马淑青，聂丹丹，徐 斌*
(潍坊市疾病预防控制中心，山东潍坊 261061)
摘 要：目的：建立了气相谱-质谱法测定果蔬中15种农药残留量。方法：样品匀浆后，用乙腈超声提取，盐析离心后，上清液氮气吹近干，用丙酮∶二氯甲烷（1∶1）复溶，过PC/NH2-SPE柱净化，采用TG-
5MS毛细管柱和质谱检测器测定，外标法定量。结果：15种农药分离效果好，定量分析相关系数均大于0.991，检出限为0.012 6～0.100 0 mg/kg，平均加标回收率在88.0%～94.6%，相对标准偏差0.50%～9.2%。结论：本文建立的方法简便、快速，具有较高的准确度与精密度，净化效果好，回收率高，适用于蔬菜、水果中农药残留的测定。 关键词：固相萃取；有机磷；氨基甲酸酯；拟除虫菊酯
Determination of 15 Pesticides in Vegetable and Fruit by
Solid Phase Extraction and Gas Chromatography/Mass
Spectrometry2-氯-5-氯甲基噻唑
MA Shuqing, NIE Dandan, XU Bin*
收割机卸粮筒
(Weifang Disease Control and Prevention Center, Weifang 261061, China) Abstract: Objective: To establish a method for detecting 15 pesticides in vegetable and fruit by gas chromatography/mass spectrometry. Methods: The homogenized samples were detected by TG-5MS capillary column and gas chromatography/mass spectrometry , quantitative analysis by external standard method after being extracted by acetonitrile, salting-out, centrifugal, the supernatant was blown nearly dry with nitrogen, redissolve by acetone and dichloromethane(1︰1) after drying with nitrogen gas, purified through PC/NH2-SPE column. Results: The separate rate of 11 kinds of pesticides was well, the correlation coefficients were more than 0.991. The minimum detection concentration were 0.012 6～0.100 0 mg/kg, the average recovery rates were 88.0%～94.6% and the relative standard deviation were 0.50%～9.2%. Conclusion: This method is simple, rapid with highly accuracy and precision, and be suitable for determination of pesticide residues in vegetable and fruits.
Keywords: solid phase extraction; organic phosphorus; carbamate; pyrethroid
有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类农药在农作物生产中的广泛应用显著提高了农作物的产量，但农药的过度及不合理使用对人们的健康造成威胁。长期食用含有农药的蔬菜，可使农药在人体内蓄积，引起多种急慢性中毒，甚至致癌、致畸等，对人体健康造成危害[1-4]。QuEchERS方法凭借其快速、简单、廉价、有效、耐用和安全等优点，被广泛用于果蔬样品的前处理，气相谱质谱联用技术以其高灵敏度、高精密度以及样品用量少等优势在果蔬农药残留检测中得到普遍应用[5]。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
丙酮、正己烷、乙腈及二氯甲烷为农残级（Merck
基金项目：潍坊市卫生和计划生育委员会科研项目（wfwsjs_2018_060）。
通信作者：徐斌（1972—），男，山东诸城人，硕士，副主任技师。研究方向：卫生检验。E-mail:*************。
公司）；氯化钠（分析纯，650 ℃灼烧4 h）；无水硫酸钠（分析纯，650 ℃灼烧4 h）；15种农药标准品（纯度＞99%）。
1.2 仪器与设备
Trace ISQ气相谱-质谱仪（美国Thermo Fisher公司），配备AS1300自动进样器；Xcalibur 操作软件；N-EV AP氮吹仪（美国Organomation公司）；Win-spe12手动固相萃取仪（北京莱伯泰科仪器股份有限公司）；Cleanert PC/NH2-SPE（美国Agela，500 mg/500 mg/6 mL）；Heidolph涡旋振荡器（德国海道夫）；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；LYNX400高速落地离心机（美国Thermo Fisher公司）。
1.3 实验方法
1.3.1 样品提取与净化
称取去泥后样本10.0 g于50 mL的BD管中，用均质器在15 000 r/min匀浆提取1 min，加入2.5 g氯化钠，再匀浆提取1 min，将离心管放入离心机，在3 000 r/min离心5 min，取上清液10 mL（相当于5 g试样量），氮吹干，分3次加入15 mL丙酮：用二氯甲烷（1︰1）提取液洗脱样品，将样品溶液过固相萃取柱净化后收集于KD瓶中，氮吹至1 mL，上机测定。
1.3.2 测定条件
（1）谱条件。谱柱：TG-5MS （30 m×0.25 mm，0.25 µm）；载气：氦气，纯度≥99.999%，流速1.0 mL/min；进样口温度：290 ℃；进样方式：脉冲不分流进样，脉冲压力250.0 kPa，进样量1 µL；
程序升温：40 ℃保持1 min，以30 ℃/min升温至130 ℃，以5 ℃/min升温至250 ℃，再以10 ℃/min升温至300 ℃保持5 min；接口温度280 ℃。
（2）质谱条件。电离方式：EI+；离子源温度：230 ℃；传输线温度：280 ℃；采集方式：选择离子检测（SIM）。
1.3.3 标准曲线的绘制
将15种农残标准于室温平衡后全部倒入50 mL 容量瓶中，用农残级正已烷溶液冲洗各标准溶液小瓶并定容至50 mL，配制成2.0 µg/mL混合标准中间液。分别吸取浓度为2.0 µg/mL混合标准中间液0.10 mL、0.20 mL、0.30 mL、0.40 mL及0.5 mL至1 mL赛默飞进样瓶中，再分别取0.9 mL、0.80 mL、0.70 mL、0.60 mL及0.50 mL农残级正己烷溶液至1 mL赛默飞进样瓶中，配成浓度为0.2 µg/mL、0.4 µg/mL、0.6 µg/mL、0.8 µg/mL及1.0 µg/mL的标准系列溶液。
2 结果与分析
2.1 扫描方式选择
方法采用选择离子监测方式（SIM）大大提高了各农药灵敏度，每种农药选择3种特征离子监测，根据保留时间和离子丰度比定性，峰面积定量。各农药保留时间、定量离子见表1。
表1 各农药的回归方程及定量限
农药名称保留时间/min定性离子（m/z）回归方程相关系数定量限/（mg/kg）敌敌畏15.66109*,185,220y=6.140 15×106x-518 2720.997 30.075 0
灭线磷22.98158*,139,126y=2.353 58×106x-318 8560.995 20.037 6
氯唑磷27.71161,119*,97y=2.901 9×106x-347 4210.997 20.025 0
甲基对硫磷29.75109*,263,125y=586 358x-93 083.40.996 30.050 0
杀螟硫磷31.18277,125*,109y=787 965x-110 6490.995 90.025 0
32.75173*,158,143y=1.243 08×106x-216 1150.991 60.050 0
毒死蜱32.3297,139,314*y=621 089x-93 844.40.994 70.012 6
对硫磷32.3997,139,291*y=289 892x-47 415.60.993 00.050 0
水胺硫磷32.75136,120*,230y=1.160 61×106x-114 2070.998 50.025 0
氟虫腈34.74367,369,213*y=516 318x-72 031.90.993 90.100 0
腐霉利35.23283,96*,285y=1.357 41×107x-883 4370.999 10.012 6
三唑磷41.13161*,172,257y=367 308x-55 475.60.998 50.037 6
联苯菊酯45.26181*,182,166y=1.957 05×107x-1.631 73×1060.998 20.012 6
45.6997*,181,265y=4.367 34×106x-494 7890.997 00.025 0
氯氟氰菊酯48.66181*,197,141y=1.726 62×107x-192 6000.995 80.012 6
2.2 标准曲线的绘制、线性范围及检出限
配制5个浓度水平农残混合标准溶液，浓度在0.1～2.0 mg/L，以各农药的峰面积对其浓度作线性回归分析。以产生3倍信噪比（S/N）时各农药的浓度作为该农药的检出限；以产生10倍信噪比（S/N）时各农药的浓度作为该农药的定量限。各农药的线性范围、回归方程、相关系数、检出限见表1。2.3 方法的准确度和精密度
称取10.0 g空白蔬菜样品3份，分别添加3个水平浓度的混合标准溶液，放置60 min后，按1.3.1提取净化样品后上机测定，每个浓度水平平行测定6次，计算加标回收率与相对标准偏差，见表2。结果表明，15种农药在3个水平上的平均加标回收率为88.0%～94.6%，RSD在0.50%～9.2%，符合残留分析的要求。
rbd-5733 结论
本实验建立了固相萃取-气相谱/质谱同时测定蔬菜中有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯三大类共15种常见农药残留的分析方法，该方法具有操作技术简单、快速、灵敏的特点，能够满足蔬菜、水果中农药残留的检测要求，适合推广。该方法为蔬菜中有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类农药残留的检测提供了依据。
参考文献立式小便器
[1]蔡圆圆，林丹，山若青，等.2016—2017年温州市市售蔬菜中有机磷农药残留监测结果分析及膳食暴露风险评估[J].中国卫生检验杂志,2019,29(22):2792-2794.
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表2 不同加标浓度下15种农药的加标回收率和精密度试验（n=6）
农药名称
回收率/（%）平均回收率/%RSD/%
0.10 mg/L0.60 mg/L 1.00 mg/L0.10 mg/L0.60 mg/L 1.00 mg/L
展频原理敌敌畏84.2091.8095.5090.50 3.70 1.800.55灭线磷82.3098.7090.8090.60 5.30 4.10 1.10氯唑磷84.60100.7093.4092.907.70 5.90 1.20甲基对硫磷83.5097.7092.4091.208.20 6.90 1.10杀螟硫磷81.8093.3091.6088.907.50 5.500.5779.2097.7091.4089.40 6.60 4.80 1.70毒死蜱83.3096.8094.2091.408.90 4.800.81对硫磷81.1092.2097.7090.30 6.708.300.79水胺硫磷86.50103.5084.6091.507.30 3.20 1.50氟虫腈88.20100.5093.4094.00 3.90 2.000.50腐霉利92.3096.7090.0093.00 5.80 2.700.93三唑磷80.7097.3086.1088.008.60 5.50 1.70联苯菊酯91.20103.1089.5094.607.50 5.20 1.7086.8094.5092.9091.40 5.60 3.800.66氯氟氰菊酯77.6097.7089.7088.309.20 6.50 1.60
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