一、探究目的:了解pH对酶活性的影响、学习测定酶的最适pH的方法。
二、实验原理:
酶是活细胞产生的一类具有催化功能的有机物,其中绝大多数的酶是蛋白质,少数酶是RNA。因此酶的活性受环境pH的影响极为显著。通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶表现其催化活性最高时的pH值称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时,酶的活性逐渐降低。
三、实验器材:计算机、5104D数据采集器、量筒、试管、水果刀、试管架、氧气传感器、10ml移液管、盐酸溶液、NaOH溶液、3%H2O2、新鲜土豆、传感器连接线若干、USB连接线等; 四、实验装置图:
图 1. 探究不同pH对过氧化氢酶催化活性影响的实验装置
五、实验准备:
1.溶液的配制和材料的准备
(1)溶液配制
pH | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 |
盐酸(10ml) | 10-3N | 10-4N | 10-5N | 10-6N 电动钢丝刷 | - |
氢氧化钠(10ml) | 小型变速箱- | - | 减速机测试台- | - | 10-6N |
3%的H2O2(ml) | 6 | 6 | 6 | 6 | 6 |
| | | | | |
(2)将土豆削皮,切成均匀的0.5*2cm的土豆条,备用;
2.界面准备
参照使用指南——第四部分:单机运行平台操作说明——装载实验模板、数据采集器与软件的连接,运行GQY数字化实验室单机运行平台。打开“探究不同pH测量温度表对过氧化氢酶催化活性的影响”实验模版,单击,进行传感器连接,问号消失,显示设备连接成功,界面准备完成。
电动拖布六、实验操作步骤:
(1)将土豆条放入pH为3的试管中,并轻轻摇晃
(2)实验前先用pH传感器测量一下试管内的pH,并在软件窗口中输入,如下图所示;
图 2.不同pH对过氧化氢酶催化作用的影响
(3)单击实验开始按钮,,按钮置于“On”,开始测量过氧化氢催化分解的氧气量,测量时间约60秒,单击完成一次实验;
(4)以相同的方法测量其它pH下过氧化氢在酶催化下的氧气释放量;
(5)记录实验数据,绘制pH与酶催化活性图,如下图所示;
图 3.过氧化氢酶的pH反应曲线(用氧气释放量代表催化活性)
(6)分析实验结果,完成实验报告