光度分析法是最常用的定量分析方法之一 其主要特点是 (1)应用围广泛 。很多物质在紫外-可见光区有吸收 因此可借助于比法进行测定。(2)适用的浓度围广泛 从常量分析到痕量分析(经预富集后)均可实现。(3)灵敏度高 选择性好 精确度高 分析成本低 操作简便、快速。因此广泛应用于地质、冶金、化工、医学、食品、制药及环境监测等行业。 在光度法中 比皿的选择、使用和维护对分析结果有着重要的影响。 比皿选择与鉴别
比皿的制造工艺有两种 一种是粘合剂粘合而成 另一种是高温熔融而成。比皿的材料通常来源于石英、熔凝硅石和光学玻璃。玻璃比皿对紫外线几乎全部吸收 吸光度非常大。而石英比皿的吸光度则小得多。常用比皿的形状有方形、矩形和圆筒形 容量一般为几毫升。也有用于少量试样的微型或超微型毛细管皿。另外还有高、低温、恒温比皿。 比皿有不同的光程长度 一般常用的有0 5、l、2、3、5cm 选择哪种光程长度的比皿 应视分析样品的吸光度而定。当比液的颜较淡时 应选用光程长度较大的如2cm、3cm比皿 当比液的颜较深时 应选用光程长度较小的如0.5cm 、lcm比皿路灯节电 以使所测溶液的吸光度在0.1-0.
7之间。 比皿有方向性。有些比皿上标有方向标记 使用时必须注意。无方向标记的比皿应予以校正 校正时要先确定方向并作好标记 以减少测定误差。比皿的校正方法是 将纯净的蒸馏水注入比皿中 把其中吸收最小的比皿的吸光度置为零 并以此为基准 测出其它比皿的相对吸光度。测定比液时 应将其吸光度减去比皿的吸光度。同一组比皿相互间的差异应小于测定误差 在测定同一溶液时 吸光度差值应小于0.5 否则应对差值进行校正。
比皿的光程长度也需校正 校正时可将吸光度约为0.4的溶液分别注入校正皿和具有准确光程长度的标准比皿中 测定吸光度。以标准比皿的吸光度为1.00 求出校正比皿吸光度的相对值作为该比皿的校正系数。测定比液时 可将所测得的吸光度乘以该皿的校正系数以得到实际吸光度值。
比皿选择或使用不当,造成无法测量或引起测量误差的现象在实验中经常出现 这一问题又很容易被实验人员忽视。 紫外区的定义为190-400nm 石英比皿可用于190-900nm 玻璃比皿用于360-900nm 紫外区的一定要用石英比皿 必须配置紫外/可见分光光度计 否则低波长段不能分析。 对于一般的非光学专业人员 用眼睛是不能分开石英比皿和玻璃比
皿的。但两者硬度差别很大很大。石英比皿比玻璃比皿硬度大 绝对值 几十倍 如果把两个对磨 石英比皿将很少被磨损 而玻璃比皿磨损非常大。 由于石英比皿的透光围从0.12-4.5微米(120nm-450nm) 广泛的谱段围没有任何吸收峰。而玻璃比皿只有0.4—4微米 400-4000nm 且有许多离子吸收峰。所以 石英比皿要比玻璃比皿优越的多 化验数据更准确、更可靠。 用手摸或者肉眼就能观察出来 只有光学技术人员凭经验“靠肉眼比较折光率差别”可以准确判定 他们肉眼观察微弱的离子吸收现象 靠经验评价也能区分。但是 对没有经验的人员来说 极易发生判定错误 方法1 石英比皿上有一个Q字样(quartz石英) 而玻璃的上面有一个G字样(glass玻璃) 从字面上可以直接区分两种比皿 如果字样已经没有啦 只能上机在紫外区实测啦 在紫外区透过率大是石英的 几乎没有透过率的是玻璃的。市面上卖的比皿造型不是完全一样的 有的没有石英标识。可在紫外波长下检测空比皿的吸光度 玻璃的吸光度要比石英的大。 方法2 将光度计的波长设定为250nm 样品室不放任何物品 调零 然后将比皿置于样品道一侧 吸光值小于0.07Abs的是石英材料 反之是玻璃材料。注 如果吸光值稍稍大于0.07Abs 的话 有可能也是石英材料的 只不过是杯子壁没有洗净之故。 比皿使用注意事项 比皿一般为长方体 其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。
在使用比皿时 两个透光面要完全平行 并垂直置于比皿架中 以保证在测量时入射光垂直于透光面 避免光的反射损失 保证光程固定。使用时应注意以下几点:
1、拿取比皿时,只能用手指接触两侧的毛玻璃,避免接触光学面。同时注意轻拿轻放 防止外力对比皿的影响 产生应力后破损。
2、使用比皿时应于测试前将待测液倒人比皿洗涤三次(注意不要产生气泡)
3、凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比皿中。
4、不能将比皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱烘烤;。
5、当发现比皿里面被污染后 应用无水乙醇清洗 及时擦拭干净。
6、不得将比皿的透光面与硬物或脏物接触。盛装溶液时,高度为比皿的2/3处即可,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附 然后再用镜头纸或丝绸擦拭。
7、比皿中的液体 应沿毛面倾斜 慢慢倒掉 不要将比皿翻转 直接口向下放在干净的滤纸上吸干剩余液 然后用蒸馏水冲洗比皿部倒掉 操作同上 避免液体外流 使第2次测量时
不用擦拭比皿 不致因擦拭带来的误差。
8、若有液体外溢 还有用好点的纸巾擦拭 最好是沿一个方向 不要来回得擦拭。
9、在使用时 每次装入参比液或样品液测量后 会将参比液或样品液倒入废液瓶。倒出时人们的习惯做法是 很随意地倒出参比液或样品液 这样参比液或样品液会流到比皿的光面上 再次装入参比液或样品液后 我们会用滤纸或脱脂棉擦拭比皿的光面 这样时间久了就会在比皿的光面上留下划痕 划痕会影响测定值 就必须更换新的比皿。好的方法是 两手捏住比皿后 将参比液或样品液沿着比皿的一个角倒入废液瓶 这时不要着急将比皿离开废液瓶 而是顺势将比皿的倒出角贴到废液瓶上 让比皿里面的液体全部沿着这个角流出 这样 比皿的光面上几乎不会粘有液体 也就不用再去用滤纸或脱脂棉擦拭 减少擦拭次数 这样就会延长比皿的使用时间。 比皿成组性测试 在测量时如对比皿有怀疑,可自行检测 异氰酸甲酯
方法如下
1、用户可将波长选择置实际使用的波长上,将一套比皿都注入蒸馏水 将其中一只的透射
比调至100%处分界开关控制器 测量其他各只的透射比 凡透射比之差不大于0.5% △T=0.005=0.5%T 即可配套使用。
2、比前将各个比皿中装入蒸馏水 在比波长下进行比较 误差在±0.001吸光度以的比皿选出4-8个进行比测定 可避免因比皿差异造成测量误差。
比皿清洗方法 分光光度法中比皿洁净与否是影响测定准确度的因素之一。因此 必须重视选择正确的洗净方法。孔刚玉 每次使用完毕的比皿 一般先用自来水冲洗 再用蒸馏水冲洗三次 倒置于干净的滤纸上晾干 然后存放于比皿盒中。如果比皿被有机物污染 宜用盐酸-乙醇(1+2)混合液浸洗 也可用相应的有机溶剂浸泡洗涤。如 油脂污染可用石油醚浸洗 铬天青显剂污染可用硝酸(1+2)浸洗等。比皿不可用碱液洗涤太空风洞 也不能用硬布、毛刷刷洗。 含有能腐蚀玻璃物质的溶液 如、氟化物的高浓度溶液不可放人比皿中。含氟离子浓度低的溶液也不宜在皿中久置。比皿质地较脆 石英皿尤甚 使用时动作要轻 切勿摔碰。
一、市场面上一般使用的石英比皿均为石英粉烧接的 专用超声波清洗 洗比皿清洗时毛面朝下。
二、 石英比皿清洁方法 1 用乙醚和无水乙醇的混合液 各50% 清洗。 2. 若太脏可用专用洗液清洗。但时间要短 10分钟) 再用清水清洗干净。
三、 不要用洗洁精之类的清洁剂 以免影响测量。 注: 高级分光光度计都采用专利技术加工的石英比皿,采用石英本体材料经过高温熔融胶合 减少污染,使用寿命更长(价格是普通石英比皿二倍)。 随着光谱分析仪器的迅速发展 微量、半微量、荧光等一些比皿不断出现 对使用维护、清洗比皿有更高的要求。一般在国外都是一次性使用 在国为了节约成本 开源节流而重复使用。
如何对比皿进行清洗 只能按照各种试剂 采用能溶解中和的方法来进行清洗 原则上一是不能损坏比皿的结构和透光性能 二是能够采用中和溶解的方法来达到比皿干净如初的效果。
>电渗析模块
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