薄膜过滤法微生物限度检查操作要点
1压延加工． 设备、仪器
1。1 无菌室 微生物限度检查应有单独的无菌室,每个无菌室应有独立的净化空气系统. 1。1。1 操作间 操作间应安装空气除菌过滤层流装置.环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为1０0级(或放置同等级净化工作台）．操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正压,不低于4.9Pa。操作台上备有电子天平,乙醇灯，火柴，乙醇棉球，大、小橡皮乳头等。
yig滤波器1。1。2 缓冲间 缓冲间内应有洗手盆，无菌衣、帽、口罩、拖鞋等。缓冲间内不得放置培养箱和其他杂物．
1。1．３ 在每次操作前、后，用75%乙醇溶液或其他消毒液擦拭操作台及可能污染的死角。然后启动层流净化装置，同时用紫外杀菌灯照射30mｉn．玻璃助剂
1.1.４ 无菌室操作台消毒擦拭后,先启动层流净化装置30min,将备妥的营养琼脂平板３个(经 ３0～350C预培养４8h,证明无菌落生长),以无菌方式移入操作间，置净化台左、中、右各1个,开盖,暴露３0mｉｎ后将盖盖上。在30～350C培养箱内倒置培养４8h，取出检查。３个平板生长的平均菌落数不超过1个。
1。2 仪器
1。2。1 恒温培养箱（30~３５0Ｃ)、生化培养箱（23～２80C）、电冰箱、蒸汽灭菌器. 1。2。2 玻璃器皿 烧杯、培养皿、量筒、试管及塞、吸管。玻璃器皿用前应洗涤干净，吸管、量筒不挂水滴,无残留抗菌物质。玻璃器皿均应用牛皮纸(或双层报纸)严密包裹置蒸汽灭菌器高压蒸汽121℃灭菌30ｍin,烘干.或于16０℃干热灭菌2h,备用。
2。1 营养琼脂培养基：取营养琼脂培养基3４g，加1000ml蒸馏水，加热溶解，分装,121℃高压灭菌15分钟． 2.2 玫瑰红钠琼脂培养基:取玫瑰红钠琼脂培养基30。5g,加100０ml蒸馏水，加热溶解,分
装,121℃高压灭菌１5分钟.
２。3 胆盐乳糖培养基：取胆盐乳糖培养基3６g，加１000ml蒸馏水,加热溶解，分装,121℃高压灭菌15分钟.
3稀释剂
3。1 0．９%无菌氯化钠溶液：取氯化钠9。0g,加水溶解使成１０00ml，12１℃灭菌2０分钟.
气门座镗床3。2PＨ7.0无菌氯化钠—蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾３。５6ｇ，磷酸氢二钠7.２3g,氯化钠4。3０ｇ，蛋白胨1.0ｇ，加水10００ｍl,微温溶解，分装,过滤,灭菌。
4 供试液的制备尺寸测量
4。１取供试品１０g，加经干热灭菌的5%吐温-80 0.2ml,加PH7。0无菌氯化钠—蛋白胨缓冲液稀释至１０0mｌ,边加边振摇使成混悬液,静止5分钟使分层,倾取上清液置离心机中50０r/min离心5分钟,取上清液作为供试品溶液。
和机器人做到哭机器打桩机5 检查方法
采用薄膜过滤法，滤膜孔径为０。４５ｕm，直径为５0mm.滤膜及滤器在使用前采用1２1℃高压灭菌30钟．试验过程中,应保持滤膜前后的完整性。将制备好的供试液过滤，然后用100mlPH7．0无菌氯化钠—蛋白胨缓冲液（注意保持供试品溶液覆盖整个滤膜表面）。冲洗后,用镊子取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养。细菌于３0～35℃培养48小时，霉菌于２3~28℃培养７2小时。
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