南瓜加工牙髓干细胞 (dentalpulp stem cells, DPSCs) 的分离培养:
1.将新鲜采集的牙髓,置于10 cm 培养皿中,用DPBS 清洗 3 遍,操作过程
尽量避免污染。
2.接着加入5ml完全培养基(完全培养基的配置:DMEM/F12 + 20% Plus Advanced Growth Supplement (StemBo Bioscience., Ltd) + 1% L-Glutamine + 1% NEAA + 1% 双抗) 浸润牙髓组织,用无菌手术剪将其剪碎。 3. 将其剪碎组织块固定在培养皿中,于37℃、5% CO2培养箱孵育30min以使组织块黏贴在培养皿壁上。
牧一征4.接著于6 cm培养皿中加入2ml完全培养基。
ca1703>出水服务5.48 h 换液,此后每 3到4天更换 1 次完全培养基。培养约 10 ~ 14 天会有细胞从组织块中爬出,细胞达到80% ~ 90%后,用胰酶-EDTA或TrypLE在 37℃消化,按1:3 比例传代。
沟槽式