氨气压缩机
复苏冷冻的胚胎，用G1.3、G2.3序贯培养法培养至囊胚。将扩张囊胚移入链霉蛋白酶中，在光镜下观察，在透明带即将完全消化溶解之前移出，用DPBS或DMEM-F12液充分洗涤后种植到灭活的鼠胚胎成纤维细胞上。种植后每隔12 h观察孵出囊胚的贴壁、增殖情况和分化倾向，种植后约36～48 h后换液，随后每天半量换液或根据培养孔内细胞代谢情况予以换液。原代克隆生长10～14 d时进行初次传代，前5 代细胞采用机械法，即用拉细的玻璃毛细管将细胞团块刮出，再用1 ml注射器针头在体式显微镜下将克隆分散成适当团块，重新接种到预先种有饲养层的培养皿中，每日换液。待hES细胞生长稳定后换用0．05％dispase消化细胞，37℃作用3～5 min，吸管轻轻吹打成约含30--50个细胞的小团块，传代培养，每日换液。 2.原代培养及纯化
将hES细胞培养于60mm组织器官培养皿中。培养皿事先用含有0.1％白明胶包被及加入1 x 106个经放射性照射的MF1鼠胚胎成纤维细胞。hES细胞用Thomson细胞培养液于37℃、5％二氧化碳培养箱内进行培养至细胞克隆增大，未分化的干细胞克隆在7-10 d滚动车轮
左右被轻轻切割成6-8小块，转移到三个培养皿中再进行培养。
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