从脱氧核糖核酸钠酶解液分离纯化脱氧核苷酸钠的方法

专利名称

：从脱氧核糖核酸钠酶解液分离纯化脱氧核苷酸钠的方法

技术领域

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本发明涉及脱氧核苷酸钠的生产方法，具体地说涉及从脱氧核糖核酸钠的酶解液中分离纯化脱氧核苷酸钠的方法。

背景技术

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脱氧核苷酸钠(Sodium Deoxyribomuleotide)来源于脱氧核糖核酸钠(DNA)大分子，经5′-磷酸二酯酶的酶解作用而获得的，在医药领域有着十分广泛的应用。酶解所获得的脱氧核苷酸钠粗品需要经过分离纯化才能够应用。传统的分离纯化方法采用离子交换树脂，一般包括①.上阴柱工艺技术②.阴柱洗脱工艺技术③.上炭柱及洗脱等步骤。所述方法产品含量低，一般为50.0～60.0％，产品收得率低，仅为65～70％左右，生产工作周期长，从酶解开始到分离纯化为止工作时间为67小时/批，劳动强度高，因此其生产成本较高。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是公开一种从脱氧核糖核酸钠的酶解液分离纯化脱氧核苷酸钠的方法，以克服现有技术存在的上述缺陷。
本发明的技术构思是这样的本发明采用吸附剂粗澄清、过滤和超滤相结合的方法处理脱氧核糖核酸钠酶解液，从而获得符合要求的脱氧核苷酸钠。
本发明的方法包括如下步骤将吸附剂投入酶解液中，以除去酶解液中的性蛋白质、断裂多肽、氯化钠和其它杂质，然后过滤；滤液用超滤膜超滤，然后采用常规的方法进行浓缩、干燥粉碎，即获得所说的脱氧核苷酸钠。
所说的吸附剂包括硅藻土、分子筛或活性炭，加入量为酶解液重量的0.5～5％，加入后搅拌混合20～30分钟。
在本发明优选的技术方案中，在采用吸附剂吸附之前，调整酶解液的pH为6～9；过滤可优选采用离心机或压滤机，滤液在用超滤膜超滤之前用滤芯为10～50μm的薄膜纯化过滤器进行精滤；按照本发明，可依次采用分子量为10,000的超滤膜和分子量为1,000的超滤膜进行超滤。
超滤温度一般为10～28℃，操作压力为0.6～1.2kg/cm2。
本发明解决了原老技术上要求解决的树脂分离纯化本身技术上存在的弊病。产品含量上达到了70.0％以上，使该品种在质量上完全达到国家药典新标准要求，在品质上上了一个台阶。产品的收得率上提高到90.0～95.0％，大大减少了浪费。生产工作时间上已缩短到30hr/批之内。在生产安排上可比较顺利地安排3.5天/批，利于生产过程的工艺及质量的监控。劳动力7人/班，节约了劳动力。生产成本0.7万元/kg(7元/g)。由此可见，本发明既在产品含量方面得到了提高，并在收率上有了升高，又使生产工作周期上大大缩短，并节约了大量的人力，明显地降低了本产品的生产成本。

具体实施例方式

实施例1将1公斤硅藻土投入100公斤pH为7.0的酶解液中，搅拌30分分钟，在压滤机中压滤，然后采用滤芯为30μm的薄膜纯化过滤器进行精滤，依次采用分子量为10,000的超滤膜和分子量为1,000的超滤膜进行超滤。超滤温度为20℃，操作压力为0.92kg/cm2，然后对超滤产物进行浓缩、干燥粉碎，即获得所说的脱氧核苷酸钠，产品含量为70.0％，产品的收得率为95.0％。

权利要求

1.一种从脱氧核糖核酸钠酶解液中分离纯化脱氧核苷酸钠的方法，其特征在于，包括如下步骤将吸附剂投入酶解液中，然后过滤；滤液用超滤膜超滤，然后进行浓缩、干燥粉碎，即获脱氧核苷酸钠。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所说的吸附剂包括硅藻土、分子筛或活性炭。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，吸附剂加入量为酶解液重量的0.5～5％，加入后搅拌混合20～30分钟。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在采用吸附剂吸附之前，调整酶解液的pH为6～9。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，过滤采用离心机或压滤机。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，滤液在用超滤膜超滤之前用滤芯为10～50μm的薄膜纯化过滤器进行精滤。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，依次采用分子量为10,000的超滤膜和分子量为1,000的超滤膜进行超滤。
8.根据权利要求1～7任一项所述的方法，其特征在于，超滤压力为0.6～1.2kg/cm2。

全文摘要

本发明公开了脱氧核糖核酸钠酶解液分离纯化脱氧核苷酸钠的方法。本发明采用吸附剂粗澄清、过滤和超滤相结合的方法处理脱氧核糖核酸钠酶解液，从而获得符合要求的脱氧核苷酸钠。产品含量上达到了70.0％以上，使该品种在质量上完全达到国家药典新标准要求，产品的收得率上提高到90.0～95.0％，大大减少了浪费。生产工作时间上已缩短到30hr/批之内。生产成本0.7万元/kg(7元/g)。由此可见，本发明既在产品含量方面得到了提高，并在收率上有了升高，又使生产工作周期上大大缩短，并节约了大量的人力，明显地降低了本产品的生产成本。