综述孕激素在女性生殖系统中起着重要的作用，这些生理作用主要是通过与孕激素受体结合表达的。孕激素受体(progesterone receptor，PR)是核受体超家族成员之一。主要有两种亚型PRA和PRB。孕激素受体在介导与调节卵巢、子宫和乳腺的功能及生殖活动中起着关键的作用。
一、孕激素受体的结构和功能。
1.PR的结构
孕激素受体(PR)，按照氨基酸序列从N一末端到C一末端可分为A、B、C、D、E、F6个区域(图1)。当有激囊等配体存在时，与E区的激素或配体结合部位(ligand binding domain，LBD)结合，这个区是结构最大功能最复杂的区域；当无配体存在时，D区即铰链区，可结合热休克蛋白(heat shock protein90，HSP90)，从而阻止了各受体之间形成二聚体。C区是受体与DNA结合的区域(DNA binding domain，DBD)，能与基因调控区的特定DNA序列结合。A／B区为高度可变区，是受体与抗体结合的部位。F区则起调节转录激活的作用。 图1
2.PR的亚型与功能
PR的亚型与功能PR主要包括2种亚型PRA和PRB。在多数情况下，PRB转录活性较强，而PRA则对PRB的转录活性有抑制作用，同时PRA可使孕激素拮抗剂产生抗雌激素样作用，而PRB则无此作用。PRA和PRB的不同功能是由其结构的差别引起的：特异性反式激活作用决定簇AF1、AF2、AF3和ID可介导孕激素受体的调节，
如上图AF1、AF3和ID位于A/B区，AF2位于E区;AF1、AF2和AF3均可单独激活转录，并对启动子和特异细胞起增效作用;AF1和AF2是PRA和PRB所共有的，而AF3是PRB 特有的，位于PRB的上游区;ID是两者共有的，却只在PRA上起作用，能抑制AF1、AF2、ER，但不能抑制AF3的功能，另外ID有利于PRB与辅助因子(SMRT)结合，而PRA不能有效地募集辅助激动子，故PRB活化转录作用强于PRA;PRA不仅活化转录作用弱，而且还可抑制PRB的功能，并可通过非PR结合的磷酸化途径抑制雌激素受体，雄激素受体，糖、盐皮质激素受体介导的转录作用。PR还有第三种PR亚型PRC，PRC不能结合DNA，但可同其他2种PR亚型形成二聚体，拮抗其生物学活性。PRC在包括子宫内膜在内的孕激素反应组织中广泛存在，它在子宫内膜癌和乳腺癌的孕激素和抗孕激素中具有潜在意义。hPR也主要包括两种亚型hPR—A、hPR—B。hPR的作用机制与PR相似。
孕激素受体的基因表达与调控PR的亚型PRA和PRB，均由位于染体11q13的同一基因编码，但受两种不同启动子A和B控制，转录形成两类碱基数不同的mRNA分别表达由796和933个氨基酸组成的蛋白产物。PRA的相对分子质量为90kD,PRB为120kD。两者惟一区别是PRB的N-末端较PRA多164个氨基酸。两种亚型在靶细胞中的表达及调控可能影响孕激素对靶细胞作用的敏感性。雌激素、雌激素拮抗剂、孕激素、孕激素拮抗剂、GnRH—a、cAMP以及生长因子等都对PR及PR亚型有调控作用。孕激素的调控具有细胞特异性。孕激素，增加子宫内膜间质细胞PR和PR的mRNA的水平(A，B亚型)，下调腺上皮细胞PR和PR的mRNA的水平(A,B亚型)，并与配体受体结合相关。
二、孕激素受体的转录活化机制
孕激素受体的转录活化机制与其他甾体类核受体相似。当没有配体与其结合时，受体无转录活性并且与热休克蛋白(Heat shock protein，HSP)形成复合物。此时孕激素受体主要分布于细胞质中。一旦受体与配体，如孕酮等，相结时，受体的构象发生改变，与HSP复合物解离，并进入细胞核。受体单体之间形成同源二聚体，与靶基因调节区域的特异性DNA 结合，参与对靶器官增殖和分化的调控。
当受体的激动剂和PR结合后可以直接激活转录机制或是通过活化转录激活因子(Co-activator)发挥转录激活作用。转录激活因子具有放大转录调控的作用。而当受体拮抗剂与PR结合后可以通过直接阻断激动剂与受体的结合发挥抑制作用，但更主要的是通过活
化转录抑制园子(Co-repressor)，如核受体抑制因子(Nuclear receptor corepressor,NcoR)或SMRT，产生下调转录活性的效应。一般认为，在一些特定的组织内，转录激活园子和转录抑制因子在细胞内处于一种动态平衡中。当加入拮抗剂后，动态平衡向转录抑制因子方向倾斜。
Activation of the progesterone receptor(PR)by progesterone receptor ligand
三、孕激素受体与妇科疾病的关系
研究表明PRA和PRB功能是有组织特异性的。PRA和PRB结构、分布及功能的改变可以影响女性生殖器官功能的改变，并与许多激素依赖性疾病的发生有关。PR亚型及其变异型在正常和恶变组织中均有表达，在正常组织中表现为生理学作用，在恶变组织中却表现为致癌作用，且与激素依赖性肿瘤的进展有关。
1.PR与子宫肌瘤子宫肌瘤是激素依赖性肿瘤。近年来已有大量的研究证实孕激素在子宫肌瘤的发病及
生长中起着重要作用。孕激素及PR调节子宫肌瘤肿瘤细胞的分裂活动，促进子宫肌瘤的增殖。
2.PR与子宫内膜异位症。子宫内膜异位症(EM)是育龄妇女的常见病。是大多数的报道认为子宫腺肌症中异位内膜与在位内膜组织一样，认为子宫腺肌症病人的异位内膜腺体和异位间质中ER、PR的表达大多为阳性。
3.PR与子宫内膜癌子宫内膜癌(UEC)的发病率呈上升趋势，其发生的基因机制不明。子宫内膜癌的发病与高雌激素刺激子宫内膜增生，并缺乏孕激素拮抗有关。对内膜癌细胞系的研究发现，高分化癌PR的两种亚型均表达，并以PR—B为主，可被雌二醇上调，低分化癌只表达PR—A，PR—B不表达且对雌激素作用无反应，鉴于孕激素通过PR起作用，PR—B的转录活性强于PR—A，提示子宫内膜癌的发病、预后及内分泌效果可能与孕激素受体亚型不均衡分布相关。在原发内膜癌中，高分化癌比低分化癌PR的浓度高。
4.孕激素受体与卵巢肿瘤一项研究分析67例晚期上皮性卵巢癌患者的雌激素受体、孕激素受体、手术残留癌、年龄等预后因素，46.3%的肿瘤PR阳性，PR水平是独立的预后因素；单因素分析和多因素分析表明PR阳性者无进展性生存期较长。
5.孕激素受体与不孕症卵巢所分泌的激素是通过内膜相应受体而起作用，因此内膜分泌状况不仅受黄体激素水平影响，还与子宫内膜孕激素受体含量有关。子宫内膜作为卵巢激素作用的靶器官在诊断卵
巢黄体功能上具有重要价值。正常月经周期中，孕激素受体的变化规律是，受体在滤泡晚期达高峰，黄体期开始下降，到黄体晚期达最低点。子宫内膜所产生的PR量与卵巢所产生的激素有明确的关系。因此，LPD患者可能由于卵巢分泌的激素水平低下致使子宫内膜产生PR量随之改变，从而导致子宫内膜分泌延迟引起不孕。
四、孕激素受体Co-activator和Corepressor。
Co-activator:
1.类固醇受体共激活因子（SRC）家族由三个不同但结构上和功能上相关的成员：
①SRC-1（核受体共激活因子1），
②SRC-2（转录中介因子2/glucocorticoid受体相互作用蛋白1/nuclear受体共激活因子2），
③SRC-3（p300/CREB-binding蛋白[CBP]co-integrator相关蛋白/受体共激活因子相关的甲状腺3/activator和维甲酸受体/扩增在乳腺癌1/thyroid受体活化分子1）。
2.E3泛素蛋白连接酶（E3ubiquitin-protein ligases）：
E6-associated protein/RPF1
3.含拉链亮氨酸蛋白：L7/SPA
4.类固醇受体激活蛋白：类固醇受体的RNA激活剂（SRA）
5.CBP/p300
Corepressor：
1.核受体抑制因子和维甲酸／甲状腺受体沉默因子(silencing mediator of retinoid and thyroid hormone receptors．SMRT）：核受体辅阻遏物（N-COR）和维甲酸和甲状腺受体（SMRT）
2.BRCA1（a breast cancer susceptibility gene）
3.泛素激活酶3（UBA3）
五、孕激素受体的筛选方法
选择基于荧光素酶报告基因系统的pGL3-Basic质粒作为载体的基本框架，在荧光素酶基因上游插入一个Mouse mammary tumor virus long terminal repeat(MMTV-LTR)作为启动子与转录增强子，构建成
报告基因载体。依据孕激素与受体相互作用的机制，将含有hPR-B全长基因的表达载体和以PRE调节荧光素酶报告基因的载体以基因共转染方式导入CV-1细胞(非洲绿猴肾纤维细胞)中，建立基于孕激素受体转录活化的药物筛选模型。
具体方法，MMTV-pGL3报告基因载体的构建:
（1）扩增pGL3-Basic Vector和pGRE-CAT Vector;
（2）酶切pGL3-Basic载体和pGRE-CAT／MMTV片段;
（3）回收双酶切产物；
（4）连接MMTV片段和pGL3-Basic载体；
（5）转化并扩增重组质粒MMTV-pGL3；
（6）阳性克隆的鉴定；
（7）测序鉴定。
经测序，发现pGRE-CAT含有MMTV片断，其具有的Xho I和Hind III两个限制性酶切位点与pGL3-Basi
c载体质粒的多克隆位点相符，且方向一致。故将pGL3-Basic质粒与PGRE-CAT质粒同时进行双酶切，将获得的MMTV片段插入pGL3-Basic质粒上游，构建成报告基因载体MMTV-pGL3。
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