一种丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途

一种丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途

技术领域

本发明属于药物学和制药学领域，涉及一种丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途。

背景技术

丁酸氯维地平（Clevidipine butyrate），是由英国AstraZeneca公司研制的第三代新型短效二氢吡啶类钙通道拮抗剂，2008年8月首次在美国上市，商品名Cleviprex?，是第一个静脉注射用二氢吡啶类钙通道阻滞药。Cleviprex?为注射乳剂，起效快，作用消除也快，可递增剂量精确地控制血压。与目前许多静脉注射经肾和（或）肝代谢的抗高血压药不同，其在血液和组织中代谢，因而不在体内蓄积。丁酸氯维地平作为一种新型静脉注射用抗高血压药，代表了当前高血压中的一大进步，其可以在危重病护理中快速、精确地控制血压。来自急诊室、手术室和重症监护室的综合资料显示，丁酸氯维地平的上市，将为医生控制患者血压时提供新的、重要的临床手段。

Cleviprex?以脂肪乳为给药载体（http://en.wikipedia.org/wiki/Clevidipine），系将丁酸氯维地平溶解于大豆中，通过磷脂乳化作用将其包裹于磷脂膜包封于平均粒径为0.2μm的乳球中。脂肪乳，又称脂质微球，是一种以脂肪油为软基质而被磷脂膜包封的微粒体分散系，在热力学及动力学上均属于不稳定体系。

脂肪乳含有磷脂等表面活性剂，大豆油、中链脂肪酸甘油酯（medium chain triglycerides，MCT）或橄榄油等脂肪油，甘油，以及大量的水，通过制备初乳并经均质后，获得粒径适中的脂质微粒体系。这是由于直接磷脂、油、水等物料混合后，会发生油水分离现象，只有将这些物料，经过专用的均质设备处理，如高压均质机，才能形成稳定均一的乳液（Hiroko Shibata, et al. (2009) Int. J. Pharm. 378: 167-176；Dirk L. Teagarden, et al.（1996）Adv. Drug. Deliv. Rev. 20：155-164）。在均质过程中，物料受到高频振动、空穴、剪切，以及冲击等协调作用，最终被打散或细化为液体中的不溶相颗粒。因此在脂肪乳制备过程中，需要对初乳、均质工艺中的剪切速率、温度、均质压力和循环次数等参数严格控制，耗时耗力，大大增加了生产成本。

Cleviprex?、Diprivan?等脂肪乳在外观呈现为不透明的乳白状液体（http://www.apsf.org/newsletters/html/2012/winter/14propofol.htm），如果因保存不当而出现絮凝、凝聚等现象时不能及时排除。此类制剂也不能进行澄明度检测，而澄明度检测是注射剂必检项目，由此给用药安全性带来隐患。并且，现有的脂肪乳需要专门设备在高压下灭菌。

一种理想的丁酸氯维地平注射制剂，是能保持脂质微球的特性，同时具有制剂稳定性高、外观透明清澈、工艺简单、无需特殊设备，以减低制备成本。

发明内容

本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，本发明人惊奇地发现，本发明的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，与水混合后，不经过均质手段，即可形成稳定的乳液，可以有效地克服油-水分离现象。并且本发明的产品能有效地克服不同辅料间的密度差而带来的制剂分层现象，由此获得单相、透明、稳定，遇水后能够自发乳化的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，特别是一种注射用丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液。由此提供了下述发明：

本发明的一个方面涉及一种丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其包含作为主药的丁酸氯维地平，以及注射用油、助溶剂、低HLB值表面活性剂和高HLB值表面活性剂。 

根据本发明任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（4）项中的任意一项或者多项：

（1）所述注射用油选大豆油、红花油、橄榄油、鱼油和中链脂肪酸酯中的任一种或者多种；优选地，所述注射用油为大豆油和/或中链脂肪酸酯；具体地，所述中链脂肪酸酯为中链脂肪酸甘油酯和/或中链脂肪酸丙二醇酯；优选地，所述中链脂肪酸酯为中链脂肪酸甘油酯；

（2）所述助溶剂为选自丙二醇、甘油和PEG400中的一种或者多种；优选地，所述助溶剂包含丙二醇，可选地，还包含选自甘油和PEG400中的一种或者多种；具体地，所述丙二醇为1, 2-丙二醇；

（3）所述低HLB值表面活性剂为4≤HLB≤9的表面活性剂；具体地，其选自磷脂、聚甘油油酸酯、司盘20、司盘60、司盘80和聚甘油-6-二油酸酯中的一种或者多种；优选地，所述低HLB值表面活性剂包含磷脂，可选地，其还包含选自聚甘油油酸酯和司盘80中的一种或者多种；具体地，所述磷脂为大豆卵磷脂和/或蛋黄卵磷脂；优选地，为大豆卵磷脂；

（4）所述高HLB值表面活性剂为HLB≥12的非离子表面活性剂；具体地，其选自吐温20、吐温80、生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油、月桂酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯中的一种或者多种；优选地，所述高HLB值表面活性剂包含聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯和/或聚氧乙烯醚(35)蓖麻油，可选地，其还包含吐温80和/或生育酚聚乙二醇琥珀酸酯。

本发明涉及一种丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其包含：

主药：丁酸氯维地平，

注射用油：大豆油，

助溶剂：1, 2-丙二醇，

低HLB值表面活性剂：磷脂，和

高HLB值表面活性剂：聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯和/或聚氧乙烯醚(35)蓖麻油；

可选地，所述油还包含中链脂肪酸甘油酯；

可选地，所述低HLB值表面活性剂还包含聚甘油油酸酯；

可选地，所述高HLB值表面活性剂还包含吐温80。

根据本发明任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（5）项中的任意一项或者多项： 

（1）所述丁酸氯维地平的含量为0.1－1%（w/w）；优选为0.15－0.5%（w/w）；

（2）所述注射用油的含量为45－85％（w/w）；优选为45－70％（w/w）；

（3）所述助溶剂的含量为5－30%（w/w）；优选为7－21%（w/w）；

（4）所述低HLB值表面活性剂的含量为7.5%－17％（w/w）；

（5）所述高HLB值表面活性剂的含量为8%－25％（w/w）。

根据本发明任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（9）项中的任意一项或者多项：

（1）所述丁酸氯维地平的含量为0.15－0.5%（w/w），优选为0.2－0.35%（w/w）；

（2）所述大豆油的含量为5－60％，优选为5－50％；

（3）所述中链脂肪酸甘油酯的含量为0％－80％，优选为0％－65％；

（4）所述1, 2-丙二醇的含量为5％－15％，优选为7％－10％；

（5）所述磷脂的含量为5％－15％，优选为7％－13％；

（6）所述聚甘油油酸酯的含量为0－8％，优选为0－5％；

（7）所述聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯的含量为0－20％，优选为0－15％；

（8）所述聚氧乙烯醚(35)蓖麻油的含量为0－20％；

（9）所述吐温80的含量为0－20％，优选为0－15％。

根据本发明任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（7）项中的任意一项或者多项：

（1）所述丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液不含水或含水量低于1％；

（2）所述丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液不含糖类；

（3）所述丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液不含糊精；

（4）所述丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液其制备方法不包含除去或者降低水分的步骤（例如旋转蒸发、喷雾干燥或冷冻干燥）；

（5）可选地，所述丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液还包含抗氧化剂；具体地，所述抗氧化剂选自油酸、油酸钠、维生素E和维生素A的任意一种或多种；

（6）所述丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液为透明、单相溶液；

（7）所述丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液采用0.22μm微孔滤膜方式除菌。

根据本发明任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其组分和含量如下面1）－4）组中的任意一组所示：

1）

丁酸氯维地平                                 0.2-0.35克

大豆油                                   5 - 30克

中链脂肪酸甘油三酯（Crodamol GTCC）     30 - 65克

1, 2-丙二醇                            6- 12克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）   7 - 12克

聚甘油油酸酯                         0 - 5克

吐温80                             4 - 10克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     6 - 15克

油酸                                 0 - 3克

油酸钠                             0 - 3克

维生素A                             0 - 3克

维生素E                              0 - 3克；

2）

丁酸氯维地平                        0.2-0.35克

大豆油                             20 - 45克

辛酸癸酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）     20 - 45克

1, 2-丙二醇                           6 - 14克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）   7 - 13克

聚甘油油酸酯                         0 - 5克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     5 - 15克

吐温80                              3 - 8克

油酸                                    0 - 3克

油酸钠                                0 - 3克

维生素A                                0 - 3克

维生素E                                0 - 3克；

3）

丁酸氯维地平                            0.2-0.35克

大豆油                                 35 -50克

辛酸癸酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）     0–15克

1, 2-丙二醇                              6- 14克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）      7 - 13克

聚甘油油酸酯                            0 - 3克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     5- 15克

吐温80                               2 - 11克

油酸                                    0 - 3克

油酸钠                                0 - 3克

维生素A                                0 - 3克

维生素E                                 0 - 3克；

4）

丁酸氯维地平                           0.2-0.35克

大豆油                                 25-45克

辛酸癸酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）     5 - 45克

1, 2-丙二醇                               6- 14克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）        7-13克

精制聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor ELP，BASF）   10-20克

油酸                                     0 - 3克

油酸钠                                   0 - 3克

维生素A                                  0 - 3克

维生素E                                     0 - 3克。

根据本发明任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，其组分和含量如下面的（1）－（4）组中的任意一组所示：

（1）

丁酸氯维地平                                 0.35克

大豆油                                       5克

中链脂肪酸甘油三酯（Crodamol GTCC）          65克

1, 2-丙二醇                                   8.5克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）           8克

吐温80                                     4.3克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     8.5克

维生素E                                       0.35克；

（2）

丁酸氯维地平                                   0.25克

大豆油                                         30.5克

辛酸癸酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）            30.5克

1, 2-丙二醇                                    7.3克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）            11.5克

聚甘油油酸酯                                  4克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     11.5克

吐温80                                     4克

维生素E                                     0.3克

油酸                                        0.15克；

（3）

丁酸氯维地平                                  0.3克

大豆油                                      50克

1, 2-丙二醇                                  9.5克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）          12.5克

聚甘油油酸酯                                     3克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     13.5克

吐温80                                           10.5克

维生素E                                           0.35克

油酸                                             0.35克；

（4）

丁酸氯维地平                                    0.2克

大豆油                                        31克

辛酸癸酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）          31克

1, 2-丙二醇                                   9.5克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）             12.5克

精制聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor ELP，BASF）   15.5克

维生素E                                         0.15克

油酸钠                                        0.15克。

需要说明的是，上述的1）－4）组或者（1）－（4）组中的单位克表示各组分之间的比例，如果修改为其它的重量单位，包括但不限于，例如千克和毫克等，也均在本发明的保护范围之内。

本发明的再一方面涉及一种注射用丁酸氯维地平脂肪乳，其由本发明中任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液加水或水溶液自乳化制得；具体地，所述注射用丁酸氯维地平脂肪乳平均粒径为0.05－0.7μm；优选为0.1－0.4μm；更优选地，为0.17－0.23μm。

本发明的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液遇水稀释后，可自发乳化为符合注射要求的丁酸氯维地平脂肪乳。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液的制备方法，包括下述步骤：

1）在20－45℃，将低HLB值表面活性剂加入油，在2000－20000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在20－45℃条件下，将丁酸氯维地平加入步骤1）产物，在并在200－2000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）在20－45℃条件下，将助溶剂、高HLB值表面活性剂以及可选的抗氧化剂加入步骤2）产物，并在200－800rpm搅拌条件下持续搅拌，直至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液。

关于步骤1）或步骤2）或步骤3）中所使用的油、低HLB值表面活性剂、高HLB值表面活性剂和助溶剂，其中水分含量要低于1%，或者没有游离水的存在。

步骤3）中的产品，在不经过除去或者降低水分的步骤（例如旋转蒸发、喷雾干燥或冷冻干燥），含水量低于1％（按重量百分比计）。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液或者本发明的注射用丁酸氯维地平脂肪乳，在外科手术时血压控制及术后急性血压升高，也可用于不宜口服或口服无效的高血压患者血压控制等临床用途。

本发明涉及的部分术语的解释：

脂肪乳，又称脂质微球是指，乳液或脂肪乳浓缩液乳化后，形成的一种以脂肪油为软基质并被磷脂膜包封，平均粒径为0.2μm左右的微粒分散体系。

本发明中，对于各个组分的含量的百分比，如果没有特别说明，均指占药物组合物总重量的重量百分比（w/w）。

发明的有益效果

本发明产品流动性好，不挂壁，外观呈单相、透明、清亮状，能够接受澄明度检测，反复冻融后不会发生制剂分层现象；本发明的产品遇水形成丁酸氯维地平脂肪乳体系过程中，无需均质处理，仅需要轻微振荡即能自发乳化，临床使用时经生理盐水或葡萄糖溶液等水溶液稀释并轻微振荡后，能够自发乳化为符合注射要求的脂肪乳体系，在优选条件下，乳化后平均粒径在0.2μm，粒径分布狭小充分体现注射脂肪乳特性。

本发明制备工艺简单，仅需要普通物理搅拌过程，不需要均质工艺，不需要除水工艺，本发明制备的丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液，可以通过0.22μm微孔滤膜除菌，给药方便，安全性高。本发明具有制备工艺简单、生产成本低廉，易于运输、储存的优势，极具应用前景。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1：丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液样品1的制备

其组成成分如下：

丁酸氯维地平                                 0.35克

大豆油                                       5克

中链脂肪酸甘油三酯（Crodamol GTCC）          65克

1, 2-丙二醇                                   8.5克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）           8克

吐温80                                     4.3克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     8.5克

维生素E                                       0.35克

该丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1） 45℃条件下，将上述重量的大豆卵磷脂、大豆油与中链脂肪酸甘油三酯混合后，在8000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2） 20℃条件下，将上述重量丁酸氯维地平加入1）产物，在并在200rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）25℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、吐温80、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯、维生素E加入步骤2）产物中，并在200rpm搅拌条件下持续搅拌，至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液。

实施例2：丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液样品2的制备

其组成成分如下：

丁酸氯维地平                                   0.25克

大豆油                                         30.5克

辛酸癸酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）            30.5克

1, 2-丙二醇                                    7.3克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）            11.5克

聚甘油油酸酯                                  4克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     11.5克

吐温80                                     4克

维生素E                                     0.3克

油酸                                        0.15克

该丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1） 20℃条件下，将上述重量的大豆卵磷脂、聚甘油油酸酯与辛酸癸酸甘油酯和大豆油混合后，在20000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2） 45℃条件下，将上述重量丁酸氯维地平加入1）产物，在并在1000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）45℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯、吐温80、维生素E、油酸加入步骤2）产物中，并在800rpm搅拌条件下持续搅拌，至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液。

实施例3：丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液样品3的制备

其组成成分如下：

丁酸氯维地平                                  0.3克

大豆油                                      50克

1, 2-丙二醇                                  9.5克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）          12.5克

聚甘油油酸酯                                     3克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     13.5克

吐温80                                           10.5克

维生素E                                           0.35克

油酸                                             0.35克

该丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1） 25℃条件下，将上述重量的大豆卵磷、聚甘油油酸酯与大豆油混合后，在2000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2） 30℃条件下，将上述重量丁酸氯维地平加入1）产物，在并在2000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）20℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯、吐温80、维生素E加入步骤2）产物中，并在600rpm搅拌条件下持续搅拌，至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液。

实施例4：丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液样品4的制备

其组成成分如下： 

丁酸氯维地平                                    0.2克

大豆油                                        31克

辛酸癸酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）          31克

1, 2-丙二醇                                   9.5克

大豆卵磷脂（Epikuron 170，Degussa）             12.5克

精制聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor ELP，BASF）   15.5克

维生素E                                         0.15克

油酸钠                                        0.15克

该丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1） 25℃条件下，将上述重量的大豆卵磷脂与辛酸癸酸甘油酯、大豆油混合后，在12000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2） 25℃条件下，将上述重量丁酸氯维地平加入1）产物，在并在1500rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）25℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、PEG400、精制聚氧乙烯醚(35)蓖麻油、维生素E、油酸钠加入步骤2）产物中，并在500rpm搅拌条件下持续搅拌，至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液。

实施例5：光密度测定试验

用日立U-2001紫外可见分光光度计，在室温条件下，600nm处测定光密度。其中丁酸氯维地平脂肪乳浓缩液为按照实施例1－4制备步骤所得的样品1－4，选用市售产品Cleviprex?作为对照，结果如表1所示。

表1：不同样品溶液的光密度值

样品 1 2 3 4 Cleviprex?

光密度 0.001 0.007 -0.001 -0.002 2.163

光密度表示光的透过性，数值越低，表明样品越澄清均一，由结果可知，本发明产品外观均一、清亮、透明。

实施例6：稳定性试验

实施例1－4制备的样品1－4，对照品为市售产品Cleviprex?。

实验方法：将不同样品在-20℃冷冻过夜后，放置于20℃自然解冻，如此反复冻融6次，环境条件下观察样品外观，试验结果见表2。

表2：不同样品经冻融后，样品外观变化

样品 外观变化

1 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

2 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

3 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

4 外观澄清，不分层，不挂壁，流动性好

Cleviprex? 油-水分层，挂壁严重

由表2可见，样品1－4均具有极好的稳定性，经过反复冻融，外观仍能保持透明均一相，不挂壁、不分层，具有良好的流动性。

实施例7：粒径测定

本发明实施例1－4制备的样品1－4，采用Mastersizer 2000粒度分析仪检测粒径，样品加入10倍体积的生理盐水，经轻微振荡自发乳化后测定。

表3：不同样品乳化后粒径分布

注：d（0.1）表示样品的累计粒度分布数为10%对应的粒径， d（0.5）、d（0.9）、d（1）依此类推。

其粒径分布如表3所示，四个实施例的粒径分布在0.1-0.5μm之间，平均粒径0.2μm左右，四个实施例产品的d（0.9）均小于0.6μm，满足注射脂肪乳粒径要求。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。