一种利用磷钾尾矿和废弃生物质制备土壤调理剂的方法

1.本发明涉及土壤修复技术领域，具体涉及一种利用磷钾尾矿和废弃生物质制备土壤调理剂的方法。

背景技术：

2.磷矿石是一种重要的不可再生战略资源，是磷肥和磷化工的重要组成部分。虽然我国是世界产磷大国，磷资源非常丰富，居世界第二位，但是我国富矿少，中低品位矿多，开采利用起来难度较大、成本较高。此外我国钾矿资源非常丰富，但难溶性钾盐居多，具有经济作用的可溶性钾盐比较短缺，目前钾矿工业开发和利用的主要是盐湖卤水、海水和可溶性含钾矿物等可溶性钾资源，对难溶性含钾矿石(比如钾长石矿)的开发利用不足。
3.微生物在自然界磷和钾的循环中发挥着重要作用，他们可以通过自身生长代谢过程中产生的代谢产物有效分解磷矿和钾长石矿，并将其中难溶性磷和钾转化为可溶性磷和钾。这种微生物技术在低品位、复杂、难处理矿产资源的开发利用上显现出强大优势。
4.土壤调理剂具有改善土壤结构、防治土壤板结、促进土壤微生物活性等功能，还能够提高土壤水土保持能力，增加土壤有效水供应，增强农作物抗性，进而改善农产品品质，对解决我国土壤退化问题、修复土壤并提高粮食产量具有重要作用。
5.近年来，利用土壤调理剂进行土壤修复的研究已经引起了人们的广泛关注，然而当前主要集中在研究传统土壤调理剂对土壤的改良效果和对农产品生长、产量及品质的影响方面，采用磷钾矿源和废弃生物质制备土壤调理剂的研究较少，目前未见综合利用磷钾尾矿和废弃生物质联合功能微生物制备土壤调理剂的相关报道。

技术实现要素：

6.本发明的目的之一在于提供一种利用磷钾尾矿和废弃生物质制备土壤调理剂的方法，主要包括以下步骤：(a)利用高效溶磷菌、高效解钾菌、有机废弃物、酵素菌制备微生物菌剂；(b)以废弃生物质、中低品位磷矿粉、钾长石矿粉为辅料，将其与微生物菌剂、高效纤维素降解菌混合均匀，得到土壤调理剂。
7.进一步的，步骤(a)中高效溶磷菌是从磷矿矿山土壤中分离纯化而来，高效解钾菌是从钾长石矿山土壤中分离纯化而来，步骤(b)中高效纤维素降解菌是从森林土壤中分离纯化而来。
8.进一步的，高效溶磷菌的分离纯化方法具体如下：
①
按照1:5-10的质量比将磷矿矿山土壤与水混合，恒温震荡得到稀释样品a；
②
按照1:5-10的体积比将稀释样品a与无磷液体培养基混合，恒温震荡培养得到富集菌液a；
③
将富集菌液a涂布于含磷琼脂培养基上恒温培养，筛选出具有透明圈的菌株，记为溶磷菌a；
④
将溶磷菌a划线接种于无磷琼脂培养基上恒温培养，得到纯化溶磷菌a；
⑤
重复步骤
④
多次(1-5次)，得到纯化溶磷菌；
⑥
将纯化溶磷菌接种于含磷液体培养基中，定期(每24小时)取样测定培养基中的可溶磷含量，选择溶磷能力相对较强的菌株作为目标高效溶磷菌。高效溶磷菌分离纯化出来后，需保存在琼
脂斜面培养基上恒温培养，然后置于4℃冰箱中冷藏保存备用。
9.进一步的，高效溶磷菌分离纯化过程中的培养温度为28-30℃，转速为140-160转/min，每次恒温培养时间为3-5天。
10.进一步的，所述无磷液体培养基的组成为：10-15g/l葡萄糖，0.5-0.8g/l酵母浸粉，0.3-0.5g/l(nh4)2so4，0.2g-0.4/l kcl，0.1-0.2g/l mgso4·
7h2o，1-2g/l cacl2、0.03-0.05g/l feso4·
7h2o，溶剂为无菌水。
11.进一步的，所述含磷琼脂培养基的组成为：10-15g/l葡萄糖，0.5-0.8g/l酵母浸粉，15-20g/l琼脂，0.3-0.5g/l(nh4)2so4，0.2-0.4g/l kcl，0.1-0.2g/l mgso4·
7h2o，1-2g/l cacl2，0.03-0.05g/l feso4·
7h2o，3-6g/l ca3(po4)2，溶剂为无菌水。
12.进一步的，所述无磷琼脂培养基的组成为：10-15g/l葡萄糖，0.5-0.8g/l酵母浸粉，0.3-0.5g/l(nh4)2so4，0.2-0.4g/l kcl，0.1-0.2g/l mgso4·
7h2o，1-2g/l cacl2，0.03-0.05g/l feso4·
7h2o，3-6g/l ca3(po4)2，溶剂为无菌水。
13.进一步的，所述含磷液体培养基的组成为：10-15g/l葡萄糖，0.5-0.8g/l酵母浸粉，15-20g/l琼脂，0.3-0.5g/l(nh4)2so4，0.2-0.4g/l kcl，0.1-0.2g/l mgso4·
7h2o，1-2g/l cacl2，0.03-0.05g/l feso4·
7h2o，溶剂为无菌水。
14.进一步的，所述琼脂斜面培养基的组成为：10-15g/l蛋白胨，5-8g/l酵母浸粉，15-20g/l琼脂，10-15g/lnacl，溶剂为无菌水。
15.进一步的，高效解钾菌的分离纯化方法具体如下：
①
按照1:5-10的质量比将钾长石矿山土壤与水混合，恒温震荡得到稀释样品b；
②
按照1:5-10的体积比将稀释样品b与无钾液体培养基混合，恒温震荡培养得到富集菌液b；
③
将富集菌液b涂布于含钾琼脂培养基上恒温培养，筛选出具有透明圈的菌株，记为溶钾菌b；
④
将溶钾菌b划线接种于无钾琼脂培养基上恒温培养，得到纯化溶钾菌b；
⑤
重复步骤
④
多次(1-5次)，得到纯化溶钾菌；
⑥
将纯化溶钾菌接种于含钾液体培养基中，定期(每24小时)取样测定培养基中的可溶钾含量，选择溶钾能力相对较强的菌株作为目标高效溶钾菌。高效溶钾菌分离纯化出来后，需保存在琼脂斜面培养基上恒温培养，然后置于4℃冰箱中冷藏保存备用。
16.进一步的，高效溶钾菌分离纯化过程中的培养温度为28-30℃，转速为140-160转/min，每次恒温培养时间为3-5天。
17.进一步的，所述无钾液体培养基的组成为：10-15g/l蔗糖，0.5-0.8g/l酵母浸粉，1-2g/l(nh4)2so4，0.1-0.3g/l nacl，0.3-0.5g/l mgso4·
7h2o，2-4g/l na2hpo4，溶剂为无菌水。
18.进一步的，所述含钾琼脂培养基的组成为：10-15g/l蔗糖，0.5-0.8g/l酵母浸粉，5-10g/l钾长石粉，15-20g/l琼脂，1-2g/l(nh4)2so4，0.1-0.3g/l nacl，0.3-0.5g/l mgso4·
7h2o，2-4g/l na2hpo4，溶剂为无菌水。
19.进一步的，所述无钾琼脂培养基的组成为：10-15g/l蔗糖、0.5-0.8g/l酵母浸粉、15-20g/l琼脂、1-3g/l(nh4)2so4、0.1-0.3g/l nacl、0.3-0.5g/l mgso4·
7h2o、2-4g/l na2hpo4，溶剂为无菌水。
20.进一步的，所述含钾液体培养基的组成为：10-15g/l蔗糖，0.5-0.8g/l酵母浸粉，5-10g/l钾长石粉，1-2g/l(nh4)2so4，0.1-0.3g/l nacl，0.3-0.5g/l mgso4·
7h2o，2-4g/l na2hpo4，溶剂为无菌水。
21.进一步的，高效纤维素降解菌的分离纯化方法具体如下：
①
按照1:5-10的质量比将森林土壤与水混合，恒温震荡得到稀释样品c；
②
按照1:5-10的体积比将稀释样品c与lb液体培养基混合，恒温震荡培养得到富集菌液c；
③
将富集菌液c涂布于纤维素刚果红琼脂培养基上恒温培养，筛选出具有透明圈的菌株，记为纤维素降解菌c；
④
将纤维素降解菌c划线接种于琼脂培养基上恒温培养，得到纯化纤维素降解菌c；
⑤
重复步骤
④
多次(1-3次)，得到纯化纤维素降解菌；
⑥
测试纯化纤维素降解菌的酶活力，选择酶活相对较强的菌株作为目标高效纤维素降解菌。高效纤维素降解菌分离纯化出来后，需保存在琼脂斜面培养基上恒温培养，然后置于4℃冰箱中冷藏保存备用。
22.进一步的，高效纤维素降解菌分离纯化过程中的培养温度为28-30℃，转速为140-160转/min，每次恒温培养时间为3-5天。
23.进一步的，所述lb液体培养基的组成为：10-15g/l蛋白胨，5-8g/l酵母浸粉，10-15g/lnacl，溶剂为无菌水。
24.进一步的，所述纤维素刚果红琼脂培养基的组成为：20-25g/l纤维素粉，0.2-0.4g/l刚果红，15-20g/l琼脂，2-4g/l(nh4)2so4，0.5-1g/lnacl，0.3-0.5g/lmgso4·
7h2o，1-2g/lkh2po4，溶剂为无菌水。
25.进一步的，所述琼脂培养基的组成为：10-15g/l蛋白胨，5-8g/l酵母浸粉，15-20g/l琼脂，8-10g/l nacl，溶剂为无菌水。
26.进一步的，分离纯化所得高效溶磷菌、高效解钾菌、高效纤维素降解菌在使用前均需进行复壮培养，具体过程如下：将菌株接种至lb液体培养基中，在28-30℃下恒温震荡培养即可。
27.进一步的，所述lb液体培养基的组成为：10-15g/l蛋白胨，5-8g/l酵母浸粉，8-10g/l nacl，溶剂为无菌水。
28.进一步的，步骤(a)制备微生物菌剂的方法具体如下：
①
按照1:1-3的体积比将高效溶磷菌、高效解钾菌混合均匀，得到溶磷解钾复合菌；
②
按照1:10-50的质量比将溶磷解钾复合菌与水混合均匀，得到稀释菌液；
③
按照1:0.1-1的质量比将稀释菌液与有机废弃物混合，循环翻转发酵10-20天，得到一级发酵物；
④
按照1:0.01-0.05的质量比将一级发酵物与酵素菌混合均匀，继续循环翻转发酵10-15天，所得混合物低温干燥后造粒成球，最终得到微生物菌剂。
29.进一步的，步骤(b)制备土壤调理剂的具体过程如下：
①
按照1:5-10:5-10的质量比将废弃生物质、中低品位磷矿粉、钾长石矿粉混合均匀，得到辅料；
②
按照1:0.3-0.6:0.3-0.5:0.1-0.3的质量比将辅料、水、微生物菌剂、高效纤维素降解菌混合，在28-33℃、40-60转/min下循环翻转混合10-15天，最终得到土壤调理剂。
30.进一步的，所述有机废弃物选自活性腐殖酸、动物粪便、厨余垃圾等其中至少一种；所述矿粉具体为五氧化二磷含量低于30％的低品位磷矿粉；所述废弃生物质选自水稻秸秆粉、玉米秸秆粉、小麦秸秆粉等农作物秸秆颗粒中的至少一种。
31.本发明所述高效溶磷菌具有抗逆性强、溶磷效果良好的特点，所述高效解钾菌具有抗逆性强、解钾效果良好的特点，所述酵素菌具有强改良与修复生态环境的作用，所述高效纤维素降解菌具有良好的纤维素降解能力，有机废弃物和废弃生物质的添加有助于提高调理剂的有机物比例，中低品味磷矿粉和钾长石矿粉的加入起到了以废治废的作用，在高
效溶磷菌和高效解钾菌的作用下为土壤调理剂提供了可溶性磷和可溶性钾。此外本发明先制备微生物菌剂微球，然后再加高效纤维素降解菌制备土壤调理剂，可以保证高效溶磷解钾的同时最大程度提高纤维素的利用率。
32.与现有技术相比，本发明的有益效果表现在以下几个方面：(1)针对我国低品位磷矿和钾长石储量丰富但难以利用的现状，通过本发明方法可以同时实现低品位磷矿和钾长石的合理利用，解决了低品位磷矿和难溶性钾矿的资源化利用难题，还对土壤修复和改善起到了积极的作用。(2)本发明提供的土壤调理剂综合利用磷钾尾矿和废弃生物质并联合功能微生物菌，具有土壤调理效果好、调理剂结构稳定等优点，为我国丰富的中低品位磷矿和难溶性钾矿的科学利用提供了一种切实可行的方法。(3)本发明具有生产成本低、工艺过程简单、变废为宝和环境友好等优点，符合当前绿环保的理念。
具体实施方式
33.为使本领域普通技术人员充分理解本发明的技术方案和有益效果，以下结合具体实施例进行进一步说明。
34.本发明不同阶段所使用的各种培养基的配方如下表所示。
35.表1各种培养基的配方表
[0036][0037]
高效溶磷菌的分离纯化过程具体如下：将磷矿矿山土壤与水按照1:10的质量比装入三角瓶中，将三角瓶置于30℃恒温摇床中，在160转/分钟的转速下下震荡12小时，得到稀释样品a。将稀释样品a与无磷液体培养基按照1:5的体积比装入三角瓶中，将三角瓶置于30℃恒温摇床中，在160转/分钟的转速下震荡培养24小时，得到富集菌液a。将富集菌液a涂布于含磷琼脂培养基上，然后转移至30℃恒温培养箱中培养3天，筛选出具有透明圈的菌株，得到溶磷菌a。将溶磷菌a划线接种于无磷琼脂培养基上，然后在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第1次纯化的溶磷菌a。将第1次纯化的溶磷菌a划线接种于无磷琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第2次纯化的溶磷菌a。将第2次纯化的溶磷菌a划线接种于无磷琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第3次纯化的溶磷菌a。将第3次纯化的溶磷菌a划线接种于无磷琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得纯化溶磷菌a。
如此反复纯化培养4次后，将最后一次纯化培养所得溶磷菌a接种于含磷液体培养基中，每24小时取样测定培养基中的可溶磷含量，筛选得到5株高效溶磷菌。将这5株高效溶磷菌接种于琼脂斜面培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，取出后置于冰箱中于4℃下冷藏保存。
[0038]
高效解钾菌的分离纯化过程具体如下：将钾长石矿山土壤与水按照1:10的质量比装入三角瓶中，将三角瓶置于30℃恒温摇床中，在160转/分钟的转速下震荡12小时，得到稀释样品b。将稀释样品b与无钾液体培养基按照1:5的体积比装入三角瓶中，将三角瓶置于30℃恒温摇床中，在160转/分钟的转速下震荡培养24小时，得到富集菌液b。将富集菌液b涂布于含钾琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，筛选出具有透明圈的菌株，得到解钾菌b。将解钾菌b划线接种于无钾琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第1次纯化的解钾菌b。将第1次纯化的解钾菌b划线接种于无钾琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第2次纯化的解钾菌b。将第2次纯化的解钾菌b划线接种于无钾琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得纯化解钾菌b。如此反复纯化培养3次后，将最后一次纯化所得解钾菌接种于含钾液体培养基，每24小时取样测定培养基中的可溶钾含量，筛选得到2株高效解钾菌。将这2株高效解钾菌接种于琼脂斜面培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天后，取出置于冰箱中于4℃下冷藏保存。
[0039]
高效纤维素降解菌的分离纯化过程具体如下：将森林土壤与水按照1:10的质量比装入三角瓶中，将三角瓶置于30℃恒温摇床中，在160转/分钟的转速下震荡12小时，得到稀释样品c。将稀释样品c与lb液体培养基按照1:5的体积比装入三角瓶中，将三角瓶置于30℃恒温摇床中，在160转/分钟的转速下震荡培养24小时，得到富集菌液c。将富集菌液c涂布于纤维素刚果红琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，筛选出具有透明圈的菌株，得到纤维素降解菌c。将纤维素降解菌c划线接种于琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第1次纯化的纤维素降解菌c。将第1次纯化的纤维素降解菌c划线接种于琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第2次纯化的纤维素降解菌c。将第2次纯化的纤维素降解菌c划线接种于琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得第3次纯化的纤维素降解菌c。将第3次纯化的纤维素降解菌c划线接种于琼脂培养基上，在30℃恒温培养箱中培养3天，获得纯化纤维素降解菌c。如此反复纯化培养4次后，测定最后一次纯化所得纤维素降解菌的纤维素降解酶活力，选择酶活最强的1株菌株(即高效纤维素降解菌)，将其接种至琼脂斜面培养基上，在30℃恒温培养箱培养3天，然后置于置于冰箱中于4℃下冷藏保存。
[0040]
微生物的复壮：分别将分离纯化的5株高效溶磷菌、2株高效解钾菌、1株高效纤维素降解菌接种于细菌液体培养基中，在30℃恒温摇床中震荡培养3天，获得复壮后的功能微生物。
[0041]
实施例1
[0042]
微生物菌剂的制备
[0043]
按照1:1的体积比将前述分离纯化好的高效溶磷菌、高效解钾菌装入恒温反应器中，30℃恒温搅拌混合均匀，得到溶磷解钾复合菌。按照1:30的质量比将溶磷解钾复合菌与水装入恒温反应器中，在30℃恒温搅拌至混合均匀，得到稀释菌液。按照1:0.5的质量比将稀释菌液与活性腐殖酸装入恒温反应器中，30℃恒温循环翻转发酵15天，得到一级发酵物。按照1:0.01的质量比将一级发酵物与酵素菌装入恒温反应器，30℃恒温继续循环翻转发酵
15天，所得混合物低温干燥后造粒成球，得到微生物菌剂。
[0044]
土壤调理剂的制备
[0045]
按照1:5:5的质量比将水稻秸秆粉、中低品位磷矿粉(五氧化二磷含量为5.96％)、钾长石矿粉装入恒温反应器中30℃恒温混合均匀，得到辅料。按照1:0.5:0.5:0.2的质量比将辅料、水、微生物菌剂、高效纤维素降解菌装入恒温反应器中，30℃恒温循环翻转混合15天，最终得到土壤调理剂。
[0046]
分析检测结果表面，该土壤调理剂总养分占比23.9％，有效活菌数达到5.64亿/g，有机质(以干基记)占比达26.7％。
[0047]
实施例2
[0048]
微生物菌剂的制备
[0049]
按照1:1.5的体积比将前述分离纯化好的高效溶磷菌、高效解钾菌装入恒温反应器中，32℃恒温搅拌混合均匀，得到溶磷解钾复合菌。按照1:20的质量比将溶磷解钾复合菌与水装入恒温反应器中，32℃恒温搅拌至混合均匀，得到稀释菌液。按照1:1的质量比将稀释菌液与动物粪便装入恒温反应器中，32℃恒温循环翻转发酵20天，得到一级发酵物。按照1:0.03的质量比将一级发酵物与酵素菌装入恒温反应器中，32℃恒温继续循环翻转发酵20天，所得混合物低温干燥后造粒成球，得到微生物菌剂。
[0050]
土壤调理剂的制备
[0051]
按照1:5:5的质量比将玉米秸秆粉、中低品位磷矿粉(五氧化二磷含量为13.45％)入恒温反应器中32℃恒温混合均匀，得到辅料。按照1:0.6:0.5:0.2的质量比将辅料、水、微生物菌剂、高效纤维素降解菌装入恒温反应器中，32℃恒温循环翻转混合15天，最终得到土壤调理剂。
[0052]
分析检测结果表明，该土壤调理剂总养分占比25.3％，有效活菌数达到5.85亿/g，有机质(以干基记)占比达27.3％。
[0053]
实施例3
[0054]
微生物菌剂的制备
[0055]
按照1:2的体积比将前述分离纯化好的高效溶磷菌、高效解钾菌装入恒温反应器中，32℃恒温搅拌混合均匀，得到溶磷解钾复合菌。按照1:45的质量比将溶磷解钾复合菌与水装入恒温反应器中，35℃恒温拌至混合均匀，得到稀释菌液。按照1:1的质量比将稀释菌液与厨余垃圾，装入恒温反应器中，35℃恒温循环翻转发酵10天，得到一级发酵物。按照1:0.03的质量比将一级发酵物与酵素菌装入恒温反应器中，35℃恒温继续循环翻转发酵12天，所得混合物低温干燥后造粒成球，得到微生物菌剂。
[0056]
土壤调理剂的制备
[0057]
按照1:5:5的质量比将小麦秸秆粉、中低品位磷矿粉(五氧化二磷含量为16.7％)、钾长石矿粉装入恒温反应器中35℃恒温混合均匀，得到辅料。按照1:0.3:0.5:0.3的质量比将辅料、水、微生物菌剂、高效纤维素降解菌装入恒温反应器中，35℃恒温循环翻转混合15天，最终得到土壤调理剂。
[0058]
分析检测结果表明，该土壤调理剂总养分占比24.9％，有效活菌数达到5.62亿/g，有机质(以干基记)占比达25.8％。

技术特征：

1.一种利用磷钾尾矿和废弃生物质制备土壤调理剂的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(a)利用高效溶磷菌、高效解钾菌、有机废弃物、酵素菌制备微生物菌剂；(b)以废弃生物质、中低品位磷矿粉、钾长石矿粉为辅料，将其与微生物菌剂、高效纤维素降解菌混合均匀，得到土壤调理剂。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中高效溶磷菌是从磷矿矿山土壤中分离纯化而来，高效解钾菌是从钾长石矿山土壤中分离纯化而来，步骤(b)中高效纤维素降解菌是从森林土壤中分离纯化而来。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于高效溶磷菌的分离纯化方法具体如下：
①
按照1:5-10的质量比将磷矿矿山土壤与水混合，恒温震荡得到稀释样品a；
②
按照1:5-10的体积比将稀释样品a与无磷液体培养基混合，恒温震荡培养得到富集菌液a；
③
将富集菌液a涂布于含磷琼脂培养基上恒温培养，筛选出具有透明圈的菌株，记为溶磷菌a；
④
将溶磷菌a划线接种于无磷琼脂培养基上恒温培养，得到纯化溶磷菌a；
⑤
重复步骤
④
多次，得到纯化溶磷菌；
⑥
将纯化溶磷菌接种于含磷液体培养基中，定期取样测定培养基中的可溶磷含量，选择溶磷能力相对较强的菌株作为目标高效溶磷菌；高效解钾菌的分离纯化方法具体如下：
①
按照1:5-10的质量比将钾长石矿山土壤与水混合，恒温震荡得到稀释样品b；
②
按照1:5-10的体积比将稀释样品b与无钾液体培养基混合，恒温震荡培养得到富集菌液b；
③
将富集菌液b涂布于含钾琼脂培养基上恒温培养，筛选出具有透明圈的菌株，记为溶钾菌b；
④
将溶钾菌b划线接种于无钾琼脂培养基上恒温培养，得到纯化溶钾菌b；
⑤
重复步骤
④
多次，得到纯化溶钾菌；
⑥
将纯化溶钾菌接种于含钾液体培养基中，定期取样测定培养基中的可溶钾含量，选择溶钾能力相对较强的菌株作为目标高效溶钾菌；高效纤维素降解菌的分离纯化方法具体如下：
①
按照1:5-10的质量比将森林土壤与水混合，恒温震荡得到稀释样品c；
②
按照1:5-10的体积比将稀释样品c与lb液体培养基混合，恒温震荡培养得到富集菌液c；
③
将富集菌液c涂布于纤维素刚果红琼脂培养基上恒温培养，筛选出具有透明圈的菌株，记为纤维素降解菌c；
④
将纤维素降解菌c划线接种于琼脂培养基上恒温培养，得到纯化纤维素降解菌c；
⑤
重复步骤
④
多次，得到纯化纤维素降解菌；
⑥
测试纯化纤维素降解菌的酶活力，选择酶活相对较强的菌株作为目标高效纤维素降解菌。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：高效溶磷菌、高效解钾菌、高效纤维素降解菌分离纯化出来后，均需保存在琼脂斜面培养基上恒温培养，然后置于4℃冰箱中冷藏保存备用。5.如权利要求3所述的方法，其特征在于：高效溶磷菌分离纯化过程中的培养温度为28-30℃，转速为140-160转/min，每次恒温培养时间为3-5天；高效溶钾菌分离纯化过程中的培养温度为28-30℃，转速为140-160转/min，每次恒温培养时间为3-5天；高效纤维素降解菌分离纯化过程中的培养温度为28-30℃，转速为140-160转/min，每次恒温培养时间为3-5天。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：分离纯化所得高效溶磷菌、高效解钾菌、高效纤维素降解菌在使用前均需进行复壮培养，具体过程如下：将菌株接种至lb液体培养基中，在28-30℃下恒温震荡培养即可。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(a)制备微生物菌剂的方法具体如下：
①
按照1:1-3的体积比将高效溶磷菌、高效解钾菌混合均匀，得到溶磷解钾复合菌；
②
按照1:10-50的质量比将溶磷解钾复合菌与水混合均匀，得到稀释菌液；
③
按照1:0.1-1的质量比将稀释菌液与有机废弃物混合，循环翻转发酵10-20天，得到一级发酵物；
④
按照1:0.01-0.05的质量比将一级发酵物与酵素菌混合均匀，继续循环翻转发酵10-15天，所得混合物低温干燥后造粒成球，最终得到微生物菌剂。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(b)制备土壤调理剂的具体过程如下：
①
按照1:5-10:5-10的质量比将废弃生物质、中低品位磷矿粉、钾长石矿粉混合均匀，得到辅料；
②
按照1:0.3-0.6:0.3-0.5:0.1-0.3的质量比将辅料、水、微生物菌剂、高效纤维素降解菌混合，在28-33℃、40-60转/min下循环翻转混合10-15天，最终得到土壤调理剂。9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述有机废弃物选自活性腐殖酸、动物粪便、厨余垃圾等其中至少一种；所述矿粉具体为五氧化二磷含量低于30％的低品位磷矿粉；所述废弃生物质选自水稻秸秆粉、玉米秸秆粉、小麦秸秆粉等农作物秸秆颗粒中的至少一种。

技术总结

本发明涉及一种利用磷钾尾矿和废弃生物质制备土壤调理剂的方法，主要包括以下步骤：1)从磷矿矿山土壤中分离纯化高效溶磷菌；2)从钾长石矿山土壤中分离纯化高效解钾菌；3)从森林土壤中分离纯化高效纤维素降解菌；4)对前述菌种进行复壮培养；5)将高效溶磷菌与高效解钾菌复合后稀释，再加入矿粉、有机废弃物、酵素菌等制成微生物菌剂；6)以废弃生物质、中低品位磷矿粉、钾长石矿粉为辅料，与微生物菌剂、高效纤维素降解菌混合制得土壤调理剂。本发明具有生产成本低、工艺过程简单、环境友好等优势，有效解决了低成本批量开发利用中低品位磷矿和钾长石矿难题，对改善土壤结构、修复土壤污染和提高作物产量也起到了积极作用。和提高作物产量也起到了积极作用。