一种旋转磁场装置在调节糖脂代谢中的应用

1.本发明涉及磁场技术领域，具体涉及一种旋转磁场装置在调节糖脂代谢中的应用。

背景技术：

2.随着肥胖及其相关代谢综合征全球化的流行趋势，非酒精性脂肪性肝病(nafld)现已成为欧美等发达国家和我国富裕地区慢性肝病的重要病因。nafld是指除酒精外和其他明确的损肝因素所致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征，与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关的获得性代谢应激性肝损伤。nafld除可直接导致失代偿期肝硬化、肝细胞癌和移植肝复发外，还可影响其他慢性肝病的进展，并参与2型糖尿病和动脉粥样硬化的发病。为此，nafld是当代医学领域的新挑战。
3.如公开号为cn111920818a的中国专利申请文献公开在两种非酒精性脂肪性肝病动物模型中观察到桦木酸改善nafld的作用，显示了桦木酸在制备抑制肝脏脂肪酸合成药物中的潜在作用。又如公告号为cn208694048u的中国专利申请文献公开的医用永磁体装置，其专利申请中记载通过环支架的永磁体组件产生的稳恒强磁场能够实现对骨折和骨质疏松的。
4.再如公开号为cn113519459a的中国专利申请文献公开一种采用调节肝细胞ros水平的磁场装置在调节人/鼠肝细胞氧化应激中的应用，显示0.01～0.15t的s极磁场可以显著改善酒精性脂肪肝小鼠的肝损伤状态。再如公开号为cn111411041a的中国专利申请文献公开一种旋转磁场专利，可抑制乳腺癌细胞的粘附、迁移和侵袭等作用。因此，如何开发和优化一种可以调节糖脂代谢改善非酒精性脂肪肝的旋转磁场装置，将有助于研究磁场发生装置作用机理，进一步加深旋转磁场在未来的实际应用。

技术实现要素：

5.本发明所要解决的技术问题在于提供一种旋转磁场装置在构建调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型中的应用以及调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法。
6.本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题：
7.一种旋转磁场装置在构建调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型中的应用，小鼠所受到的磁场强度为0.1t。
8.有益效果：采用本发明中磁场强度为0.1t的旋转磁场发生装置处理后，非酒精性脂肪肝小鼠体重显著降低，经磁场发生装置处理后同时构建的低体重非酒精性脂肪肝小鼠肝脏组织脂肪堆积显著减少，参与肝脏组织中脂肪酸代谢的多种酶含量显著改善；有利于对低体重非酒精性脂肪肝小鼠进行进一步研究，并加深对磁场的理解、扩展磁场的应用。
9.优选地，所述旋转磁场装置包括罩体、旋转轴和两块永磁铁，所述旋转轴和两块永磁铁均位于罩体内，所述两块永磁铁沿旋转轴的轴线相对设置，所述两块永磁铁之间设有
连接杆，所述连接杆与旋转轴连接，所述旋转轴转动致使两块永磁铁沿旋转轴的轴线旋转，每个永磁铁的一端均朝向罩体顶端，所述两块永磁铁的磁极方向相反。
10.本发明还提出的一种所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：
11.(1)、将小鼠适应性喂养后采用脂肪含量为60kcal％的高脂饲料喂养形成非酒精性脂肪肝小鼠模型；
12.(2)、将高脂饲料喂养后的小鼠置于旋转磁场装置上进行磁处理；在磁处理过程中，小鼠受到的磁场强度为0.1t；
13.(3)、每天磁处理结束后统计小鼠每天饮水量和食物消耗量；并检测小鼠血糖、统计小鼠体重；
14.(4)、磁处理结束后牺牲小鼠，收集小鼠的血液和组织器官，并进行相关指标检测；将小鼠的肝脏组织进行转录组学测序分析。
15.优选地，在(1)中，所述小鼠为spf级8周龄雄性c57bl/6j小鼠。
16.优选地，在(1)中，所述适应性喂养的时间为一周。
17.优选地，在(1)中，所述高脂饲料为美国research diets d12492,60kcal％高脂饲料；购于红荣微再(上海)生物工程技术有限公司。
18.优选地，在(1)中，采用高脂饲料喂养的时间为63天。
19.优选地，在(2)中，在所述磁处理过程中，旋转频率为4.2hz，每天处理6h，每周处理5天停止2天，实验总时间为63天，磁处理总时间为45天。
20.优选地，在(3)中，每7天检测一次小鼠血糖，每5天统计一次小鼠体重。
21.优选地，在(4)中，所述组织器官包括心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、性腺周围脂肪组织中的一种或多种。
22.本发明还提出的一种以非为目的采用旋转磁场装置在调节非酒精性脂肪肝小鼠肝脏组织脂肪酸代谢相关酶和/或糖代谢途径相关酶和/或氧化应激和增殖凋亡和/或肝脏胰岛素抵抗中的应用，所述小鼠所受到的磁场强度为0.1t。
23.优选地，所述脂肪酸代谢相关酶的检测是通过生物信息学转录组测序(rna-seq)分析的方法得到。
24.优选地，参与脂肪酸代谢过程包括，脂肪酸从头合成途径，脂肪酸吸收以及脂肪酸β-氧化过程中相关酶的转录情况检测。
25.优选地，参与肝脏组织糖代谢，包括糖酵解，磷酸戊糖途径和氧化磷酸化途径中相关基因转录情况检测。
26.优选地，参与肝脏氧化应激和增殖凋亡途径相关基因转录情况检测。
27.优选地，参与肝脏胰岛素抵抗相关受体基因转录情况检测。
28.本发明的优点总结如下：
29.(1)本发明所述的旋转磁场装置在构建调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型中的应用，得知，0.1t旋转磁场发生装置可显著降低体重。
30.(2)本发明所述的旋转磁场装置在构建调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型中的应用，得知，0.1t旋转磁场发生装置可改善空腹血糖水平。
31.(3)本发明的磁场强度为0.1t的旋转磁场发生装置在调节脂肪酸代谢途径中，能
调节脂肪酸从头合成、脂肪酸吸收和脂肪酸β-氧化相关酶的转录表达，并改善非酒精性脂肪肝。
32.(4)本发明的磁场强度为0.1t的旋转磁场发生装置能调节肝脏组织糖酵解、磷酸戊糖途径和氧化磷酸化相关基因表达，并改善非酒精性脂肪肝。
33.(5)本发明的磁场强度为0.1t的旋转磁场发生装置能调节肝脏氧化应激和增殖凋亡途径中相关基因的表达，并改善非酒精性脂肪肝。
34.(6)本发明的磁场强度为0.1t的旋转磁场发生装置能调节胰岛素抵抗途径中相关基因的表达，并改善非酒精性脂肪肝。
35.(7)本发明的旋转磁场发生装置的磁场场强分布具有持续、均匀、长期和稳定等特点。
36.本发明的旋转磁场发生装置以及其在调节肝脏组织参与脂肪酸代谢相关酶中的应用，能扩展应用在调节非酒精性脂肪肝的领域，为临床研究以及相关药物研制提供帮助。
附图说明
37.图1为本发明实施例1中旋转磁场发生装置的示意图；
38.图2为本发明实施例1中旋转磁场发生装置的截面结构示意图；
39.图3为本发明实施例1中旋转磁场发生装置上表面0.01-0.15t的磁场分布图；
40.图4为本发明实施例1中各组小鼠的周龄与体重变化关系的折线图；
41.图5为本发明实施例1中在第60天时各组小鼠体重变化的柱状图；
42.图6为本发明实施例1中各组小鼠的血糖与天数变化关系的折线图；
43.图7为本发明实施例1中各组小鼠的饮水量对比的散点图；
44.图8为本发明实施例1中各组小鼠的摄食量对比的散点图；
45.图9为本发明实施例1中各组小鼠的肝脏组织对比照片；
46.图10为本发明实施例1中各组小鼠的肝脏组织相对重量百分比；
47.图11为本发明实施例1中各组小鼠的性腺周围脂肪组织相对重量百分比；
48.图12为本发明实施例1中各组小鼠的心脏组织相对重量百分比；
49.图13为本发明实施例1中各组小鼠的脾脏组织相对重量百分比；
50.图14为本发明实施例1中各组小鼠的肺脏组织相对重量百分比；
51.图15为本发明实施例1中各组小鼠的肾脏组织相对重量百分比；
52.图16为本发明实施例1中各组小鼠的肝脏组织h&e染切片图；
53.图17为本发明实施例1中各组小鼠的肝脏组织油红o染切片图；
54.图18为本发明实施例1中各组小鼠血液中甘油三酯含量检测柱状图；
55.图19为本发明实施例1中各组小鼠血液中总胆固醇含量检测柱状图；
56.图20为本发明实施例1中各组小鼠血液中高密度脂蛋白胆固醇酯含量检测柱状图；
57.图21为本发明实施例1中各组小鼠血液中低密度脂蛋白胆固醇酯含量检测柱状图；
58.图22为本发明实施例1中各组小鼠肝脏组织中谷丙转氨酶含量检测柱状图；
59.图23为本发明实施例1中各组小鼠肝脏组织中谷草转氨酶含量检测柱状图；
60.图24为本发明实施例1中各组小鼠肝脏组织中超氧化物歧化酶含量检测柱状图；
61.图25为本发明实施例1中各组小鼠肝脏组织中丙二醛含量检测柱状图；
62.图26为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中参与多个脂肪酸代谢过程相关酶的热图；
63.图27为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中参与脂肪酸从头合成相关基因表达量分析差异对比热图；
64.图28为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中参与脂肪酸吸收相关基因表达量分析差异对比热图；
65.图29为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中参与脂肪β氧化相关基因表达量分析差异对比热图；
66.图30为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中参与糖酵解途径相关基因表达量分析差异对比热图；
67.图31为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中参与磷酸戊糖途径基因表达量分析差异对比热图；
68.图32为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中参与增殖凋亡和胰岛素敏感途径相关基因表达量分析差异对比热图；
69.图33为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中各种代谢通路go富集统计分析气泡图；
70.图34为本发明实施例2中各组小鼠肝脏组织中各种代谢通路kegg富集统计分析气泡图。
71.其中，本发明中，数据表示方式均为平均值
±
标准偏差。由graphpad prism v6.02，t-检验进行数据差异性分析。正常饮食对照组和高脂饮食对照组、高脂饮食0.1t旋转磁场处理组之间，“＊”代表p《0.05；“＊＊”代表p《0.01；“＊＊＊”代表p《0.001和“＊＊＊＊”代表p《0.0001。
具体实施方式
72.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
73.下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
74.实施例中未注明具体技术或条件者，均可以按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。
75.实施例1
76.如图1和图2所示，本实施例公开一种旋转磁场发生装置，其为公开号为cn111411041a的中国专利申请文献中公开的旋磁装置；旋磁装置表面磁场分布情况如图3所示；旋磁装置包括罩体11、旋转轴和两块永磁铁。
77.罩体11成长方体状，其长、宽、高分别为44cm、41cm和52cm，旋转轴和永磁铁均位于罩体11内，罩体11的材质为木质。
78.为方便旋转轴旋转和调节旋转轴的转速，本实施例中的旋转轴为电机12的输出轴，输出轴的一端安装连接杆14，连接杆14的中心与输出轴连接，连接杆14的轴线与输出轴的轴线垂直，其连接方式为现有技术，电机12安装在罩体11的内底壁，电机输出轴13的最大旋转速度为250r/min，同时也可以调节旋转速度为200r/min、150r/min，其对应的旋转频率分别为4.2hz、3.3hz和2.5hz。
79.永磁铁包括第一永磁铁15和第二永磁铁16，第一永磁铁15和第二永磁铁16分别固定安装在连接杆14的两端，第一永磁铁15和第二永磁铁16的规格相同，永磁铁的材质均为钕铁硼，第一永磁铁15和第二永磁铁16均呈长方体状，第一永磁铁15的轴线与第二永磁铁16的轴线平行，第一永磁铁15的轴线与连接杆14的轴线垂直，第一永磁铁15与第二永磁铁16相对于电机输出轴13对称设置，第一永磁铁15的n极朝向罩体11的顶端，第一永磁铁15的s极朝向罩体11的底端，第二永磁铁16的s极朝向罩体11的顶端，第二永磁铁16的n极朝向罩体11的底端。
80.电机输出轴转动使永磁铁沿电机输出轴的轴线旋转，形成旋转磁场，其中两块永磁铁的磁极方向相反，从而在两个磁极之间形成闭合磁力线。
81.有益效果：本发明中的旋转磁场发生装置可以处理各种动物模型，可用于检测各种动物在旋磁处理条件下的变化。
82.本发明中的旋磁装置体积较小，便于应用，成本较低，使用便捷。
83.本实施例公开一种旋转磁场装置对非酒精性脂肪肝小鼠模型各项生理指标的影响。
84.将小鼠置于上述旋转磁场装置上方，调节小鼠受到的磁场强度为0.1t，旋转频率为4.2hz，实验方案均经过伦理学认证；具体地，本发明提出的一种所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：
85.spf级8周龄雄性c57bl/6j小鼠在spf级动物房适应性喂养，一周后开始进行脂肪含量为60kcal％的高脂饲料进行喂养63天。并对小鼠进行随机分组，分别为高脂饮食对照组(第一组)、高脂饮食0.1t旋转磁场处理组(第二组)，并设置正常饮食组(第三组)小鼠为对照，每组6只，一组一笼分为3笼，每天上午9点到下午3点于旋转磁场装置上方对第二组小鼠进行6小时的处理，小鼠受到的磁场强度为0.1t，旋转频率为4.2hz，每连续处理5天停止2天，实验总计处理63天，磁处理时间总计45天，每天经旋转磁场处理结束后称量各组小鼠每天饮水量和食物消耗量，每周检测一次各组小鼠血糖，每5天统计一次各组小鼠体重；实验的第63天牺牲小鼠，进行小鼠眼球取血，对各组小鼠进行解剖收集组织器官进行各种生理学和病理学参数的检测；并将小鼠的肝脏组织进行转录组学测序分析。
86.器官指数测定：收集各组小鼠心、肝、脾、肺、肾和性腺周围脂肪组织等组织进行称重，并计算得到各个组织器官占体重的比例。
87.肝功能和氧化还原酶含量检测：将收集得到的小鼠血清分别通过长春汇力生物技术有限公司的天门冬氨酸氨基转移酶(ast)测定试剂盒(货号：c072)，丙氨酸氨基转移酶(alt)测定试剂盒(货号：c052)和南京建成生物工程研究所超氧化物歧化酶(sod)测定试剂盒(货号：a001-1)，丙二醛(mda)测定试剂盒(货号：a003-1)进行ast、alt、sod和mda的检测。
88.血常规检测：实验结束时，通过摘除小鼠眼球获取血液样品。采集200μl血液样品，加入20μl抗凝剂edta-k2·
2h2o溶液(其中edta-k2·
2h2o溶液由edta-k2·
2h2o粉末与水配
制成；edta-k2·
2h2o粉末购于生工生物工程(上海)股份有限公司，货号a600075，edta-k2·
2h2o在edta-k2·
2h2o溶液中的质量分数为0.15％)，进行血常规检测，结果如表1所示。
89.血液脂质含量检测：待实验结束，收集小鼠的血液组织，离心收集各组小鼠血清。分别用深圳雷杜生命科学股份有限公司的甘油三酯(tg)测定试剂盒(货号：s03027)，总胆固醇(tc)测定试剂盒(货号：s03042)，高密度脂蛋白胆固醇酯(hdl-c)测定试剂盒(货号：s03025)，低密度脂蛋白胆固醇酯(ldl-c)测定试剂盒(货号：s03029)对血清中tg、tc、hdl-c和ldl-c含量进行检测。
90.h&e和油红o染：血液样本收集结束后，解剖小鼠，并将肝脏组织固定在多聚甲醛溶液(多聚甲醛溶液购于武汉赛维尔生物科技有限公司，货号g1101，多聚甲醛在多聚甲醛溶液中的体积百分比v/v为4％)24h，后经脱水、包埋、切片等步骤，制备h&e和油红o染切片并观察。
91.实验结果：
92.图4中，高脂饮食对照组为第一组小鼠(图中用正方形的点连接形成折线)，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组为第二组小鼠(图中用三角形的点连接形成折线)，正常饮食组为第三组小鼠(图中用圆形的点连接形成折线)；
93.1)如图4所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)体重明显高于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)体重；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)体重低于高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)。
94.2)如图5所示，在小鼠实验第60天时(我们按照每5天统计一次小鼠体重变化情况)，高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)、高脂饮食0.1t旋转磁场处理组(第二组小鼠)体重明显高于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)体重；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)体重较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)体重降低13.55％。
95.3)如图6所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)血糖水平明显高于正常饮食组小鼠血糖；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)血糖较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)血糖有降低的趋势。
96.4)如图7所示，正常饮食组小鼠(第三组小鼠)饮水量明显高于高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)饮水量。
97.5)如图8所示，正常饮食组小鼠(第三组小鼠)饮食量明显高于高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)饮食量。
98.6)如图9所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)肝脏鲜重状态肉眼观察脂质堆积明显高于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)肝脏脂质堆积较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)有显著减少的现象。
99.7)如图10所示，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)肝脏脂质堆积较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)有显著减少的现象。
100.8)如图11所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)性腺周围脂肪组织重量明显高于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)性腺周围脂肪组织重量较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)有显著减少的现象。
101.9)如图12所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)心脏组织重量明显低于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)。
102.10)如图13所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)脾脏组织重量明显低于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)。
103.11)如图14所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)肺脏组织重量明显低于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)。
104.12)如图15所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)肾脏组织重量明显低于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)。
105.13)如图16所示，各组小鼠肝脏组织h&e染切片结果显示(其中图中标尺尺寸为50μm)：高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)肝脏细胞脂肪变性的细胞数目高于高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠和高脂饮食对照组小鼠肝脏细胞脂肪变性的细胞数目多于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)。
106.14)如图17所示，各组小鼠肝脏组织油红o染切片结果显示(其中图中标尺尺寸为50μm)：高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)肝脏细胞脂肪堆积的含量高于高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠和高脂饮食对照组小鼠肝脏细胞脂肪堆积的含量多于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)。
107.15)如图18所示，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组)血清甘油三脂水平显著低于高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)。
108.16)如图19所示，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组)血清总胆固醇水平显著低于高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)。
109.17)如图20所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)血清高密度脂蛋白胆固醇酯的含量明显高于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)。
110.18)如图21所示，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组)血清低密度脂蛋白胆固醇酯的含量显著低于高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)。
111.19)如图22所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)肝脏组织中谷丙转氨酶的含量明显高于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)；高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)肝脏组织中谷丙转氨酶的含量较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)有显著减少的现象；减少达45.5％；
112.20)如图23所示，高脂饮食组小鼠(第一组小鼠、第二组小鼠)肝脏组织中谷草转氨酶的含量明显高于正常饮食组小鼠(第三组小鼠)；
113.21)如图24所示，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)肝脏组织中超氧化物歧化酶的含量较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)有显著增加的现象；增加达25.3％；
114.22)如图25所示，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组小鼠(第二组小鼠)肝脏组织中丙二醛的含量较高脂饮食对照组小鼠(第一组小鼠)有显著减少的现象；减少达47.8％。
115.表1
[0116][0117]
注：wbc(白细胞数)、lymph(淋巴细胞数)、mono(单核细胞数)、neut(中性粒细胞数)、rbc(红细胞数)、hgb(血红蛋白)、mcv(平均红细胞体积)和mch(平均红细胞血红蛋白含量)
[0118]
由表1可知，高脂饮食0.1t旋转磁场处理组使得血液常规指标好转，逐渐趋近于正常饮食组。
[0119]
实施例2
[0120]
本实施例公开一种通过转录组测序技术(rna-seq)检测各组小鼠肝脏组织中参与糖脂代谢相关基因转录水平的检测结果。具体操作过程如下：
[0121]
(1)收集各组小鼠肝脏组织并研磨成组织匀浆，并使用组织rna抽提试剂盒，提取各组小鼠肝脏组织的rna。
[0122]
(2)样品提取总rna后，对于原核生物，去除rrna，使得到的mrna片段化，再以其为模板，合成cdna第一链，以及cdna第二链。
[0123]
(3)经过qiaquick pcr纯化并加eb缓冲液洗脱经末端修复、加碱基a，加测序接头，再经琼脂糖凝胶电泳回收目的大小片段，并进行pcr扩增，从而完成整个文库制备工作，构建好的文库用illumina hiseq2000进行测序。
[0124]
实验结果：
[0125]
(1)图26为本发明实施例2中第一组小鼠和第二组小鼠肝脏组织中参与多个脂肪酸代谢过程相关酶的热图；
[0126]
(2)如图27所示，第一组小鼠和第二组小鼠肝脏组织中参与脂肪酸从头合成相关基因表达量分析差异对比热图；
[0127]
(3)如图28所示，第一组小鼠和第二组小鼠肝脏组织中参与脂肪酸吸收相关基因表达量分析差异对比热图；
[0128]
(4)如图29所示，第一组小鼠和第二组小鼠肝脏组织中参与脂肪β氧化相关基因表达量分析差异对比热图；
[0129]
(5)如图30所示，第一组小鼠和第二组小鼠肝脏组织中参与糖酵解途径相关基因表达量分析差异对比热图；
[0130]
(6)如图31所示，第一组小鼠和第二组小鼠肝脏组织中参与磷酸戊糖途径相关基因表达量分析差异对比热图；
[0131]
(7)如图32所示，第一组小鼠和第二组小鼠肝脏组织中参与增殖凋亡和胰岛素敏感途径相关基因表达量分析差异对比热图；
[0132]
其中，图26-32中，红代表表达量水平增加，绿代表表达量水平减少；其中的
sham_hfd_1、sham_hfd_2、sham_hfd_3表示3组重复的高脂饮食对照组；rmf_0_1t_1、rmf_0_1t_2、rmf_0_1t_3为3组重复的高脂饮食0.1t旋转磁场处理组；
[0133]
(8)如图33所示，其为高脂饮食0.1t旋转磁场处理组vs高脂饮食对照组小鼠肝脏组织中各种代谢通路go富集统计分析气泡图；其中，气泡越大代表该信号通路富集的基因数越多，气泡p值越大代表经旋磁处理后该信号通路变化越显著；
[0134]
(9)如图34所示，其为高脂饮食0.1t旋转磁场处理组vs高脂饮食对照组小鼠肝脏组织中各种代谢通路kegg富集统计分析气泡图；其中，气泡越大代表该信号通路富集的基因数越多，气泡p值越大代表经旋磁处理后该信号通路变化越显著；
[0135]
由图26-34可知，旋转磁场装置处理后分别改善了脂肪酸代谢，糖代谢，等多种途径改善非酒精性脂肪肝。
[0136]
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

技术特征：

1.一种旋转磁场装置在构建调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型中的应用，其特征在于：小鼠所受到的磁场强度为0.1t。2.根据权利要求1所述旋转磁场装置在构建调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型中的应用，其特征在于：所述旋转磁场装置包括罩体、旋转轴和两块永磁铁，所述旋转轴和两块永磁铁均位于罩体内，所述两块永磁铁沿旋转轴的轴线相对设置，所述两块永磁铁之间设有连接杆，所述连接杆与旋转轴连接，所述旋转轴转动致使两块永磁铁沿旋转轴的轴线旋转，每个永磁铁的一端均朝向罩体顶端，所述两块永磁铁的磁极方向相反。3.一种调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、将小鼠适应性喂养后采用脂肪含量为60kcal％的高脂饲料喂养形成非酒精性脂肪肝小鼠模型；(2)、将高脂饲料喂养后的小鼠置于权利要求1或2所述的旋转磁场装置上进行磁处理；在磁处理过程中，小鼠受到的磁场强度为0.1t；(3)、每天磁处理结束后统计小鼠每天饮水量和食物消耗量；并检测小鼠血糖、统计小鼠体重；(4)、磁处理结束后牺牲小鼠，收集小鼠的血液和组织器官，并进行相关指标检测；将小鼠的肝脏组织进行转录组学测序分析。4.根据权利要求3所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，其特征在于，在(1)中，所述小鼠为spf级8周龄雄性c57bl/6j小鼠。5.根据权利要求3所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，其特征在于，在(1)中，所述适应性喂养的时间为一周。6.根据权利要求3所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，其特征在于，在(1)中，所述高脂饲料为美国research diets d12492,60kcal％高脂饲料。7.根据权利要求3所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，其特征在于，在(1)中，采用高脂饲料喂养的时间为63天。8.根据权利要求3所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，其特征在于，在(2)中，在所述磁处理过程中，旋转频率为4.2hz，每天处理6h，每周处理5天停止2天，实验总时间为63天，磁处理总时间为45天。9.根据权利要求3所述的调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，其特征在于，在(4)中，所述组织器官包括心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、性腺周围脂肪组织中的一种或多种。10.一种以非为目的采用旋转磁场装置在调节非酒精性脂肪肝小鼠肝脏组织脂肪酸代谢相关酶和/或糖代谢途径相关酶和/或氧化应激和增殖凋亡和/或肝脏胰岛素抵抗中的应用，其特征在于，所述小鼠所受到的磁场强度为0.1t。

技术总结

本发明公开了一种旋转磁场装置在构建调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型中的应用及调节糖脂代谢的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法，在小鼠模型中，小鼠所受到的磁场强度为0.1T；磁场强度为0.1T的磁场装置可参与活体小鼠肝脏脂肪酸代谢途径，参与脂肪酸从头合成，脂肪酸吸收，脂肪酸β氧化，糖代谢，细胞增殖和凋亡和胰岛素敏感性提高等过程，一定条件下可改善非酒精性脂肪肝的脂肪堆积。件下可改善非酒精性脂肪肝的脂肪堆积。件下可改善非酒精性脂肪肝的脂肪堆积。