一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法

1.本发明属于生物分离工程研究领域，具体而言，涉及一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法。

背景技术：

2.肠道是人体重要的消化吸收场所，特别是肠道内微生物，其所携带的基因数量约为已知人类基因组的150倍，被认为是人体的另一个“重要器官”。肠道微生物参与了人体的基本生物学过程，如炎症性肠病、肥胖、糖尿病、酒精性肝病、癌症等诸多慢性疾病的发生发展均与肠道微生物紊乱密切相关。食源性多酚可调节肠道微生物结构和改变肠道微环境(如降低肠道ph)，刺激肠道组织中的巨噬细胞或淋巴细胞抵抗癌症等疾病，对人体肠道健康有着正向的调节作用。
3.灰树花(grifolafrondosa)又名栗蘑、贝叶多孔菌，是多孔菌属中的一种珍稀食、药兼用大型真菌，研究发现，灰树花具有抗肿瘤、提高免疫力、降血糖、抗病毒、抗辐射、清除自由基等多种药理生物活性。多酚类物质是灰树花重要的活性组成成分之一，具有较强的体外抗氧化活性、抗菌和改善脂质代谢紊乱作用。
4.目前，有文献和专利公开报道了提取灰树花多酚的几种方法。cn105732250a公开了一种高纯度灰树花多酚组分的制备方法，通过超声波辅助浸提技术制备灰树花多酚粗组分，然后用超滤膜截留技术去除其中的多糖和蛋白等生物大分子，最后采用大孔吸附树脂nka-ii柱层析和制备型高效液相谱的串联分离纯化技术，制备多种高纯度的灰树花多酚类化合物单体。
5.目前对灰树花多糖和多酚提取条件的研究仅限于单独提取(肖建勇，陈智超，朱育娴，等.不同灰树花多糖提取及其体外抗氧化活性研究[j].食品工业，2022，43(8)：59-63；吕旭聪，贾瑞博，李燕，等.灰树花抗氧化活性多酚的提取纯化及其鉴定[j].中国酿造，2016，35(3)：74-79)，在提取多糖类组分时，忽略了另一主要有效成分多酚，提取后的醇沉液在回收乙醇后直接丢弃，造成资源浪费，并且污染环境。因此，对灰树花多糖进行提取后，富集其提取废液中的灰树花多酚，不仅能为灰树花的综合利用提供新的途径，而且可获得较好的经济效益和社会效益，同时可有效减轻环保压力。
[0006]
多酚具有抗衰老、抗辐射、清除体自由基等功能，对心脑血管疾病的防治具有良好功效。研究表明，多酚是食用菌中起抗氧化作用的主要活性成分，陈向东等(陈向东，刘晓雯，吴梧桐.灰树花多酚的提取和活性研究[j].食品与生物技术学报，2005(4)：26-30)从灰树花菌丝体中分离得到粉末状物质，应用光谱技术和化学鉴别试验证明其主要为多酚类物质，并采用红细胞氧化溶血和丙二醛(malondialdehyde)试验证实了灰树花多酚粗提物具有较强的抗氧化作用。
[0007]
专利公开文献cn114989319a公开了一种具有调节肠道菌功能的灰树花多糖及其制备方法和应用，采用碱法对灰树花子实体多糖进行提取，结合微滤、超滤、干燥等操作
得到灰树花多糖，得到的灰树花多糖具有调节肠道菌功能，在制备肠道菌调节剂中有较好的用途。以水提醇沉灰树花多糖后的醇沉液为原料液，研发利用大孔树脂吸附法富集并回收其中灰树花多酚的工艺，拓展灰树花多酚的调节肠道菌功能具有重要的研究意义和应用价值。

技术实现要素：

[0008]
本发明的目的在于提供一种从灰树花多糖提取废液富集多酚的制备方法及其在调节肠道菌的应用。
[0009]
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
[0010]
一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法，包括如下步骤：
[0011]
(1)以水提醇沉灰树花多糖后的醇沉液为原料液，经乙醇回收，过滤除去不溶物，通过真空浓缩使原料液总多酚含量在1.0～1.2mg/ml，作为上柱液；
[0012]
(2)调节上柱液ph值4.0，以2～3bv/h的流速进样通过预处理并用湿法装填好大孔吸附树脂的层析柱，控制流速，分部收集流出液，当流出液中总多酚浓度达到50.0μg/ml时停止上样吸附；
[0013]
(3)将吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂，用体积分数50％～70％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液、回收乙醇、真空浓缩、干燥得到灰树花多酚富集物。
[0014]
本发明步骤(2)中所述大孔树脂型号为ab-8、x-5和nka-9。
[0015]
本发明步骤(3)中所述吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂的流速为2bv/h，去离子水除杂体积用量3bv。
[0016]
本发明步骤(3)中所述吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂后，乙醇洗脱剂的洗脱流速为2bv/h，洗脱剂体积用量2bv。
[0017]
本发明制得灰树花多酚对小鼠进行灌胃实验，处理如下：将70只spf级6周龄的雌性昆明小鼠正常饲养一周让其适应鼠房的环境，然后把它们随机分为七组，每组10只，分别为正常对照组(kb)、实施例1中的灰树花多酚(gft-1)、实施例2中的灰树花多酚(gft-2)、实施例3中的灰树花多酚(gft-3)。实验期间，连续14天对小鼠进行定时灌胃，各组灌胃剂量为400mg/kg
·
d。不同组的灰树花多酚溶液用生理盐水配制，正常对照组灌胃同体积的生理盐水，饲养期间小鼠自由摄食饮水，实验期间记录各组小鼠的体重变化。
[0018]
实验第2周最后一天，采集新鲜小鼠粪便，液氮冷却，-80℃条件保存备用，送往上海派森诺基因科技有限公司通过illumina miseq测序平台进行高通量测序，根据小鼠肠道菌变化评价本发明所制得灰树花多酚对小鼠肠道菌调节能力。
[0019]
本发明的优点和积极效果是：
[0020]
1)本发明所采用的原料是灰树花，是一种很常见的药食同源食用菌，方便易得，所利用的原料液来自于灰树花提取完多糖的提取废液，具有节约环保的特点。
[0021]
2)富集多酚工艺中所使用的化学调节剂均为无害物，可以广泛应用于食用菌工业化生产；方法操作简便，可重复性高，使用的大孔树脂有选择性好、成本低、易再生处理等优点。
[0022]
3)本发明富集所得灰树花多酚得率达到80％以上，纯度达到60％以上，小鼠模型试验显示，喂食本发明制备的从灰树花多糖提取废液中醇提总多酚物质能显著刺激原有有益菌乳酸杆菌属(lactobacillus)、阿克曼氏菌属(akkermansia)等益生菌属的生长，抑制棒状杆菌属(corynebacterium)、费克蓝姆菌属(facklamia)等有害菌的生长，有效调节肠道菌功能，在制备肠道菌调节剂中有较好的用途。
附图说明
[0023]
图1从灰树花多糖提取废液富集多酚的工艺流程图；
[0024]
图2本发明制备的灰树花多酚富集物的红外光谱图(gft-1为实施例1制得灰树花多酚、gft-2为实施例2制得灰树花多酚、gft-3为实施例3制得灰树花多酚)；
[0025]
图3利用本发明制备的灰树花多酚富集物喂养小鼠后，小鼠肠道菌的特殊序列维恩图(kb为空白对照组、gft-1为实施例1制得灰树花多酚、gft-2为实施例2制得灰树花多酚、gft-3为实施例3制得灰树花多酚)；
[0026]
图4利用本发明制备的灰树花多酚富集物喂养小鼠后，小鼠肠道菌门水平上的相对丰度变化图(kb为空白对照组、gft-1为实施例1制得灰树花多酚、gft-2为实施例2制得灰树花多酚、gft-3为实施例3制得灰树花多酚、厚壁菌门(firmicutes)、拟杆菌门(bacteroidetes)、放线菌门(actinobacteria)、变形菌门(proteobacteria))；
[0027]
图5利用为本发明制备的灰树花多酚富集物喂养小鼠后，小鼠肠道菌中有益菌(a)和有害菌(b)的相对丰度图(kb为空白对照组、gft-1为实施例1制得灰树花多酚、gft-2为实施例2制得灰树花多酚、gft-3为实施例3制得灰树花多酚、乳酸杆菌属(lactobacillus)、阿克曼氏菌属(akkermansia)、棒状杆菌属(corynebacterium)、费克蓝姆菌属(facklamia))；
[0028]
图6本发明制备灰树花多酚富集物喂养小鼠后，小鼠肠道菌属水平物种组成热图(kb为空白对照组、gft-1为实施例1制得灰树花多酚、gft-2为实施例2制得灰树花多酚、gft-3为实施例3制得灰树花多酚、roseburia(罗氏菌属)、jeotgalicoccus(暂无中文名)、bacteroides(拟杆菌属)、staphylococcus(葡萄球菌属)、psychrobacter(嗜冷杆菌属)、sporosarcina(八叠球菌属)、corynebacterium(棒状杆菌属)、facklamia(费克蓝姆氏菌属)、alcaligenes(产碱杆菌属)、prevotella(普雷沃氏菌属)、acinetobacter(不动杆菌属)、lactobacillus(乳酸菌属)、oscillospira(颤螺菌属)、adlercreutzia(阿德勒克菌属)、alistipes(另枝菌属)、akkermansia(阿克曼氏菌属)、coprococcus(粪球菌属)、turicibacter(苏黎世杆菌属))。
具体实施方式
[0029]
以下实验步骤应用于整个实施实例中：
[0030]
灰树花多酚含量测定folin酚法测定灰树花总酚的含量，即以没食子酸为标准品，通过测定没食子酸的标准曲线，再测得每个样品的吸光度值，通过回归方程计算样品的浓度，重复测定3次，结果以平均值
±
标准差表示。
[0031]
(1)没食子酸标准曲线的测定
[0032]
精确称取0.01g没食子酸定容至100ml，分别取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml于
25ml容量瓶中，加入6.0ml蒸馏水，混合均匀，再加入0.5ml福林酚试剂，后加入2.0ml 10％碳酸钠溶液，蒸馏水定容，避光2h后于760nm处测吸光值，重复上述操作2次，绘制标准曲线。以吸光度为纵坐标，没食子酸浓度为横坐标绘制没食子酸标准曲线。
[0033]
(2)多酚含量的测定
[0034]
称取冷冻干燥的灰树花多酚粉末0.01g粉末置于25ml的容量瓶中，加入60％的乙醇定容，充分震荡溶解后，从中吸取2ml，加入0.5ml福林酚试剂，后加入2.0ml 10％碳酸钠溶液，定容后避光2h后于760nm处测吸光值，重复上述操作3次，求得吸光度值的平均值，将待测样品的吸光度值平均值代入没食子酸标准曲线中，根据方程计算多酚浓度以及多酚含量。
[0035]
(3)灰树花多酚的红外光谱分析
[0036]
称取按照本发明制备的灰树花多酚5mg的粉末与kbr粉末混合后压片，采用傅里叶红外光谱仪在4000～400cm-1
波长范围内进行扫描。
[0037]
下面结合实施例对本发明进行进一步描述：
[0038]
实施例1
[0039]
灰树花多酚富集物(gft-1)的制备量取水提醇沉灰树花多糖后的醇沉液200ml，减压回收乙醇至无醇味，过滤除去不溶物后通过真空浓缩原料液总多酚含量至1.0mg/ml，将灰树花多酚的浓缩液用4mol/l naoh调ph值至4.0。以2bv/h的流速进样通过预处理并用湿法装填好大孔吸附树脂的层析柱，控制流速，分部收集流出液，当流出液中总多酚浓度达到50.0μg/ml时停止上样吸附；将吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用3bv量的流速为2bv/h去离子水洗涤除杂后，再用2bv量的体积分数50％的乙醇溶液以流速2bv/h进行洗脱，收集洗脱液、回收乙醇、真空浓缩、干燥得到灰树花多酚富集物(gft-1)，灰树花多酚得率为81.4％，纯度为62.3％。将制得的gft-1进行红外测定，红外扫描图谱(图2)显示在3400cm-1
左右强宽峰为羟基的伸缩振动吸收，3000cm-1
左右为苯环的不饱和c-h键的伸缩振动，1600～1400cm-1
具有苯环的特征吸收，判断为酚类物质。
[0040]
实施例2
[0041]
灰树花多酚富集物(gft-2)的制备量取水提醇沉灰树花多糖后的醇沉液200ml，减压回收乙醇至无醇味，过滤除去不溶物后通过真空浓缩原料液总多酚含量至1.2mg/ml，将灰树花多酚的浓缩液用4mol/l naoh调ph值至4.0。以2bv/h的流速进样通过预处理并用湿法装填好大孔吸附树脂的层析柱，控制流速，分部收集流出液，当流出液中总多酚浓度达到50.0μg/ml时停止上样吸附；将吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用3bv量的流速为2bv/h去离子水洗涤除杂后，再用2bv量的体积分数为60％的乙醇溶液以流速2bv/h进行洗脱，收集洗脱液、回收乙醇、真空浓缩、干燥得到灰树花多酚富集物(gft-2)，灰树花多酚得率为82.1％，纯度为61.9％。将制得的gft-2进行红外测定，红外扫描图谱(图2)显示在3400cm-1
左右强宽峰为羟基的伸缩振动吸收，3000cm-1
左右为苯环的不饱和c-h键的伸缩振动，1600～1400cm-1
具有苯环的特征吸收，判断为酚类物质。
[0042]
实施例3
[0043]
灰树花多酚富集物(gft-3)的制备量取水提醇沉灰树花多糖后的醇沉液200ml，减压回收乙醇至无醇味，过滤除去不溶物后通过真空浓缩原料液总多酚含量至1.1mg/ml，将灰树花多酚的浓缩液用4mol/l naoh调ph值至4.0。以2bv/h的流速进样通过预处理并用
湿法装填好大孔吸附树脂的层析柱，控制流速，分部收集流出液，当流出液中总多酚浓度达到50.0μg/ml时停止上样吸附；将吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用3bv量的流速为2bv/h去离子水洗涤除杂，用2bv量的体积分数为70％的乙醇溶液以流速2bv/h进行洗脱，收集洗脱液、回收乙醇、真空浓缩、干燥得到灰树花多酚富集物(gft-3)，灰树花多酚得率为82.3％，纯度为61.7％。将制得的gft-3进行红外测定，红外扫描图谱(图2)显示在3400cm-1
左右强宽峰为羟基的伸缩振动吸收，3000cm-1
左右为苯环的不饱和c-h键的伸缩振动，1600～1400cm-1
具有苯环的特征吸收，判断为酚类物质。
[0044]
实施例4
[0045]
不同吸附树脂对灰树花多酚静态吸附-洗脱性能的影响准确称取预处理后的3种型号树脂各1.5g分别置于150ml具塞三角瓶中，各加入30ml灰树花多酚上柱液，室温下振荡(180r/min)24h，至吸附平衡，测定此时溶液中灰树花多酚总浓度，计算饱和吸附量。将吸附后树脂过滤，再各用70ml体积分数95％乙醇解吸，振荡解吸24h，测定解吸液中总多酚浓度，计算洗脱量和脱附率。在相同实验条件下，测得各树脂的静态吸附-洗脱性能结果如表1所示。
[0046]
表1 3种大孔吸附树脂对灰树花多酚静态饱和吸附-脱附性能测定结果
[0047][0048]
由表1可看出，ab-8、x-5和nka-9型树脂对灰树花多酚的静态饱和吸附量都大于50mg/g，都能用于灰树花多酚的吸附分离工艺。
[0049]
实施例5
[0050]
乙醇浓度对解吸效果的影响量取经过静态实验选出的树脂20ml，经过预处理后装入1.2
×
30cm的玻璃层析柱中。按上述最佳吸附条件进行吸附，吸附完全的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂后，用不同浓度的乙醇对灰树花多酚的解吸情况如表2。
[0051]
表2乙醇浓度对灰树花多酚解吸率的影响
[0052][0053]
由表2可知，在一定范围内，随着乙醇浓度的增加解吸率也得以提高。当乙醇浓度为10％时，解吸率仅为27.6％；而当体积分数的乙醇浓度提高到50％～70％时，解吸率均达到80％以上，效果良好。此后，再增加乙醇体积分数浓度，解吸率虽略有增加，但变化不明显，且对于生产来说成本过高、挥发性大，增加了控制操作，条件的难度。因此，选用50％-70％的乙醇进行洗脱。
[0054]
实施例6
[0055]
灰树花多酚肠道菌调节功能评价分别灌胃实施例1～3制备的灰树花多酚富集物(gft-1、gft-2、gft-3)14天后，通过小16s rrna高通量测序分析空白对照组(kb组)和实
施例1-3的灰树花多酚组小鼠粪便。具体方法如下：
[0056]
将70只spf级6周龄的雌性昆明小鼠正常饲养一周让其适应鼠房的环境，然后把它们随机分为七组，每组10只，分别为正常对照组(kb)、实施例1中的灰树花多酚(gft-1)、实施例2中的灰树花多酚(gft-2)、实施例3中的灰树花多酚(gft-3)。实验期间，连续14天对小鼠进行定时灌胃，各组灌胃剂量为400mg/kg
·
d。不同组的灰树花多酚溶液用生理盐水配制，正常对照组灌胃同体积的生理盐水，饲养期间小鼠自由摄食饮水，实验期间记录各组小鼠的体重变化。
[0057]
灌喂第2周最后一天，采集新鲜小鼠粪便，液氮冷却，-80℃条件保存备用，送往上海派森诺基因科技有限公司通过illumina miseq测序平台进行高通量测序。
[0058]
如表3所示，与对照组(kb)相比，各组小鼠灌胃不同条件所得灰树花多酚富集物(gft-1、gft-2、gft-3)后，相关chao1、observed species、shannon和simpson指数有显著性差异(p＜0.05)，不同实施例灰树花多酚均提高了小鼠肠道菌的丰富度和多样性，表明灰树花多酚富集物对小鼠肠道菌的多样性具有提高作用。
[0059]
表3喂养灰树花多酚富集物后，小鼠肠道菌alpha指数多样性分析
[0060][0061]
注：kb-空白对照组、gft-1-实施例1制得灰树花多酚组、gft-2-实施例2制得灰树花多酚组、gft-3-实施例3制得灰树花多酚组
[0062]
各组小鼠肠道中的细菌16s rrna测序后，对获得的序列进行归并和扩增子测序变异(asv)划分。根据获得的asv丰度矩阵，使用r软件计算各样本组共有asv的数量，运用维恩(venn)图可显示不同样品分组所共有以及特有的asv个数。从图3中可看出，空白对照组和不同实施例灰树花多酚组共检测到11887个asv，其中共有asv仅511个，占4.30％，从各分组所特有的asv数量上看，灰树花多酚组明显增多，说明灌胃灰树花多酚的小鼠肠道菌类别与空白对照组明显不同，其肠道菌结构发生了显著的变化。
[0063]
小鼠肠道菌中两个优势菌门分别为厚壁菌门和拟杆菌门，占肠道细菌组成相对丰度的90％以上。从图4来看，与空白对照组比较，不同实施例灰树花多酚组的拟杆菌和厚壁菌优势菌地位没变，但是厚壁菌门、放线菌门和变形菌门的相对丰度均减少，拟杆菌门数量增加，且厚壁菌门/拟杆菌门比值均下降明显。研究表明，厚壁菌门/拟杆菌门比值的增加，与多种疾病如炎性肠病、肥胖症及便秘的发生发展密切相关。实验数据表明，灰树花多酚可以调节肠道菌结构，适当使用可能具有改善相关病征的潜力。
[0064]
空白对照组和实施例组在属水平上的显著性分析如图5-a、5-b所示。与空白对照组kb相比，不同实施例灰树花多酚富集物组肠道菌中的拟杆菌属、阿克曼氏菌属相对丰度都有十分显著性(p＜0.001)增加；不同实施例灰树花多酚组肠道菌中的棒状杆菌属和
费克蓝姆菌属相对丰度均减少。说明灰树花多酚能刺激肠道内原有有益菌乳酸杆菌属、阿克曼氏菌属等的增殖，抑制棒状杆菌属、费克蓝姆菌属等有害菌的生长。因此灰树花多酚对于小鼠可能具有优化宿主肠道菌结构，发挥益生功能的潜力。
[0065]
热图通过使用平均丰度前20位的属的丰度数据进行物种组成分析，进一步比较样本间的物种组成差异，实现对各样本的物种丰度分布趋势的展示。热图将数据的大小用颜的深浅来代表。可以用不同的颜变化来表示所给信息。颜越深，物种丰度越大。从图6可以看出，在属水平上，灰树花多酚富集物组的乳酸菌属、阿克曼菌属和双歧杆菌菌属的数量都有明显增加(p＜0.05)。说明小鼠经过灰树花多酚干预，能显著刺激原有有益菌乳酸杆菌属、阿克曼氏菌属等益生菌属的生长，抑制棒状杆菌属、费克蓝姆菌属等有害菌的生长，有效调节肠道菌功能。
[0066]
从表4可知，不同实施例的灰树花多酚富集物组与空白对照组之间有极显著性差异(p＜0.01)；gft-1组和gft-3组也有极显著性差异(p＜0.01)；gft-2灰树花多酚组和gft-3多酚组有显著性差异(p＜0.05)，从而说明适量剂量的灰树花多酚能显著性的调节小鼠的肠道菌。
[0067]
表4喂养灰树花多酚富集物后，小鼠肠道菌组间差异分析
[0068][0069]
注：kb-空白对照组、gft-1-实施例1制得灰树花多酚组、gft-2-实施例2制得灰树花多酚组、gft-3-实施例3制得灰树花多酚组。

技术特征：

1.一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)以水提醇沉灰树花多糖后的醇沉液为原料液，经乙醇回收，过滤除去不溶物，通过真空浓缩使原料液总多酚含量在1.0～1.2mg/ml，作为上柱液；(2)调节上柱液ph值4.0，以2～3bv/h的流速进样通过预处理并用湿法装填好大孔吸附树脂的层析柱，控制流速，分部收集流出液，当流出液中总多酚浓度达到50.0μg/ml时停止上样吸附；(3)将吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂，用体积分数50％～70％的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液、回收乙醇、真空浓缩、干燥得到灰树花多酚富集物。2.根据权利要求1中所述的一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法，其特征在于步骤(2)中所述大孔树脂型号为ab-8、x-5和nka-9。3.根据权利要求1中所述的一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法，其特征在于步骤(3)中所述吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂的流速为2bv/h，去离子水除杂用量3bv。4.根据权利要求1中所述的一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法，其特征在于步骤(3)中所述吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂后，乙醇洗脱剂的洗脱流速为2bv/h，洗脱剂用量2bv。5.根据权利要求1中所述的一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法，其特征在于所富集的多酚具有明显的调节肠道菌作用，可以增加肠道菌多样性和丰富度，显著刺激原有有益菌乳酸杆菌属、阿克曼氏菌属等益生菌属的生长，抑制棒状杆菌属、费克蓝姆菌属等有害菌的丰度。

技术总结

本发明提供了一种从灰树花多糖提取废液富集具有调节肠道菌功能多酚的方法，包括如下步骤：以水提醇沉灰树花多糖后的醇沉液为原料液，经乙醇回收，过滤真空浓缩，调节pH后利用大孔吸附树脂吸附；将吸附多酚后的大孔吸附树脂柱床层用去离子水洗涤除杂，用乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液、回收乙醇、真空浓缩、干燥得到灰树花多酚富集物。富集方法操作简便，可重复性高，使用的大孔树脂有选择性好、成本低、易再生处理等优点；富集所得灰树花多酚得率和纯度高，能有效提高肠道菌多样性，促进肠道有益菌的生长，在制备肠道菌调节剂中有良好的应用前景。的应用前景。的应用前景。