作为缺氧诱导因子(HIF)抑制剂的缩合噻吩衍生物

作为缺氧诱导因子(HIF)抑制剂的缩合噻吩衍生物

发明背景

本发明的目的为寻具有有价值特性的新型化合物，特别是可用于制备药物的那些化合物。

本发明涉及抑制HIF-2α (HIF-2α) (缺氧诱导因子(Hypoxia-InducibleFactor))的噻吩衍生物。因此本发明的化合物可用于疾病比如癌症。

本发明还提供用于制备这些化合物的方法、包含这些化合物的药用组合物以及利用包含这些化合物的药用组合物疾病的方法。

为组织提供充足的氧气对于保持哺乳动物细胞功能和生理机能至关重要。组织供氧不足为许多其中血流不足以提供充足的氧合的病理生理状况的特征，例如缺血性障碍、癌症和动脉粥样硬化。组织的缺氧(低氧)环境激活信号级联，驱动诱导或抑制与事件比如血管生成(新血管形成)、葡萄糖代谢和细胞存活/死亡有关的许多基因的转录。这种缺氧转录反应的关键在于转录因子，即缺氧诱导因子(HIF)。

HIF通过缺氧依赖性和独立性机制在大量癌症中失调，并且表达与患者预后不良有关。缺氧诱导因子(HIF)，包括HIF-1α和HIF-2α，为介导细胞对供氧减少的反应的转录因子。这些蛋白在缺氧(低氧)下变得稳定，并且随后激活基因表达以促进细胞存活和增殖。HIF蛋白在许多类型的癌症中被激活，并与癌症的起始、进展和转移有关。HIF-2α在透明细胞肾细胞癌(ccRCC)中的作用尤为重要。在大多数ccRCC肿瘤中，靶向HIF-2α降解的肿瘤抑制因子von Hippel-Lindau蛋白(pVHL)失活，导致HIF-2α的累积和驱动肾癌肿瘤发生的基因转录。包括肾细胞癌在内的某些癌症显示出高水平的HIF-2α和对HIF-2α信号传导的依赖性。

已在膀胱、乳腺、结肠、肝脏、卵巢、胰腺、前列腺和肾脏的各种人类肿瘤以及肿瘤相关巨噬细胞中检测到HIF-2α蛋白。

本发明的化合物在包括生物化学、生物物理和细胞测定在内的多种相关环境中显示出针对HIF-2α的高活性。

已经发现，根据本发明的化合物及其盐具有非常有价值的药理学特性，同时具有良好的耐受性。

宿主或患者可属于任何哺乳动物物种，例如灵长类物种，特别是人类；啮齿动物，包括小鼠、大鼠和仓鼠；兔子；马、牛、狗、猫等。动物模型对实验研究有吸引力，为人类疾病提供模型。

特定细胞对用根据本发明的化合物处理的易感性可通过体外测试确定。一般地，将细胞培养物与根据本发明的化合物以各种浓度组合一段时间，该时间足以使得活性剂比如抗IgM能够诱导细胞反应比如表面标志物的表达，通常介于约一小时至一周之间。可使用来自血液或活检样本的培养细胞进行体外测试。表达的表面标志物的量通过流式细胞术使用识别标志物的特异性抗体来评价。

剂量取决于所使用的特定化合物、特定疾病、患者状态等而变化。剂量一般足以显著减少目标组织中不期望的细胞，同时保持患者的活力。通常持续直至细胞负荷发生显著减少，例如减少至少约50%，并且可持续直至基本上不再在体内检测到不期望的细胞。

现有技术

用于癌症的其他HIF-2α抑制剂描述于WO 2018/031680 A1、WO 2015/035223A1、WO 2016/145045 A1、WO 2016/145032 A1、WO 2016/144825 A1、WO 2016/144826 A1和WO 2016/168510 A1中。

H. Cho等人 Nature, 第539卷, 2016, 107-122 (doi:10.1038/nature19795)和W. Chen等人 Nature,第539卷, 2016,112-130 (doi: 10.1038/nature19796)描述了HIF-2α拮抗剂的临床前靶向功效研究。

S.E. Wilkins ChemMedChem, 2016, 11, 773-786描述了对FIIF-2a靶向途径的综述。

发明内容

本发明涉及式I化合物：

其中

R1表示A、[C(R6)2]qAr、[C(R6)2]qCyc、[C(R6)2]qHet或COA，

R2表示SO2A、SOA、SA、SO2NHA、SO2NA2、S(=NH，=O)A、S(=NH)2A、NO2、Hal、CN、A、Het1、COOH或COOA，

R3表示H或Hal，

R4表示H或Hal，

R5表示H或Hal，

R6表示H或A’，

A表示具有1-8个C原子的未分支或分支烷基，其中1-5个H原子可由OH、OA、F、Cl和/或Br替代和/或其中一个或两个不相邻的CH2基团可由O和/或NH基团替代，

A’表示具有1、2、3或4个C原子的未分支或分支烷基，

Cyc表示具有3、4、5、6或7个C原子的环状烷基，其中1-5个H原子可由OH、OA、F和/或Cl替代，

Ar表示苯基，其为未取代的或者由Hal、A、NH2、NHA、NA2、COOH、COOA、CONH2、CONHA、CONA2、CONHAr、S(O)pA、NHCH2Ar、CN、OH和/或OA单-、二-或三取代，

Het表示具有1-4个N、O和/或S原子的单-或双环芳族、不饱和或饱和的杂环，其可为未取代的或者由Hal、A、NH2、NHA、NA2、COOH、COOA、CONH2、CONHA、CONA2、CONHAr、S(O)pA、NHCH2Ar、CN、OH和/或OA单-、二-或三取代，

Het1表示具有1-4个N、O和/或S原子的单-或双环芳族、不饱和或饱和的杂环，其可为未取代的或者由Hal、A、COOA、NH2、NHA和/或NA2单-、二-或三取代，

Hal表示F、Cl、Br或I，

n表示1或2，

m表示0、1、2或3，

p表示1、2或3，

q表示0、1或2，

及其药学上可接受的溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物。

本发明还涉及这些化合物的光学活性形式(立体异构体)、对映异构体、外消旋体、非对映异构体以及水合物和溶剂合物。

此外，本发明涉及式I化合物的药学上可接受的衍生物。

术语化合物的溶剂合物用于描述惰性溶剂分子在化合物上由于它们的相互吸引力而形成的加合作用。溶剂合物为例如一-或二水合物或醇化物。

应当理解，本发明还涉及盐的溶剂合物。

术语药学上可接受的衍生物指的是例如根据本发明的化合物的盐以及所谓的前药化合物。

如本文使用并且除非另外指明，否则术语“前药”意指式I化合物的衍生物，其可在生物条件下(体外或体内)水解、氧化或以其他方式反应以提供活性化合物，特别是式I化合物。前药的实例包括但不限于包含以下可生物水解的部分的式I化合物的衍生物和代谢物：比如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯类似物。在某些实施方案中，具有羧基官能团的化合物的前药为羧酸的低级烷基酯。羧酸酯便利地通过酯化分子上存在的任何羧酸部分来形成。前药一般地可使用众所周知的方法制备，比如由Burger's Medicinal Chemistryand Drug Discovery 第6版 (Donald J. Abraham编辑, 2001, Wiley)和Design andApplication of Prodrugs (H.Bundgaard编辑, 1985, Harwood Academic PublishersGmfh)描述的那些方法。

表述“有效量”表示在组织、系统、动物或人类中引起例如研究人员或医师寻求或期望的生物或医学反应的药物或药用活性成分的量。

另外，表述“有效量”表示与未接受该量的相应受试者相比较具有以下结果的量：

改善的、治愈、预防或消除疾病、综合征、病症、不适、障碍或副作用，或者还减少疾病、不适或障碍的进展。

表述“有效量”还涵盖有效于增加正常生理功能的量。

本发明还涉及式I化合物的混合物的用途，例如两种非对映异构体的混合物，例如以比率1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:10、1:100或1:1000。

这些特别优选地为立体异构化合物的混合物。

“互变异构体”是指相互平衡的化合物异构形式。异构形式的浓度将取决于发现化合物的环境，并且可取决于例如化合物为固体还是处于有机或水溶液中而有所不同。

本发明涉及式I化合物及其盐以及用于制备式I化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体的方法，其特征在于

a) 使式II的化合物与NaBH4或任何其他还原剂反应

II

其中R1、R2、R3、R4、R5、m和n具有对以上式I和权利要求1中所指示的含义，

和/或

将式I的碱或酸转化成其盐之一。

在上下文中，基团R1、R2、R3、R4、R5、m和n具有对式I所指示的含义，除非另外明确说明。

A表示烷基，其为未分支(线性)或分支的，并且具有1、2、3、4、5、6、7或8个C原子。A优选地表示甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基，此外还表示戊基、1-、2-或3-甲基丁基、1,1-、1,2-或2,2 -二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-或4-甲基戊基、1,1-、1,2-、1,3-、2,2-、2,3-或3,3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-或1,2,2-三甲基丙基，此外优选地为例如三氟甲基。

A非常特别优选地表示具有1、2、3、4、5或6个C原子的烷基，优选地为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、三氟甲基、五氟乙基或 1,1,1-三氟乙基。

此外，A优选地表示CH2OCH3、CH2CH2OH或CH2CH2OCH3。

此外，A优选地表示具有1-6个C原子的未分支或分支烷基，其中1-5个H原子可由OH和/或F替代，和/或其中一个或两个不相邻的CH2基团可由O和/或NH基团替代。

A’优选地表示具有1、2、3或4个C原子的烷基，优选地为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

R1优选地表示A、[C(R6)2]qAr、[C(R6)2]qCyc或[C(R6)2]qHet。

R2优选地表示SO2A，最优选地为SO2CH3。

R3优选地表示H或F。

R4优选地表示H或F。

R5优选地表示H。

Cyc优选地表示环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基，其中1-5个H原子可由OH、OA、F和/或Cl替代。

不考虑进一步的取代，Het表示例如2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-异噁唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-异噻唑基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-、5-或6-嘧啶基，此外优选地为1,2,3-三唑基-1-、-4-或-5-基、1,2,4-三唑基-1-、-3-或-5-基、1-或5-四唑基、1,2,3-噁二唑-4-或-5-基、1,2,4-噁二唑-3-或-5-基、1,3,4-噻二唑-2-或-5-基、1,2,4-噻二唑-3-或-5-基、1,2,3-噻二唑-4-或-5-基、3-或4-哒嗪基、吡嗪基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、4-或5-异吲哚基、吲唑基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、 4-、5-、6-或7-苯并异噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并异噻唑基、4-、5-、6-或7-苯并-2,1,3-噁二唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、5-或6-喹喔啉基、2-, 3-, 5-, 6-, 7-或8-2H-苯并-1,4-噁嗪基、吡咯并吡啶基、嘌呤基，进一步优选地为1,3-苯并二噁茂-5-基、1,4-苯并二噁烷-6-基、2,1,3-苯并噻二唑-4-或-5-基、2,1,3-苯并噁二唑-5-基、氮杂双环[3.2.1]-辛基或二苯并呋喃基。

杂环基也可部分或完全氢化。

不考虑进一步的取代，Het因此还可表示例如2,3-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、2,5-二氢-2-、-3-、- 4-或5-呋喃基、四氢-2-或-3-呋喃基、1,3-二氧戊环-4-基、四氢-2-或-3-噻吩基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、2,5-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、1-、2-或3 -吡咯烷基、四氢-1-、-2-或-4-咪唑基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基、四氢-1-、-3 -或-4-吡唑基、1,4-二氢-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基、1-、2-、 3-或4-基、2-, 3-或4-吗啉基、四氢-2-, -3-或-4-吡喃基、1,4-二噁烷基、1,3-二噁烷-2-、-4-或-5-基、六氢-1-, -3-或-4-哒嗪基、六氢-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基、1-、2-或3-哌嗪基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-异喹啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-3,4-二氢-2H-苯并-1,4-噁嗪基，此外优选地为2,3-、3,4-、2,3-亚乙基二氧苯基、3,4-亚乙基二氧苯基、3,4-(二氟亚甲基二氧)苯基、2,3-二氢苯并呋喃-5-或6-基、2,3-(2-氧代亚甲基二氧)苯基或者还有3,4-二氢-2H-1,5-苯并二噁庚英-6-或-7-基，此外优选地为2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢-2-氧代呋喃基,3,4-二氢-2-氧代-1H-喹唑啉基、2, 3-二氢苯并噁唑基、2-氧代-2,3-二氢苯并噁唑基, 2,3-二氢苯并咪唑基, 1 ,3-二氢吲哚、2-氧代-1,3-二氢吲哚或2-氧代-2,3-二氢苯并咪唑基。

不考虑进一步的取代，Het1表示例如2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-异噁唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-异噻唑基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-、5-或6-嘧啶基，此外优选地为1,2,3-三唑-1-、-4-或-5-基，1,2,4-三唑-1-、-3-或5-基、1-或5-四唑基、1,2,3-噁二唑-4-或-5-基、1,2,4-噁二唑-3-或-5-基、1,3,4-噻二唑-2-或-5-基、1,2,4-噻二唑-3-或-5-基、1,2,3-噻二唑-4-或-5-基、3-或4-哒嗪基、吡嗪基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、4-或5-异吲哚基、吲唑基、1-、2-、4-或5 -苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并异噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并异噻唑基、4-、5-、6-或7-苯并-2,1,3-噁二唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、5-或6-喹喔啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-2H-苯并-1,4-噁嗪基、吡咯并吡啶基、嘌呤基，进一步优选地为1,3-苯并二氧噁茂-5-基、1,4-苯并二噁烷-6-基、2,1,3-苯并噻二唑-4-或-5-基、2,1,3-苯并噁二唑-5-基、氮杂双环[3.2.1]-辛基或二苯并呋喃基。

杂环基也可部分或完全氢化。

不考虑进一步的取代，Het1因此还可表示例如2,3-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、2,5-二氢-2-、-3-、-4-或5-呋喃基、四氢-2-或-3-呋喃基、1,3-二氧戊环-4-基、四氢-2-或-3-噻吩基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、2,5-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、1-、2-或3-吡咯烷基、四氢-1-、-2-或-4-咪唑基、2,3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基、四氢-1-、-3-或- 4-吡唑基、1,4-二氢-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、- 5-或-6-吡啶基、1-、2-、3-或4-基、2-、3-或4-吗啉基、四氢-2-、-3-或-4-吡喃基、1,4-二噁烷基、1,3-二噁烷-2-、-4-或-5-基、六氢-1-、-3-或-4-哒嗪基、六氢-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基、1-、2-或3-哌嗪基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8 -喹啉基、1,2,3,4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-异喹啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8- 3,4-二氢-2H-苯并-1,4-噁嗪基，此外优选地为2,3-、3,4-、2,3-亚乙基二氧苯基、3,4-亚乙基二氧苯基、3,4-(二氟亚甲基二氧)苯基、2,3-二氢苯并呋喃-5-或6-基、2,3-(2-氧代亚甲基二氧)苯基或者还有3,4-二氢-2H-1,5-苯并二噁庚英-6-或-7-基，此外优选地为2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢-2-氧代呋喃基, 3,4-二氢-2-氧代-1H-喹唑啉基、2, 3-二氢苯并噁唑基、2-氧代-2,3-二氢苯并噁唑基, 2,3-二氢苯并咪唑基, 1 ,3-二氢吲哚、2-氧代-1,3-二氢吲哚或2-氧代-2,3-二氢苯并咪唑基。

Het优选地表示具有1-4个N、O和/或S原子的单环饱和杂环，其可为未取代的或者由Hal、A、CN、OH和/或OA单-、二-或三取代。

Het特别优选地表示四氢呋喃基、1,3-二氧戊环基、四氢噻吩基、吡咯烷基、基、吗啉基、四氢吡喃基或哌嗪基。

Ar表示例如苯基、邻-、间-或对-甲苯基、邻-、间-或对-乙基苯基、邻-、间-或对-丙基苯基、邻-、间-或对-异丙基苯基、邻-、间-或对-叔丁基苯基、邻-、间-或对-羟基苯基、邻-、间-或对-硝基苯基、邻-、间-或对-氨基苯基、邻-、间-或对-( N-甲基氨基)苯基、邻-、间-或对-(N-甲基氨基羰基)苯基、邻-、间-或对-乙酰氨基苯基、邻-、间-或对-甲氧基苯基、邻-、间-或对-乙氧基苯基、邻-、间-或对-乙氧基羰基苯基、邻-、间-或对-(N,N-二甲基氨基)苯基、邻-、间-或对- (N,N-二甲基氨基羰基)苯基、邻-、间-或对-(N-乙基氨基)苯基、邻-、间-或对- (N,N-二乙氨基)苯基、邻-、间-或对-氟苯基、邻-、间-或对-溴苯基、邻-、间-或对-氯苯基、邻-、间-或对-(甲基磺酰氨基)苯基、邻-、间-或对-(甲基磺酰基)苯基、邻-、间-或对-氰基苯基、邻-、间-或对-羧基苯基、邻-、间-或对-甲氧基羰基苯基、邻-、间-或对-氨基磺酰基苯基、邻-、间-或对-(苄基氨基)苯基，此外优选地为2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-或3,5-二氟苯基、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-或3,5-二氯苯基、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-或3,5-二溴苯基、2,4-或2,5-二硝基苯基、2,5-或3,4-二甲氧基苯基、3-硝基-4-氯苯基、3-氨基-4-氯-、2-氨基-3-氯-、2-氨基-4-氯-、2-氨基-5-氯-或2-氨基-6-氯苯基、2-硝基-4-N,N-二甲基氨基-或3-硝基-4-N,N-二甲基氨基苯基、2,3-二氨基苯基、2,3,4-、2,3,5-、2,3,6-、2,4,6-或3,4,5-三氯苯基、2,4,6-三甲氧基苯基、2-羟基-3,5-二氯苯基、对-碘苯基、3,6-二氯-4-氨基苯基、4-氟-3-氯苯基、2-氟-4-溴苯基、2,5-二氟-4-溴苯基、3-溴-6-甲氧基苯基、3-氯-6-甲氧基苯基、3-氯-4-乙酰氨基苯基、3-氟-4-甲氧基苯基、3-氨基-6-甲基苯基、3-氯-4-乙酰氨基苯基或2,5-二甲基-4-氯苯基。

Ar特别优选地表示未取代或由Hal和/或CN单-、二-或三取代的苯基。

特别优选的式I化合物为：

，

，

。

在整个发明中，所有出现多于一次的基团可为相同或不同，即彼此独立。

式I化合物可具有一个或多个手性中心，并因此可以各种立体异构形式存在。式I涵盖所有这些形式。

因此，本发明特别涉及其中至少一个所述基团具有上述优选含义之一的式I化合物。化合物的一些优选基团可由以下子式Ia-Ih表示，其符合式I并且其中没有更详细指定的基团具有对式I所指示的含义，但其中

在Ia中，R1表示A、[C(R6)2]qAr、[C(R6)2]qCyc或[C(R6)2]qHet；

在Ib中，R2表示SO2A；

在Ic中，R3表示H或F，

R4表示H或F；

在Id中，A表示A优选地表示具有1-6个C原子的未分支或分支烷基，其中1-5个H原子可由OH和/或F替代，和/或其中一个或两个不相邻的CH2基团可由O和/或NH基团替代；

在Ie中，Ar表示苯基，其为未取代的或者由Hal和/或CN单-、二-或三取代；

在If中，Het表示具有1-4个N、O和/或S原子的单环饱和杂环，其可为未取代的或者由Hal、A、CN、OH和/或OA单-、二-或三取代；

在Ig中，Het表示四氢呋喃基、1,3-二氧戊环基、四氢噻吩基、吡咯烷基、基、吗啉基、四氢吡喃基或哌嗪基；

在Ih中，R1表示A、[C(R6)2]qAr、[C(R6)2]qCyc或[C(R6)2]qHet；

R2表示SO2A，

R3表示H或F，

R4 表示H或F，

R5表示H，

R6表示H或A’，

A表示具有1-8个C原子的未分支或分支烷基，其中1-5个H原子可由OH和/或F替代，和/或其中一个或两个不相邻的CH2基团可由O和/或NH基团替代，

A’表示具有1、2、3或4个C原子的未分支或分支烷基，

Cyc表示具有3、4、5、6或7个C原子的环状烷基，其中1-5个H原子可由OH、OA、F和/或Cl替代，

Ar表示苯基，其为未取代的或者由Hal和/或CN单-、二-或三取代，

Het表示四氢呋喃基、1,3-二氧戊环基、四氢噻吩基、吡咯烷基、基、吗啉基、四氢吡喃基或哌嗪基，

Hal表示F、Cl、Br或I，

n表示1 或 2，

m表示0、1、2或3，

p表示1、2或3，

q表示0、1或2，

及其药学上可接受的溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物。

另外，式I化合物以及用于其制备的起始原料通过如文献中描述的本身已知的方法制备(例如在标准著作中，比如Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie[Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart)，确切地说是在已知且适合于所述反应的反应条件下。这里也可使用本身已知的这里没有更详细地提及的变体。

式I化合物优选地可通过使式II化合物与络合氢化物比如NaBH4在惰性溶剂比如MeOH或THF中反应来获得。反应通常在0℃-75℃，优选地在10℃-40℃之间的温度下进行。

药用盐和其他形式

根据本发明的所述化合物可以其最终的非盐形式使用。另一方面，本发明还涵盖这些化合物以其药学上可接受的盐形式的用途，盐可通过本领域已知的程序衍生自各种有机和无机酸和碱。式I化合物的药学上可接受的盐形式大部分为通过常规方法制备。如果式I化合物含有羧基，则可通过使化合物与合适的碱反应得到相应的碱加成盐来形成其合适的盐之一。这种碱例如为碱金属氢氧化物，包括氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂；碱土金属氢氧化物，比如氢氧化钡和氢氧化钙；碱金属醇盐，例如乙醇钾和丙醇钠；以及各种有机碱，比如、二乙醇胺和N-甲基谷氨酰胺。同样包括式I化合物的铝盐。在某些式I化合物的情况下，酸加成盐可通过用药学上可接受的有机和无机酸处理这些化合物来形成，所述酸例如卤化氢，比如氯化氢、溴化氢或碘化氢，其他矿物酸及其相应的盐，比如硫酸盐、硝酸盐或磷酸盐等，以及烷基和单芳基磺酸盐，比如乙磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐，以及其他有机酸及其相应的盐，比如乙酸盐、三氟乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等。因此，式I化合物的药学上可接受的酸加成盐包括以下：乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐(besylate)、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、辛酸盐、氯化物、氯苯甲酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、甲酸盐、半乳糖二酸盐(来自粘酸)、半乳糖醛酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、半琥珀酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、甲磺酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、油酸盐、扑酸盐(palmoate)、果胶酸盐、过硫酸盐、盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、膦酸盐、邻苯二甲酸盐，但这不代表限制。

此外，根据本发明化合物的碱盐包括铝、铵、钙、铜、铁(III)、铁(II)、锂、镁、锰(III)、锰(II)、钾、钠和锌盐，但这不旨在代表限制。在上述盐中，优选为铵盐；碱金属盐钠盐和钾盐，以及碱土金属盐钙盐和镁盐。衍生自药学上可接受的有机非毒性碱的式I化合物的盐包括伯、仲和叔胺、取代胺(还包括天然存在的取代胺)、环状胺和碱性离子交换树脂的盐，例如精氨酸、甜菜碱、、氯普鲁卡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺(苄星)、二环己基胺、二乙醇胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基、葡糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、海巴明、异丙胺、利多卡因、赖氨酸、葡甲胺、N-甲基-D-葡糖胺、吗啉、哌嗪、、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙醇胺、TEA、三甲胺、三丙胺和三(羟甲基)甲胺(氨丁三醇)，但这不旨在代表限制。

含有碱性含氮基团的本发明化合物可使用试剂来季胺化，所述试剂比如(C1-C4)烷基卤化物，例如甲基、乙基、异丙基和叔丁基氯化物、溴化物和碘化物；二(C1-C4)烷基硫酸盐，例如二甲基、二乙基和二戊基硫酸盐；(C10-C18)烷基卤化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；以及芳基(C1-C4 )烷基卤化物，例如苄基氯和苯乙基溴。根据本发明的水溶性和油溶性化合物两者均可使用这种盐来制备。

优选的上述药用盐包括乙酸盐、三氟乙酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、半琥珀酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、羟乙基磺酸盐、扁桃酸盐、葡甲胺、硝酸盐、油酸盐、膦酸盐、新戊酸盐、磷酸钠、硬脂酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、硫代苹果酸盐、甲苯磺酸盐和氨丁三醇，但这不旨在代表限制。

特别优选为盐酸盐、、氢溴酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐、硫酸盐和琥珀酸盐。

式I的碱性化合物的酸加成盐为通过使游离碱形式与足够量的期望的酸接触，导致以常规方式形成盐来制备。可通过使盐形式与碱接触并以常规方式分离游离碱来再生游离碱。游离碱形式在某些方面关于某些物理特性(比如在极性溶剂中的溶解度)不同于其相应的盐形式；然而，出于本发明的目的，盐在其他方面对应于其各自的游离碱形式。

如上所述，式I化合物的药学上可接受的碱加成盐为用金属或胺比如碱金属和碱土金属或有机胺形成。优选的金属为钠、钾、镁和钙。优选的有机胺为N,N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺和普鲁卡因。

根据本发明的酸性化合物的碱加成盐为通过使游离酸形式与足够量的期望的碱接触，导致以常规方式形成盐来制备。可通过使盐形式与酸接触并以常规方式分离游离酸来再生游离酸。游离酸形式在某些方面关于某些物理特性(比如在极性溶剂中的溶解度)不同于其相应的盐形式；然而，出于本发明的目的，盐在其他方面对应于其各自的游离酸形式。

如果根据本发明的化合物含有超过一个能够形成这种类型的药学上可接受的盐的基团，则本发明还涵盖多元盐。典型的多元盐形式包括例如二酒石酸盐、二乙酸盐、二富马酸盐、二葡甲胺盐、二磷酸盐、二钠盐和三盐酸盐，但这不旨在代表限制。

关于上述内容，可以看出，本文中的表述 “药学上可接受的盐”指的是活性成分，其包含呈现其盐之一形式的式I化合物，特别是如果与活性成分的游离形式或早先使用的活性成分的任何其他盐形式相比较，这种盐形式赋予活性成分改善的药代动力学特性。活性成分的药学上可接受的盐形式还可首次为该活性成分提供其早先不具有的期望的药代动力学特性，并且甚至可关于该活性成分的体内功效对其药效学具有积极影响。

同位素

此外，旨在式I化合物包括其同位素标记形式。式I化合物的同位素标记形式与该化合物相同，除了化合物的一个或多个原子已由原子质量或质量数与通常天然存在的原子的原子质量或质量数不同的一个或多个原子替代的事实之外。易于市售获得并且可通过众所周知的方法并入到式I化合物中的同位素的实例分别包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。含有一种或多种上述同位素和/或其他原子的其他同位素的式I化合物或其药学上可接受的盐旨在为本发明的一部分。同位素标记的式I化合物可以多种有益方式使用。例如，其中已并入例如放射性同位素比如3H或14C的同位素标记的式I化合物适合于药物和/或底物组织分布测定。这些放射性同位素，即氚(3H)和碳-14(14C)，由于制备简单和可检测性优异，因此特别优选。将较重的同位素，例如氘(2H)并入到式I化合物中具有优势，因为这种同位素标记的化合物代谢稳定性较高。较高的代谢稳定性直接转化成增加的体内半衰期或较低的剂量，这在大多数情况下将代表本发明的优选实施方案。同位素标记的式I化合物通常可通过实施本文在合成方案和相关描述中、在实施例部分中和制备部分中公开的程序，由易于获得的同位素标记的反应物替代非同位素标记的反应物来制备。

也可将氘(2H)并入到式I化合物中，出于以便通过一级动力学同位素效应控制化合物的氧化代谢的目的。一级动力学同位素效应为由同位素核交换引起的化学反应速率的变化，这继而又是由这种同位素交换之后形成共价键所必需的基态能量的变化引起的。较重同位素的交换通常会导致化学键的基态能量降低，从而导致限速键断裂的速率降低。如果键断裂发生于沿多产物反应坐标的鞍点区域中或者附近，则产物分布比率可显著改变。出于解释：如果氘在不可交换的位点与碳原子键合，则典型的速率差为kM/kD = 2-7。如果这一速率差成功地应用于易受氧化影响的式I化合物，则这种化合物在体内的分布可显著改变并导致药代动力学特性的改善。

当发现和开发剂时，本领域的技术人员试图优化药代动力学参数，同时保持合乎期望的体外特性。可以合理地假设许多具有较差药代动力学特征的化合物易受氧化代谢的影响。目前可用的体外肝微粒体测定提供关于这种类型氧化代谢过程的有价值的信息，这继而又允许通过对这种氧化代谢的抗性来合理设计具有改善的稳定性的氘代式I化合物。由此获得式I化合物的药代动力学特征的显著改善，并且可在增加体内半衰期(t1/2)、最大效果时的浓度(Cmax)、剂量反应曲线下面积(AUC)和F方面以及减少的清除率、剂量和材料成本方面定量表达。

以下旨在说明以上内容：将具有多个潜在的氧化代谢攻击位点(例如苄型氢原子和与氮原子键合的氢原子)的式I化合物制备为一系列类似物，其中各种氢原子的组合由氘原子替代，使得这些氢原子中的一些、大部分或全部由氘原子替代。半衰期测定使得可有利和准确地确定对氧化代谢的抗性的改善程度已经改善的程度。以这种方式，确定由于这种类型的氘-氢交换，母体化合物的半衰期可延长多达100%。

式I化合物中的氘-氢交换也可用于实现对起始化合物的代谢物谱的有利修饰，以减少或消除不期望的毒性代谢物。例如，如果毒性代谢物为通过氧化性碳氢(CH)键断裂产生，则可以合理地假设氘代类似物将大大地减少或消除不需要的代谢物的产生，即使特定氧化不是速率决定步骤。可例如在Hanzlik等人, J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990,Reider等人, J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987, Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985, Gillette等人, Biochemistry 33(10) 2927-2937, 1994, 和Jarman 等人Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993中到关于氘-氢交换的现有技术的进一步信息。

此外，本发明涉及包含至少一种式I化合物和/或其药学上可接受的盐、溶剂合物和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)以及任选地赋形剂和/或佐剂的药物。

药用制剂可以每剂量单位包含预定量的活性成分的剂量单位的形式施用。这种单位可包含例如0.5 mg-1 g，优选地1 mg-700 mg，特别优选地5 mg-100 mg的根据本发明的化合物，取决于所的病症、施用方法和患者的年龄、体重和状况，或者药用制剂可以每剂量单位包含预定量的活性成分的剂量单位的形式施用。优选的剂量单位制剂为包含如上所指示的每日剂量或部分剂量，或其相应部分的活性成分的那些。此外，这种类型的药用制剂可使用制药领域中通常已知的方法来制备。

药用制剂可适合于经任何期望的合适方法施用，例如通过口服(包括口腔或舌下)、直肠、鼻腔、局部(包括口腔、舌下或经皮)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内或皮内)方法。这种制剂可使用制药领域已知的所有方法制备，例如通过将活性成分与赋形剂或佐剂组合。

适合于口服施用的药用制剂可作为分开的单位(比如胶囊剂或片剂、粉剂或颗粒剂)、在水性或非水性液体中的溶液剂或混悬剂、可食用泡沫或泡沫食品或者水包油液体乳剂或油包水液体乳剂施用。

因此，例如，在以片剂或胶囊剂形式口服施用的情况下，活性成分组分可与口服、非毒性和药学上可接受的惰性赋形剂(比如乙醇、甘油、水等)组合。通过将化合物粉碎至合适的细小尺寸并将其与以类似方式粉碎的药用赋形剂(比如可食用碳水化合物，比如淀粉或甘露醇)混合来制备粉剂。同样可存在调味剂、防腐剂、分散剂和染料。

通过制备如上所述的粉末混合物并用其填充成型的明胶壳来产生胶囊剂。助流剂和润滑剂，比如高度分散的硅酸、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体形式的聚乙二醇，可在填充操作之前添加至粉末混合物中。同样可添加崩解剂或增溶剂，比如琼脂、碳酸钙或碳酸钠，以在服用胶囊剂之后提高药物的利用度。

另外，如果期望或必要，合适的粘合剂、润滑剂和崩解剂以及染料同样可并入到混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖类比如葡萄糖或β-乳糖、由玉米制成的甜味剂、天然和合成橡胶比如阿拉伯胶、黄蓍胶或海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。通过例如制备粉末混合物、将混合物制粒或干压、添加润滑剂和崩解剂并压制整个混合物以得到片剂来配制片剂。通过将以合适方式粉碎的化合物与如上所述的稀释剂或碱以及任选地与粘合剂(比如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮)、溶出阻滞剂(比如石蜡)、吸收加速剂(比如季盐)和/或吸收剂(比如膨润土、高岭土或磷酸二钙))混合来制备粉末混合物。粉末混合物可通过用粘合剂(比如糖浆、淀粉糊、阿拉伯胶粘液或者纤维素或聚合物材料的溶液)将其润湿并将其压过筛子来制粒。作为制粒的替代，粉末混合物可运行通过压片机，产生非均匀形状的块，然后破碎形成颗粒。可通过添加硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油来润滑颗粒，以防止粘于片剂铸模上。然后压制润滑的混合物以得到片剂。根据本发明的化合物还可与自由流动的惰性赋形剂组合，并然后直接压制以得到片剂，而不进行制粒或干压步骤。可存在由虫胶密封层、糖或聚合物材料的层和蜡光泽层组成的透明或不透明保护层。可将染料添加至这些包衣中，以便能够区分不同的剂量单位。

口服液剂，比如溶液剂、糖浆剂和酏剂，可以剂量单位形式制备，使得给定量包含预定量的化合物。可通过使化合物溶解于具有合适味道的水溶液中来制备糖浆剂，而酏剂使用非毒性醇类媒介物来制备。可通过使化合物分散于非毒性媒介物中来配制混悬剂。同样可加入增溶剂和乳化剂(比如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐剂、调味添加剂(比如薄荷油或天然甜味剂或糖精或其他人工甜味剂)等。

如果需要，可将用于口服施用的剂量单位制剂封装于微胶囊中。制剂也可以延长或延迟释放的这种方式制备，比如通过将在颗粒材料包衣或包埋在聚合物、蜡等中。

式I化合物及其药学上的溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体也可以脂质体递送系统的形式施用，比如小单层囊泡、大单层囊泡和多层囊泡。脂质体可由各种磷脂形成，比如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱。

式I化合物及其溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体也可使用单克隆抗体作为与化合物分子偶联的单独载体递送。这些化合物也可与作为靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。这种聚合物可涵盖聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺基苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或聚环氧乙烷聚赖氨酸，由棕榈酰基取代。此外，这些化合物可与适合于实现药物控制释放的一类可生物降解聚合物偶联，例如聚乳酸、聚ε-己内酯、聚、聚原酸酯、聚缩醛、聚二羟基吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲嵌段共聚物。

适合于经皮施用的药用制剂可作为独立的膏药施用，以便与接受者的表皮延长、紧密接触。因此，如在Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)中以一般术语所述的，例如活性成分可通过离子电渗疗法从膏药中递送。

适合于局部施用的药用化合物可配制为软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗剂、粉剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。

为了眼睛或其他外部组织，例如口腔和皮肤，制剂优选地作为局部软膏剂或乳膏剂应用。在配制以得到软膏剂的情况下，活性成分可与石蜡或水混溶性乳膏基质一起使用。或者，可配制活性成分以得到具有水包油乳膏基质或油包水基质的乳膏剂。

适合于局部应用于眼睛的药用制剂包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮于合适的载体，特别是水性溶剂中。

适合于局部应用于口腔中的药用制剂涵盖糖锭、锭剂和漱口剂。

适合于直肠施用的药用制剂可以栓剂或灌肠剂的形式施用。

其中载体物质为固体的适合于鼻腔施用的药用制剂包含粒度例如在20-500微米范围内的粗粉，其以服用鼻烟的方式施用，即通过从保持靠近鼻子的含有粉末的容器中经鼻部通道快速吸入。用于以液体作为载体物质作为鼻喷雾剂或滴鼻剂施用的合适制剂涵盖活性成分在水或油中的溶液剂。

适合于通过吸入施用的药用制剂涵盖细颗粒粉尘或薄雾，其可由各种类型的具有喷雾器、雾化器或吹入器的加压分配器产生。

适合于阴道施用的药用制剂可作为阴道栓剂、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂施用。

适合于肠胃外施用的药用制剂包括水性和非水性无菌注射溶液剂，包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶质，借以使制剂与待的接受者的血液等渗；和水性和非水性无菌混悬剂，其可包含悬浮介质和增稠剂。制剂可在单剂量或多剂量容器中施用，例如密封的安瓿和小瓶，并以冷冻干燥(冻干)状态储存，使得在临使用之前仅需要添加无菌载液，例如用于注射目的的水。根据配方制备的注射溶液剂和混悬剂可由无菌粉剂、颗粒剂和片剂制备。

不言而喻，除以上特别提及的成分之外，制剂还可包含本领域关于特定类型制剂的其他常用试剂；因此，例如，适合于口服施用的制剂可包含调味剂。

式I化合物的有效量取决于许多因素，包括例如动物的年龄和体重、需要的确切病症及其严重程度、制剂的性质和施用方法，并且最终由医生或兽医决定。然而，根据本发明的化合物的有效量通常在每天0.1-100 mg/kg接受者(哺乳动物)体重的范围内，并且特别是一般地在每天1-10 mg/kg体重的范围内。因此，用于体重70 kg的成年哺乳动物的每天实际量通常在70-700 mg之间，其中该量可作为每天单剂量或通常以每天一系列部分剂量(比如二、三、四、五或六)施用，使得总每日剂量相同。其盐或溶剂合物或生理学功能衍生物的有效量可确定为根据本发明的化合物本身的有效量的分数。可以假设类似的剂量适合于上述其他病症的。

这种类型的组合可借助同时、连续或单独分配的单个组分来实现。这种类型的组合产品使用根据本发明的化合物。

本发明此外涉及药物，其包含至少一种式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)以及至少一种其他药物活性成分。

本发明还涉及一种由分开的以下包装组成的一种套装(试剂盒)：

(a) 有效量的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物，

和

(b) 有效量的其他药物活性成分。

该套装包含合适的容器，比如盒子、单独的瓶子、袋子或安瓿。例如，该套装可包含单独的安瓿，每个含有有效量的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体(包括它们所有比率的混合物)，以及有效量的其他药物活性成分，为溶解或冻干形式。

如本文使用的“”意指全部或部分地减轻与障碍或疾病相关的症状，或者减缓或停止这些症状的进一步进展或恶化，或者在处于患上疾病或障碍风险下的受试者中防止或预防疾病或障碍。

与式(I)化合物有关的术语“有效量”可意指能够全部或部分地减轻与障碍或疾病相关的症状、或者减缓或停止这些症状的进一步进展或恶化、或者在患上本文公开的疾病(比如炎症性病症、免疫病症、癌症或代谢病症)或处于其风险下的受试者中防止疾病或障碍或提供对其的预防的量。

在一个实施方案中，式(I)化合物的有效量为抑制细胞中的HIF-2α的量，比如在体外或体内。在一些实施方案中，与未处理的细胞中HIF-2α的活性相比较，有效量的式(I)化合物将细胞中的HIF-2α抑制10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或99%。例如在药用组合物中，式(I)化合物的有效量可处于将产生期望的效果的水平；例如用于口服和肠胃外施用两者的单位剂量中为约0.005 mg/kg受试者的体重至约10 mg/kg受试者的体重。

用途

本发明化合物适合作为癌症中用于哺乳动物尤其是人类的药用活性成分。

本发明涵盖式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体用于制备用于或预防癌症的药物的用途。

此外，本发明涵盖用于或预防癌症的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体。

还涵盖式I化合物和/或其药学上可接受的溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体用于制备用于在哺乳动物中或预防HIF-2α诱导的疾病或HIF-2α诱导的病症的药物的用途，其中对于这一方法，将有效量的根据本发明的化合物施用给需要这种的患病哺乳动物。量根据具体疾病而变化，并且可由本领域技术人员在无需过度努力的情况下确定。

本发明具体地涉及式I化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物，用于其中抑制、调控和/或调节抑制HIF-2α起作用的疾病的用途。

本发明具体地涉及式I化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们所有比率的混合物，用于抑制HIF-2α的用途。

式I化合物可用于或预防的代表性癌症包括(但不限于)头、颈、眼、口、咽喉、食道、支气管、喉、咽、胸、骨、肺、结肠、直肠、胃、前列腺、膀胱、子宫、宫颈、乳腺、卵巢、睾丸或其他生殖器官、皮肤、甲状腺、血液、淋巴结、肾脏、肝脏、胰腺、脑、中枢神经系统的癌症、实体肿瘤和血源性肿瘤。

此外，式I化合物可用于或预防的代表性癌症包括胶质母细胞瘤、肾细胞癌(RCC)和透明细胞肾细胞癌 (ccRCC)。

此外，本发明涵盖用于用途的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、互变异构体和立体异构体，用于或预防von Hippel-Lindau (VHL)病。

此外，本发明涵盖用于用途的式I化合物和/或其药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，用于或预防心血管疾病。

优选地，本发明涉及一种癌症的方法，包括给需要它的受试者施用有效量的根据本发明的式I化合物。

特别优选地，本发明涉及一种方法，其中疾病为癌症，其中施用与至少一种其他活剂的施用同时、依序或交替进行。

公开的式I化合物可与其他已知的剂包括抗癌剂组合施用。如本文使用的术语“抗癌剂”涉及出于癌症的目的而施用给患有癌症的患者的任何剂。

以上定义的抗癌可作为单一疗法应用，或者除本文公开的式I化合物之外，还可涉及常规手术或放射疗法或药物疗法。这种药物疗法，例如化学疗法或靶向疗法，可包括一种或多种、但优选地为一种以下抗肿瘤剂：

烷化剂

比如六甲蜜胺(altretamine)、苯达莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、氮芥(chlormethine)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、达卡巴嗪(dacarbazine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、英丙舒凡(improsulfan)、托西酸盐(tosilate)、洛莫司汀(lomustine)、美法仑(melphalan)、二溴甘露醇(mitobronitol)、二溴卫矛醇(mitolactol)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、噻替哌(thiotepa)、曲奥舒凡(treosulfan)、二氯甲基二乙胺(mechloretamine)、卡波醌(carboquone)、阿帕齐醌(apaziquone)、福莫司汀(fotemustine)、葡磷酰胺(glufosfamide)、帕利伐米(palifosfamide)、哌泊溴烷(pipobroman)、曲磷胺(trofosfamide)、乌拉莫司汀(uramustine)、TH-3024、VAL-0834；

铂化合物

比如卡铂(carboplatin)、顺铂(cisplatin)、依铂(eptaplatin)、米铂水合物(miriplatine hydrate)、奥沙利铂(oxaliplatin)、洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、吡铂(picoplatin)、沙铂(satraplatin)；

DNA改变剂

比如氨柔比星(amrubicin)、比生(bisantrene)、地西他滨(decitabine)、米托蒽醌(mitoxantrone)、丙卡巴肼(procarbazine)、曲贝替定(trabectedin)、氯法拉滨(clofarabine)；

安吖啶(amsacrine)、溴他利星(brostallicin)、匹杉琼(pixantrone)、laromustine 1,3；

拓扑异构酶抑制剂

比如依托泊苷(etoposide)、伊立替康(irinotecan)、雷佐生(razoxane)、索布佐生(sobuzoxane)、替尼泊苷(teniposide)、拓扑替康(topotecan)；

氨萘非特(amonafide)、贝洛替康(belotecan)、依利醋铵(elliptiniumacetate)、伏利拉辛(voreloxin)；

微管修饰剂

比如卡巴他赛(cabazitaxel)、多西他赛(docetaxel)、艾瑞布林(eribulin)、伊沙匹隆(ixabepilone)、紫杉醇(paclitaxel)、长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、长春地辛(vindesine)、长春氟宁(vinflunine)；

福他布林(fosbretabulin)、替司他赛(tesetaxel)；

抗代谢物

比如天冬酰胺酶(asparaginase)3、阿扎胞苷(azacitidine)、左亚叶酸钙(calcium levofolinate)、卡培他滨(capecitabine)、克拉屈滨(cladribine)、阿糖胞苷(cytarabine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)、氟达拉滨(fludarabine)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他滨(gemcitabine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、奈拉滨(nelarabine)、培美曲塞(pemetrexed)、普拉曲沙(pralatrexate)、硫唑嘌呤(azathioprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、卡莫氟(carmofur)；

去氧氟尿苷(doxifluridine)、艾西拉滨(elacytarabine)、雷替曲塞(raltitrexed)、沙帕他滨(sapacitabine)、替加氟(tegafur)2,3、三甲曲沙(trimetrexate)；

抗癌抗生素

比如博来霉素(bleomycin)、放线菌素D (dactinomycin)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)、左旋咪唑(levamisole)、米替福新(miltefosine)、丝裂霉素C (mitomycin C)、罗米地辛(romidepsin)、链脲佐菌素(streptozocin)、戊柔比星(valrubicin)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)、柔红霉素(daunurobicin)、普卡霉素(plicamycin)；

阿柔比星(aclarubicin)、培洛霉素(peplomycin)、吡柔比星(pirarubicin)；

激素/拮抗剂

比如阿巴瑞克(abarelix)、阿比特龙(abiraterone)、比卡鲁胺(bicalutamide)、布舍瑞林(buserelin)、卡鲁睾酮(calusterone)、氯烯雌醚(chlorotrianisene)、地加瑞克(degarelix)、地塞米松(dexamethasone)、雌二醇(estradiol)、氟可龙(fluocortolone)、氟甲睾酮(fluoxymesterone)、氟他胺(flutamide)、氟维司(fulvestrant)、戈舍瑞林(goserelin)、组氨瑞林(histrelin)、亮丙瑞林(leuprorelin)、甲地孕酮(megestrol)、米托坦(mitotane)、那法瑞林(nafarelin)、诺龙(nandrolone)、尼鲁米特(nilutamide)、奥曲肽(octreotide)、泼尼松龙(prednisolone)、雷洛昔芬(raloxifene)、他莫昔芬(tamoxifen)、促甲状腺素α (thyrotropin alfa)、托瑞米芬(toremifene)、曲洛司坦(trilostane)、曲普瑞林(triptorelin)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)；

阿考比芬(acolbifene)、达那唑(danazol)、德舍瑞林(deslorelin)、环硫雄醇(epitiostanol)、奥特罗奈(orteronel)、恩扎鲁胺(enzalutamide)1,3；

芳香化酶抑制剂

比如氨鲁米特(aminoglutethimide)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)、法屈唑(fadrozole)、来曲唑(letrozole)、睾内酯(testolactone)；

福美司坦(formestane)；

小分子激酶抑制剂

比如克唑替尼(crizotinib)、达沙替尼(dasatinib)、厄洛替尼(erlotinib)、伊马替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、尼洛替尼(nilotinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、瑞戈非尼(regorafenib)、鲁索利替尼(ruxolitinib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、凡德他尼(vandetanib)、威罗非尼(vemurafenib)、博舒替尼(bosutinib)、吉非替尼(gefitinib)、阿昔替尼(axitinib)；

阿法替尼(afatinib)、阿利替(alisertib)、达拉非尼(dabrafenib)、达可替尼(dacomitinib)、地纳昔布(dinaciclib)、多韦替尼(dovitinib)、恩扎妥林(enzastaurin)、尼达尼布(nintedanib)、仑伐替尼(lenvatinib)、利尼伐尼(linifanib)、林西替尼(linsitinib)、马赛替尼(masitinib)、米哚妥林(midostaurin)、莫替沙尼(motesanib)、奈拉替尼(neratinib)、奥安替尼(orantinib)、哌立福新(perifosine)、泊那替尼(ponatinib)、拉多替尼(radotinib)、瑞格替(rigosertib)、替吡法尼(tipifarnib)、tivantinib、替沃扎尼(tivozanib)、曲美替尼(trametinib)、哌吗替(pimasertib)、丙氨酸布立尼布(brivanib alaninate)、西地尼布(cediranib)、阿帕替尼(apatinib)4、S-苹果酸卡博替尼(cabozantinib S-malate)1,3、依布替尼(ibrutinib)1,3、埃克替尼(icotinib)4、布帕尼西(buparlisib)2、西帕替尼(cipatinib)4、考比替尼(cobimetinib)1,3、艾代拉里斯(idelalisib)1,3、菲达替尼(fedratinib)1、XL-6474；

光敏剂

比如甲氧(methoxsalen)3；

卟吩姆钠(porfimer sodium)、他拉泊芬(talaporfin)、替莫泊芬(temoporfin)；

抗体

比如阿仑单抗(alemtuzumab)、贝索单抗(besilesomab)、本妥昔单抗(brentuximab vedotin)、西妥昔单抗(cetuximab)、地诺单抗(denosumab)、伊匹单抗(ipilimumab)、奥法木单抗(ofatumumab)、帕尼单抗(panitumumab)、利妥昔单抗(rituximab)、托西莫单抗(tositumomab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、贝伐珠单抗(bevacizumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)2,3；

卡妥索单抗(catumaxomab)、埃罗妥珠单抗(elotuzumab)、依帕珠单抗(epratuzumab)、法妥珠单抗(farletuzumab)、莫格利珠单抗(mogamulizumab)、奈妥木单抗(necitumumab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、奥比妥珠单抗(obinutuzumab)、奥卡妥珠单抗(ocaratuzumab)、奥戈伏单抗(oregovomab)、雷莫芦单抗(ramucirumab)、利妥木单抗(rilotumumab)、塞妥昔单抗(siltuximab)、托珠单抗(tocilizumab)、扎芦木单抗(zalutumumab)、扎木单抗(zanolimumab)、马妥珠单抗(matuzumab)、达洛珠单抗(dalotuzumab)1,2,3、奥那妥组单抗(onartuzumab)1,3、雷妥莫单抗(racotumomab)1、他贝芦单抗(tabalumab)1,3、EMD-5257974、阿维单抗(avelumab)、纳武单抗(nivolumab)1,3；

细胞因子

比如阿地白介素(aldesleukin)、干扰素α2、干扰素α2a3、干扰素α2b2,3；西莫白介素(celmoleukin)、他索纳明(tasonermin)、替西白介素(teceleukin)、奥普瑞白介素(oprelvekin)1,3、重组干扰素β-1a4；

药物缀合物

比如地尼白介素(denileukin diftitox)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、碘苄胍I123 (iobenguane I123)、泼尼莫司汀(prednimustine)、恩美曲妥珠单抗(trastuzumab emtansine)、雌莫司汀(estramustine)、吉妥珠单抗(gemtuzumab)、奥佐米星(ozogamicin)、阿柏西普(aflibercept)；

贝辛白介素(cintredekin besudotox)、依多曲肽(edotreotide)、奥加伊妥珠单抗(inotuzumab ozogamicin)、埃托-那普妥莫单抗(naptumomab estafenatox)、莫奥珠单抗(oportuzumab monatox)、锝(technetium) (99mTc)、阿西莫单抗(arcitumomab)1,3、长春碱-叶酸偶联物(vintafolide)1,3；

疫苗

比如sipuleucel3；维特斯朋(vitespen)3、emepepimut-S3、oncoVAX4、rindopepimut3、troVax4、MGN-16014、MGN-17034；

其他

阿利维A酸(alitretinoin)、贝沙罗汀(bexarotene)、硼替佐米(bortezomib)、依维莫司(everolimus)、伊班膦酸(ibandronic acid)、咪喹莫特(imiquimod)、来那度胺(lenalidomide)、香菇多糖(lentinan)、甲酪氨酸(metirosine)、米法莫肽(mifamurtide)、帕米膦酸(pamidronic acid)、培门冬酶(pegaspargase)、喷司他丁(pentostatin)、sipuleucel3、西索菲兰(sizofiran)、他米巴罗汀(tamibarotene)、替西罗莫司(temsirolimus)、沙利度胺(thalidomide)、维甲酸(tretinoin)、维莫德吉(vismodegib)、唑来膦酸(zoledronic acid)、伏立诺他(vorinostat)；

塞来昔布(celecoxib)、西仑吉肽(cilengitide)、恩替司他(entinostat)、依他硝唑(etanidazole)、加特司匹(ganetespib)、伊屈诺昔(idronoxil)、iniparib、伊沙佐米(ixazomib)、氯尼达明(lonidamine)、尼莫拉唑(nimorazole)、帕比司他(panobinostat)、培维A酸(peretinoin)、普立肽(plitidepsin)、泊马度胺(pomalidomide)、丙考达唑(procodazol)、地磷莫司(ridaforolimus)、他喹莫德(tasquinimod)、替洛司他(telotristat)、胸腺法新(thymalfasin)、替拉扎明(tirapazamine)、托舍多特(tosedostat)、曲贝德生(trabedersen)、乌苯美司(ubenimex)、伐司扑达(valspodar)、今又生(gendicine)4、毕西巴尼(picibanil)4、里奥溶素(reolysin)4、盐酸瑞他霉素(retaspimycin hydrochloride)1,3、曲巴尼布(trebananib)2,3、维鲁利秦(virulizin)4、卡非佐米(carfilzomib)1,3、内皮抑素(endostatin)4、immucothel4、贝利司他(belinostat)3、MGN-17034；

PARP抑制剂

奥拉帕尼(Olaparib)、维利帕尼(Veliparib)。

1Prop. INN (提议的国际非专利名称)

2Rec. INN (推荐的国际非专利名称)

3USAN (美国采用的名称)

4没有INN。

以下缩写分别是指以下定义：

aq (水性)、h (小时)、g (克)、L (升)、mg (毫克)、MHz (兆赫兹)、min (分钟)、mm(毫米)、mmol (毫摩尔)、mM (毫摩尔的)、m.p. (熔点)、eq (当量)、mL (毫升)、μL (微升)、ACN (乙腈)、AcOH (乙酸)、CDCl3 (氘代氯仿)、CD3OD (氘代甲醇)、c-hex (环己烷)、DCC(二环己基碳二亚胺)、DCM (二氯甲烷)、DIC (二异丙基碳二亚胺)、DIEA (二异丙基乙胺)、DMF (二甲基甲酰胺)、DMSO (二甲基亚砜)、DMSO-d6 (氘代二甲基亚砜)、EDC (1-(3-二甲基-氨基-丙基)-3-乙基碳二亚胺)、ESI (电喷雾电离)、EtOAc (乙酸乙酯)、Et2O (乙醚)、EtOH (乙醇)、HATU (二甲基氨基-([1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-亚甲基]-二甲基铵六氟磷酸盐)、HPLC (高效液相谱)、i-PrOH (2-丙醇)、K2CO3 (碳酸钾)、LC (液相谱)、MeOH (甲醇)、MgSO4 (硫酸镁)、MS (质谱)、MTBE (甲基叔丁基醚)、NaHCO3 (碳酸氢钠)、NaBH4 (硼氢化钠)、NMM (N-甲基吗啉)、NMR (核磁共振)、PE (石油醚)、PyBOP (苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷子基鏻六氟磷酸盐)、RT (室温)、Rt (保留时间)、SPE (固相萃取)、TBTU (2-(1-H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐)、TEA (三乙胺)、TFA (三氟乙酸)、THF (四氢呋喃)、TLC (薄层谱)、UV (紫外)、WL (波长)。

在上下文中，所有温度均以℃表示。在以下实施例中，“常规后处理”意指：如果需要，加入水；根据最终产物的组成，如果需要，将pH值调节至2-10之间的值；用EtOAc或DCM萃取混合物；分离各相；有机相经硫酸钠干燥并蒸发；并将残余物通过硅胶上的谱法和/或通过结晶来纯化。硅胶上的Rf值；洗脱剂：EtOAc/MeOH 9:1。

1H NMR记录于Bruker DPX-300、DRX-400、AVII-400或500 MHz光谱仪上，使用氘代溶剂的残留信号作为内标。化学位移(δ)相对于残留溶剂信号(对于DMSO-d6中的1H NMR，δ =2.49 ppm)，以ppm为单位报告。1H NMR数据报告如下：化学位移(多重性、偶合常数和氢数)。多重性缩写如下：s (单重峰)、d (双重峰)、t (三重峰)、q (四重峰)、m (多重峰)、br (宽峰)。

分析方法

LCMS

方法A

柱：Ascentis Express C18，3.0x50 mm，2.7 µm

流动相：A：含0.05% TFA的水，B：含0.05% TFA的ACN

梯度：5% B至100% B直至2.1 min，保持直至2.8 min，100% B至5% B直至2.85min，3.00 min之后停止

流速：1.5 mL/min

波长：254 nm。

方法B

柱：Kinetex EVO C18，3.0x50 mm，2.6 µm

流动相：A：含0.04% NH4OH的水，B：ACN

梯度：10% B至95% B直至2.1 min，保持直至2.7 min，95% B至10% B直至2.75min，3.00 min之后停止

流速：1.2 mL/min

波长：254 nm。

方法 C

柱：Ascentis Express C18，3.0x50 mm，2.7 µm

流动相： A：含0.05% TFA的水，B：含0.05% TFA的ACN

梯度：5% B至60% B直至3.0 min，60% B至100% B直至4.2 min，保持直至5.2 min，100% B至5% B直至5.3 min，5.60 min之后停止

流速：1.5 mL/min

波长：254 nm。

方法 D

柱：Kinetex EVO C18，3.0x50 mm，2.6 µm

流动相：A：含0.04% NH4OH的水，B：ACN

梯度：10% B至60% B直至3.0 min，60% B至95% B直至4.0 min，保持直至4.8 min，95% B至10% B直至4.9 min，5.20 min之后停止

流速：1.2 mL/min

波长：254 nm。

方法E

柱：Cortecs C18+，2.1x50 mm，2.7 µm

流动相：A：含0.1% FA的水，B：含0.1% FA的ACN

梯度：10% B至100% B直至2.0 min，保持直至2.6 min，100% B至10% B直至2.7min， 2.90 min之后停止

流速：1.0 mL/min

波长：254 nm。

方法 F

柱：Shim-pack GIST C18，3.0x50 mm，2.0 µm

流动相：A：含5 mM NH4CO3的水，B：ACN

梯度：10% B至95% B直至2.1 min，保持直至2.7 min，95% B至10% B直至2.75min，3.00 min之后停止

流速：1 .2 mL/min

波长：254 nm。

方法 G

柱：Durashell C18，3.0x50 mm，2.1 µm

流动相：A：含0.04% NH4OH的水，B：ACN

梯度：10% B至95% B直至2.1 min，保持直至2.7 min，95% B至10% B直至2.75min，3.00 min之后停止

流速：1 .2 mL/min

波长：254 nm。

方法H

柱：Titank C18，3.0x50 mm，3.0 µm

流动相：A：含5 mM NH4CO3的水，B：ACN

梯度：10% B至95% B直至2.1 min，保持直至2.7 min，95% B至10% B直至2.75min，3.00 min之后停止

流速：1.2 mL/min

波长：254 nm。

方法I

柱：Poroshell HPH-C18，3.0x50 mm，2.7 µm

流动相：A：含0.04% NH4OH的水，B：ACN

梯度：10% B至95% B直至2.1 min，保持直至2.7 min，95% B至10% B直至2.75min，3.00 min之后停止

流速：1.2 mL/min

波长：254 nm。

方法J

柱：Cortecs C18+，2.1x50 mm，2.7 µm

流动相：A：含0.1% FA的水，B：含0.1% FA的ACN

梯度：10% B至60% B直至3.0 min，60% B至100% B直至4.0 min，保持直至4.7min，100% B至10% B直至4.8 min，5.00 min之后停止

流速：1.0 mL/min

波长：254 nm。

方法K

柱：Cortecs C18+，2.1x50 mm，2.7 µm

流动相：A：含0.1% FA的水，B：含0.1% FA的ACN

梯度：10% B至100% B直至1.10 min，保持直至1.60 min，100% B至10% B直至1.61min，1.90 min之后停止

流速：1.0 mL/min

波长：254 nm。

方法L

柱：Cortecs C18+，2.1x50 mm，2.7 µm

流动相：A：含0.1% FA的水，B：含0.1% FA的ACN

梯度：5% B至100% B直至2.0 min，保持直至2.6 min，100% B至5% B直至2.7 min，2.90 min之后停止

流速：1.0 mL/min

波长：254 nm。

HPLC

方法A

柱：XSELECT HSS T3 100x4.6 mm

流动相：A = 水+ 0.05% TFA，B = ACN + 0.05% TFA

梯度：开始5% B，8 min之后95% B，10.2 min之后5% B，12 min之后停止

流速：1.2 mL/min

波长：254 nm。

方法B

柱：Ascentis Express C18 2.7 µm，100x4.6 mm

流动相：A = 水 + 0.05% TFA，B = ACN + 0.05% TFA

梯度：开始5% B，8 min之后95% B，10.2 min之后5% B，12 min之后停止

流速：1.5 mL/min

波长：254 nm。

分析型手性分离

方法A

方法：HPLC

柱：ChiralPak IG-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 7:3

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法B

方法：HPLC

柱：ChiralPak IG-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 8:2

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法C

方法：HPLC

柱：ChiralPak IC-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 7:3

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法D

方法：HPLC

柱：ChiralPak IF-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 7:3

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法E

方法：HPLC

柱：ChiralPak IG-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 9:1

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法F

方法：HPLC

柱：ChiralPak IG-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 6:4

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法G

方法：HPLC

柱：ChiralPak IC-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/IPA = 1:1

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法H

方法：HPLC

柱：ChiralPak IF-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (10 mmol NH3)/EtOH = 5:5

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法I

方法：HPLC

柱：Chiral Cellulose-SB，0.46x10 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/IPA = 3:1

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法J

方法：HPLC

柱：ChiralPak IG-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 1:1

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法K

方法：HPLC

柱：ChiralPak IE-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 85:15

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

方法L

方法：HPLC

柱：ChiralPak IC-3，0.46x5 cm, 3 µm

流动相：Hex (0.1% DEA)/IPA = 65:35

波长：254 nm

流速：1.0 mL/min。

生物活性

Alphascreen蛋白-蛋白相互作用测定：

为了评价HIF-2α和HIF-1β的PAS B结构域相互作用的功能性破坏，建立了AlphaScreen测定。测定在384孔浅灰Perkin Elmer微量滴定板中进行，总体积为7 µl。将人类rec His6Gb1-TEV-GEFKGL-HIF2α (240-350aa)-G (fc 143 nM)和人类rec ARNTHis6Gb1-TEV-GEFKGL-ARNT(356-470aa)-FLAG-E362R (fc 143 nM)与目标化合物(fc 1 nM至30 µM)一起在20 mM Hepes、150 mM NaCl、0.05% Tween 20、2 mM DTT、0.1% (w/v) BSA、0.3% DMSO，pH 7.5中于23℃下温育15分钟。通过添加AlphaLISA® Anti-FLAG受体珠粒(fc20 µg/mL)和AlphaScreen®镍螯合物供体珠粒(fc 9 µg/mL) (两者均为Perkin Elmer)来进行蛋白-蛋白相互作用的检测，并将反应在23℃下于黑暗中温育240分钟。如果由于HIF2αPAS B与HIF-1β PAS B结构域的相互作用而导致供体和受体珠粒相互靠近，则在680 nm处激发之后会在615 nm处产生发光信号。化合物的PPI破坏活性直接自Alphascreen信号的损失计算。AlphaScreen信号用Envision多模式阅读器(Perkin Elmer LAS Germany GmbH)测量。使用的对照值为无抑制剂反应。使用的药理学零值为在不存在HIF-1β的情况下确定。使用来自GeneData的Assay分析仪计算抑制值(IC50)。

化合物在测定中抑制HIF-2α，其中IC50为A < 50 nM、50 ≤ B ≤ 1000 nM和C >1000 nM，如下表所示：

实例 AlphaScreen 1a A 2a A 3a A 4a A 5a A 6a A 7a A 8a A 9a A 10a A 11a A 12a A 13a A 14a A 15a A 16a A 17a A 18a A 19a A 20a A 21a A 22a A 23a A 24a C 25a B 26a B 27a B 28a B 29a C 30a C 31a C 32a C 33a A 34a B

ITC

ITC测量用来自MicroCal/Malvern (UK)的VP-ITC微量热计进行。对于所有滴定实验，将蛋白和相应的化合物配制于30 mM HEPES缓冲液pH 7.5、150 mM NaCl和5 mM β-巯基乙醇中。蛋白HIF2α (240-350)-G通过重组过表达和多步谱纯化来制备。从浓缩的DMSO储备溶液使用化合物。注射器中的最终蛋白浓度为100 μM。用缓冲液将DMSO中的10 mM配体储备溶液稀释至10 μM浓度并装载到样品池中。所有缓冲液均调整至最终浓度为1% (v/v)DMSO。被滴定液和滴定剂溶液两者均在装载量热计池和注射器之前脱气。ITC滴定在303 K的恒定温度下进行。使用由MicroCal/Malvern (UK)作为标准仪器软件提供的基于Origin7 (OriginLab Cooperation Northampton, USA)的量热法定制进行ITC数据分析。用单位点结合模型拟合综合热数据，以确定结合的亲和力、焓和化学计量学的表观值。

化合物在测定中结合HIF-2α，其中KD为A < 100 nM、100 ≤ B ≤ 1000 nM和C >1000 nM，如下表所示：

实例 ITC 1a B 3a B 5a B 7a A 8a B 9a B 12a B 13a B 16a B 19a A 20a B 22a B 24a C 25a C 26a C 27a B 28a B 29a C 30a C 31a C

细胞机理测定：786-O HRE-luc2P报告基因测定

该报告基因测定设计为监测HIF2α-HIF1β复合物与生理相关细胞系中称为缺氧反应元件(HRE)的特定DNA片段的结合。通过稳定整合在HRE序列的控制下驱动荧光素酶表达的HRE Luc报告基因构建体(pGL4.42[luc2P/HRE/Hygro] Vector, Promega, cat no.E4001)，786-O HRE-luc2P细胞衍生于786-O人类肾细胞腺癌细胞系。HRE存在于受缺氧诱导因子调控的各种基因的启动子中。786-O细胞仅表达HIF2α。因此，该报告基因测定允许通过确定产生的荧光素酶的活性来监测HIF2α-HIF1β活性。细胞培养在补充有10% FBS、丙酮酸钠、青霉素/链霉素、谷氨酰胺、200 μg/mL 潮霉素-金的RPMI培养基中进行。

测定在384孔白不透明、具有透明底部的微量滴定板(Greiner Bio-one,Frickenhausen)中进行。786-O HRE-luc2P细胞以4 x 104个细胞/mL重新悬浮于新鲜、预热的不含潮霉素的培养基(RPMI, 10% FBS, SP, P/S, Q) 中。将每孔50 μl的细胞悬液(2000个细胞)分配于微量滴定板中，并在37℃下于5% CO2温育器中温育过夜。用Labcyte Echo分配器添加化合物(fc 0.3% DMSO，以30 μM开始的9个浓度稀释原料)。将板在37℃下于5%CO2温育器中温育48小时。之后，每孔添加45 μl预热的ONE-Glo™ EX试剂。将板置于1200rpm下的定轨振荡器上持续3分钟。将板密封并用Tecan Spark 20M酶标仪测量发光(读取时间为0.1秒的终点测量)。将数值标准化为DMSO对照和没有细胞的孔(仅有培养基的对照)。发光减少与HIF2α活性的抑制直接相关。使用Ryvu Therapeutics (前身为Selvita S.A.)DRC应用程序或GraphPad Prism软件拟合可变斜率sigmoidal函数来计算EC50值和效应值百分比。

化合物在测定中抑制HIF-2α，其中IC50为A < 50 nM、50 ≤ B ≤ 1000 nM和C >1000 nM，如下表所示：

实例 HRE-luc2P报告基因测定 1a B 2a B 3a B 4a B 5a B 6a A 7a B 8a B 9a C 10a C 11a B 12a B 13a C 14a B 15a B 16a C 17a B 18a B 19a B 20a B 21a B 23a C 24a C 25a C 26a C 27a C 28a C 29a C 30a C 31a C 32a C 33a B 34a C

合成

一般程序

3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酸(2)的合成

向250 ml圆底烧瓶中的3-(噻吩-3-基)丙酸(6.00 g, 36.49 mmol, 95%)中加入甲苯(70 ml)和SO2Cl2 (11.92 g, 83.90 mmol, 95%)。将所得溶液在69℃搅拌4 h。然后通过加入100 mL水/冰淬灭反应并用4 x 100 mL EtOAc萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。将残余物经柱谱法纯化，用0-8% EtOAc的PE溶液洗脱，得到8.89 g为无固体的3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酸。

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.00 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 2.75-2.70(m, 2H), 2.54-2.48 (m, 2H);LC-MS (方法D): [M-H]-= 222.75, Rt = 0.89 min。

3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酰氯(3)的合成

向用氮气吹扫的250 mL圆底烧瓶中的3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酸(8.89 g,36.89 mmol, 93.4%)中加入氯化亚砜(80.00 mL, 1.05 mol, 95%)。将所得溶液在25℃下搅拌3 h。然后将混合物减压浓缩，得到8.32 g为橙油的3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酰氯，其无需进一步纯化即使用。

1,3-二氯-5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮(4)的合成

在用氮气吹扫的500 mL圆底烧瓶中，将3-(2,5-二氯噻吩-3-基)丙酰氯(8.32 g,32.04 mmol, 93.8%)溶解于DCM (80 mL)中，并使溶液冷却至0-5℃。缓慢加入AlCl3(35.98 g, 256.3 mmol, 95%)。将所得混合物在25℃下搅拌5 h。然后将其倾入到1 L水/冰中并用3 x 300 mL EtOAc萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并蒸发溶剂。将残余物经柱谱法纯化，用EtOAc (0-10%)的PE溶液洗脱，得到4.02 g为浅黄固体的1,3-二氯-5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮。

1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.01-2.95 (m, 2H), 2.87-2.81 (m, 2H); LC-MS(方法D): [M+H]+= 206.80, Rt = 0.95 min。

1-氯-3-(甲硫基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮的合成

向用氮气吹扫的250-mL圆底烧瓶中加入1,3-二氯-5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮(4.57 g, 21.10 mmol)、四氢呋喃(97 mL)和(甲硫基)钠(1.77 g, 23.99 mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌4 h。然后通过加入H2O淬灭反应。所得溶液用100 mL乙酸乙酯萃取。将有机层干燥、过滤并蒸发溶剂。将残余物用乙酸乙酯/石油醚(1:20)加载到硅胶柱上，得到3.3g (71%)为红固体的1-氯-3-(甲硫基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮。LC-MS (方法K): [M+H]+ = 218.85, Rt = 0.92 min。

1-氯-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮的合成

向用惰性氮气气氛吹扫并保持的50-mL圆底烧瓶中放入1-氯-3-(甲硫基) -4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮(3.3 g, 15.0 mmol)、二氯甲烷(31 mL)和m-CPBA (17.2g, 74.75 mmol,75%)。将所得溶液在25℃下搅拌2 h并用水淬灭。所得溶液用4x50 mL乙酸乙酯萃取并合并有机层，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到3.3 g (85%)为白固体的1-氯-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮。LC-MS (方法K): [M+H]+ =250.85, Rt = 0.71 min。

1-氯-3-甲磺酰基-5,6-二氢螺[环戊二烯并[c]噻吩-4,2’-[1,3]二氧戊环]的合成

向用氮气吹扫的250-mL圆底烧瓶中放入1-氯-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮(3.00 g, 10.0 mmol)、乙烷-1,2-二醇(1.30 g，20.0 mmol)、TsOH (0.36 g，1.996 mmol)、甲苯(100 mL)。将所得溶液在125℃下搅拌16 h。将所得混合物浓缩并经柱谱法(乙酸乙酯:石油醚=1:3)纯化残余物。这产生了2.8 g (94%)为黄固体的1-氯-3-甲磺酰基-5,6-二氢螺[环戊二烯并[c]噻吩-4,2’-[1,3]二氧戊环]。LC-MS (方法K): [M+H]+= 294.95, Rt = 0.94 min。

3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-5,6-二氢螺[环戊二烯并[c]噻吩-4,2’-[1,3]二氧戊环]的合成

向用氮气吹扫的20-mL小瓶中放入2-甲基丙-1-醇(1286 mg, 16.5 mmol)、DMF(20 mL)。随后加入异丁醇钾(1.04 g, 8.8 mmol)。将混合物在0℃下搅拌20 min。向其中加入1-氯-3-甲磺酰基-5,6-二氢螺[环戊二烯并[c]噻吩-4,2’-[1,3]二氧戊环] (900 mg,2.75 mmol)、15-冠醚-5 (955.71 mg, 4.1 mmol)。将所得溶液在油浴中于55℃下搅拌3 h，冷却至室温并用水淬灭。所得溶液用3x50 mL乙酸乙酯萃取并合并有机层，过滤并真空浓缩。将残余物用乙酸乙酯/石油醚(1:4)加到硅胶柱上。这产生了566 mg (53%)为棕固体的3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-5,6-二氢螺[环戊二烯并[c]噻吩-4,2’-[1,3]二氧戊环]。LC-MS (方法K): [M+H]+ = 333.05, Rt = 1.06 min。

3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮的合成

向100-mL圆底烧瓶中放入3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-5,6-二氢螺[环戊二烯并[c]噻吩-4,2’-[1,3]二氧戊环] (556 mg, 1.5 mmol)、DCM (10 mL)和TFA (1.5 mL,19.2 mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌3 h。然后通过加入30 mL NaHCO3淬灭反应。所得溶液用乙酸乙酯萃取，合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。这产生了500 mg(74.9%纯度, 86%)为棕固体的3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮。LC-MS (方法K): [M+H]+ = 288.95, Rt = 0.94 min。

5-氟-3-甲磺酰基-4,4-二甲氧基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩的合成

向用惰性氮气气氛吹扫并保持的20-mL小瓶中放入3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮(560 mg, 1.45 mmol, 74.9%)、MeOH (10 mL)、选择性氟试剂(1376 mg, 3.7 mmol)、H2SO4 (0.25 mL, 4.5 mmol)。将所得溶液在油浴中于60℃下搅拌3 h。所得溶液用3x30 mL乙酸乙酯萃取并合并有机层，过滤并真空浓缩。这产生了550 mg (39%纯度, 42%)为棕固体的5-氟-3-甲磺酰基-4,4-二甲氧基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩。LC-MS (方法K): [M+H-CH3-OCH3]+ = 306.95, Rt =1.09 min。

5-氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮的合成

向100-mL圆底烧瓶中放入5-氟-3-甲磺酰基-4,4-二甲氧基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩(550 mg, 0.858 mmol, 39%)、DCM (10 mL)、TFA (2 mL,25.580 mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌2 h。然后通过加入水淬灭反应。所得混合物用3x20 mL乙酸乙酯萃取并合并有机层，过滤并真空浓缩。这产生了520 mg (45%纯度, 89%)为固体的5-氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮。LC-MS (方法K): [M+H]+ = 306.95, Rt = 1.10 min。

叔丁基({[5-氟-1-甲磺酰基-3-(2-甲基丙氧基)-4H-环戊二烯并[c]噻吩-6-基]氧基})二甲基硅烷的合成

向用氮气吹扫的50-mL三颈圆底烧瓶中放入5-氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮(100 mg, 0.29 mmol)、DCM (5 mL)、TEA (160mg, 1.50 mmol, 95%)、TBSOTf (252 mg, 0.91 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌3 h并然后真空浓缩。残余物经柱谱法(乙酸乙酯:石油醚=1:5)纯化。这产生了100 mg (74%)为黄油的叔丁基({[5-氟-1-甲磺酰基-3-(2-甲基丙氧基)-4H-环戊二烯并[c]噻吩-6-基]氧基})二甲基硅烷。LC-MS (方法K): [M+H]+ = 421.10, Rt = 1.36 min。

5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮的合成

向25-mL圆底烧瓶中放入叔丁基({[5-氟-1-甲磺酰基-3-(2-甲基丙氧基)-4H-环戊二烯并[c]噻吩-6-基]氧基})二甲基硅烷(90 mg, 0.19 mmol)、MeCN (4 mL)、选择性氟试剂(151.5 mg, 0.41 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌2 h。所得溶液用50 mL乙酸乙酯稀释。所得混合物用2x30 mL NaCl水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。这产生了60 mg (86%)为黄固体的5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮。LC-MS (方法K): [M+H]+ = 325.05, Rt = 0.97 min。

5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇的合成

向25-mL圆底烧瓶中放入5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-酮(30 mg, 0.08 mmol)、THF (4 mL)、NaBH4 (7.0 mg, 0.18 mmol)。将所得溶液在室温搅拌2 h并用30 mL乙酸乙酯稀释。所得混合物用2x20 mL NaCl水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得到为白固体的5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇。

5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(8)的手性拆分

5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(8)在以下条件下通过手性制备型HPLC(Chiral-Prep-HPLC)分离：HPLC柱：ChiralPak IG-3，0.46x5 cm，3 µm，流动相：Hex (0.1% DEA)/EtOH = 9:1，波长：254 nm，流速：1.0 mL/min。这产生了30.3 mg为白固体的(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(8a)，熔点65-68℃。

8a: 1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ =5.04 (dd, J = 11.6, 2.8 Hz, 1H), 3.97(d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.24-3.12 (m, 2H), 2.18-2.00 (m, 1H), 1.03(d, J = 6.7 Hz, 6H); LC-MS (方法E): Rt = 1.24 min, [M+HCOO]- = 370.75; HPLC(方法B): 纯度99.1%, Rt 5.28 min; 手性HPLC (方法E): 98.0% er, Rt 3.95 min,(8b: Rt = 3.53 min)。

以下化合物已类似地获得：

(4S)-1-(环己基氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(1a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ =5.06-5.02 (m, 1H), 4.31-4.23 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 3.21-3.08 (m, 2H), 2.06 (m, 2H), 1.80-1.74 (m,2H), 1.66-1.58 (m, 3H), 1.52-1.35 (m, 3H); LC-MS (方法A): Rt = 1.47 min, [M+Na]+ = 274.9; HPLC (方法A): 纯度99.7%, Rt 6.70 min; 手性HPLC (方法A): >99.5%ee, Rt 2.2 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-(2,2-二甲基丙氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(2a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ =5.06 (dd, J = 11.5, 2.9Hz, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.28 (s, 3H), 3.23 (ddd, J = 16.2, 9.0, 5.4 Hz, 2H),1.06 (s, 9H); LC-MS (方法B): Rt = 1.66 min, [M+NH4]+ = 358.1; HPLC (方法B): 纯度98.6%, Rt 5.72 min; 手性HPLC (方法B): >99.5% ee, Rt 1.53 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-环丁氧基-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(3a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.06-5.02 (m, 1H), 4.80-4.73 (m, 1H), 3.26-3.14 (m, 5H), 2.55-2.45 (m, 2H), 2.31-2.18 (m, 2H), 1.95-1.85 (m, 1H), 1.78-1.68 (m, 1H); LC-MS (方法A): Rt = 1.52min, [M+Na]+ =346.9; HPLC (方法A): 纯度99.5%, Rt 6.0 min; 手性HPLC (方法B): 99.8% er, Rt2.26 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丁氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(4a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.06 (dd, J=11.4, 2.7Hz, 1H), 4.08-3.96 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.22-3.14 (m, 2H), 1.94-1.83 (m,1H), 1.62-1.48 (m, 1H), 1.36-1.21 (m, 1H), 1.03-0.93 (m, 6H); LC-MS (方法C):Rt = 2.75 min, [M+Na]+ = 363.0; HPLC (方法A): 纯度97.4%, Rt 6.75 min; 手性HPLC (方法C): >99.5% ee, Rt 1.24 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-(2,2-二氟乙氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(5a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 6.69 (m, 1H),6.56-6.21(m,1H),4.97(m, 1H), 4.62-4.52 (m, 2H), 3.44-3.28 (m, 5H); LC-MS (方法A): Rt =1.06 min, [M+Na]+ = 356.8; HPLC (方法A): 纯度99.9%, Rt 5.16 min; 手性HPLC (方法A): 99.5% ee, Rt 1.9 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(3,3,3-三氟-2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(6a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ =6.69 (d, J =7.1 Hz,1H), 5.03-4.87 (m, 1H), 4.34 (d, J=5.4 Hz, 2H), 3.28 (d, J =5.6 Hz, 5H), 2.97(d, J=7.6 Hz, 1H), 1.18 (d, J=7.1 Hz, 3H); LC-MS (方法D): Rt = 2.52 min, [M+NH4]+ = 398.1; HPLC (方法A): 纯度99.5%, Rt 6.20 min; 手性HPLC (方法B): >99.5%ee, Rt 2.13 min。

(4R)-立体异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(7a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 5.08 (d, J=6.9 Hz,1H), 5.07-4.99 (m, 3H), 3.40-3.35 (m, 5H); LC-MS (方法E): Rt = 1.14 min, [M+HCOO]- = 396.7; HPLC (方法A): 纯度99.6%, Rt 5.6 min; 手性HPLC (方法D): >99.5%ee, Rt 1.22 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(2-甲基丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(8a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.04 (dd, J = 11.6, 2.8Hz, 1H), 3.97 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.24-3.12 (m, 2H), 2.18-2.00(m, 1H), 1.03 (d, J = 6.7 Hz, 6H); LC-MS (方法E): Rt = 1.24 min, [M+HCOO]- =370.75; HPLC (方法B): 纯度99.1%, Rt 5.28 min; 手性HPLC (方法E): 98.0% er, Rt3.95 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-{[1,1,1-三氟丁-2-基]氧基}-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(9a)

按照一般程序制备；1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ =5.08 (dd, J = 11.1, 3.0Hz, 1H), 4.74-4.65 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.26-3.18 (m, 2H), 2.01-1.83 (m,2H),1.13 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS (方法E): Rt = 1.44 min, [M+HCOO]- =424.75; HPLC (方法B): 纯度99.6%, Rt 5.44 min; 手性HPLC (方法B): 99.8% er, Rt2.36 min。

式中“或”意指未知构型。

立体异构体已类似地得到。

(4S)-1-{[1,1-二氟丙-2-基]氧基}-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(10a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ =6.18-5.81 (m, 1H), 5.08-5.03 (m, 1H), 4.62-4.47 (m, 1H), 3.29-3.14 (m, 5H), 1.45 (s, 3H); LC-MS (方法D): Rt = 2.14 min, [M+NH4]+ = 366.0; HPLC (方法B): 纯度96.5%, Rt 4.50 min; 手性HPLC (方法A): >99.5% ee, Rt 2.17 min。

式中“或”意指未知构型。

立体异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(3,3,3-三氟丙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(11a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ =5.07 (dd, J = 11.5, 3.0Hz, 1H), 4.44 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.29 (s, 3H), 3.26-3.19 (m, 2H), 2.86-2.71(m, 2H); LC-MS (方法B): Rt = 1.41 min, [M+NH4]+ = 384.0; HPLC (方法A): 纯度96.1%, Rt 4.74 min; 手性HPLC (方法B): >99.5%, Rt 1.61 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-丙氧基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(12a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.08 (m, 2H), 4.19-4.15(m, 2H), 3.25-3.11 (m, 5H), 1.91-1.80 (m, 2H), 1.08-1.06 (m, 3H); LC-MS (方法F): Rt = 1.77 min, [M-H]- = 311.0; HPLC (方法A): 纯度98.9%, Rt 5.91 min; 手性HPLC (方法F): >99.5% ee, Rt 1.10 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-(环丙基甲氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(13a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.08 (dd, J=11.1, 3.0Hz, 1H), 4.05 (d, J=7.2 Hz, 2H), 3.27-3.15 (m, 5H), 1.39-1.26 (m, 1H), 0.71-0.60 (m, 2H), 0.45-0.39 (m, 2H); LC-MS (方法G): Rt = 1.41 min, [M+NH4]+ =342.1; HPLC (方法A): 纯度99.8%, Rt 5.79 min; 手性HPLC (方法B): >99.5% ee, Rt5.45 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-{[1,1-二氟丙-2-基]氧基}-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(14a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 6.19-5.81 (m, 1H), 5.08-5.03 (m, 1H), 4.62-4.47 (m, 1H), 3.30-3.14 (m, 5H), 1.44 (s, 3H); LC-MS (方法D): Rt = 2.14 min, [M+NH4]+ = 366.1; HPLC (方法B): 纯度96.8%, Rt 4.52 min; 手性HPLC (方法A): >99.5% ee, Rt 1.74 min。

式中“或”意指未知构型。

立体异构体已类似地得到。

(4S)-1-(2,2-二氟丙氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(15a)

按照一般程序制备；1H NMR (400 MHz, CDCl3): 5.24 (dd, J = 11.5, 4.8 Hz,1H), 4.28-4.20 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 3.40-3.14 (m, 6H), 1.78 (t, J = 18.8 Hz,3H); LC-MS (方法H): Rt = 1.62 min, [M-H]- = 346.9; HPLC (方法B): 纯度99.5%,Rt 4.7 min; 手性HPLC (方法A): >99.5% ee, Rt 2.21 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-[(1-甲氧基环丁基)甲氧基]-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(16a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.08 (dd, J=11.4, 2.7Hz, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.36-3.30 (m, 4H), 3.28-3.17 (m, 4H), 2.30-2.19 (m,2H), 2.11-2.03 (m, 2H), 1.90-1.67 (m, 2H); LC-MS (方法E): Rt = 1.09 min, [M+COO]- = 412.8; HPLC (方法A): 纯度99.8%, Rt 5.71 min; 手性HPLC (方法A): >99.5%ee, Rt 1.55 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S,5S)-5-氟-3-甲磺酰基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(17a)

按照一般程序制备；1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ = 5.39-5.19 (m, 2H), 4.79-4.73 (m, 2H), 3.37-3.32 (m, 3H), 3.15-3.03 (m, 2H); LC-MS (方法B): Rt = 1.24min, [M-H]- = 332.9; HPLC (方法B): 纯度98.0%, Rt 4.08 min; 手性HPLC (方法A):>99.5% ee, Rt 3.67 min。

立体异构体已类似地得到。

(4S)-1-[(3,3-二氟环丁基)甲氧基]-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(18a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 6.68 (d, J=7.0 Hz,1H), 5.06-4.88 (m, 1H), 4.28 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.29 (d, J=16.1 Hz, 5H),2.83-2.57 (m, 3H), 2.49 (s, 2H); LC-MS (方法B): Rt = 1.49 min, [M+NH4]+ =392.1; HPLC (方法B): 纯度99.5%, Rt 4.98 min; 手性HPLC (方法A): >99.5% ee, Rt1.42 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-(环丁基甲氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(19a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.08 (dd, J=2.7 Hz, 1H),4.18 (d, J=6.3 Hz, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.24-3.16 (m, 2H), 2.88-2.78 (m, 1H),2.21-2.09 (m, 2H), 2.06-1.80 (m, 4H); LC-MS (方法E): Rt = 1.28 min, [M+Na]+ =362.0; HPLC (方法A): 纯度99.8%, Rt 6.47 min; 手性HPLC (方法A): >99.5% ee, Rt2.20 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-(1-环丁基乙氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(20a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.08 (dd, J=11.7, 2.7Hz, 1H), 4.31-4.23 (m, 1H), 3.29-3.06 (m, 5H), 2.64-2.51 (m, 1H), 2.07-1.77(m, 6H), 1.28 (d, J=6Hz, 3H); LC-MS (方法E): Rt = 1.41 min, [2M+H]+ = 705.1;HPLC (方法A): 纯度99.4%, Rt 6.78 min; 手性HPLC (方法B): 99.2% er, Rt 1.45min。

立体异构体已类似地得到。

(4S)-1-(3,3-二氟丁氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(21a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 6.71 (d, J=7.0 Hz,1H), 5.06-4.92 (m, 1H), 4.43-4.32 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 3.31-3.19 (m, 2H),2.49-2.36 (m, 2H), 1.76-1.61 (m, 3H); LC-MS (方法H): Rt = 2.86 min, [M+NH4]+ =380.0; HPLC (方法B): 纯度97.4%, Rt 4.71 min; 手性HPLC (方法A): >99.5% ee, Rt1.25 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(噁烷-4-基氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(22a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.08-5.04 (m, 1H), 4.55-4.47 (m, 1H), 3.99-3.91 (m, 2H), 3.63-3.55 (m,2H), 3.32-3.14 (m, 5H), 2.14-2.08 (m, 2H), 1.86-1.75 (m, 2H); LC-MS (方法F): Rt = 1.35 min, [M+Na]+ =376.9; HPLC (方法A): 纯度99.9%, Rt 4.96 min; 手性HPLC (方法G): >99.5% ee, Rt2.07 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-[2-(三氟甲氧基)乙氧基]-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(23a)

按照一般程序制备；1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ = 5.07 (dd, J=11.4, 3.0Hz, 1H), 4.48-4.42 (m, 2H), 4.42-4.35 (m, 2H), 3.29 (s, 3H), 3.36-3.15 (m,2H); LC-MS (方法B): Rt = 2.42 min, [M+NH4]+ = 400.0; HPLC (方法B): 纯度99.0%,Rt 4.90 min; 手性HPLC (方法E): >99.5% ee, Rt 2.71 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

1-(3,4-二氟苯氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(24a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 7.23-7.17 (m, 1H), 7.05-6.98 (m, 1H), 6.93-6.87 (m, 1H), 5.27-5.21 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.26 (s,3H), 3.19-2.96 (m, 2H); LC-MS (方法E): Rt = 1.24 min, [M+H]+ = 404.9; HPLC(方法A): 纯度99.3%, Rt 6.44 min; 外消旋体。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(丙-2-基氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(25a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.05 (m, 1H), 4.53 (m,1H), 3.28-3.25 (s, 3H), 3.24-3.13 (m, 2H), 1.42 (d, 6H); LC-MS (方法I): Rt =1.37 min, [M+NH4]+= 330.0; HPLC (方法B): 纯度99.8%, Rt 4.4 min; 手性HPLC (方法G): >99.5% ee, Rt 1.38 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

3-氯-5-{[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-1-基]氧基}苯甲腈(26a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 7.69 (t, 1H), 7.59-7.54(m, 2H), 5.14 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.11 (m, 2H); LC-MS (方法E): Rt = 1.29min, [M+Na]+ = 429.0; HPLC (方法A): 纯度99.9%, Rt 6.45 min; 手性HPLC (方法G):>99.5% ee, Rt 1.70 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-(3,5-二氟苯氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(27a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 7.00-6.73 (m, 3H), 5.15(dd, J = 11.2, 3.2 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.23-2.95 (m, 2H); LC-MS (方法I):Rt = 1.61 min, [M+NH4]+ = 400.2; HPLC (方法A): 纯度9.74%, Rt 6.5 min; 手性HPLC(方法H): >99.5% ee, Rt 1.35 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

3-{[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-1-基]氧基}-5-氟苯甲腈(28a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 7.52-7.42 (m, 2H), 7.38(m, 1H), 5.16 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.13 (m, 2H); LC-MS (方法I): Rt = 1.50min, [M-H]- = 367.9; HPLC (方法A): 纯度99.1%, Rt 6.09 min; 手性HPLC (方法A):>99.5% ee, Rt 2.87 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-1-(4-氟苯氧基)-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(29a)

按照一般程序制备；1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ = 7.36-7.09 (m, 4H), 5.10(dd, J =11.3, 3.1 Hz, 1H), 3.30 (s, 3H), 3.19-2.87 (m, 2H); LC-MS (方法B): Rt= 1.55 min, [M+NH4]+ = 382.2; HPLC (方法A): 纯度99.7%, Rt 6.29 min; 手性HPLC(方法C): >99.5% ee, Rt 1.53 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-(3-氯-5-氟苯氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(30a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 7.19-7.09 (m, 2H), 7.00(m, 1H), 5.16 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.12 (m, 2H); LC-MS (方法J): Rt =2.71min, [M+Na]+ = 420.8; HPLC (方法A): 纯度99.4%, Rt 7.26 min; 手性HPLC (方法I): >99.5% ee, Rt 2.31 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

3-{[(4S)-5,5-二氟-4-羟基-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-1-基]氧基}苯甲腈(31a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 7.67-7.58 (m, 3H), 7.53(m, 1H), 5.14 (dd, 1H), 3.14 (d, 3H), 3.12-3.00 (m, 2H); LC-MS (方法E): Rt =1.16 min, [M+H]+ = 371.9; HPLC (方法A): 纯度98.7%, Rt 5.90 min; 手性HPLC (方法J): >99.5% ee, Rt 1.35 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-1-乙氧基-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(32a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CD3OD): δ = 5.05 (dd, J=11.4, 2.7Hz, 1H), 4.27-4.20 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.22-3.14 (m, 2H),1.43 (t, J=6.9Hz, 3H), LC-MS (方法L): Rt = 1.05 min, [M+H]+ = 299.00; HPLC (方法B): 纯度99.2%, Rt 4.15 min; 手性HPLC (方法L): >99.5% ee, Rt 1.30 min。

(4R)-对映异构体已类似地得到。

(4S)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-1-(4,4,4-三氟丁氧基)-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(33a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ =6.68 (d, J=7.2 Hz, 1H),4.97-4.95 (m,1H), 4.26 (t, J=6.3 Hz, 2H), 3.29-3.22 (m, 5H), 2.44-2.38 (m,2H), 1.99-1.93 (m, 2H); LC-MS (方法D): Rt = 2.63 min, [M+NH4]+ = 398.1; HPLC(方法B): 纯度99.5%, Rt 5.18 min; 手性HPLC (方法K): >99.5% ee, Rt 2.31 min。

(4R)-立体异构体已类似地得到。

(4S)-1-(3,4-二氟苯氧基)-5,5-二氟-3-甲磺酰基-4H,5H,6H-环戊二烯并[c]噻吩-4-醇(34a)

按照一般程序制备；1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 7.23-7.17 (m,1H), 7.05-6.98 (m, 1H), 6.93-6.87 (m, 1H), 5.27-5.21 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.26 (s,3H), 3.19-2.96 (m, 2H); LC-MS (方法E): Rt = 1.24 min, [M+H]+ = 404.85; HPLC(方法A): 纯度99.3%, Rt 6.44 min。

(4R)-立体异构体已类似地得到。

以下化合物可以类似方式制备：

以下实施例与药物有关。

实施例A：注射小瓶

使用2 N盐酸将100 g式I的活性成分和5 g磷酸氢二钠在3 L双蒸水中的溶液调节至pH 6.5，无菌过滤，转移到注射小瓶中，在无菌条件下冻干并密封于无菌条件下。每个注射小瓶含有5 mg活性成分。

实施例B：栓剂

将20 g式I的活性成分与100 g大豆卵磷脂和1400 g可可脂的混合物熔化，倾入到模具中并使得冷却。每个栓剂含有20 mg活性成分。

实施例C：溶液剂

由1 g式I的活性成分、9.38 g NaH2PO4∙2 H2O、28.48 g Na2HPO4∙12 H2O和0.1 g苯扎氯铵在940 mL双蒸水中制备溶液剂。将pH调节至6.8，并将溶液补足至1 L且经照射灭菌。该溶液剂可以滴眼剂的形式使用。

实施例D：软膏剂

在无菌条件下将500 mg式I的活性成分与99.5 g凡士林混合。

实施例E：片剂

1 kg式I的活性成分、4 kg乳糖、1.2 kg马铃薯淀粉、0.2 kg滑石和0.1 kg硬脂酸镁的混合物以常规方式压制以产生片剂，由此使得每片含有10 mg活性成分。

实施例F：糖衣丸

与实施例E类似地压制片剂，并随后以常规方式用蔗糖、马铃薯淀粉、滑石、黄蓍胶和染料的包衣进行包衣。

实施例G：胶囊剂

将2 kg式I的活性成分以常规方式引入到硬明胶胶囊中，由此使得每个胶囊含有20 mg活性成分。

实施例H：安瓿

将1 kg式I的活性成分在60 L双蒸水中的溶液无菌过滤，转移到安瓿中，在无菌条件下冻干并在无菌条件下密封。每个安瓿含有10 mg活性成分。