用于骨关节炎的DDR2抑制剂

用于骨关节炎的DDR2抑制剂

本发明涉及式I化合物特别是包含至少一种式I化合物的药物， 其中式I化合物用于和/或预防在其触发中涉及DDR2的生理和/ 或病理生理状态、特别是用于和/或预防骨关节炎、肝硬化、创伤 性软骨损伤、疼痛、异常性疼痛或痛觉过敏。

发明背景

骨关节炎(OA)在发达国家是最致残疾的疾病之一。估计在全世 界OA的发病率(prevalence)在男子中为十分之一而在年龄60岁以 上的女性中为五分之一。因而，该疾病是相当大的卫生保健消费的原 因且因此代表明显的社会经济负担。迄今为止，不能获得改善疾病的 。因此当前的完全是对症性的，直到可指示全关节置换术的 点。

尽管这对于医疗卫生系统非常重要，但迄今为止OA的原因仍然 不清楚且此外有效的预防措施仍然是遥远的目标。关节间隙减小(由 关节软骨破坏引起的)伴随软骨下骨的变化和骨刺生成是该疾病的放 射学特征。然而，对于患者而言，主要是疼痛(负荷依赖性和夜间静 息痛)伴随随后的功能受限。这还促使患者由于相应的继发性疾病与 社会隔离。

根据非官方的定义，术语骨关节炎表示超过年龄的通常程度的“关 节磨损”。病因被认为是过度负荷(例如体重增加)、出生的或创伤的 原因，如关节的错位，或也可能是由于骨病关节如骨质疏松症引起的 骨头变形。骨关节炎同样可能是由于另一种疾病，例如关节炎症(关 节炎)的结果(继发性骨关节炎)、或伴随超负荷引发的渗出(继发 性炎症反应)带来的结果(活动性骨关节炎)。英美专业文献区分骨 关节炎和关节炎(类风湿性关节炎，RA)，其中在骨关节炎中关节表 面破坏很可能主要归因于负荷的作用，而在关节炎中主要是由于炎症 部位的关节退化。

原则上，骨关节炎也可根据其病因区分。尿黑酸尿关节炎基于在 之前存在的尿黑酸尿症的情况下在关节内增多的尿黑酸沉积。在血友 病性关节病的情况下，由于血友病(血友病性关节)出现规律性关节 内出血。尿酸性关节炎起因于尿酸盐尿酸盐晶体(尿酸)对健康软骨 的机械影响(Pschyrembel W.等：KlinischesVerlag  Walter de Gruyter&Co,253rd Edition,1977)。

骨关节炎的典型病因是关节的发育不良。以髋部为例，显然在生 理学髋部位态的情况下最大机械应力的区域相比在发育不良的髋部的 情况下具有明显较大的面积。然而，通过作用于关节的力的负荷与关 节形状基本上无关。负荷基本上分布在主要的负荷区。经此在相对小 的区域的情况下将出现相比在较大的区域的情况下更高的压力负荷。 由此在发育不良的的髋部的情况下关节软骨上的生物机械压力负荷比 在生理学髋部位置的情况下大。此规律通常被认为是由于异常于理想 解剖形状的支撑性关节上频繁出现的关节炎性变化。

如果过早的磨损是由于外伤的后果，则称为创伤后关节病。作为 继发性关节病或骨关节炎的其它病因讨论的有涉及机械、炎症、代谢、 化学(喹诺酮类)、营养、激素、神经学和遗传的原因。然而，在大 多数情况下，给出的诊断结论为特发性关节病，借此医生意指明显缺 少病因性疾病(H.I.Roach和S.Tilley,Bone和Osteoarthritis,F. Bronner和M.C.Farach-Carson(Editors),Verlag Springer,Volume 4, 2007)。

骨关节炎的医源性病因可能是例如促旋酶抑制剂类型的抗生素 (氟喹诺酮类，如环丙沙星，左氧氟沙星)。这种药物导致血管化差 的组织(透明的关节软骨，肌腱组织)中镁离子的络合，其结果是结 缔组织发生不可逆的损害。通常该损害在儿童和青少年的生长期更显 著。肌腱病和关节病是此类药物的已知副作用。根据来自无关联的药 理学家和风湿病学家的信息，在成人中此类抗生素导致透明关节软骨 的生理学降解加速(Menschik M.等,Antimicrob.Agents Chemother. 41,2562-2565页,1997；Egerbacher M.等，Arch.Toxicol.73,557-563 页,2000；Chang H.等，Scand.J.Infect.Dis.28,641-643页,1996； Chaslerie A.等，Therapie 47,80页,1992)。用苯丙香豆素的常年治 疗也会通过在关节内部结构的负荷下骨密度的降低促成关节病。

除年龄之外，已知的骨关节病风险因素是机械性过负荷、(微) 创伤、由固定机制丧失引起的关节失去稳定性、和遗传因素。然而， 不能完全解释其产生和干预可能性(H.I.Roach和S.Tilley,Bone和 Osteoarthritis,F.Bronner和M.C.Farach-Carson(Editors),Verlag  Springer,Volume 4,2007)。

在患有骨关节炎的关节中，一氧化二氮的含量有时增加。通过软 骨组织的高机械性刺激可观察到类似的情形(Das P.等，Journal of  Orthopaedic Research 15,87-93页,1997；Farrell A.J.等，Annals of  the Rheumatic Diseases 51,1219-1222页,1992；Ferm或B.等，Journal  of Orthopaedic Research 19,729-737页,2001)，而中度机械性刺激倾 向于具有正效应。因此机械力作用有因果地涉及骨关节炎的发展(Liu  X.等，Biorheology 43,183-190页,2006)。

原则上，骨关节炎遵循两个目标：一方面常规负荷下无疼痛， 另一方面防止关节的机械性能受限或关节变化。从长远来看这些目标 不能通过作为一种纯粹的对症疗法的疼痛来实现，因为这种 不能阻止疾病的发展。如果要实现后者，就必须停止软骨破坏。由于 成人患者的关节软骨不能再生，消除致病因素如关节发育不良或错位 (这会导致关节软骨上的点压力负荷增加)更加非常重要。

最后，可试图在药物的帮助下阻止或停止软骨组织内的退化过程。

机能状态的基本因素是细胞外基质，因而关节软骨对紧张的抵抗 是细胞外基质，其主要由胶原蛋白、蛋白聚糖和水组成。涉及细胞外 基质降解的酶包括，尤其是金属蛋白酶蛋白聚糖酶和组织蛋白酶。

网柄菌凝素域(discoidin domain)受体(DDRs)DDR2(网柄菌 凝素域受体族成员2，亦称CCK-2，tyro-10或TKT)和DDR1(网 柄菌凝素域受体族成员1；亦称MCK-10，DDR，NEP，cak， trkE，RTK6或ptk3)为受体酪氨酸激酶亚族的成员，它们由胶原蛋 白激活。

这些蛋白以细胞外网柄菌凝素域为特征，其中网柄菌凝素域首先 在细胞聚集中发挥作用的粘菌Dictyostelium discoideum中被鉴定，是 大的细胞质膜旁区。每种蛋白还含有两个免疫球蛋白结构域。序列比 较显示DDRs的非哺乳动物同源体存在：Caenorhabditis中的三个密 切相关基因和在海绵Geodia cydonium中一个密切相关基因。

多种类型的胶原蛋白已经被鉴定为两种哺乳动物网柄菌凝素域受 体酪氨酸激酶的配体，DDR1和DDR2。与胶原蛋白的相互作用既抑 制胶原蛋白的原纤维生成又调节基质金属蛋白酶(MMP)(裂解天然 纤维胶原蛋白的酶)的表达(Vogel W.,FASEB,13,S77,1999；Xu et al, J.Biol.Chem.280:548-55.,2005；Mihai等，J.Mol.Biol.361:864-76, 2006)。胶原蛋白与胞外域直接相互作用并以时间和浓度依赖的方式 激起DDRs的酪氨酸磷酸化。DDRs在结构上通过discoidin域与其它 受体酪氨酸激酶区分且不像大多数的其它受体酪氨酸激酶它们不能在 几分钟内完全激活。胶原蛋白与DDRs的结合导致延迟但持续的酪氨 酸激酶激活。最大的激活发生在胶原蛋白刺激之后几小时。DDR2具 有更长的膜旁区，其中膜旁区具有推测的自身抑制作用。DDR2只被 纤维胶原蛋白(I-III)激活。

两种受体，DDR1和DDR2，均显示若干潜在的酪氨酸磷酸化位 点，其能通过与细胞质的效应器蛋白相互作用而分程传递激活信号 (Vogel W.,FASEB,13:577-582,1999)。DDR2需要被最大磷酸化和 激活基质金属蛋白酶-2启动子的srk激酶。

DDR2的正常功能基本上未知。已知DDR2调节与基质金属蛋白 酶-2的转录激活有关的成纤维细胞和软骨细胞的增殖和通过细胞外基 质的迁移(Labrad或等，EMBO Reports 2,5:446-452,2001)。DDR2 在肝星形细胞中作为对肝损伤期间胶原蛋白的响应被诱导，且DDR2 的过表达增加肝星形细胞增殖、MMP-2的激活的表达、和增加细胞通 过基质胶的侵入(Olaso等，J.Clin.Invest.,108:1369-1378,2001)。 DDR2作为对胶原蛋白的响应的激活和粘附可能需要Wnt和G蛋白信 号(Dejmek等，Int.J.Cancer 103:344-351,2003)。DDR2表达的缺 乏在小鼠中导致侏儒症，很可能是由于骨生长期间软骨细胞的降低的 增殖引起(Labrador等,EMBO Reports 2,5:446-452,2001)。

已报道的是DDR1在许多人肿瘤包括乳癌、卵巢癌、食管癌和脑 癌中和在转移性癌细胞中过度表达(Barker等，Oncogene 11:569-575, 1995；Laval等，Cell Growth Diff.5:1173-1183,1994；Nemoto等， Pathobiol.65:165-203,1997；Weiner等，Pediatr.Neurosurg.25: 64-72,1996；Weiner等，Neurosurgery 47:1400-1409,2000； Heinzelmann等，10:4427-4436,2004)。DDR1和DDR2在卵巢肿瘤 和肺肿瘤中具有相互排斥的表达，其中DDR1的转录在高侵入性肿瘤 细胞中(检测到)和DDR2的转录在周围间质细胞中检测到。(Alves 等，Oncogene 10:609-618,1995；Barker等，Oncogene 11:569-575, 1995)。此外，DDR2表达与侵入性乳癌有关联(Evitmova等，2003, Tum或Biol.24:189-98)。因此作为癌症干细胞标记物的DDR2的鉴定 表明在人癌症中靶向这些受体可证明是有效的。

已有报道DDR2表达的增强导致小鼠中基质金属蛋白酶-13 (MMP-13)(一种通过降解主要的基质成分重塑细胞外基质的蛋白) 的表达增强。这些小鼠显示在各关节中年龄相关性骨关节炎样的变化 (Li Y等，J.Biol.Chem.2005,280:548-555)。DDR2由胶原蛋白的 激活还显示导致基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的上调。

因此，DDR2似乎通过调节细胞粘附、增殖和细胞外基质重塑(抑 制基质蛋白产生&增加基质分解)在骨关节炎中直接参与病理生理事 件。

DDR2抑制剂用于骨关节炎的应用的科学原理遵循从软骨细 胞开始的证据线：骨关节炎软骨细胞、软骨动物外植、动物骨关节炎 模型和与mRNA和蛋白质表达有关的人骨关节炎软骨。人体内的蛋白 质表达使软骨损伤和骨关节炎标记物的表达相互关联。

按照步骤骨关节炎发病期间存在：最早的事件是软骨损伤(软骨 撞击)或、在陈化期关节软骨细胞的生长因子敏感性丧失。这导致 HTRA1通过软骨细胞的增强的表达或活性，结果是屏蔽软骨细胞表 面上DDR2受体的细胞周围富含胶原蛋白VI的基质损毁。如果这种 屏蔽丧失，则胶原蛋白II纤维或碎片在DDR2受体附近并激活该途径， 这导致细胞因子和降解蛋白酶(例如MMP13、ADAMTS5)的释放并 因此导致软骨降解。因此，DDR2受体被认为在软骨伤口和骨关节炎 中关键的受体。

除癌症和骨关节炎之外DDR2似乎参与多种其它人类疾病，特别 是动脉粥样硬化、肝硬化、炎症、关节炎、和组织纤维化。

WO2005092896公开了作为DDR抑制剂用于肝硬化、风湿病和 癌症的呋喃并嘧啶化合物。

与本发明化合物相似的化合物公开于WO2004037789和 WO2006042599中(其被描述为Tie-2和cRaf抑制剂)和公开于 WO2011017142中(其被描述为Aurora和RON激酶抑制剂)，所有 这些化合物尤其用于癌症。

本发明的目的基于发现具有有价值的性能的新化合物，特别是可 用于制备药物的新化合物。

本发明的目的尤其是发现可用于预防和骨关节炎且对DDR2 具有尤其高选择性的新活性化合物和特别优选新的DDR2抑制剂。此 外，本发明的目的是发现至少在局部或关节内施用时足够稳定的新 DDR2抑制剂。

发明概述

令人惊奇地，已经发现根据本发明的式I化合物高效地抑制 DDR2，这在骨关节炎的形成中具有关键的作用。数据表明不仅可获 得细胞的效力而且发现抑制前MMP13，其为骨关节炎发生和进展的 生物标志物。令人惊讶的是发现在R3位置具有苯基或杂芳环的本发 明化合物为强的和选择性的DDR2抑制剂，因此可预计几乎没有副作 用。另外，显示潜在基因致毒的苯胺部分可用氨基杂芳环置换。此外， 本发明的化合物在滑膜液中具有足够良好的稳定性，从而它们适于关 节内施用因而适于骨关节炎。

本发明涉及式I化合物，

其中

W为O、N、CH₂、CH₂CH₂、CH₂CHOH或-(CH₂)O-，

X、Y、Q、U、T彼此独立地为C或N，条件是X、Y、Q、U和 T中一个或多个为碳原子且M与碳原子键合，

V为单键或-CR⁴R⁵-，

M为O或-CR⁴R⁵-，

R¹为含有3至14个碳原子和1或4个独立地选自N、O和S的 杂原子的单环或二环杂芳基、杂环基或芳基，其未被取代或被R⁶单取 代、二取代或三取代，

R²为H、A、CN、OH、OA或Hal，

R³为含有3至14个碳原子和1或4个独立地选自N、O和S的 杂原子的单环或二环杂芳基、杂环基或芳基，其未被取代或被R⁷单取 代、二取代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H和A，

R²、R⁶和R⁷彼此独立地选自H、A、Hal、CH₂Hal、CH(Hal)₂、 C(Hal)₃、NO₂、(CH₂)_nCN、(CH₂)_nNR⁸R⁹、(CH₂)_nO(CH₂)_kNR⁸R⁹、 (CH₂)_nNR⁸(CH₂)_kNR⁸R⁹、(CH₂)_nO(CH₂)_kOR¹⁸、(CH₂)_nNR⁸(CH₂)_kOR⁹、 (CH₂)_nCOOR¹⁰、(CH₂)_nCOR¹⁰、(CH₂)_nCONR⁸R⁹、C(O)NHA、 C(O)NHANH₂(CH₂)_nNR⁸COR¹⁰、(CH₂)_nNR⁸CONR⁸R⁹、 (CH₂)_nNR⁸SO₂A、(CH₂)_nSO₂NR⁸R⁹、(CH₂)_nS(O)_uR¹⁰、(CH₂)_nOC(O)R¹⁰、 (CH₂)_nCOR¹⁰、(CH₂)_nSR⁸、CH＝N-OA、CH₂CH＝N-OA、(CH₂)_nNHOA、 (CH₂)_nCH＝N-R⁸、(CH₂)_nOC(O)NR⁸R⁹、(CH₂)_nNR⁸COOR¹⁰、 (CH₂)_nN(R⁸)CH₂CH₂OR¹⁰、(CH₂)_nN(R⁸)CH₂CH₂OCF₃、 (CH₂)_nN(R⁸)C(R¹⁰)HCOOR⁹、(CH₂)_nN(R⁸)C(R¹⁰)HCOR⁹、 (CH₂)_nN(R⁸)CH₂CH₂N(R⁹)CH₂COOR⁸、(CH₂)_nN(R⁸)CH₂CH₂NR⁸R⁹、 CH＝CHCOOR¹⁰、CH＝CHCH₂NR⁸R⁹、CH＝CHCH₂NR⁸R⁹、 CH＝CHCH₂OR¹⁰、(CH₂)_nN(COOR¹⁰)COOR¹¹、 (CH₂)_nN(CONH₂)COOR¹⁰、(CH₂)_nN(CONH₂)CONH₂、 (CH₂)_nN(CH₂COOR¹⁰)COOR¹¹、(CH₂)_nN(CH₂CONH₂)COOR¹⁰、 (CH₂)_nN(CH₂CONH₂)CONH₂、(CH₂)_nCHR¹⁰COR¹¹、 (CH₂)_nCHR¹⁰COOR¹¹、(CH₂)_nCHR¹⁰CH₂OR¹¹、(CH₂)_nOCN和 (CH₂)_nNCO，

R⁸、R⁹彼此独立地选自H、A、(CH₂)_mAr¹和(CH₂)_mHet，或在 NR⁸R¹⁹中R⁸和R⁹与它们所连接的N-原子一起形成5元、6元或7元 杂环，其任选地含有1或2个选自N、O和S的额外的杂原子，

R¹⁰、R¹¹彼此独立地选自H、Hal、A、(CH₂)_mAr²和(CH₂)_mHet，

A选自烷基、链烯基和环烷基，

Ar¹、Ar²彼此独立地为包含5至12个并优选5至10个碳原子的 芳烃残基，其任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：A、Hal、 NO₂、CN、OR¹²、NR¹²R¹³、COOR¹²、CONR¹²R¹³、NR¹²COR¹³、 NR¹²CONR¹²R¹³、NR¹²SO₂A、COR¹²、SO₂R¹²R¹³、S(O)_uA和OOCR¹²,

Het为含有3至14个碳原子和1或4个独立地选自N、O和S的 杂原子的饱和、不饱和的或芳香的单环或二环杂环残基，其任选地被 一个或多个选自以下的取代基取代：A、Hal、NO₂、CN、OR¹²、NR¹²R¹³、 COOR¹²、CONR¹²R¹³、NR¹²COR¹³、NR¹²CONR¹²R¹³、NR¹²SO₂A、 COR¹²、SO₂R¹²R¹²、S(O)_uA和OOCR¹²,

R¹²、R¹³彼此独立地选自H、A、和(CH₂)_mAr³，

Ar³为5元或6元芳烃，其任选地被一个或多个选自甲基、乙基、 丙基、2-丙基、叔丁基、Hal、CN、OH、NH₂和CF₃的取代基取代，

k、u、n和m彼此独立地为0、1、2、3、4、或5，

Hal彼此独立选自F、Cl、Br和I，

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明优选涉及所有上述的式I化合物，其中

R¹为其未被取代或被 R⁶单取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或 三取代，且

R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开的含义，及其生理学可接受 的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体，包括它们以所有比例 的混合物。

本发明优选涉及所有上述的式I化合物，其中

V为-CR⁴R⁵-，

R¹为其未被取代 或被R⁶单取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代 或三取代，且

R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开的含义，及其生理学可接受 的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体，包括它们以所有比例 的混合物。

本发明优选涉及所有上述的式I化合物，其中

V为单键

R¹为其未被取代 或被R⁶单取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代 或三取代，且

R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开的含义，及其生理学可接受 的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体，包括它们以所有比例 的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T彼此独立地为C或N，条件是X、Y、Q、U和 T中一个或多个为碳原子且M与碳原子键合，

V为单键或-CR⁴R⁵-，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H、烷基和环烷基，且

R²、R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开含义

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明特别优选的实施方案为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V为-CR⁴R⁵-，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代，

R²为H、含1至5个C-原子的烷基、CN、OH、OA或Hal，

R³为

其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H、烷基和环烷基，

R⁶为H、烷基、C(O)NHA或C(O)NHANH₂，

R⁷为H、烷基、环烷基、Hal、CF₃、＝O、CN、SA、C(O)A、 COOH、CONH₂、CONHA、CONA₂、CONHANHA、(CH₂)_nOH、 (CH₂)_nOA、OCH₂C(O)OA、O(CH₂)_nNH₂、O(CH₂)_nNHA、 O(CH₂)_nNA₂、O(CH₂)_nNASO₂A、AOH、OAOH、OAC(O)NH₂、 O(CH₂)_n杂环基、杂环基、SO₂CF₃或OANAC(O)OA且

n为0-3

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明特别优选的实施方案为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代，

R²为H、含1至5个C-原子的烷基、CN、OH、OA或Hal，

R³为

其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H、烷基和环烷基，

R⁶为H、烷基、C(O)NHA或C(O)NHANH₂，

R⁷为H、烷基、环烷基、Hal、CF₃、＝O、CN、SA、C(O)A、 COOH、CONH₂、CONHA、CONA₂、CONHANHA、(CH₂)_nOH、 (CH₂)_nOA、OCH₂C(O)OA、O(CH₂)_nNH₂、O(CH₂)_nNHA、 O(CH₂)_nNA₂、O(CH₂)_nNASO₂A、AOH、OAOH、OAC(O)NH₂、 O(CH₂)_n杂环基、杂环基、SO₂CF₃或OANAC(O)OA且

n为0-3

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

非常特别优选选自以下的式I化合物：

a)4-{4-[3-(3,5-二氯-吡啶-4-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰 胺

b)4-{4-[3-(2,6-二氯-吡啶-4-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰 胺

c)4-{4-[(3-吡啶-2-基-脲基)-甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

d)4-{4-[3-(2-甲氧基-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲 酰胺

e)4-{4-[(3-吡啶-3-基-脲基)-甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

f)4-{4-[3-(2-氯-吡啶-4-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

g)4-{4-[3-(3-氯-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2- 甲酸甲酰胺

h)4-{4-[3-(2,5-二氯-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰 胺

i)4-{4-[(3-异喹啉-3-基-脲基)-甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

j)4-{4-[(3-喹啉-3-基-脲基)-甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

k)4-{4-[3-(2-甲氧基-喹啉-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲 酰胺

l)4-{4-[3-(5-甲基-吡啶-2-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

m)4-{2-甲基-4-[3-(5-甲基-吡啶-2-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲 酸甲酰胺

n)4-{4-[3-(4-甲基-吡啶-2-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰 胺

o)4-{2-甲基-4-[3-(4-甲基-吡啶-2-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲 酸甲酰胺

p)4-{4-[3-(2-氯-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

q)4-{4-[3-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲 酰胺

r)1-(2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3-[4-(吡啶-4-基氧)-苄基]-脲

s)4-{4-[3-(2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2- 甲酸甲酰胺

t)4-{4-[3-(2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-脲甲基]-2-甲基-苯氧基}- 吡啶-2-甲酸甲酰胺

u)4-{4-[3-(5-氯-2-甲氧基-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲 酸甲酰胺

v)4-{4-[3-(2-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸 甲酰胺

w)4-{4-[3-(5-氯-2-甲氧基-吡啶-3-基)-脲甲基]-2-甲基-苯氧基}-吡 啶-2-甲酸甲酰胺

x)4-{4-[3-(2-氯-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2- 甲酸甲酰胺

y)4-{4-[3-(2-氯-5-甲基-吡啶-3-基)-脲甲基]-2-甲基-苯氧基}-吡啶 -2-甲酸甲酰胺

z)4-{4-[3-(2-氯-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-脲甲基]-2-甲基-苯氧基}- 吡啶-2-甲酸甲酰胺

aa)1-(5-氯-2-甲氧基-吡啶-3-基)-3-[4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄基]- 脲

bb)1-(5-氯-2-甲氧基-吡啶-3-基)-3-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基 氧)-苄基]-脲

cc)1-(2-氯-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3-[4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄 基]-脲

dd)1-(2-氯-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-3-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基 氧)-苄基]-脲

ee)1-(2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基 氧)-苄基]-脲

ff)1-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄基]-3-喹啉-3-基-脲

gg)1-(2-甲氧基-喹啉-3-基)-3-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄 基]-脲

hh)1-异喹啉-3-基-3-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄基]-脲

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

还尤其优选选自以下的式I化合物：

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T彼此独立地为C或N，条件是X、Y、Q、U和 T中一个或多个为碳原子且M与碳原子键合，

V为单键或-CR⁴R⁵-，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取代，且

R²、R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开含义

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明特别优选的实施方案为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键或-CR⁴R⁵-，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代、二取代或三取代，

R²为H、A、CN、OH、OA或Hal，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取 代，

R⁴、R⁵为H，

R⁶为H、A、＝O、CN、CF₃、Hal、COOH、C(O)NH₂、 C(O)NHA、C(O)NA₂、(CH₂)_nOH、(CH₂)_nOA、(CH₂)_n芳基，(CH₂)_n杂芳基或(CH₂)_n杂环基，

R⁷为H、A、＝O、CN、CH₂)_nOH、(CH₂)_nOA、CF₃、Hal、 COOH、(CH₂)_n芳基，(CH₂)_n杂芳基或(CH₂)_n杂环基，

A为烷基，且

n为0-3

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明特别优选的实施方案为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键或-CR⁴R⁵-，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代、二取代或三取代，

R²为H、A、CN、OH、OA或Hal，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取 代，

R⁴、R⁵为H，

R⁶为H、烷基、环烷基、＝O、CF₃、CN、(CH₂)_nOH、 (CH₂)_nOA、Hal、COOH、C(O)NH₂或C(O)NHA、

R⁷为H、＝O、A、CN、(CH₂)_nOH、(CH₂)_nOA、(CH₂)_n芳基、 Hal或CF₃，

A为烷基，且

n为0-3

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

特别优选式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V-CR⁴R⁵-,

M为O，

R¹和R⁶一起为

R²为H或含1至5个C-原子的烷基，

R³和R⁷一起为

R⁴、R⁵为H且

n为0-3

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

特别优选式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为O，

R¹和R⁶一起为

R²为H或含1至5个C-原子的烷基，

R³和R⁷一起为

R⁴、R⁵为H且

n为0-3

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

非常特别优选选自以下的式I化合物：

a)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-(1H-吡 咯并[2,3-b]吡啶-4-基氧)-苄基]-脲

b)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-(6-三氟 甲基-喹啉-4-基氧)-苄基]-脲

c)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-(1H-吡 咯并[2,3-b]吡啶-4-基氧)-苄基]-脲

d)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-([1,8]萘 啶-4-基氧)-苄基]-脲

e)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-(2-氧代 -1,2,3,4-四氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基氧)-苄基]-脲

f)1-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄基]-3-(1-甲基-2-氧代-5-三 氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲

g)4-{2-甲基-4-[3-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3- 基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

h)4-{4-[3-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲甲 基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

i)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-(喹啉-4- 基氧)-苄基]-脲

j)1-[3-甲基-4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基氧)-苄 基]-3-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲

k)4-{4-[3-(1-乙基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲甲 基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

l)4-{4-[3-(1-苄基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲甲 基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

m)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-(3-三 氟甲基-吡啶-4-基氧)-苄基]-脲

n)4-{4-[3-(1-羟甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲甲 基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

o)(3-{3-[4-(2-甲基氨甲酰基-吡啶-4-基氧)-苄基]-脲基}-2-氧代-5- 三氟-甲基-2H-吡啶-1-基)-乙酸

p)4-{4-[3-(1-氨基甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲 甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

q)4-{4-[3-(1-甲氨基甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)- 脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

r)4-{4-[3-(1-二甲氨基甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3- 基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为O，

X、Y、Q、U、T彼此独立地为C或N，条件是X、Y、Q、U和 T中一个或多个为碳原子且M与碳原子键合，

V为单键或-CR⁴R⁵-，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶ 单取代、二取代或三取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H、烷基和环烷基，且

R²、R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开含义

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为O，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键或-CR⁴R⁵-，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代、二取代或三取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取 代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H、烷基和环烷基，且

R²、R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开含义

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

特别优选式I化合物，其中

W为O，

X、Y、Q、U、T为C，

V为-CR⁴R⁵-,

M为O，

R¹和R⁶一起为

R²为H或含1至5个C-原子的烷基，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取 代或三取代，

R⁴、R⁵为H，

R⁷为含1-5个C-原子的烷基、CN、OH、OA、Hal或CF₃

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

特别优选式I化合物，其中

W为O，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为O，

R¹和R⁶一起为

R²为H或含1至5个C-原子的烷基，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取 代或三取代，

R⁴、R⁵为H，

R⁷为含1-5个C-原子的烷基、CN、OH、OA、Hal或CF₃

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

非常特别优选选自以下的式I化合物：

a)(2-羟基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-氨基甲酸3-甲基-4-(2-甲基氨甲 酰基-吡啶-4-基氧)-苄基酯

b)(2-羟基-5-甲基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-(2-甲基氨甲酰基-吡啶 -4-基氧)-苄基酯

c)(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-氨基甲酸4-(2-甲基氨甲酰基-吡啶-4-基 氧)-苄基酯

d)(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-氨基甲酸3-甲基-4-(2-甲基氨甲酰基- 吡啶-4-基氧)-苄基酯

e)(2-羟基-5-三氟甲基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-(2-甲基氨甲酰基-吡 啶-4-基氧)-苄基酯

f)(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-氨基甲酸4-(2-甲基氨甲酰基-吡啶-4-基 氧)-苄基酯

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T彼此独立地为C或N，条件是X、Y、Q、U和 T中一个或多个为碳原子且M与碳原子键合，

V为单键，

M为O

R¹为其未被取代或被R⁶单取代、二取代或三取代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、 二取代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H、烷基和环烷基，且

R²、R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开含义

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为-CR⁴R⁵-，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代、二取代或三取代，

R²为H、A、CN、OH、OA或Hal，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、 二取代或三取代，

R⁴、R⁵彼此独立地选自H、烷基和环烷基，且

R⁶、R⁷彼此独立地选自H、含1-5个C-原子的烷基、＝O、CN、 Hal、CF₃、OH、OA、COOH、C(O)NH₂和C(O)NHA、

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

特别优选式I化合物，其中

W为N，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为-CR⁴R⁵-，

R¹和R⁶一起为

R²为H，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取 代，

R⁴、R⁵为H，

R⁷为H、含1-5个C-原子的烷基、＝O、CF₃,OH、OA或Hal，

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

非常特别优选选自以下的式I化合物：

a)1-[4-(4-氧代-4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-苯 基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲

b)1-[4-(3-甲基-4-氧代-4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)- 苯基]-3-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-脲

c)1-(2-甲氧基-5-三氟甲基-苯基)-3-[4-(3-甲基-4-氧代-4,5-二氢 -3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-苯基]-脲

d)1-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-3-[4-(4-氧代 -4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-苯基]-脲

e)1-(5-甲基-吡啶-3-基)-3-[4-(4-氧代-4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡 啶-2-基甲基)-苯基]-脲

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为CH₂、CH₂CH₂、CH₂CHOH或-(CH₂)O-，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为O，

R¹为其未被取代或被R⁶单取代、二取代或三取 代，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、 二取代或三取代，

R²、R⁶和R⁷彼此独立地具有上文中公开含义

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为CH₂、CH₂CH₂、CH₂CHOH或-(CH₂)O-，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为O，

R¹为其未被取代或 被R⁶单取代、二取代或三取代，

R²为H或含1-5个C-原子的烷基，

R³为其未被取代或被R⁷单取代、二取代或三取 代，

R⁶为H、烷基、环烷基、＝O、CF₃、CN、(CH₂)_nOH、 (CH₂)_nOA、Hal、COOH、C(O)NH₂或C(O)NHA、

R⁷为H、＝O、A、CN、(CH₂)_nOH、(CH₂)_nOA、Hal或CF₃，

A为烷基，且

n为0-3

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

本发明另一个优选的实施方案优选为式I化合物，其中

W为CH₂、CH₂CH₂、CH₂CHOH或-(CH₂)O-，

X、Y、Q、U、T为C，

V为单键，

M为O，

R¹和R⁶一起为

R²为H或含1-5个C-原子的烷基，且

R³和R⁷一起为

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

非常特别优选选自以下的式I化合物：

a)4-{4-[(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨甲酰基)-甲基]-2-甲基-苯氧基}- 吡啶-2-甲酸甲酰胺

b)4-{4-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨甲酰基)-1-羟基-乙基]-2-甲基- 苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

c)4-{4-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨甲酰基)-乙基]-2-甲基-苯氧 基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

d)4-{4-[(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基氨甲酰 基)-甲氧基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

e)N-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-2-[4-(2-氧代 -1,2,3,4-四氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基氧)-苯氧基]-乙酰胺

f)N-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-2-[4-(2-氧代-1,2,3,4-四氢-吡啶并 [2,3-d]嘧啶-5-基氧)-苯氧基]-乙酰胺

g)N-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-2-[4-(喹啉 -4-基氧)-苯氧基]-乙酰胺

h)2-[4-(3a,7a-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基氧)-苯氧基]-N-(1- 甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-乙酰胺

i)4-{4-[(2-羟基-5-三氟甲基-吡啶-3-基氨甲酰基)-甲基]-2-甲基-苯 氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

j)4-{2-甲基-4-[(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基氨 甲酰基)-甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺

k)2-[3-甲基-4-(3-甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-5- 基氧)-苯基]-N-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3-基)-乙酰胺

l)N-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-2-[3-甲基-4-(3-甲基-2-氧代-1,2,3,4- 四氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-5-基氧)-苯基]-乙酰胺

及其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体， 包括它们以所有比例的混合物。

如果上述氨基酸可以多种对映体形式存在，则在上文和下文中包 括所有这些形式以及它们的混合物(例如DL形式)。

此外，缩写具有下述含义：

Boc        叔丁氧羰基

CBZ        苄氧羰基

DNP        2,4-二硝基苯基

FMOC       9-芴基甲氧羰基

imi-DNP    在咪唑环1-位上的2,4-二硝基苯基

OMe        甲酯

POA        苯氧乙酰基

DCCI       二环己基碳二亚胺

HOBt       1-羟基苯并三唑

Hal表示氟、氯、溴或碘，尤其是氟或氯。

A为无支链的(直链)、分支的或环状的烃链且含1、2、3、4、5、 6、7、8、9或10个C原子。优选地表示甲基，此外还有乙基，丙基， 异丙基，丁基，异丁基，仲丁基或叔丁基，此外也可以是戊基，1-、 2-或3-甲基丁基，1,1-、1,2-或2,2-二甲基丙基，1-乙基丙基，己基， 1-、2-、3-或4-甲基戊基，1,1-、1,2-、1,3-、2,2-、2,3-或3,3-二甲基丁 基，1-或2-乙基丁基，1-乙基-1-甲基丙基，1-乙基-2-甲基丙基，1,1,2- 或1,2,2-三甲基丙基，直链或分支的庚基、辛基、壬基或癸基。

环烷基优选地表示(如果A为环状则它表示)环丙基、环丁基、环 戊基、环己基或环庚基。

另外，A还表示链烯基如乙烯基、丙烯基、丁烯基等。

“烷基”、以及具有前缀“烷(alk)”的其它基团如烷氧基和烷 酰基，指可以是直链或分支的、及其组合的碳链，除非该碳链另有定 义。烷基基团的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲和叔 丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基等。尤其优选C₁-C₅烷基。 C₁-C₅烷基基团为例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、 叔丁基或戊基。

“芳基”、“Ar”或“芳烃残基”指含有碳环原子的单环或多环 芳环系统。优选的芳基为单环或双环的6-10元芳环系统。“芳基”基团 的实例包括但不限于苯基、2-萘基、1-萘基、联苯基、茚满基以及其 取代的衍生物。最优选的芳基为苯基。

“杂环”和“杂环基”指含有至少一个选自O、S和N的杂原子 (其它杂原子包括硫的氧化形式，即SO和SO₂)的饱和或不饱和的 非芳香环或环系。杂环的实例包括四氢呋喃(THF)、二氢呋喃、1,4- 二噁烷、吗啉、1,4-二噻烷、哌嗪、、1,3-二氧戊环、咪唑烷、咪 唑啉、吡咯啉、吡咯烷、四氢吡喃、二氢吡喃、氧硫杂环戊烷 (oxathiolane)、二硫戊环、1,3-二噁烷、1,3-二噻烷、氧硫杂环己烷、 硫代吗啉等。

“杂芳基”指含有至少一个选自O、S和N的环杂原子的芳香或 部分芳香的杂环。因此杂芳基包括与其它种类的环如芳基、环烷基和 非芳香杂环稠合的杂芳基。杂芳基基团的实例包括：吡咯基、异噁唑 基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、噻 唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、三嗪基、噻吩基、嘧啶基、 苯并异噁唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、二氢苯并 呋喃基、二氢吲哚基、哒嗪基、吲唑基、异噁唑基、异吲哚基、二氢 苯并噻吩基、吲嗪基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、二氮杂萘基、咔 唑基、苯并二噁英基(benzdioxinyl)、苯并二氧杂环戊烯基、喹喔啉 基、嘌呤基、呋咱基、噻吩基、异苄基呋喃基(isobenzylfuranyl)、 苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、喹啉基、吲哚基、异喹啉基、 二苯并呋喃基等。至于杂环基和杂芳基基团，包括含有3-15个原子的 环和环系，形成1-3个环。

根据本发明还有所有这些化合物的生理学可接受的盐、衍生物、 溶剂合物和立体异构体，包括它们以所有比例的混合物。

本发明还涉及这些化合物的旋光活性形式(立体异构体)、对映异 构体、外消旋体、非对映异构体以及水合物和溶剂合物。

本发明的式I化合物由于它们的分子结构可能是手性，因而可能 以各种对映体形式存在。因此它们可能是外消旋体或旋光体形式。由 于本发明化合物的外消旋体或立体异构体的药物效力可能不同，因而 使用对映异构体可能是期望的。在这些情况下，最终产品、而且甚至 是中间产品，可通过本领域技术人员已知的或本身已在合成中运用的 化学或物理措施而分离成对映体化合物。

药学或生理学上可接受的衍生物指例如本发明化合物的盐以及所 谓的前药化合物。前药化合物指式I化合物,其已经用例如烷基或酰基 基团(也参见下文的氨基保护基和羟基保护基)、糖或寡肽修饰并且 在有机体内迅速地裂解或释放生成本发明的有效化合物。这些还包括 本发明化合物的可生物降解的聚合物衍生物，如描述于例如Int.J. Pharm.115(1995),61-67中的可生物降解的聚合物衍生物。

适宜的酸加成盐为所有生理学或药理学上可接受的酸的无机或有 机盐，例如卤化物，尤其盐酸盐或氢溴酸盐、乳酸盐、硫酸盐、枸橼 酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、草酸盐、乙酸盐、磷酸盐、 甲基磺酸盐或对甲苯磺酸盐。

式I化合物的溶剂合物指惰性溶剂分子在式I化合物上的加合物， 由于它们之间的相互吸引力形成。溶剂合物为例如水合物，如一水合 物或二水合物，或醇化物，即与醇(例如用甲醇或乙醇)的加成化合 物。

本发明还涉及本发明的式I化合物的混合物，例如两种非对映异 构体例如以1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:10、1:100或1:1000比例的 混合物。它们特别优选为两种立体异构化合物的混合物。

本发明的另一实施方案为一种制备式I化合物的方法，特征在于 化合物通过结构单元的逐步反应来制备(参见实施例2)。

可能的是在各种情况下逐步进行反应和改变结构单元的连接反应 的顺序以适应保护基团概念。

起始原料或起始化合物是公知的。如果它们是新的，则它们可通 过本身已知的方法来制备。

如有需要，起始原料也可原位生成，就此不从反应混合物中分离 出来，而是立即将它们进一步转化为式I化合物。

式I化合物优选地通过经溶剂分解(尤其是经水解、或经氢解) 从它们的官能团衍生物上将它们释放来获得。溶剂分解或氢解优选的 起始原料是含相应地带保护基的氨基、羧基和/或羟基的那些，而不是 含一个或多个自由的氨基、羧基和/或羟基的那些，优选载有氨基保护 基团的那些，而不是载有与N原子连接的H原子的那些。进一步地优 选载有羟基保护基的起始原料，而不是载有羟基的H原子的起始原料。 还优选载有带保护基的羧基而不是自由羧基的起始原料。也是可能的 是多个相同或不同的带保护基的氨基、羧基和/或羟基存在于起始原料 的分子中。如果存在的保护基相互不同，则它们可在许多情况下选择 性地裂解。

作为起始原料使用的式I化合物的官能团衍生物可通过氨基酸和 肽合成的已知方法来制备，例如在所述标准著作和专利申请中描述的 方法。

式I化合物从其官能团衍生物释放，依赖于所用的保护基，例如 在强酸的帮助下，有利地使用三氟乙酸或高氯酸，但也可使用其它无 机强酸，如盐酸或硫酸，有机强酸，如三，或磺酸，如苯甲酰 基-或对甲苯磺酸。另外的惰性溶剂和/或催化剂的存在是可能的，但 并不总是必要的。

取决于各自的合成路线，起始原料可任选地在惰性溶剂的存在下 反应。

适宜的惰性溶剂为例如庚烷，己烷，石油醚，DMSO，苯，甲苯， 二甲苯，三氯乙烯，1,2二氯乙烷，四氯化碳，氯仿或二氯甲烷；醇类， 如甲醇，乙醇，异丙醇，正丙醇，正丁醇或叔丁醇；醚类，如乙醚， 二异丙醚(优选在吲哚氮上取代)，四氢呋喃(THF)或二噁烷；乙二 醇醚，如乙二醇单甲醚或单乙醚，乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮 类，如丙酮或丁酮；酰胺类，如乙酰胺，二甲基乙酰胺，N-甲基吡咯 烷酮(NMP)或二甲基甲酰胺(DMF)；腈类，如乙腈；酯类，如乙酸乙 酯，羧酸类或酸酐类，例如乙酸或乙酸酐；硝基化合物，如硝基甲烷 或硝基苯，任选地还可以是所述溶剂相互的混合物或与水的混合物。

溶剂的量不重要；优选地每g待反应的式I化合物可加入10g至 500g的溶剂。

可能是有利的是，添加缚酸剂，例如碱金属或碱土金属氢氧化物、 碳酸盐或碳酸氢盐或其它弱酸的碱金属或碱土金属盐，优选钾盐、钠 盐或钙盐，或者添加有机碱，例如三乙胺、二甲胺、吡啶或喹啉，或 过量的胺组分。

可将所得的本发明化合物与制备它们的相应溶液分离(例如通过 离心和洗涤)，并可在分离后贮存在另一组合物中，或者它们可直接 保留在制备溶液中。所获得的本发明化合物也可在用于特定用途所期 望的溶剂中收纳。

适宜的反应温度为0至40℃的温度，优选5至25℃。

反应持续时间依赖于所选择的反应条件。通常，反应持续时间为 0.5小时至10天，优选1至24小时。使用微波炉时，反应时间可缩短 到1至60分钟。

另外，式I化合物以及制备它们的起始原料通过已知的方法来制 备，如描述于文献中的方法(例如在标准著作中，如Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie[有机化学的方法],Georg-Thieme- Verlag,Stuttgart)，例如在已知的并且适合于所述反应的反应条件下 制备。本发明中还可运用本身已知的变化形式，这在本文中没有更详 细地描述。

常规的精制步骤，例如加水至反应混合物中并萃取，使得能够在 除去溶剂之后得到化合物。这之后将产物经蒸馏或结晶或进行谱纯 化进一步纯化可能是有利的。

本发明的另一实施方案为一种制备式I化合物的方法，特征在于

a)通过用酸处理将式I化合物的碱转变为其盐中的一种，或者

b)通过用碱处理将式I化合物的酸转变为其盐中的一种。

式I的酸可用碱转变为相关的加成盐，例如通过将等量的酸和碱 在惰性溶剂如乙醇中反应和随后蒸发进行。用于此反应的适宜的碱尤 其为可提供生理学可接受的盐的那些。因此，式I的酸可用碱(例如 氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾)转变为相应的金属盐，尤其 是碱金属盐或碱土金属盐，或转变为相应的铵盐。可提供生理学可接 受的盐的有机碱例如乙醇胺也适于此反应。

另一方面，式I的碱可使用酸转变为相关的酸加成盐，例如通过 将等量的碱和酸在惰性溶剂如乙醇中反应并随后蒸发进行。用于此反 应的适宜的酸尤其为可提供生理学可接受的盐的那些。因此，可以使 用无机酸，例如硫酸，硝酸，氢卤酸如盐酸或氢溴酸，磷酸如正磷酸， 氨基磺酸，此外还可以使用有机酸，尤其脂肪羧酸，脂环羧酸，芳脂 羧酸，芳香羧酸或杂环羧酸，单羧酸或多元羧酸，磺酸或硫酸，例如 甲酸，乙酸，丙酸，特戊酸，二乙基乙酸，丙二酸，琥珀酸，庚二酸， 富马酸，马来酸，乳酸，酒石酸，苹果酸，枸橼酸，葡糖酸，抗坏血 酸，烟酸，异烟酸，甲磺酸或乙磺酸，乙二磺酸，2-羟基磺酸，苯磺 酸，对甲苯磺酸，萘单磺酸和萘二磺酸或月桂基硫酸。与生理学不能 接受的酸形成的盐，例如盐，可用于分离和/或纯化式I化合物。

已经发现式I化合物耐受良好且具有有价值的药理特性，因为它 们能选择性抑制DDR2。

因此本发明还涉及本发明化合物用于制备和/或预防由DDR2 和/或由DDR2-媒介的信号转导引起、介导和/或传播的疾病的药物的 用途。

因此本发明还涉及，尤其是，用于和/或预防生理和/或病理 生理状态的、包含至少一种本发明的化合物和/或其生理学可接受的 盐、衍生物、溶剂合物和立体异构体包括它们以所有比例的混合物之 一的药物。

特别优选，尤其是，与DDR2有关联的生理和/或病理生理状态。

生理和/或病理生理状态指医学上相关的生理和/或病理生理状 态，例如疾病或生病和医学紊乱、难受(complaints)、病征或并发 症等，尤其是疾病。

因此本发明还涉及包含至少一种本发明的化合物和/或其生理学 可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体(包括它们以所 有比例的混合物)之一的药物，用于和/或预防选自骨关节炎、肝 硬化、创伤性软骨损伤、疼痛、异常性疼痛和痛觉过敏的生理和/或病 理生理状态。

本发明尤其优选的实施方案为包含至少一种本发明的化合物和/ 或其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体(包 括它们以所有比例的混合物)之一的药物，用于和/或预防选自骨 关节炎和疼痛的生理和/或病理生理状态。

本发明还涉及包含至少一种本发明的化合物和/或其生理学可接 受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立体异构体(包括它们以所有比 例的混合物)之一的药物,用于和/或预防选自阿尔茨海默病、亨 廷顿病、粘脂病、接触性皮炎、迟发型过敏性反应、炎症、子宫内膜 异位症、瘢痕、佝偻病、皮肤病例如银屑病、免疫性疾病、自身免疫 性疾病和免疫缺陷病的生理和/或病理生理状态。

疼痛是一种复杂的感官知觉，其作为急性事件，具有警告和控制 信号的特征，但作为慢性疼痛已经失去这种作用，在这种情况下(作 为慢性疼痛综合征)现在应当被视为是一种独立的病征和作为一种独 立的病征进行。痛觉过敏是在医学中用于对疼痛过度敏感和对通 常的疼痛刺激过度反应而使用的术语。可触发疼痛的刺激是例如压力、 热、冷或炎症。痛觉过敏是一种感觉过敏的形式，用于对刺激过度敏 感的通用术语。异常性疼痛是在医学中使用的被通常不引起疼痛的刺 激触发的疼痛感觉的术语。

意图是上文公开的药物包括本发明的化合物用于制备和/或 预防上述生理和/或病理生理状态的药物的相应应用。

另外的意图是上文公开的药物包括和/或预防上述生理和/或 病理生理状态的相应方法，其中将至少一种本发明的化合物施用于需 要此种的患者。

本发明的化合物优选显示出有利的生物学活性，这种生物学活性 可在实施例描述的酶活性测定和动物实验中容易证实。在此种基于酶 的试验中，本发明的化合物优选显示出和产生抑制作用，这通常通过 适宜范围内、优选在微摩尔的范围内、更优选在纳摩尔的范围内的IC₅₀值记载。

本发明的化合物可施用于人或动物，尤其是哺乳动物，如猿、狗、 猫、大鼠或小鼠，可用于人或动物体和用于对抗以上提到的疾病。 它们还可用作诊断剂或试剂。

进一步地，本发明的化合物可用于DDR2的分离和用于DDR2的 活性或表达的研究。此外，它们特别适用于与被扰乱的DDR2活性有 关的疾病的诊断方法。因此本发明还涉及本发明的化合物用于DDR2 的分离和用于DDR2的活性或表达的研究或作为DDR2的结合剂和抑 制剂的用途。

为了诊断目的，可将本发明的化合物例如进行放射活性标记。放 射性标记的实例为³H、¹⁴C、²³¹I和¹²⁵I。优选的标记方法为碘化法 (iodogen method)(Fraker等，1978)。此外，本发明的化合物可 用酶、荧光团和发团(chemophores)标记。酶的实例是碱性磷酸 酶、β-半乳糖苷酶和葡萄糖氧化酶，荧光团的实例是荧光素，发团 (chemophore)的实例是鲁米诺，自动化检测系统例如用于荧光呈 的自动化检测系统，例如在US4,125,828和US4,207,554中有描述。

式I化合物可用于制备药物组合物，特别是通过非化学方法制备。 在此使它们与至少一种固体、液体和/或半液体的赋形剂或助剂一起以 及任选地与一种或多种其它活性成分组合成为适宜的剂型。

因此本发明还涉及药物组合物，其包含至少一种式I的化合物和/ 或其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括它们 以所有比例的混合物。尤其，本发明还涉及包含其它赋形剂和/或助剂 的药物组合物、以及包含至少一种其它药物活性成分的药物组合物。

尤其，本发明还涉及制备药物组合物的方法,特征在于使式I化 合物化合物和/或其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂合物、前药和立 体异构体(包括它们所有比例的混合物)之一，与固体、液体或半液 体的赋形剂或助剂一起，以及任选地与其它药物活性成分一起，成为 适宜的剂型。

本发明的药物组合物可用作人药或兽药的药物。患者或宿主可属 于任何哺乳动物物种，例如灵长类物种，特别是人；啮齿类，包括小 鼠、大鼠和仓鼠；兔；马、牛、狗、猫等。动物模型对于实验研究是 有价值的，其中它们提供人疾病的模型。

适宜的载体物质为适于经肠(例如口服)、肠胃外或局部施用的 并且不与新化合物起反应的有机或无机物，例如水，植物油(如向日 葵油或鱼肝油)，苯甲醇，聚乙二醇，明胶，碳水化合物如乳糖或淀 粉，硬脂酸镁，滑石粉，羊毛脂或凡士林。由于其专业知识，本领域 技术人员熟悉适于期望的药物制剂的助剂。除溶剂(例如水，生理盐 溶液或醇例如乙醇、丙醇或甘油，糖溶液如葡萄糖或甘露醇溶液，或 所述溶剂的混合物，凝胶形成剂，片剂辅助剂及其它活性成分载体) 之外，还可以例如使用润滑剂、稳定剂和/或湿润剂、乳化剂、影响渗 透压的盐、抗氧化剂、分散剂、消泡剂、缓冲剂、调味剂和/或芳香剂 或矫味剂、防腐剂、增溶剂或染料。如有需要，本发明的组合物或药 物可包含一种或多种其它活性成分，例如一种或多种维生素。

术语“药物制剂”和“药物组合物”对于本发明而言作为同义词 使用。

如本文中使用的“药物耐受的”涉及药物、沉淀剂、赋形剂、助剂、 稳定剂、溶剂及其它试剂，它们使得由它们获得的药物组合物施用于 哺乳动物而没有不期望的生理副作用例如恶心、头晕、消化问题等。

在肠胃外给药的药物组合物中，要求制剂(低毒)、所用的助剂 和最初的包装等渗性、水合正常和耐受性和安全性。令人惊奇地，本 发明的化合物优选地具有以下优点：直接使用是可能的，因而在本发 明的化合物以药物制剂形式应用之前无需进一步的纯化步骤以除去毒 理学不能接受的试剂，例如高浓度的有机溶剂或其它毒理学不能接受 的助剂。

本发明特别优选地还涉及药物组合物，其包含以沉淀的非晶体、 沉淀的晶体形式或以溶解的或混悬的形式的至少一种本发明的化合 物、和任选的赋形剂和/或助剂和/或其它药物活性成分。

本发明的固体化合物优选地使得能够制备高浓度制剂，而不出现 不利的、不期望的本发明的化合物聚集。因此，可借助本发明的化合 物与水性溶剂或在水性介质中制备具有高活性成分含量的即用溶液。

还可将该化合物和/或其生理学可接受的盐和溶剂合物冻干，且所 得冻干物可例如用于制备注射制剂。

水性组合物可通过将本发明的化合物溶解或混悬于水溶液中和任 选地加入助剂来制备。为此目的，有利地将所定义体积的储备溶液加 入到含所定义浓度的本发明化合物的溶液或悬浮液中，其中储备溶液 包含所定义浓度的所述其它助剂，并任选地将混合物用水稀释至预先 计算的浓度。可替代的是，助剂可以固体形式加入。得到的水溶液或 悬浮液中可随即加入每种情况下所需量的储备溶液和/或水。还可将本 发明的化合物有利地直接溶解或混悬于包含所有其它助剂的溶液中。

可有利地制备包含本发明化合物的、pH为4至10、优选pH为5 至9、和渗透压度为250至350mOsmol/kg的溶液或悬浮液。因此该 药物组合物可基本上无疼痛地直接静脉内、动脉内、关节内、皮下或 经皮施用。此外，该制剂也可加入到输注溶液，例如葡萄糖溶液、等 张盐溶液或林格氏液中，这些输注溶液还可含其它活性成分，从而也 使得能够施用相对大量的活性成分。

本发明的药物组合物也可包含多个本发明化合物的混合物。

本发明的组合物为生理学上耐受良好，易于制备，可精确计量并 且优选地整个存贮和运输过程中和在多重冻融过程中就试验、分解产 物和聚集而言是稳定的。它们优选地在冰箱温度(2-8℃)下和在室温 (23-27℃)下和60％相对大气湿度(R.H.)稳定贮存至少3个月至两 年的时间。

例如，本发明的化合物可通过干燥以稳定的方式贮存且必要时通 过溶解或混悬转变为即用药物组合物。可能的干燥方法是例如，不局 限于这些实例，氮气干燥、真空烘干、冷冻干燥、用有机溶剂洗涤并 随后风干、液体床干燥、流化床干燥、喷雾干燥、滚筒干燥、层干燥、 在室温下风干和其它方法。

术语“有效量”表示在组织、系统、动物或人中引起生物学或医 学响应的药物或药物活性成分的量，其是例如研究人员或医生所研究 或期望的。

此外，术语“有效量”表示与没有接受此量的相应受试者相 比较有下述结果的量：改善的，痊愈，疾病、病征、疾病状态、 难受、紊乱的预防或消除或副作用的预防或疾病、难受或病症的发展 减轻。术语“有效量”还包括对增强正常的生理机能有效的量。

应用本发明的组合物或药物时，本发明的化合物和/或其生理学可 接受的盐和溶剂合物通常以类似于已知的、商购可得的的组合物或制 剂使用，优选以每使用单位0.1至500mg、尤其是5至300mg的剂量 使用。日剂量优选为0.001至250mg/kg体重，尤其是0.01至100mg/kg 体重。组合物可每天施用一次或多次，例如每天两次、三次或四次。 然而，患者的个体剂量依赖于很多个体因素，例如依赖于所用的具体 化合物的效力，依赖于年龄、体重、总的健康状态、性别、营养，依 赖于给药时间和方法，依赖于排泄率，依赖于与其它药物的组合以及 依赖于具体疾病的严重程度和持续时间。

在有机体内药物活性成分的摄取的测量是其生物利用度。如果将 药物活性成分以注射溶液剂的形式静脉内递送至有机体内，其绝对生 物利用度即以无变化的形式到达系统血液即主要循环的药物的比例为 100％。在活性成分口服给药的情况下，活性成分通常在制剂中为 固体形式，因此必须首先溶解以便它能克服进入屏障，例如胃肠道、 口腔粘膜、鼻粘膜或皮肤尤其是角质层，或者能被身体吸收。关于药 代动力学即关于生物利用度的数据，可按类似于J.Shaffer等，J. Pharm.Sciences,88(1999),313-318的方法获得。

进一步，此类型的药物可按药物领域中公知的方法之一来制备。

药物可适于经任何期望的适宜途径施用，例如通过口腔(包括颊 内或舌下)、直肠、肺、鼻、局部(包括颊内、舌下或透皮)、阴道 或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内、皮内以及特别是关节内)途径 施用。此类型的药物可通过药物领域中所有已知的方法来制备，例如 通过将活性成分与赋形剂或助剂组合来制备。

肠胃外给药优选适合于本发明药物的施用。在肠胃外给药的情况 下，关节内施用为特别优选。

因此本发明还涉及用于关节内施用的本发明的药物组合物在 和/或预防选自骨关节炎、创伤性软骨损伤、疼痛、异常性疼痛或痛觉 过敏的生理和/或病理生理状态中的用途。.

关节内施用有如下的优点：本发明的化合物可直接施用到关节软 骨附近的滑膜液中，而且还能从那里扩散到软骨组织中。因此本发明 的药物组合物也可直接注入关节间隙中，因此可直接在预定的作用部 位发挥其作用。本发明的化合物还适于制备活性成分缓释、持续释放、 和/或控释的肠胃外施用的药物。因此它们还适于制备长效制剂，这对 患者是有利的，因为只需要在相对大的时间间隔施用。

适于肠胃外给药的药物，包括含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶 质(通过这些试剂使得制剂与受的接受者的血液或滑膜液等张) 的水性和非水性无菌注射溶液剂；以及可包含混悬介质和增稠剂的水 性和非水性灭菌混悬剂。所述制剂可在单剂量或多剂量容器(例如密 封的安瓿和小瓶)中递送，和以冷冻干燥(冻干)状态贮存，使得只 需要在临用前立即加入无菌载体液体，例如注射用水。按照配方制备 的注射溶液剂和混悬剂可由无菌粉末、颗粒剂和片剂制备。

本发明的化合物也可以脂质体递送系统的形式(例如，小单层囊 泡、大单层囊泡和多层囊泡)施用。脂质体可由各种磷脂例如胆固醇、 硬脂胺或磷脂酰胆碱形成。

本发明的化合物还可与作为靶向药物赋形剂的可溶性聚合物偶 联。此类聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基 丙烯酰胺苯酚、聚羟乙基门冬酰胺苯酚或被棕榈酰基基团取代的聚氧 乙烯聚赖氨酸。本发明的化合物可进一步与适于实现药物缓释的可生 物降解的聚合物偶联，其中可生物降解的聚合物为例如聚乳酸，聚ε- 己内酯，聚，聚原酸酯，聚缩醛，聚二羟基吡喃，聚氰基丙 烯酸酯，聚乳酸-乙醇酸共聚物，聚合物如右旋糖酐和甲基丙烯酸酯之 间的轭合物，聚磷酸酯，各种多糖和聚胺和聚-ε-己内酯，白蛋白，壳 聚糖，胶原蛋白或改性明胶和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。

适合于经肠施用(口腔或直肠)的尤其是片剂、糖衣片、胶囊、糖 浆剂、汁液、滴剂或栓剂，适合于局部应用的是软膏、霜剂、糊剂、 洗剂、凝胶剂、喷雾剂、泡沫剂、气雾剂、溶液(例如在醇如乙醇或异 丙醇、乙腈、DMF、二甲基乙酰胺、1,2-丙二醇或它们相互和/或与水 的混合物中的溶液)或粉末。脂质体组合物也特别适合于局部应用。

在配制得到软膏的情况下，活性成分可与石蜡霜基或与水混溶的 霜基一起使用。作为替代，活性成分可与水包油霜基或与油包水基质 一起配制成霜剂。

适应于透皮施用的药物可作为独立的贴剂用于与接受者的表皮长 时间、密切接触给药。因此例如贴剂中的活性成分可借助离子电渗递 送，如Pharmaceutical Research,3(6),318(1986)中一般性描述。

不言而喻，除上面特别提及的组分之外，根据药物制剂的特定类 型本发明的药物还可包含现有技术中其它常用试剂。

本发明还涉及由下列分开的包装构成的试剂盒

a)有效量的式I化合物和/或其生理学可接受的盐、衍生物、溶剂 合物、前药和立体异构体，包括它们以所有比例的混合物，和

b)有效量的其它药物活性成分。

所述试剂盒包括适宜的容器，如盒子或纸盒，单独的瓶子、袋或 安瓿。所述试剂盒例如可包含分开的安瓿，每个安瓿装有溶解或冻干 形式的有效量的式I化合物和/或其药学上可接受的、衍生物溶剂合物、 前药和立体异构体(包括它们以所有比例的混合物)、和有效量的其 它药物活性成分。

此外，本发明的药物可在某些已知的中使用以提供累加或协 同作用和/或可使用以恢复某些当前的效力。

除本发明的化合物之外，本发明的药物组合物还可包含其它药物 活性成分，例如用于骨关节炎的其它DDR2抑制剂，组织蛋白酶 D抑制剂，ADAMTS5抑制剂,NSAIDS，Cox-2抑制剂，糖皮质激素， 透明质酸，硫唑嘌呤，甲氨蝶呤，抗CAM抗体例如抗ICAM-1抗体， FGF-18。为所提及的其它疾病，除本发明的化合物之外，本发明 的药物组合物还可包含在其中本领域技术人员已知的其它药物活 性成分。

即使没有其它说明，也可以设想本领域技术人员能在最宽的范围 内应用上面的描述。因此优选的实施方案应当仅仅被认为是描述公开 的内容，无论如何绝不是起限制作用。

因此下列实施例旨在解释本发明而不是限制本发明。除非另有所 指，百分比数据表示重量百分比。所有温度以摄氏温度表示。“常规 的精制”：如有必要加入水，如有必要根据最终产品的组成将pH值 调至2至10之间，混合物用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，相分离，有机 相经硫酸钠干燥，过滤并蒸干，并将产物在硅胶上通过谱纯化和/ 或通过结晶纯化。

硅胶上的Rf值；质谱法：EI(电子碰撞电离)：M⁺，FAB(快 原子轰击)：(M+H)⁺,THF(四氢呋喃)，NMP(N-甲基吡咯烷酮)， DMSO(二甲亚砜)，EA(乙酸乙酯)，MeOH(甲醇)，TLC(薄 层谱法)。

下列物质已经被合成和表征。然而，这些物质的制备和表征也可 由本领域技术人员按其它方法进行。

实施例1：示例性的式I化合物

表1a

表1b-表1a中化合物的NMR数据

表2

表3a

表3b-表3a中化合物的NMR数据

表4

表4b-表4a中化合物的NMR数据

表5a

表5b-表5a中化合物的NMR数据

表6

为避免任何疑问，在所有本发明化合物的化学名称与该化合物的 化学结构的描述错误地不相符的情况下，本发明的化合物由化学结构 的描述清楚地定义。

实施例2：本发明化合物的制备

本发明的化合物可例如通过本领域技术人员已知的方法按下述合 成顺序来制备。所述实施例是描述合成，而不是将后者限制到实施例。

实施例2.1.：1-(2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3-[3-甲基-4-(2-甲基- 吡啶-4-基氧)-苄基]-脲的合成

1.3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苯甲腈的合成

将4-氯-2-甲基-吡啶(1.00g，7.84mmol，1当量)和4-羟基-3-甲基 -苯甲腈(1.57g，11.76mmol，1.5当量)一起混合并加热约16h至160℃。 将反应混合物冷却降至室温，加入EtOAc和2N NaOH，将有机相分 离并用2N NaOH和水洗涤两次。将有机相分离，用饱和NaCl溶液一 次并经Na₂SO₄干燥。过滤后将有机相在真空中还原。棕残留物 (HPLC/MS：R_t＝1.227min，M+H 243.1)在空气中静置时变为晶体。

2)3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄胺的合成

将3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苯甲腈(1.20g，5.35mmol，1 当量)溶解于MeOH/NH₃(20％，5ml)中，加入作为催化剂的海绵镍(0.60 g)，并将混合物在H₂的气氛(5巴)下于50℃搅拌约16h。将反应混合 物在真空中还原。该残留物(HPLC/MS：R_t＝0.435min，M+H 229.1) 不经进一步纯化直接用于下一步反应。

3)2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基胺的合成

将2-甲氧基-5-甲基-3-硝基-吡啶(1.00g，5.95mmol，1当量)溶解 于THF(10ml)中，加入湿的Pd/C(0.50g)。将反应混合物在H₂的气氛 下于室温搅拌约16h(400ml，17.84mmol，3当量)。将反应混合物过 滤并将可溶物在真空中除去。得到棕晶体形式的产物(HPLC/MS： R_t＝1.058min，M+H 129.3)，其不经进一步纯化用于下一步反应。

4)1-(2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基)-3-[3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基 氧)-苄基]-脲的合成

将2-甲氧基-5-甲基-吡啶-3-基胺(48.00mg，0.35mmol，1当量) 溶解于DCM(10ml)中，加入4-硝基-苯基-氯-甲酸酯(78.00mg，0.39 mmol，1.1当量)和吡啶(31ml)。将混合物于室温搅拌16小时。然后 加入3-甲基-4-(2-甲基-吡啶-4-基氧)-苄胺(80.00mg，0.35mmol，1当 量)和N-乙基-二异丙基-胺(0.06ml，0.35mmol，1当量)。将混合物于 室温搅拌16h。向混合物中加入DCM。将有机层用1N NaOH洗涤一 次和用水洗涤两次，将其经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中除去溶剂。 残留物通过制备型HPLC纯化。

HPLC(RP-18):Chromolith-prep RP-18e 100-25,Shimadzu LC 8A

洗脱剂A：H₂O+0,1％TFA

洗脱剂B：乙腈+0,1％TFA

梯度：在15min内99:1-->1:99

30ml/min,检测：UV 220nm

得到黄油状的产物(HPLC/MS：R_t＝1.503min，M+H 393.2)。

1H-NMR(DMSO,500mHz)in ppm＝8.66(d,J＝5Hz,1H), 8.25(d,J＝5Hz,1H),8.13(s,1H),7.52(m,1H),7.45(m,1H),7.37(m, 1H),7.30(m,1H),7.27(m,1H),7.27-7.19(m,2H),4.35(d,J＝5Hz,2H), 3.90(s,3H),2.63(s,3H),2.18(s,3H),2.12(s,3H)

缩写：

DCM＝二氯甲烷            DMA＝二甲基乙酰胺

DMF＝二甲基甲酰胺        EA＝乙酸乙酯

MTBE＝甲基叔丁基醚       PE＝石油醚

RT＝室温                 TFA＝三氟乙酸

实施例2.2.：4-{2-甲基-4-[3-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢- 吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成

1)4-(4-氰基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成

将4-羟基-3-甲基-苯甲腈(0,100g；0,717mmol)在无水DMF(3mL) 中的溶液用叔丁基化钾(0,088g；0,788mmol)处理。将反应混合物在 室温下搅拌2h并加入4-氯-吡啶-2-甲酸甲酰胺(0,130g；0,717mmol) 和碳酸钾(0,020ml；0,358mmol)。然后将所得悬浮液加热至130℃4 天。为了纯化让反应混合物让冷却降至RT并将其用洗涤1N NaOH 溶液(5mL)和水(5mL)洗涤。将在洗涤时沉淀出的固体过滤并加入到 有机层中。水相用DCM(2x 15mL)萃取并将合并的有机层蒸干。将所 得固体溶解于DCM(20mL)中，用Na₂SO₄干燥并浓缩得到粗产物。 产物经急骤柱层析(Combi Flash RF,Si-60,24g-柱，在12min内梯度 PE/EE 95:5至50:50，然后等浓度50:50洗脱7min，流速35ml/min， UV 254nM)纯化产生黄固体状的4-(4-氰基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2- 甲酸甲酰胺(136,000mg；0,443mmol)。

2)4-(4-氨基甲基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成

将4-(4-氰基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺(0,690g；0,836 mmol)在甲醇(5mL)中的溶液和在甲醇的NH3(20％，5mL)用镍海绵 (0.5g Johnson Matthey，A-7000)处理并用H₂吹洗。将反应混合物在 室温下在5巴的压力下搅拌17.5h。滤去催化剂并蒸发溶剂。然后将 粗产物通过急骤柱层析(Flashmaster，UV 240nM，70g硅胶柱，流速 20ml/min，DCM/MeOH 9：1)纯化得到黄树脂状的4-(4-氨基甲基-2- 甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺(0,182g；0,584mmol)。

3)1-甲基-3-硝基-5-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮的合成

向3-硝基-5-(三氟甲基)吡啶-2-醇(60,0g；288,33mmol)在 DMF(500ml)中的溶液中加入碳酸钾(120,0g；864,99mmol)和碘代甲 烷(19,7ml；317,16mmol)。将所得悬浮液于80℃搅拌约16h。反应混 合物用EtOAc稀释并用水萃取3x，经Na₂SO₄干燥，过滤并将溶液蒸 干。

残留物用THF/石油醚(PE)处理。将沉淀的产物滤出，用PE冲洗 并在真空中干燥得到棕固体。

4)3-氨基-1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮的合成

向1-甲基-3-硝基-5-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮(9.40g，42.32mmol) 在THF(100ml)和MeOH(10ml)中的溶液中加入5％Pd/C(54％H₂O， 2g)。将反应在氢气氛下于室温搅拌。16h之后加入额外的Pd/C(4g) 并在氢气下(1atm)继续搅拌23小时。通过过滤除去固体并将滤液 在真空中还原得到3-氨基-1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮(7.9g，41.1 mmol)。

5)4-{2-甲基-4-[3-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2-二氢-吡啶-3- 基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成_

将3-氨基-1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮(1,64g，8,55mmol)溶 解于DCM(50ml)中，加入4-硝基-苯基-氯-甲酸酯(1,90g，9,437mmol) 和吡啶(0,76ml)。将混合物于室温搅拌2小时。然后加入4-(4-氨基甲 基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺(2,32mg，8,55mmol)和N-乙基 -二异丙基-胺(2,91ml，17,10mmol)。将混合物于室温搅拌16h。向混 合物中加入DCM。将有机层用1N NaOH洗涤一次和用水洗涤两次， 将其经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中除去溶剂。将残留混合物用 MTBE收纳，并将所得白沉淀滤出并在真空中干燥。

得到白固体状的4-{2-甲基-4-[3-(1-甲基-2-氧代-5-三氟甲基-1,2- 二氢-吡啶-3-基)-脲甲基]-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺(HPLC/MS： R_t＝2,184min，M+H 490.2)。

1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm＝8.74(q,J＝4.6,1H)，8.65 (s,1H)，8.50(d,J＝5.6,1H)，8.22(d,J＝2.5,1H)，7.96-7.92(m,1H)， 7.76(t,J＝5.9,1H)，7.34-7.31(m,1H)，7.29(d,J＝2.6,1H)，7.25(dd, J＝8.2,2.2,1H)，7.15-7.11(m,1H)，7.10(dd,J＝5.6,2.6,1H)，4.33(d, J＝5.8,2H)，3.57(s,3H)，2.79(d,J＝4.9,3H)，2.10(s,3H).

方法信息：HPLC/MS

A:H₂O+0,05％HCOOH|B:MeCN+0,04％HCOOH

T:30℃|流速：2ml/min|柱子：Chromolith RP-18e 50-4,6mm |MS:85-800amu

1％->100％B:0->2,8min|100％B:2,8->3,3min

实施例2.3.：(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-氨基甲酸3-甲基-4-(2-甲基 氨甲酰基-吡啶-4-基氧)-苄基酯的合成

1)4-(4-甲酰基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成

将4-羟基-3-甲基苯甲醛(503.7mg；3.7mmol)在无水DMF(7mL) 中的溶液用叔丁醇钾(456.7mg；4.1mmol)处理。将反应混合物在室温 下搅拌2h加入然后4-氯-吡啶-2-甲酸甲酰胺(672.6mg；3.7mmol)和 碳酸钾(255.7mg；1.9mmol)。将所得悬浮液加热至130℃5天。为了 纯化让反应混合物让冷却降至RT并加入水(50mL)和DCM(50mL)。 相分离，将有机层用1M NaOH溶液(50mL)盐水(20mL)洗涤，经 Na₂SO₄干燥并蒸发溶剂。粗产物经急骤柱层析(Combi Flash RF,Si-60, 120g-柱，梯度的CH/EE：在28min内100:0至45:55，流速85ml/min， UV 254nM和280nM)得到白固体状的4-(4-甲酰基-2-甲基-苯氧基)- 吡啶-2-甲酸甲酰胺(598mg；2.21mmol)。

2)4-(4-羟甲基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成

将4-(4-甲酰基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺(400mg；1.5 mmol)溶解于无水THF(6mL)中。将混合物用硼氢化钠(61mg；1.6 mmol)处理并于50℃搅拌3h。为了纯化加入甲醇(15mL)并将混合物 再搅拌30min。然后将混合物蒸干并加入水(10mL)和乙酸乙酯(30 mL)。相分离，将有机层用盐水(10mL)洗涤并经Na₂SO₄干燥。最后 蒸发溶剂得到白固体状的4-(4-羟甲基-2-甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸 甲酰胺(370mg；1.4mmol)。

3)(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-氨基甲酸3-甲基-4-(2-甲基氨甲酰基- 吡啶-4-基氧)-苄基酯的合成

将4-三氟甲基-吡啶-2-基胺(53.6mg；0.33mmol)溶解于DCM(1.1 ml)中。另外，加入4-硝基苯基氯甲酸盐(73.6mg；0,37mmol)和吡啶 (0,029ml；0,37mmol)并将反应混合物搅拌2h。然后将4-(4-羟甲基-2- 甲基-苯氧基)-吡啶-2-甲酸甲酰胺(90mg；0.33mmol)溶解于DMF(1 mL)并加入N-乙基二异丙基氨基(0.112mL；0.66mmol)并将反应混合 物在室温下再搅拌2d。为了纯化，蒸发溶剂并将粗产物用制备型HPLC 直接纯化(Agilent 1100系列，SunFire^TM Prep C18OBM^TM 5μm (150-30mm)柱，梯度的ACN/H₂O在3min内99:1至30:70，然后在 18min内30:70至60:40，流速50ml/min，UV 220nM)得到白TFA- 盐形式的(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-氨基甲酸3-甲基-4-(2-甲基氨甲酰基- 吡啶-4-基氧)-苄基酯(22.8mg；0.05mmol)。

HPLC/MS:(T:30℃|流速：2ml/min|柱子：Chromolith, RP-18e 50-4,6mm,4％->100％B:0->2,8min|100％B:2,8->3,3 min,A:H2O+0,05％HCOOH,B:MeCN+0,04％HCOOH):

Rt＝2.470min，[M+H]461.2

1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm＝10.80(s,1H)，8.75(q, J＝4.8,1H)，8.55(d,J＝5.2,1H)，8.51(d,J＝5.6,1H)，8.16(s,1H)，7.52 -7.49(m,1H)，7.44-7.39(m,2H)，7.28(d,J＝2.6,1H)，7.21-7.15(m, 1H)，7.12(dd,J＝5.6,2.6,1H)，5.23(s,2H)，2.78(d,J＝4.9,3H)，2.12 (s,3H).

实施例2.4.：1-[4-(4-氧代-4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲 基)-苯基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲和1-(5-甲基-吡啶-3-基)-3-[4-(4-氧代 -4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-苯基]-脲的合成

1)1-[4-(4-氧代-4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-苯 基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲的合成按照WO2006/042599A1中的描述 分四步制备。

2)1-(5-甲基-吡啶-3-基)-3-[4-(4-氧代-4,5-二氢-3H-咪唑并[4,5-c] 吡啶-2-基甲基)-苯基]-脲的合成

向5-甲基-吡啶-3-基胺(100,00mg；0,925mmol)在THF中的溶液 中于10℃加入三光气(Triphosgen)(109,76mg；0,370mmol)和三乙 胺(0,26ml；1,849mmol)。将混合物于室温搅拌2小时。加入2-(4-氨 基-苄基)-3,5-二氢-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-酮(177,74mg；0,740mmol)在 (5,00ml)中的溶液并将混合物于室温搅拌约16h。加入水并将该混合 物用DCM萃取。粗产物以黄固体的形式沉淀。通过过滤收集固体， 用水洗涤并在真空中干燥。粗产物经急骤层析在硅胶上纯化 (Teledyne-Isco Combi Flash RF，Si-60，4g，梯度：DCM/MeOH在 13min内100:0至80:20和5min等浓度的80:20，流速：18ml/min， UV 254nm)得到1-(5-甲基-吡啶-3-基)-3-[4-(4-氧代-4,5-二氢-3H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-2-基甲基)-苯基]-脲(33,00mg；0,085mmol)。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm＝12.78(s,1H)，11.08(s, 1H)，8.93(s,1H)，8.91(s,1H)，8.40(s,1H)，8.03(s,1H)，7.78(s,1H)， 7.43-7.35(m,2H)，7.26-7.17(m,2H)，7.04(t,J＝5.8,1H)，6.44(d, J＝7.0,1H)，4.03(s,2H)，2.27(s,3H).

HPLC/MS:Rt＝1.108min,[M+H]＝375.1

方法信息：HPLC/MS

A:H₂O+0,05％HCOOH|B:MeCN+0,04％HCOOH

T:30℃|流速：2ml/min|柱子：Chromolith RP-18e 50-4,6mm |MS:85-800amu；梯度4％->100％B:0->2,8min|100％B:2,8-> 3,3min

实施例2.5.：4-{4-[(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨甲酰基)-甲基]-2-甲基- 苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成

1)(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酸甲酯的合成

将(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-乙腈(3.3g；20.4mmol)在DCM(20mL) 中的溶液冷却至-78℃并在30min内滴加在DCM(30mL)中的三溴化 硼(5.8ml；61.2mmol)处理。让反应混合物温热至RT然后搅拌20h。 为了纯化于0℃滴加甲醇(50mL)并将溶液用水(2x 50mL)洗涤。水相 用DCM(5x 50mL)反萃取并将合并的有机层经Na₂SO₄干燥。最后蒸 发溶剂并将粗产物用急骤柱层析纯化(Combi Flash RF，Si-60，120g- 柱，梯度的CH/EE：在29min内100：0至75：25然后等浓度的75： 25洗脱13min，流速85ml/min，UV 254nM和280nM)得到无油 状的(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酸甲酯(1.8g；8mmol)。

2)(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酸的合成

将(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酸甲酯(1.8g；8mmol)溶解于2M  NaOH溶液(20mL)中并于室温搅拌1.5h。然后将反应混合物用6M  HCl溶液调至pH4并用DCM(4x 70mL)萃取。合并的有机层经 Na₂SO₄干燥并蒸发溶剂得到白固体状的(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酸 (1.3g；7.9mmol)。

3)N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酰胺的合 成

将5-氨基-2-氯三氟甲苯(455.2mg；2.3mmol；)和(4-羟基-3-甲基- 苯基)-乙酸(429.7mg；2.3mmol)溶解于无水DMF(9mL)中。另外加入 HOBT(463.3mg；3mmol)、EDCI(490,783mg；2.6mmol)和4-甲基吗 啉(0.27mL；2.6mmol)启动反应。将反应混合物在60℃下搅拌24h。 然后加入水(30mL)和DCM(30mL)，相分离。将有机层用水(15mL) 和盐水(15mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并蒸发溶剂。粗产物经急骤柱层 析法纯化(Combi Flash RF，Si-60，40g-柱，梯度的CH/EE在16min 内100：0至50：50然后等浓度的50:50洗脱8min，流速40ml/min， UV 254nM和280nM)得到黄油状的N-(4-氯-3-三氟甲基-苯 基)-2-(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酰胺(243mg；0.5mmol)。

4)4-{4-[(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨甲酰基)-甲基]-2-甲基-苯氧基}- 吡啶-2-甲酸甲酰胺的合成

将N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-羟基-3-甲基-苯基)-乙酰胺(243 mg；0.5mmol；)在无水DMF(1.1mL)中的溶液用叔丁醇钾(64mg； 0.6mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌2h并加入4-氯-吡啶-2- 甲酸甲酰胺(104mg；0.6mmol)和碳酸钾(35.9mg；0.3mmol)。将所 得悬浮液加热至130℃1天。为了纯化让反应混合物冷却至室温并加 入水(15mL)和DCM(15mL)。相分离，将有机层用水(15mL)、盐水 (15mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并最后蒸发溶剂。粗产物经急骤柱层析 法纯化(Combi Flash RF，Si-60，24g-柱，梯度的CH/EE在21min 内100：0至35：65然后等浓度的35：65洗脱6min，流速35mL/min， UV 254nM和280nM)得到黄固体状的4-{4-[(4-氯-3-三氟甲基-苯基 氨甲酰基)-甲基]-2-甲基-苯氧基}-吡啶-2-甲酸甲酰胺(82.5mg，0.2 mmol)。

HPLC/MS(方法信息：A:H₂O+0,05％HCOOH|B:MeCN+ 0,04％HCOOH,T:30℃|流速：2ml/min|柱子：Chromolith RP-18e 50-4,6mm|MS:85-800amu,4％->100％B:0->2,8min|100％B: 2,8->3,3min)

Rt＝2.526min[M+H]478.1

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)ppm＝10.63(s,1H)，8.82-8.66 (m,1H)，8.49(d,J＝5.7,1H)，8.28-8.15(m,1H)，7.92-7.81(m,1H)， 7.65(d,J＝8.8,1H)，7.41-7.32(m,1H)，7.33-7.23(m,2H)，7.17-7.04 (m,2H)，3.72(s,2H)，2.78(d,J＝4.8,3H)，2.09(s,3H).

实施例3：用于DDR2的生物化学活性测试的自磷酸化试验

自磷酸化分两步进行：酶促反应，其中含作为辅助底物的ATP的 His-示踪的DDR2自磷酸化，和检测反应，其中对与酶的His-尾端结 合的标记的抗6His抗体和结合磷酸化的DDR2酪氨酸残基的 穴状化合物标记的抗磷酸酪氨酸抗体(PT66)之间的时间分辨的FRET 进行分析。自磷酸化活性可通过HTRF信号的增强直接检测。

自磷酸化试验以1536孔或384孔(Cisbio,Codolet, France)试验形式在结合Greiner低容量培养基的384-孔微量滴定板 中进行并用于高通量筛选。将4nM His-示踪的人重组DDR-2激酶结 构域(His-TEV-DDR2467-855aa)和150μm作为辅助底物的ATP以 6μl的总体积(50mM HEPES，10mM氯化镁，2mM  DTT，1％DMSO，1mM EGTA，0.1％BSA，pH 7.5)在缺少或存在 试验化合物(10倍稀释浓度)下于22℃温育150min。通过加入4μl检测 溶液(在50mM HEPES，400mM KF，0.1％BSA，20mM EDTA，pH 7.0中的16.5nM抗6His(Cisbio，Codolet，法国)和 2.75nM以标记的抗磷酸酪氨酸(PT66)(PT66-K，Cisbio， Codolet，法国))使反应停止。于室温1h的温育之后用Envision多模 读板仪(Perkin Elmer LAS Germany GmbH)在激发波长340nm(激 光方式)和发射波长615nm和665nm下测量HTRF。测定发射信号 之比。所用的全值(full value)为无抑制剂的反应。所用的药理学零 值为4μM终浓度的尼洛替尼(LC Laboratories，USA)。采用得自 GeneData的程序Symyx Assay或测定抑制值 (IC50)(参见实施例1中的表)。

实施例4：磷酸DDR2细胞试验

采用以人DDR2转染的细胞系HEK293(PLT460F_ (DDR2)-P7-1)，在384孔板形式中进行试验。

材料和方法：

将细胞以10'000个细胞/孔的密度在384孔聚D-赖氨酸包被的 Black/透明板(Cellcoat Greiner)接种并在37℃下10％胎牛血清、5％ CO₂的存在下在DMEM培养基中温育48h。将介质以无血清培养基置 换并将细胞于37℃、5％CO₂温育8h。加入在5％DMSO或5％DMSO 和50μg/ml的鸡胶原蛋白II中的待测化合物并将细胞在37℃、5％CO₂下温育16h。

将细胞用冰冷过的PBS冲洗，用溶胞缓冲液(M-PER Thermo# 78501)于室温溶解30min并在1000RPM下离心1min。平行地，将结 合White High的384孔板(Corning)用小鼠抗人DDR2捕获抗体 (R&D系统试剂盒DuoSet IC人磷酸DDR2ELISA)涂覆，于室温 过夜。

将等分试样的细胞溶胞产物转入涂覆的板中并于室温温育2h。将 板洗涤并于室温加入与辣根过氧化物酶(HRP)缀合的小鼠抗磷酸酪 氨酸检测抗体(R&D Systems试剂盒DuoSet IC人磷酸DDR2ELISA) 2h。将板洗涤并于室温加入用于HRP的化学发光底物(Thermo) 15min。在光度计上测量发光。

胶原蛋白II诱导的DDR2磷酸化的抑制百分率采用抑制剂对照 (50μg/ml胶原蛋白II+0.3μm达沙替尼)和中性对照(50μg/ml胶原蛋白 II+1％DMSO)运用Genedata软件计算(参见实施例1中的表)。

实施例5：动物体内抗痛觉过敏作用的研究

为了诱发炎症反应，将角叉菜胶溶液(CAR，1％，50μl)在一侧 关节内注入大鼠膝关节内。未注射的一侧用于对照的目的。每组用六 只动物。利用螺旋测微器(膝关节上的中间侧面)测定阈值，并通过 Hargreaves方法(Hargreaves等，1988)利用定向的红外线光源在脚 掌上测量热痛觉过敏。由于炎症的位置(膝关节)与测量的位置(脚 掌)不同，本文中使用术语继发性热痛觉过敏，其机制对于发现有效 的镇痛药有重大意义。

热痛觉过敏的实验描述(Hargreaves试验)：将实验动物置入在 石英片上的塑料室中。试验前，首先给实验动物约5-15分钟的时间使 其自身熟悉环境。一旦实验动物在熟悉阶段之后(探究阶段结束)不 再那么频繁移动，就将红外线光源(其焦点在玻璃钮扣平面上)直接 置于后爪下面使其受刺激。然后通过按电钮开始实验操作：红外光导 致后爪的皮肤温度升高。当已经达到预先设定的最高温度时通过实验 动物抬起后爪(作为达到痛觉阈的表达)或通过自动切断红外线光源 终止实验。只要实验动物坐着不动就记录爪子反射的光。爪子的撤退 会中断该反射，之后切断红外线光源并记录从接通到切断的时间。校 准仪器使得红外线光源在10s内升高皮肤温度至约45摄氏温度 (Hargreaves等，1988)。由Ugo Basile制造的用于此目的的仪器用 于该试验。

CAR购自Sigma-Aldrich。在CAR前30分钟进行关节内施用特 异性的组织蛋白酶D抑制剂，化合物23(实施例1，表1， (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-氨基-4-{(S)-3-甲基-2-[(S)-4-甲基-2-(3-甲基 丁酰氨基)戊酰基氨基]丁酰氨基}-5-苯基戊酰基氨基)-3-甲基戊酰基氨 基]-3-甲基丁酸)。10μg/关节的量的曲安西龙(TAC)用作阳性对照， 且溶剂(载体)用作阴性对照。痛觉过敏以发炎和未发炎的爪子撤退 次数的差别提供。

结果：TAC能降低CAR诱导的肿胀，但特异性DDR2抑制剂不 降低CAR诱导的肿胀。相反，特异性DDR2抑制剂能以剂量的函数 降低热痛觉过敏的程度。

评价：已经显示本发明的化合物起抗痛觉过敏的作用。可以假定 该结论，因为本发明的化合物显示出对炎性肿胀没有影响因而对痛觉 过敏触发没有影响。因此可以设想本发明的化合物在人体内产生疼痛 减轻作用。

实施例6：本发明的化合物在牛滑膜液中的稳定性

牛滑膜液的提取：

在牛外植体(用于扩散小室或其它试验)的制备中，使用奶牛蹄 (掌骨关节)或奶牛膝。滑膜液可由两种关节获得。为此目的，采用 10ml注射器和导管将滑膜液小心地从开放性关节中取出并转入预备 的2ml Eppendorf容器中。根据动物(奶牛许可证可获得)标记 Eppendorf容器。本发明中必须确保在关节的制备过程中血液不进入 关节间隙。如果是这种情况，滑膜液将变成微红，因而必须弃去。 滑膜液基本上非常粘且透明，颜为淡黄。切除以及滑膜液的目测 分析(macroscopic analysis)都记录在案。

在SF中的物质稳定性试验的批：

为了检查个别化合物的稳定性，将四种不同的牛滑膜液混于一池。 为此目的，使用每SF约1ml。在5ml玻璃容器中直接调配该混合物。 将SF充分地、但小心地混合。不应当有气泡或泡沫生成。为此目的， 在最低的速度下利用涡流仪。在1μM的初浓度下(除非另有要求)试 验待测化合物。在加入物质后，再次将该批充分地且小心地混合。为 了目视监测，将所有SF批次拍照，并将相应实验的图片编入eLabBio 文档内。附图1作为例子显示此类型的照片文档。将这些批次在保温 箱中在37℃下和在7.5％CO₂中温育48h。

取样：

取样在预先确定的时间进行(除非另有要求，参见下面)。将200μl 的SF从每个时间的混合物中取出并直接转入到0.5ml“低结合的 (low-binding)”Eppendorf容器中。为了使物质与容器塑料的相互作 用最小化使用“低结合的”Eppendorf容器。已将200μl的乙腈引入 Eppendorf容器中，使此后形成SF的1+1混合物。这简化了随后的 分析，但蛋白质沉淀可能在加入SF之后立即发生。对该方案应该注 意这一点。在加入物质之后立即采取0h样品。这对应于稳定性计算中 的100％值。理想地，这里所采用的浓度应当恢复。样品可在-20℃下 冷冻。

·0h

·6h

·24h

·48h

所用的阴性对照为不含物质的SF。所用的阳性对照为含1μM物 质的SF。这对应于0h值因而为100％稳定性。

将样品于-20℃下贮存在“低结合的”Eppendorf容器内。随后定量 测量样品。

数据处理：

在图中画出所测得的浓度(ng/ml)对时间的曲线(GraphPad )。在此测定物质的百分比稳定性。所使用的100％值为在时 间0h时SF中的初值。数据以各自的实验编号存放在eLabBio中并报 告在MSR数据库中(在相应的温育时间之后以百分比稳定性报告)。

结果：

所有测量的化合物保持稳定(参见实施例1中的表)。化合物稳 定性被定义为48h之后>80％化合物回收率。

实施例7：对DDR2抑制剂关于在用胶原蛋白II型刺激时SW1353 细胞产生MMP13的评价

原理：

胶原蛋白II型与SW1353细胞的DDR2受体的结合激发信号级 联，导致MMP13表达的增加。MMP13在培养基中以其前形式 (pro-form)proMMP13释放，该proMMP13可用ELISA测量。

针对它们阻断信号级联因此阻断在胶原蛋白刺激时的 proMMP13产生的能力评价DDR2抑制剂。

材料和方法：

名称 供应商 Cat.编号

RPMI 1640 Gibco 21765

FCS Promocell C37350

L-谷氨酰胺 Gibco 25030

丙酮酸钠 Gibco 11360

HEPES Gibco 15630

Eisessig MERCK 8.18755.1000

胰蛋白酶/EDTA Invitrogen 25300

II型胶原蛋白 SIGMA C9301-5MG

DMSO MERCK 1.02931.0500

达沙替尼 TRC D193600

人Pro-MMP-13Quantikine ELISA试剂盒 R&D Systems DM1300

细胞培养：

将保存在液氮中的SW1353细胞(ATCC，HTB-94)，解冻并在补 充2mM谷氨酰胺、1mM丙酮酸钠、10％FCS的RPMI1640中的T75 中，以1,6.10⁶个细胞，于37℃，5％CO₂培养三天。然后用胰蛋白酶 /EDTA收获SW1353细胞并再悬浮于补充2mM谷氨酰胺、1mM丙 酮酸钠、25mM HEPES和0,5％FCS的RPMI1640(试验培养基)中， 并以30000个细胞/孔在96孔板中在100μL的试验培养基中接种并在 37°、5％CO₂下再温育24小时使能够细胞粘附。为了刺激DDR2受体， 在每个孔中加入50μL的胶原蛋白II溶液160μg/mL(在孔中的终浓 度为40μg/mL)以及50μL的自0,003μm至10μm(在板中的终浓度) 的不同稀释度的抑制剂(MSCs)。各种条件以四份进行。再培养三 天之后，收获上清液以进行proMMP13测量。

存在各板上的不同对照品由试验培养基与以下成分构成：

阳性对照(含参比化合物)：40μg/mL胶原蛋白II，0,03μM在0,1％ DMSO中的达沙替尼(参比化合物)

阴性对照(没有抑制)：40μg/mL胶原蛋白II和0,1％DMSO

培养基对照品(没有刺激)：0,005％乙酸和0,1％DMSO

所有孔含有0,1％DMSO和0,005％乙酸。

所用的MSCs浓度为10、3、1、0,3、0,1、0,03、0,01和0,003μM

需要的溶液为：

-将胶原蛋白II以在0,25％乙酸中2mg/mL稀释。在试验中使用 之前可将储备溶液在4℃下贮存一周并在试验培养基中稀释1/12,5(得 到在0,02％乙酸中160μg/mL)。

-在含0,4％DMSO的试验培养基中自0,012至40μm的MSCs(然 后将它们再在检测板中稀释1/4)

-在含0,4％DMSO的试验培养基中的达沙替尼0,12μM(然后将它 再在检测板中稀释1/4)

-在试验培养基中的乙酸0,02％(对照品)。

ProMMP13测量：

收获的上清液或者直接使用或者在使用前贮存于-20℃。按照制造 商的建议，ProMMP13用商购的ELISA试剂盒测量(参见附件)。 简而言之，50μL的各样品使用未稀释的并在试验培养基中获取标准曲 线。在试验结束时在Paradigm MTP-读板仪(Beckman Coulter)上 于540(参比波长)和450nm对ELISA板读数。将在450nm下得到 的所有吸收度值以在540nm下的吸收度进行校正并采用‘四参数拟合 (Four Parameter Fit)’建立标准曲线。由标准曲线计算所有样品中 proMMP13的浓度。通过Paradigm软件实现所有的计算。

计算：

数据库中报道的数据为化合物在两个最高浓度(10和3μM)下 的％效果以及IC₅₀。

根据下式计算在两个最高浓度下的％效果：

运用软件GraphPad Prism计算IC₅₀(参见实施例1中的表)。

实施例8：注射小瓶

用2N盐酸将100g的式I化合物和5g的磷酸氢二钠在3升重蒸 馏水中的溶液调至pH6.5，在无菌条件下过滤，转移到注射小瓶中， 在无菌条件下冻干并在无菌条件下密封。每个注射小瓶含5mg的式I 化合物。

实施例9：溶液

溶液由1g的式I化合物、9.38g的NaH₂PO₄2H₂O、28.48g的 Na₂HPO₄·12H₂O和0.1g的苯扎氯铵在940ml的重蒸馏水中制备。将 pH调至6.8，将溶液补足至1l并通过辐射杀菌。此溶液可以以滴眼剂 的形式使用。

实施例10：软膏

将500mg的式I化合物与99.5g的凡士林在无菌条件下混合。

实施例11：安瓿

将1kg的式I化合物在60升蒸馏水中的溶液在无菌条件下过滤， 转入安瓿中，在无菌条件下冻干并在无菌条件下密封。每个安瓿含 10mg的式I化合物。