改善药物中具有脒官能团的活性物质的生物利用度

本发明涉及改善具有至少一个脒官能团的药用物质的生物利用度，还 涉及包含相应的改用物质的药物。

包含具有一个或多个脒官能团的活性成份的药物制剂在口服应用时几 乎不表现出药理学作用。在口服给药后活性成份的作用的前提条件是 其在胃肠道吸收。这种作用的最重要的机制是被动扩散。通过被动扩散途 径的吸收程度取决于亲油性，并因此取决于活性成份的酸性和碱性。

高碱性化合物例如苯甲脒在胃中(pH1)和在小肠中(pH6.4)几乎被完全 离子化。因此，在口服给药后吸收——这需要通过胃肠道膜的脂双层—— 仅极小程度地发生。在口服应用时，一般认为具有脒作为官能团的所有活 性成份表现出不充分的吸收。

通过引入氧原子，N-羟基化衍生物例如酰胺肟表现出较低的碱性。酰 胺肟在生理学条件下是非质子化的。苯甲酰胺肟是多种包含酰胺肟官能团 的药用物质的模型化合物[Clement,B.(2002)Drug Met.Rev.34 565-579]。 然而，在希美加(ximelagatran)的情况下，与美拉加(melagatran)相比， 通过引入酰胺肟官能团仅可以将口服生物利用度由7％增加至14％[Clement, B.；Lopian,K.(2003)Drug Met.Dispos.31 645-651]。因此，仍然迫切需要口 服给药后经过胃肠道有效地被吸收的具有脒官能团的药用物质。

因此，本发明的目的是增加包含脒官能团的物质的口服生物利用度。

通过权利要求1的技术特征实现本发明的目的，从属权利要求表示了 本发明的优选实施方案。

根据本发明的应用，用N,N′-二羟基脒、N,N′-二羟基脒酯、N,N′-二羟 基脒醚和噁二唑啉代替至少一个脒官能团，使得它们在口服给药后最初被 有效地吸收，然后通过内源酯酶和N-还原被转化回实际的活性形式：脒(前 药原理)。改性脒官能团在胃肠道中优异的可吸收性明显归功于活性成份分 子的大大降低的碱性和增加的亲油性。将脒官能团化学改性为N,N′-二羟基 脒官能团将pKa从脒的约11降低至N,N′-二羟基脒和其酯和醚的约4。因 此，在活性成份吸收的主要位置——肠道中，N,N′-二羟基脒或N,N′-二羟 基脒酯和N,N′-二羟基脒醚几乎完全是游离碱的形式。通过对脒官能团进行 改性而降低碱性的同时，相应的活性成份的亲油性增加。

活性成份包含至少一个所建议的形式的活性脒基是足够的。因此，活 性成份可以包含多个脒基(例如，在戊双脒的情况下包含两个脒基)，在这种 情况下，这些基团中的至少一个以上述方式改性。只要至少一个活性成份 具有脒基，就可以同样采用活性成份的混合物。口服剂形可以制备为液体、 半固体或固体制剂，特别是片剂、包衣片剂、小丸剂或微胶囊剂。关于这 一点，对于那些其中采用液体制剂的实施方案，活性成份或活性成份的混 合物可以溶于适当的无毒溶剂如水、一元醇(特别是乙醇)、多元醇(特别是 甘油和/或丙二醇)、聚二醇(特别是聚乙二醇和/或饱和的植物脂肪酸三甘油 酯(miglyol))、甘油缩甲醛、二甲基异山梨醇、天然或合成油。常用的碱可 用于制备半固体或固体制剂，例如膨润土、硅酸铝镁(Veegum)、瓜尔胶和/ 或纤维素衍生物、特别是甲基纤维素和/或羧基甲基纤维素、和乙烯醇和/ 或乙烯基吡咯烷酮的聚合物、藻酸盐、果胶、聚丙烯酸酯、固体和/或液体 聚乙二醇、石蜡、脂肪醇、矿脂(petrolatum)和/或蜡、脂肪酸和/或脂肪酸酯。

固体制剂可以进一步包含目前已知的补充剂(extender)例如胶体二氧化 硅、滑石、乳糖、淀粉、糖、明胶、金属氧化物和/或金属盐。合适的其它 添加剂有稳定剂、乳化剂、分散剂和防腐剂。

通过本发明的方法改性的药用物质口服给药时表现出优异的可吸收性 并因此表现出优异的生物利用度，因此，脒的药理学作用明显增加。因此， 现在可以提供用于脒的口服的最佳药物形式。

由于脒官能团是用于多种应用领域的多种重要活性成份的基本组成部 分这一事实，本发明的应用特别重要。此外，脒基还是以下活性成份种类 或活性成份的组成部分：蛋白酶抑制剂(凝血酶抑制剂例如美拉加；因子 Xa、因子VII和凝血级联(gerinnungskaskade)的所有蛋白酶的抑制剂；蛋白 裂解酶(matriptase)抑制剂)；抗凝血剂；溶血栓剂；抗纤维蛋白溶解剂；DNA 嵌入化合物和RNA嵌入化合物(例如戊双脒、二脒那秦、氮氨菲啶 (isometamidium))；N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂以及病毒酶抑制剂(例如 神经氨酸酶抑制剂)。

此外，包含活性脒基的活性成份还可以用于抑制血液凝固，用于预防 和内脏和皮肤利什曼病、锥虫病(非洲昏睡病)、由卡氏肺囊虫 (pneumocystis carinii)引起的肺炎(PcP)，用于抑制恶性肿瘤的生长、降低血 压、神经保护(neuroprotection)，以及用于控制病毒感染例如流感和HIV感 染。

以上所列仅是通过举例说明，且本发明原理上包括所有具有至少一个 脒基的活性成份。因此根据本发明的应用可以应用于范围非常广泛的活性 成份种类和指征，并可以显著提高其活性形式包含脒的多种药用物质的生 物利用度。

可以提及的根据本发明改性的药用物质的实例有N,N′-二羟基苯甲脒 和其根据本发明的衍生物。可以根据Ley和Liu等的描述合成N,N′-二羟基 苯甲脒[Ley H.(1898)Ber.Dtsch.Chem.Ges.31 2126-2129；Liu K.-C.； Shelton B.R.；Hews RK.(1980)J.Org.Chem.45 3916-3918]。其单酯的合成可 以按照Ley等的方法[Ley,H.:Ulrich,M.(1914)Ber.Dtsch.Chem.Ges.47 2938-2944]。可以用例如通过单醚的O-甲基化合成其二醚。可以根 据Andrewes等的描述合成N,N′-二羟基苯甲脒的单酯和二酯[Andrewes, C.H.；King,H.；Walker,J.(1946)Proceedings of the Royal Society of London, Series B 133 20-62]。可以根据Desherces等的描述合成4-羟基-1,2,4-噁二唑 啉[Desherces,S.；Barrans,J.；Roubaty,J.L.(1978)Revue Roumaine de Chimie 23 203-208]。

为了阐述由胃肠道的吸收并随后还原为游离的脒，选择N,N′-二羟基苯 甲脒作为新的前药原理的模型化合物，并且向三头猪口服和静脉给药。在 体内N,N′-二羟基苯甲脒代谢为苯甲脒按照如下方式进行：

为了能够确定物质的准确剂量，每周将动物称重一次。由该数据计算 每天的增重。将待口服给药的物质混入湿的、磨细的饲料精料中。将静脉 给药的物质溶解在0.9％NaCl溶液中以避免溶血。

在将要注射入静脉留置导管之前，过滤溶液以避免通过任何的不溶解 部分诱发血栓形成。在注射之后用至少10ml的0.9％NaCl溶液再次冲洗。 在每种情况下在早晨给药该物质。在每种情况下在次日进行冲洗阶段以保 证该药用物质的完全排泄。

N,N′-二羟基苯甲脒的口服给药剂量为每次10mg/kg体重(BW)。静脉快 速注射给药的物质的浓度为2mg/kg BW。苯甲脒和N,N′-二羟基苯甲脒类似 地通过静脉给药。按预先设定的时间取样。一种条件的实验周期持续一天。 在给药该物质后的24小时的周期内获得血样。在口服给药后0、30、60、 90、120、150、180、240、360、480、720和1440分钟时取样。静脉给药 后，另外在5和15分钟后取样。将获得的全血转入肝素管中并离心(4℃， 10min，1500g)。离心后，约4ml血浆作为上清液取出，移液到Eppendorf 管中并在-80℃下冷冻。缓慢解冻血浆样品，然后在7000rpm下离心3分钟， 通过固相萃取处理并进行HPLC。

实验结果显示在下面的附图中。

图1：向三头猪口服给药N,N′-二羟基苯甲脒(10mg/kg BW)后的苯甲脒 血浆水平图。

图2：向两头猪注射(2mg/kg BW)后的苯甲脒血浆水平图。

图3：向三头猪注射N,N′-二羟基苯甲脒(2mg/kg BW)后的苯甲脒血浆 水平图。

图4：向两头猪注射N,N′-二羟基苯甲脒(2mg/kg BW)后的苯甲酰胺肟 血浆水平图。

从获得的数据可以确定在口服给药N,N′-二羟基苯甲脒后苯甲脒的口 服生物利用度。

从上表可以清楚的知道，口服给药N,N′-二羟基苯甲脒后苯甲脒的生物 利用度为90.62％。这表明在口服给药后前药几乎完全被吸收并且在血液中 快速地被还原为活性形式。同样在注射N,N′-二羟基苯甲脒后，前药也快速 地被还原为苯甲脒，在以这种方式给药后在血浆中另外也能检测到苯甲酰 胺肟。