一种西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方法与流程

1.本发明是药物化学技术领域，具体涉及一种西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方法。

背景技术：

2.西格列汀（sitagliptin）由merck sharp & dohme开发，2006年10月fda批准其磷酸盐（商品名：捷诺维januvia
®
）上市；西格列汀作为首个缩聚二肽酶ⅳ（dpp-4）抑制剂，用于ⅱ型糖尿病。2007年3月，该药被fda批准与二甲双胍联合ⅱ型糖尿病。2009年该药被欧盟批准为用于ⅱ型糖尿病的一线用药。2009年3月，cfda批准磷酸西格列汀在中国上市，商品名：捷诺维（januvia
®
）。2009年12月，ono公司在日本推出了西格列汀；2011年5月，日本批准该药和阿尔法糖苷酶抑制剂联合用药；2011年9月，日本批准了该药和胰岛素的联合用药。
3.西格列汀的化学名称为：(3r)-3-氨基-1-[3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-7-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-1-酮，分子式为c
16h15
f6n5o，分子量为407.31，结构式如下：为了西格列汀的用药安全，达到有效控制其质量的目的，对药品中杂质的研究显得尤为重要。目前国际通行的办法是对杂质进行杂质对照品分析验证，因此开展西格列汀中杂质的合成研究具有重要意义。
[0004]
2022年2月，ema的一份会议文件中提到，西格列汀制剂中存在潜在亚硝胺类杂质nitroso-stg-19；2022年8月，fda在一份文件中公开了该亚硝胺杂质的最大可接受日摄入量为37ng，并将该杂质简称为“nttp”（即下述式1化合物）。检索文献及专利，未发现该杂质的制备方法。

技术实现要素：

[0005]
为了提高西格列汀原料药和制剂的质量，降低临床用药的安全性风险，本发明提供了一种西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方法，能快速、简便、高效的得到纯度高的杂质对照品，可用于西格列汀原料药和制剂的质量研究。
[0006]
为了解决上述问题，本发明采用的技术方案如下：本发明是一种西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方式，其结构式如下式1所述：式1
上述亚硝胺杂质的制备方法是，以3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐为原料，于溶剂中，在乙酸酐作用下与亚硝酸盐反应得到亚硝胺杂质，合成路线如下：。
[0007]
作为本发明优选的技术方案：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和亚硝酸盐的摩尔比为1:1~1:10，进一步优选的摩尔比为1:1~1:5，最优选的摩尔比为1:3。
[0008]
作为本发明优选的技术方案：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和乙酸酐的摩尔比为1:1~1:10，进一步优选的摩尔比为1:1~1:5，最优选的摩尔比为1:3。
[0009]
作为本发明优选的技术方案：所述亚硝酸盐选自亚硝酸钠、亚硝酸钾、亚硝酸锂、亚硝酸铁或亚硝四氟硼酸盐中的一种或任意两种以上的组合。
[0010]
作为本发明优选的技术方案：所述溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃中的一种或任意两种以上的组合。
[0011]
本发明所述方法制得的亚硝胺杂质，可以作为西格列汀原料药或者制剂质量研究的对照品的用途。
[0012]
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明所述的西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方法操作简单、高效，反应条件温和，安全性强，易于控制，由该制备方法制得的亚硝胺杂质收率高、纯度高，适合作为对照品，用于西格列汀原料药和制剂的质量研究，为西格列汀相关药物的质量，进行有效控制奠定了基础。
附图说明
[0013]
图1为本发明方法制得的亚硝胺杂质的hplc图；图2为本发明方法制得的亚硝胺杂质的1hnmr图谱；图3为本发明方法制得的亚硝胺杂质的
13
cnmr图谱；图4为本发明方法制得的亚硝胺杂质的质谱图。
[0014]
具体实施方法下面通过具体实施例子，对本发明进一步阐述。应当理解，以下实施例只是为进一步说明本发明的特征和优点，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。
[0015]
以下将结合附图和实施例来具体说明本发明，但本发明的内容，并非局限于具体实施例。
[0016]
实施例1，向反应瓶中加入10.0g 3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐、9.1g 亚硝酸钠、13.4g 乙酸酐和100ml 二氯甲烷，常温搅拌5小时，过滤，滤液浓缩至干，乙醇结晶，得到白固体5.4g，收率55%，hplc纯度98.8%，见图1。
[0017]
实施例2，向反应瓶中加入10.0g 3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐、12.0g 亚硝酸钠、17.8g 乙酸酐和150ml 乙酸乙酯，常温搅拌4小时，过滤，滤液浓缩至干，甲醇结晶，得到白固体5.0g，收率52%。
[0018]
实施例3，向反应瓶中加入10.0g 3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐、15.3g亚硝四氟硼酸盐、13.4g 乙酸酐和100ml 丙酮，常温搅拌5小时，过滤，滤液浓缩至干，异丙醇结晶，得到白固体4.9g，收率50%。
[0019]
对上述实施例获得的亚硝胺类杂质（式1）的结构进行1h核磁、
13
c核磁和质谱数据分析为：1h nmr (500 mhz , dmso-d6) δ: 5.06(5.81) (s , 2h), 4.81(4.26) (t , j=5.5hz , 2h), 4.48(4.18) (t , j=5.4hz , 2h); 13
c nmr δ: 149.7(150.2), 142.4(q , 2jcf
=38.7hz), 118.3(q, 1jcf
=270.8hz), 45.4(35.6), 43.2(d) (41.9), 38.8(45.6); esi-ms(m/z): c6h6f3n5o，221.96[m+h]
+
。本发明方法制得的亚硝胺杂质的1hnmr图谱参照图2；亚硝胺杂质的
13
cnmr图谱参照图3；亚硝胺杂质的质谱图参照图4。
[0020]
对上述获得的样品，经质谱鉴别和1h核磁确认其式1的结构及含量后，可作为杂质对照品，用于磷酸西格列汀原料药和相关制剂中，亚硝胺类致突变杂质nttp检测方法的开发和含量测定，以此判断磷酸西格列汀原料药及相关制剂中，致突变杂质nttp的残留情况，进而评估药物的安全性。例如，参考ich m7致突变性杂质评估和控制指导原则，磷酸西格列汀的最大日剂量为100mg（以西格列汀计），按nttp最大日暴露量37ng/day计算，磷酸西格列汀中该致突变杂质（nttp）所允许的最大残留量为0.288ppm。开发高灵敏的高效液相谱串联质谱法（lc-ms/ms），建立了磷酸西格列汀中致突变杂质nttp的含量测定方法，并使用上述制备的nttp杂质对照品，可进行磷酸西格列汀原料药或相关制剂中nttp的含量测定，并与限度值0.288ppm进行比对，以确认该致突变杂质是否超标，进而评判药品的安全性。对nttp杂质超限样品，可能要考虑采取诸如药品召回等一系列监管措施。
[0021]
以上所述仅是本发明的实施方式的举例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明内容、精神和范围的前提下，对本发明所述的亚硝胺杂质的制备方法，进行改动或适当变更与组合，来实现本发明技术，所有相类似的改进和变型，对本领域技术人员来说是显而易见的，这些改进和变型都被视为包括在本发明的内容、精神和范围中。

技术特征：

1.一种西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方法，其特征在于：所述杂质的结构如下式1所示：式1所述的西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方法是以3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐为原料，于溶剂中，在乙酸酐作用下与亚硝酸盐反应得到亚硝胺杂质。2.根据权利要求1所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和亚硝酸盐的摩尔比为1:1~1:10。3.根据权利要求2所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和亚硝酸盐的摩尔比为1:1~1:5。4.根据权利要求3所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和亚硝酸盐的摩尔比为1:3。5.根据权利要求1所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和乙酸酐的摩尔比为1:1~1:10。6.根据权利要求5所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和乙酸酐的摩尔比为1:1~1:5。7.根据权利要求6所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐和乙酸酐的摩尔比为1:3。8.根据权利要求1所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述亚硝酸盐选自亚硝酸钠、亚硝酸钾、亚硝酸锂、亚硝酸铁或亚硝四氟硼酸盐中的一种或任意两种以上的组合。9.根据权利要求1所述的亚硝胺杂质的制备方法，其特征在于：所述溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃中的一种或任意两种以上的组合。10.权利要求1－9中任项一项所述的制备方法制得的亚硝胺杂质的用途，其特征在于，所述的用途将亚硝胺杂质作为西格列汀原料药或者制剂质量研究的对照品。

技术总结

本发明公开一种西格列汀中亚硝胺类杂质的制备方法，属于药物化学技术领域。具体为：以3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐为原料，在乙酸酐作用下与亚硝酸盐反应得到亚硝胺类杂质。由本发明的合成方法制得的亚硝胺类杂质收率高、纯度高，合成操作简便，可作为对照品应用于西格列汀原料药和制剂的质量研究。药和制剂的质量研究。药和制剂的质量研究。