一种提高脑靶向的左旋多巴组合物及其应用

1.本发明属于医药技术领域，具体得到说涉及一种提高脑靶向的左旋多巴组合物及其应用。

背景技术：

2.帕金森病(parkinson disease，pd)是一种常见的中老年神经变性疾病，平均发病年龄为60岁左右，报道显示我国65岁以上人pd患病率大约为1.7％，pd会使黑质多巴胺能神经元变型、缺失，纹状体多巴胺含量显著降低，由于多巴胺不能透过血脑屏障，其前体左旋多巴是帕金森病最有效的药物，通过血脑屏障进入中枢，经多巴脱羧酶作用转化成多巴胺而发挥药理作用。然而，临床研究发现左旋多巴吸收后95％左右在外周脱羧成为多巴胺，只有1％透过血脑屏障进入脑内。为减少外周组织多巴胺的含量其外周不良反应，增强疗效，需要使更多的左旋多巴进入脑中，减少左旋多巴的剂量，增加其生物利用度。
3.目前左旋多巴的剂型多为片剂，也有对其剂型进行改良，例如cn102755310b公开发明了涉及一种提供缓释左旋多巴和金刚烷胺的固态口服缓释制剂，为片剂、胶囊剂、微丸剂的药物缓释制剂技术领域，其药物释放为缓释或双释。又如cn104918607a专利公开发明了含有可吸入左旋多巴、二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)和盐的粉末组合物用于肺部使用的高剂量左旋多巴胶囊。为解决患者顺应性，cn108553416a又将剂型改良为混悬剂，公开发明了一种含有左旋多巴和盐酸苄丝肼的缓释混悬制剂及其制备方法，所述缓释混悬剂由阳离子交换树脂、左旋多巴、盐酸苄丝肼、浸渍剂、增塑剂、助悬剂、骨架材料、阻滞剂和其他辅料制成。上述专利虽然将左旋多巴进行剂型进行改良，很难解决脑靶向和首过效应等问题，不能有效阻止左旋多巴在外周组织中转化成多巴胺而引起的副作用。
4.口服制剂是左旋多巴经常使用的剂型，左旋多巴生成的多巴胺会刺激延髓催吐化学感受区，使得在服药早期会出现厌食、恶心、呕吐等不良反应，部分患者还会出现原因不明的体位性低血压，因为多巴胺还可以兴奋心脏，所以还会引起心律失常，也可见短暂性转氨酶增高，同时胃肠道吸收不稳定会引起pd患者症状波动即指“开”期和“关”期交替出现，包括疗效减退、不可预测的“关”期、冻结步态等类型，总之左旋多巴口服制剂的药物效果较差，不良反应症状严重，临床上为了减轻不良反应的措施使用皮下注射阿扑，是补救突发“关”期的疗法，但伴有皮肤结节、嗜睡、异动症和神经精神症状。左旋多巴半衰期较短，不是全肠道吸收，仅限于胃肠道上段，滞留时间大约3-4小时，通过改变剂型，如胃内滞留剂可有望于克服胃肠道上端滞留时间短的问题，而左旋多巴将被代谢成3-o-甲基多巴而降低疗效，导致严重的不良反应，且不能显著缩短患者的“关闭”时间。一种可持续释放卡比多巴的新型皮下贴剂nd0611，可完善左旋多巴的药代动力学，虽然经皮给药被认为是一种理想的给药途径，减少个体用药的差异，提供长期的缓释效果，它可以减少左旋多巴的并发症。但左旋多巴本身的强亲水性，且稳定性差，难以透过皮肤的角质层，限制了它的吸收，目前在技术上有难度而且效果并不令人满意，并且对皮肤有强大的刺激性，使左旋多巴在经皮给药的进展并不大。另外在美国上市的首个左旋多巴吸入剂inbrija，可绕过胃肠道而迅
速吸收，使处于关期的患者尽快恢复运动功能，关闭期症状，但是干粉需要通过患者自身吸力进入体内，依赖患者自身呼吸能力，严重受限患者不适合使用，对于粉末粒径等理化参数要求高，如果患者呼吸配合不佳极易导致药物黏附到咽喉、气道等部位而不能完全进入肺部，使得临床效果欠佳，干粉吸入制剂在吸入剂开发过程中难度最高，装置造价成本较高。左旋多巴-卡比多巴凝胶剂可经胃造瘘管直接输送至空肠，通过便携式输注泵进行调控，在减少关期的时间和减轻异动症有着较好效果，可减少帕金森患者运动波动，但不良反应是很容易输注泵移位、胃造口感染、皮肤刺激、周围神经病变以及疼痛等。另外为了减少左旋多巴副作用常与外周脱羧酶抑制剂制成复方制剂，但并没有明显改善严重的外周不良反应。
5.鼻腔给药历史悠久，给药后经吸收药物直接进入体循环，可避免肝脏首关效应，减少了药物药效的降解，并提高了药物的生物利用度。但经鼻粘膜给药时，给药剂量受限，药物在鼻粘膜上停留时间短，对药物鼻粘膜的吸收产生一定的影响。由于不少药物和辅料对鼻纤毛及黏膜有一定的刺激性，经鼻粘膜递送某些药物或辅料后，纤毛运动和粘液分泌受到影响，可引起一系列的鼻粘膜生理结构和功能改变，包括纤毛摆动缓慢，鼻粘膜形态学损伤，生物膜结构改变和蛋白质以及酶的释放增加，使鼻腔无法发挥其正常的生理屏障功能，阻碍了药物经鼻腔制剂的开发。
6.目前帕金森病的药物制剂药效一般，不能有效提高药物生物利用度且降低不良反应，难以满足临床需求。

技术实现要素：

7.本发明目的在于解决上述技术问题提供一种提高脑靶向的左旋多巴组合物及其应用。
8.为实现上述目的，本发明技术方案是：
9.一种提高脑靶向的左旋多巴组合物，组合物为左旋多巴与芳香开窍类中药，其中，左旋多巴占组合物质量的45-99％。
10.所述芳香开窍类中药为薄荷醇、柠檬烯、桉叶油、薄荷油、冬青油、藏茴香油、丁香油、松节油左旋龙脑、、麝香、苏合香、安息香、石菖蒲的一种或几种。
11.所述芳香开窍类中药为麝香、左旋龙脑、苏合香、安息香、薄荷醇中的一种或几种。
12.一种所述组合物的应用，所述组合物在制备帕金森病的药物制剂中的应用。
13.所述制剂为鼻用凝胶制剂。
14.一种帕金森病的鼻用凝胶制剂，制剂含所述组合物。
15.所述制剂以所述组合物作为活性组分与药学上可接受的助剂混合，其中，制剂按质量百分比计5～50％活性组分和50％～95％助剂。
16.所述制剂按重量百分比计，5～50％左旋多巴、0.5％～6％芳香开窍类中药、0.4％～2％凝胶基质、5％～20％保湿剂、0.2％～5％其他助剂和水。
17.所述凝胶基质为聚丙烯酸、聚乙烯醇、卡波姆、纤维素类基质中的一种或几种；
18.所述保湿剂为甘油和/或丙二醇；
19.所述其他助剂为抑菌剂、ph调节剂、抗氧剂中的一种或几种。
20.所述其他助剂为抑菌剂、ph调节剂和抗氧剂；抑菌剂占制剂质量的0.05％～
0.2％，抑菌剂为尼泊金乙酯、山梨酸钾、对羟基甲酸丙酯、苯甲醇的一种或几种；所述ph调节剂调节制剂体系ph范围为5～6，ph调节剂为三乙醇胺、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种或几种；所述抗氧剂占制剂质量的0.1％～0.3％，抗氧剂为维生素c、乙二胺四乙酸二钠、亚硫酸氢钠中的一种或几种。
21.一种所述制剂的制备方法：
22.步骤一：将凝胶基质加入水中，使其充分溶胀，而后加入ph调节剂调节溶胀体系ph5～6，待用；
23.步骤二：按上述比例将芳香开窍类中药、保湿剂混合均匀，而后加入上述制备凝胶基质混匀，待用；
24.步骤三：按上述比例将左旋多巴5～50％加至上述步骤二所得混合物中；
25.步骤四：按上述比例将抗氧化剂和抑菌剂混合至步骤三所得混合物中，而后加入余量水，搅拌混匀，获得鼻用凝胶；
26.步骤五：将上述获得鼻用凝胶制备成鼻用给药制剂。
27.所述鼻用凝胶制备为鼻用给药制剂的剂型为气雾剂、滴鼻剂、喷雾剂或粉剂。
28.本发明与现有技术相比较，其具有以下有益效果：
29.1.本发明将左旋多巴与中药促渗剂组合，利用如芳香开窍类中药可以促进其他药物透过血脑屏障的特点，提高左旋多巴脑靶向能力，减少外周不良反应。
30.2.本发明将左旋多巴与芳香类开窍中药促渗透剂组合制备成鼻粘膜给药系统的剂型，经鼻给药透过血脑屏障能够绕过血脑屏障进入中枢神经，同时也避免首过效应，提高生物利用度，进一步提高靶向作用。
31.3.本发明制备成凝胶制剂，以气雾剂、滴鼻剂、喷雾剂、粉剂等通过鼻腔给药。
附图说明
32.图1为本发明实施例提供的不同鼻用制剂体外透皮左旋多巴累积渗透量图。
33.图2为本发明实施例提供的不同鼻用制剂在皮肤中药物滞留量图。
具体实施方式
34.以下结合实例对本发明的具体实施方式做进一步说明，应当指出的是，此处所描述的具体实施方式只是为了说明和解释本发明，并不局限于本发明。
35.本发明提供通过鼻粘膜给药方式的左旋多巴组合物，该组合物可提高左旋多巴脑部靶向与生物利用度，降低毒副作用。
36.同时，本发明利用某些特定的“使药”功能，能够促使药物透过血脑屏障进入中枢神经系统，从而直接在中枢神经系统发挥药效。芳香开窍药在生理状态下与其他药物合用，可促进其他药物跨血脑屏障入脑进入中枢神经系统，提高药物脑内浓度。加入芳香开窍类中药可作为良好的渗透增强剂促进左旋多巴的吸收，提高其脑靶向能力，减少左旋多巴用药剂量，降低毒副作用，延长其作用时间，提高药物的透皮速率、靶向作用，还可以减少药物的刺激性，并提高疗效。
37.实施例1
38.步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至
5～6使成凝胶基质，称取0.04g凝胶基质；
39.步骤二：
40.称取芳香开窍类中药原麝香0.025g，左旋龙脑0.025g，苏合油香0.025g，安息香胶0.025g，薄荷醇0.025g，加入1.5g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
41.步骤三：加入2g左旋多巴至上述混合物中；
42.步骤四：在上述混合物中加入0.01g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和6.3g纯化水，搅拌混匀；
43.步骤五：按照常规制备方法制成喷雾制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
44.鼻用凝胶对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响：
45.采用在体法考察鼻黏膜纤毛毒性。阴性对照组、阳性对照组依次为生理盐水、1％去氧胆酸钠溶液处理。将蟾蜍仰卧固定，止血钳牵拉，使口张开，于上腭黏膜分别滴加生理盐水、1％去氧胆酸钠溶液、上述制备获得鼻用凝胶0.5ml。使完全浸没上颚。30min后用生理盐水洗净药物，分离出大小约为3mm*3mm的蟾蜍上颚黏膜，再用生理盐水清洗附着的血块，将黏膜朝上平铺于载玻片上，用生理盐水润湿，盖上盖玻片，排出气泡，光学显微镜下(10*40倍)观察纤毛运动情况。再将载玻片室温放置于加有少量生理盐水的密闭容器内，每隔30min取出，显微镜下观察，并记录纤毛持续运动时间。记录以上各实验组的纤毛运动停止时间，计算纤毛持续运动时间百分比。此百分比越高，表明制剂对纤毛的毒性越小，制剂的安全性越高。一般以纤毛持续运动时间百分比大于85％为制剂的安全阈值。
46.运动时间百分比＝给药运动时间/阴性对照组运动时间*100％
47.纤毛毒性试验持续运动时间表见表1，以生理盐水组纤毛持续运动时间为100％，按照上述公式计算得到各组纤毛持续运动时间百分比。结果显示阳性对照组纤毛持续运动时间百分比为8.33％，有明显的纤毛毒性；鼻用凝胶组纤毛在显微镜下清晰完整且纤毛运动活跃，纤毛持续运动时间百分比为96.67％(》85％)，表明鼻用凝胶对鼻黏膜纤毛运动基本无影响，没有显著毒性，用于鼻腔给药基本安全。
48.皮肤刺激性实验：
49.实验开始前家兔饲养1周，观察摄食和行为，完全无异常后随机分为单次给药组和多次给药组，每组包含完整皮肤组5只。单次给药：在给药前24h，背部脊柱两侧剪毛，8％硫化钠溶液脱毛，去毛范围每侧约5cm*5cm。实验采用同体左右自身对照，家兔右侧脱毛区涂以0.5ml上述制备获得鼻用凝胶，左侧脱毛区涂以蒸馏水0.5ml作为对照，用2层无菌纱布覆盖，再盖以聚乙烯膜，再加兔套包裹固定单笼饲养。6h后，去除覆盖物，温水洗净药物，自然光下，肉眼观察去除受试物后1、24、48、72h的局部情况，观察涂药处有无红肿情况。多次给药：实验操作同单次给药，每日给药1次，连续7次。每次去除受试物后注意观察局部皮肤是否有红肿，记录第7次给药后1、24、48、72h的局部情况。
50.鼻用凝胶对皮肤刺激性结果见表2,单次给药：在去除受试药物后各个时间点内，肉眼观察皮肤刺激性反应，未发现明显红斑、水肿等反应，左右两边无显著差异。多次给药：未见皮肤有红斑、水肿等刺激反应。实验结果表明鼻用凝胶对家兔皮肤无刺激性。
51.体外透皮实验：
52.采用franz扩散池法进行体外透皮实验。接受池中加入7ml乙醇-生理盐水(3：7，v/
v)作为接受介质，调节扩散池温度至(32
±
1)℃，恒速搅拌(约200r/min)，分别于实验开始后0.5，1，2，4，6，8，10，12，24h从样品接受池中吸取1ml接受液，同时各补加同温度同体积接受液。将所吸取的接受液用0.22μm微孔滤膜过滤后，并按下式计算累积渗透量(q)、渗透速率常数(j)，结果见图1。
53.q＝[cn×v0
+∑ci×
v]/s，其中，cn：第n次取样时接受液中的浓度；ci：第i次取样时接受液中的浓度；v0：扩散池体积7ml；v：取样体积1ml；s：扩散面积1.3267cm2。
[0054]
经预实验结果可知，制剂体外透皮释放行为符合higuchi模型，q＝j
·
t1/2+a，其中，q为累积透过量，j为透皮速率常数，t为时间，a为积分常数，拟合结果见表3。
[0055]
皮肤内药物滞留量实验：
[0056]
待透皮实验终止后，取出皮肤，用蒸馏水洗净后，滤纸吸干水分，称重，剪碎，加入适量生理盐水研磨成乳糜状，超声匀浆，4000r/min离心10min，上清液，过滤，取续滤液到10ml容量瓶中。计算单位面积皮肤药物滞留量，将所得数据绘制成直方图，以便直观的表现两者的比较，结果见图2。
[0057]
实施例2
[0058]
步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节ph至5～6使成凝胶基质，称取0.04g凝胶基质；
[0059]
步骤二：
[0060]
称取芳香开窍类中药薄荷醇0.025g，苏合油香0.025g，安息香胶0.025g，干石菖蒲0.025g，左旋龙脑0.15g，加入1.5g丙二醇，混合超声后，加入上述凝胶基质中，混匀；
[0061]
步骤三：加入2g左旋多巴至上述混合物中；
[0062]
步骤四：在上述混合物中加入0.02g亚硫酸氢钠，0.01g尼泊金乙酯和6.2g纯化水，搅拌混匀；
[0063]
步骤五：按照常规制备方法制成滴鼻剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0064]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0065]
实施例3
[0066]
步骤一：将甲基纤维素加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至5～6使成凝胶基质，称取0.2g凝胶基质；
[0067]
步骤二：
[0068]
称取芳香开窍类中药原麝香0.025g，薄荷醇0.025g，苏合油香0.025g，安息香胶0.025g，左旋龙脑0.1g，加入1g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
[0069]
步骤三：加入2g左旋多巴至上述混合物中；
[0070]
步骤四：在上述混合物中加入0.03g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和6.6g纯化水，搅拌混匀；
[0071]
步骤五：按照常规制备方法制成喷雾制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0072]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响
的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0073]
实施例4
[0074]
步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至5～6使成凝胶基质，称取0.05g凝胶基质；
[0075]
步骤二：称取芳香开窍类中药原麝香0.2g，加入1g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
[0076]
步骤三：加入2.1g左旋多巴至上述混合物中；
[0077]
步骤四：在上述混合物中加入0.03g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和6.6g纯化水，搅拌混匀；
[0078]
步骤五：按照常规制备方法制成凝胶制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0079]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0080]
实施例5
[0081]
步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至5～6使成凝胶基质，称取0.05g凝胶基质；
[0082]
步骤二：称取芳香开窍类中药薄荷醇0.2g，加入1g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
[0083]
步骤三：加入2.1g左旋多巴至上述混合物中；
[0084]
步骤四：在上述混合物中加入0.03g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和6.6g纯化水，搅拌混匀；
[0085]
步骤五：按照常规制备方法制成凝胶制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0086]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0087]
实施例6
[0088]
步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至5～6使成凝胶基质，称取0.05g凝胶基质；
[0089]
步骤二：称取芳香开窍类中药左旋龙脑0.2g，加入1g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
[0090]
步骤三：加入2.1g左旋多巴至上述混合物中；
[0091]
步骤四：在上述混合物中加入0.03g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和6.6g纯化水，搅拌混匀；
[0092]
步骤五：按照常规制备方法制成凝胶制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0093]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响
的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0094]
实施例7
[0095]
步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至5～6使成凝胶基质，称取0.06g凝胶基质；
[0096]
步骤二：称取芳香类开窍类中药左旋龙脑0.1g，加入1.5g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
[0097]
步骤三：加入2.5g左旋多巴至上述混合物中；
[0098]
步骤四：在上述混合物中加入0.03g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和5.8g纯化水，搅拌混匀；
[0099]
步骤五：冷冻干燥后加入微晶纤维素，制成粉末制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0100]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0101]
实施例8
[0102]
步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至5～6使成凝胶基质，称取0.05g凝胶基质；
[0103]
步骤二：称取芳香类开窍类中药左旋龙脑0.1g，薄荷醇0.2g，加入1g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
[0104]
步骤三：加入2.5g左旋多巴至上述混合物中；
[0105]
步骤四：在上述混合物中加入0.03g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和6.1g纯化水，搅拌混匀；
[0106]
步骤五：冷冻干燥后加入微晶纤维素，制成粉末制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0107]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0108]
实施例9
[0109]
步骤一：将卡波姆加入水中，使其充分溶胀，而后加入三乙醇胺调节溶胀体系ph至5～6使成凝胶基质，称取0.04g凝胶基质；
[0110]
步骤二：称取芳香类开窍类中药左旋龙脑0.3g，薄荷醇0.3g，加入1g丙二醇，混合超声后，加入到上述凝胶基质中，混匀；
[0111]
步骤三：加入2.5g左旋多巴至上述混合物中；
[0112]
步骤四：在上述混合物中加入0.03g亚硫酸氢钠，0.02g尼泊金乙酯和5.8g纯化水，搅拌混匀；
[0113]
步骤五：冷冻干燥后加入微晶纤维素，制成粉末制剂，定量灌装，封口，检查重量，检测泄露，包装。
[0114]
将上述获得鼻用凝胶按照上述实施例1记载的方式进行对蟾蜍鼻黏膜纤毛的影响
的测试、皮肤刺激性实验、体外透皮实验和皮肤内药物滞留量实验的测定，效果参见表1、表2、图1和图2。
[0115]
实施例10
[0116]
以上述实施例6加入芳香开窍类中药左旋龙脑为例，将鼻部给药制剂制备成的鼻用凝胶进行以下大鼠药物动力学实验。
[0117]
实验动物：sd大鼠，体重约200g。
[0118]
实验方法：健康的大鼠，雌雄各半，实验前禁食12h，自由饮水。
[0119]
将实验动物分为三组：
[0120]
a组，鼻腔给左旋多巴鼻用凝胶(按照上述实施例6记载制备仅是不添加左旋龙脑)，按0.21g/kg给药；
[0121]
b组，鼻腔给左旋龙脑促左旋多巴鼻用凝胶(按照上述实施例6记载制备)，按0.21g/kg给药；
[0122]
c组，灌胃左旋多巴片(国药准字h45020051)，按44.1mg/kg给药，三组左旋多巴的给药量相同。
[0123]
对大鼠在以下取样时间点：10min、30min、45min、1h、1.5h、2h、3h、4h、8h、12h进行眼眶取血。
[0124]
鼻腔给药时，用25％乌拉坦溶液将大鼠麻醉，用1ml带针头注射器，在针头处接上直径约1mm左右的软管。用此装置吸取药液，将软管插入大鼠鼻孔约5-10mm，即可将药液推入，结果见表4。
[0125]
将左旋多巴鼻腔给药与灌胃左旋多巴片给药的auc
0-∞
作比较，计算出左旋多巴鼻用凝胶剂在大鼠体内的相对生物利用度(fr)。
[0126][0127]
(注：in代表鼻腔给药；po代表灌胃给药)
[0128]
未加左旋龙脑鼻用凝胶剂对灌胃给药制剂的相对生物利用度为542.58％，加左旋龙脑鼻用凝胶剂对灌胃给药制剂的相对生物利用度为1086.17％。
[0129]
采取鼻腔与灌胃给药研究左旋多巴在体内的药动学，比较了鼻腔与灌胃给药的药动学各项参数，并进行了统计学分析。研究中发现，鼻用凝胶剂的t
max
明显小于左旋多巴片剂，加左旋龙脑鼻用凝胶达峰时间是灌胃给药组的0.55，凝胶剂的c
max
值较灌胃组有显著的差异，说明药物在体内的吸收明显加快；未加左旋龙脑左旋多巴鼻用凝胶组相对生物利用度约为左旋多巴片剂的5倍，加左旋龙脑左旋多巴鼻用凝胶组相对生物利用度约为左旋多巴片剂的11倍。可见，与左旋多巴片剂相比，未加左旋龙脑左旋多巴鼻用凝胶剂鼻腔给药与加左旋龙脑左旋多巴鼻用凝胶剂鼻腔给药，其吸收迅速，生物利用度显著提高。
[0130]
实施例11
[0131]
以上述实施例6加入芳香开窍类中药左旋龙脑为例，将鼻部给药制剂制备成的鼻用凝胶进行以下大鼠脑组织分布实验。
[0132]
实验动物：sd大鼠，体重约200g。
[0133]
实验方法：健康的大鼠，雌雄各半，实验前禁食12h，自由饮水。
[0134]
将实验动物分为三组：
[0135]
a组，鼻腔给左旋多巴鼻用凝胶(按照上述实施例6记载制备仅是不添加左旋龙脑)，按0.21g/kg给药；
[0136]
b组，鼻腔给左旋龙脑促左旋多巴鼻用凝胶(按照上述实施例6记载制备)，按0.21g/kg给药；
[0137]
c组，灌胃左旋多巴片(国药准字h45020051)，按44.1mg/kg给药，三组左旋多巴的给药量相同。
[0138]
脑组织分布实验：分别在30min、1h、5h时处死实验动物，取出脑、心、肝、脾、肺、肾组织置于-20℃冰箱保存，进行测定分析。
[0139]
鼻腔给药时，用25％乌拉坦溶液将大鼠麻醉，用1ml带针头注射器，在针头处接上直径约1mm左右的软管。用此装置吸取药液，将软管插入大鼠鼻孔约5-10mm，即可将药液推入，结果见表5。
[0140]
由脑组织样本测定结果可以看出，鼻用凝胶给药组与灌胃市售左旋多巴片剂给药组相比较，在0.5h鼻用凝胶药物到达大鼠脑组织的浓度更高，效果明显好，可能是由于药物可以部分透过鼻腔嗅神经通路直接到达脑组织。而加入左旋龙脑组的左旋多巴鼻用凝胶的效果更好于未加左旋龙脑组的左旋多巴鼻用凝胶，可能是由于左旋龙脑属于芳香类开窍中药，起到促渗透作用，使左旋多巴更易透过血脑屏障，使左旋多巴在脑中含量更高。
[0141]
表1不同药物对蟾蜍鼻黏膜纤毛持续运动时间的影响(n＝3)
[0142]
[0143][0144]
表2鼻用凝胶对家兔皮肤刺激反应结果(n＝5)
[0145]
[0146][0147]
表3鼻用制剂higuchi拟合方程
[0148][0149]
表4左旋多巴组合物鼻用凝胶剂的大鼠药物动力学实验平均t
max
、t
1/2
、c
max
及auc
0-t
(n＝6)
[0150][0151]
表5左旋多巴组合物鼻用凝胶剂的大鼠脑组织含量(n＝6)
[0152][0153]
综上所述本发明鼻部给药组合物对蟾蜍鼻黏膜和家兔皮肤均无刺激性，其体外透皮释放实验中累积渗透量可高达422μg/cm2，释药效果良好，药物在皮肤的蓄积量高达170μg/cm2，更有利于药物的鼻黏膜吸收，同时与现有药剂相比，本发明鼻部给药组合物不仅具有相对较短的达峰时间，较长的半衰期，更具有高达约7倍的达峰浓度和约11倍的相对生物利用度。除此之外，本发明鼻部给药组合物在脑中也表现出较高的药物浓度，具有很好的脑靶向能力。
[0154]
上述实施例仅是为阐明本发明技术方案内容而举例的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质和原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化、劣化技术方案或手段，均应视为本发明技术方案的等同或置换方式，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：

1.一种提高脑靶向的左旋多巴组合物，其特征在于：组合物为左旋多巴与芳香开窍类中药，其中，左旋多巴占组合物质量的45-99％。2.按权利要求1所述提高脑靶向的左旋多巴组合物，其特征在于：所述芳香开窍类中药为薄荷醇、柠檬烯、桉叶油、薄荷油、冬青油、藏茴香油、丁香油、松节油、左旋龙脑、麝香、苏合香、安息香、石菖蒲的一种或几种。3.按权利要求2所述提高脑靶向的左旋多巴组合物，其特征在于：所述芳香开窍类中药为麝香、左旋龙脑、苏合香、安息香、薄荷醇中的一种或几种。4.一种权利要求1-3任意一项所述组合物的应用，其特征在于：所述组合物在制备帕金森病的药物制剂中的应用。5.按权利要求4所述的应用，其特征在于：所述制剂为鼻用凝胶制剂。6.一种帕金森病的鼻用凝胶制剂，其特征在于：制剂含权利要求1-3任意一项所述组合物。7.按权利要求6所述制剂，其特征在于：所述制剂以权利要求1-3任意一项组合物作为活性组分与药学上可接受的助剂混合，其中，制剂按质量百分比计5～50％活性组分和50％～95％助剂。8.按权利要求7所述制剂，其特征在于：所述制剂按重量百分比计，5～50％左旋多巴、0.5％～6％芳香开窍类中药、0.4％～2％凝胶基质、5％～20％保湿剂、0.2％～5％其他助剂和水。9.按权利要求8所述的制剂，其特征在于：所述其他助剂为抑菌剂、ph调节剂和抗氧剂；抑菌剂占制剂质量的0.05％～0.2％，抑菌剂为尼泊金乙酯、山梨酸钾、对羟基甲酸丙酯、苯甲醇的一种或几种；所述ph调节剂调节制剂体系ph范围为5～6，ph调节剂为三乙醇胺、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种或几种；所述抗氧剂占制剂质量的0.1％～0.3％，抗氧剂为维生素c、乙二胺四乙酸二钠、亚硫酸氢钠中的一种或几种。10.一种权利要求6所述制剂的制备方法，其特征在于步骤一：将凝胶基质加入水中，使其充分溶胀，而后加入ph调节剂调节溶胀体系ph5～6，待用；步骤二：将芳香开窍类中药、保湿剂混合均匀，而后加入上述制备凝胶基质混匀，待用；步骤三：按上述比例将左旋多巴5～50％加至上述步骤二所得混合物中；步骤四：按上述比例将抗氧化剂和抑菌剂混合至步骤三所得混合物中，而后加入余量水，搅拌混匀，获得鼻用凝胶；步骤五：将上述获得鼻用凝胶制备成鼻用给药制剂。

技术总结

本发明属于医药技术领域，具体得到说涉及一种提高脑靶向的左旋多巴组合物及其应用。组合物为左旋多巴与芳香开窍类中药，其中，左旋多巴占组合物质量的45-99％。本发明将左旋多巴与芳香开窍类中药组合制备成鼻粘膜给药系统的剂型，经鼻给药能够绕过血脑屏障进入中枢神经，同时也可避免首过效应，提高药物生物利用度，进一步提高靶向作用。进一步提高靶向作用。进一步提高靶向作用。