抗人VEGF抗体在制备实体瘤的药物中的应用的制作方法

抗人vegf抗体在制备实体瘤的药物中的应用1.本发明要求于2021年6月30日，向中国专利局提交的，发明名称为“抗人vegf抗体在制备实体瘤的药物中的应用”，申请号为202110740378.5的中国专利申请的优先权，该专利申请的全文通过引用的方式结合至本发明。

技术领域

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：2.本发明涉及医药领域，具体涉及抗人vegf抗体在制备实体瘤的药物中的应用。

背景技术

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：：3.肿瘤是我国以及全球主要的公共健康问题。在我国肿瘤死亡占全部死因的1/4。2016年1月，国家癌症中心主任陈万青带领团队在国际著名癌症专业期刊《癌症通讯》(cancerletter)上首次发布了我国居民癌症现患数据。结果显示，我国5年内诊断为癌症且仍然存活的病例数约为749万，总体5年癌症发病率为250.28/10万，5年患病率为556/10万，累积发病率(0～74岁)为21.20％。乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌和食道癌是我国患病率最高的前五种癌症，占中国癌症负担的56.1％。4.血管内皮生长因子(vegf)是一种二硫键连接的肝素结合二聚体糖蛋白，可与内皮细胞表面的受体特异性结合，发挥生物学效应。研究表明，vegf在肿瘤的生长和转移中起关键的作用。如何有效地通过抗人vegf抗体实体瘤，尤其是晚期或转移性实体瘤，具有重要意义。5.有鉴于此，特提出本发明。技术实现要素：6.本发明提供抗人vegf抗体在制备用于晚期或转移性实体瘤患者的药物中的应用或抗人vegf抗体、紫杉醇和卡铂在制备用于肺癌的药物中的应用，用于提高对晚期或转移性实体瘤的效果。7.在第一方面，本发明提供抗人vegf抗体在制备用于晚期实体瘤或转移性实体瘤患者的药物中的应用，所述抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3,其中：8.所述hcdr1选自seqidno:5-7任一项所示序列；9.所述hcdr2选自seqidno:8-10任一项所示序列；10.所述hcdr3选自seqidno:11-12任一项所示序列；11.所述lcdr1选自seqidno:13-14任一项所示序列；12.所述lcdr2选自seqidno:15-16任一项所示序列；和，13.所述lcdr3选自seqidno:17所示序列。14.在一些具体的实施方式中，所述重链可变区具有如seqidno：1所示序列，或与seqidno：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seqidno：3所示的序列，或与seqidno：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。15.在一些具体的实施方式中，所述抗体的重链恒定区具有如seqidno：2所示序列，或与seqidno：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述抗体的轻链恒定区具有如seqidno：4所示的序列，或与seqidno：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。16.在一些具体的实施方式中，所述实体瘤为组织学、细胞学或影像学证实的进展期实体瘤或转移性恶性实体肿瘤。17.在一些具体的实施方式中，所述实体瘤为结直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、肝癌、胰体尾癌或十二指肠乳头癌。18.在一些具体的实施方式中，所述患者为缺少标准疗法或者标准疗法无效的患者。19.在一些具体的实施方式中，所述患者既往接受过化疗、放疗和/或手术方案。20.在一些具体的实施方式中，所述患者存在或手术切除前存在转移病灶，可选地，所述转移病灶为1处、2处、3处或大于3处。21.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体向所述患者施用的有效施用量为1.5～8mg/kg，优选2mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg或7.5mg/kg；22.优选地，所述抗人vegf抗体的剂型为单剂量剂型，每剂包含能够给予患者所述有效施用量的抗体量。23.在一些具体的实施方式中，所述药物的活性成分仅包括所述抗人vegf抗体，或者，所述药物还包括所述抗人vegf抗体以外的其他活性成分(抗人vegf抗体以外的其他剂)。24.在第二方面，本发明还提供一种晚期实体瘤或转移性实体瘤患者的方法，所述方法包括向患者施用有效量的抗人vegf抗体，所述抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3,其中：25.所述hcdr1选自seqidno：5-7任一项所示序列；26.所述hcdr2选自seqidno：8-10任一项所示序列；27.所述hcdr3选自seqidno：11-12任一项所示序列；28.所述lcdr1选自seqidno：13-14任一项所示序列；29.所述lcdr2选自seqidno：15-16任一项所示序列；和，30.所述lcdr3选自seqidno：17所示序列。31.在一些具体的实施方式中，所述重链可变区具有如seqidno：1所示序列，或与seqidno：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seqidno：3所示的序列，或与seqidno：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。32.在一些具体的实施方式中，所述抗体的重链恒定区具有如seqidno：2所示序列，或与seqidno：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述抗体的轻链恒定区具有如seqidno：4所示的序列，或与seqidno：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。33.在一些具体的实施方式中，所述实体瘤为组织学、细胞学或影像学证实的进展期实体瘤或转移性恶性实体肿瘤。34.在一些具体的实施方式中，所述实体瘤为结直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、肝癌、胰体尾癌或十二指肠乳头癌。35.在一些具体的实施方式中，所述患者既往接受过化疗、放疗和/或手术方案。36.在一些具体的实施方式中，所述患者存在或手术切除前存在单处或多处转移病灶，可选地，所述多处转移病灶为2处、3处或大于3处转移病灶。37.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体向所述患者施用的有效施用量为1.5～8mg/kg，优选2mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg或7.5mg/kg。38.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体的给药频次为每2周给药1次。39.在一些具体的实施方式中，所述药物的活性成分仅包括所述抗人vegf抗体，或者，所述所述药物还包括所述抗人vegf抗体以外的其他活性成分(所述抗人vegf抗体以外的其他剂)。40.在第三方面，本发明还提供一种抗人vegf抗体，用于晚期或转移性实体瘤患者，所述抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3,其中：41.所述hcdr1选自seqidno：5-7任一项所示序列；42.所述hcdr2选自seqidno：8-10任一项所示序列；43.所述hcdr3选自seqidno：11-12任一项所示序列；44.所述lcdr1选自seqidno：13-14任一项所示序列；45.所述lcdr2选自seqidno：15-16任一项所示序列；和，46.所述lcdr3选自seqidno：17所示序列。47.在一些具体的实施方式中，所述重链可变区具有如seqidno：1所示序列，或与seqidno：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seqidno：3所示的序列，或与seqidno：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。48.在一些具体的实施方式中，所述抗体的重链恒定区具有如seqidno：2所示序列，或与seqidno：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述抗体的轻链恒定区具有如seqidno：4所示的序列，或与seqidno：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。49.在一些具体的实施方式中，所述实体瘤为组织学、细胞学或影像学证实的进展期实体瘤或转移性恶性实体肿瘤。50.在一些具体的实施方式中，所述实体瘤为结直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、肝癌、胰体尾癌或十二指肠乳头癌。51.在一些具体的实施方式中，所述患者为缺少标准疗法或者标准疗法无效的患者。52.在一些具体的实施方式中，所述患者既往接受过化疗、放疗和/或手术方案。53.在一些具体的实施方式中，所述患者至少存在1处、2处、3处或大于3处转移病灶。54.在一些具体的实施方式中，所述患者存在或手术切除前存在转移病灶，可选地，所述转移病灶为1处、2处、3处或大于3处灶。55.在一些具体的实施方式中，所述抗体的有效施用量为1.5～8mg/kg，优选2mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg或7.5mg/kg；56.优选地，所述抗人vegf抗体的剂型为单剂量剂型，每剂包含能够给予患者所述有效施用量的抗体量。57.在第四方面，本发明还提供抗人vegf抗体、紫杉醇和卡铂在制备用于肺癌的药物中的应用抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3,其中：58.所述hcdr1选自seqidno：5-7任一项所示序列；59.所述hcdr2选自seqidno：8-10任一项所示序列；60.所述hcdr3选自seqidno：11-12任一项所示序列；61.所述lcdr1选自seqidno：13-14任一项所示序列；62.所述lcdr2选自seqidno：15-16任一项所示序列；和，63.所述lcdr3选自seqidno：17所示序列。64.在一些具体的实施方式中，所述重链可变区具有如seqidno：1所示序列，或与seqidno：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seqidno：3所示的序列，或与seqidno：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。65.在一些具体的实施方式中，所述重链具有如seqidno：2所示序列，或与seqidno：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链具有如seqidno：4所示的序列，或与seqidno：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。66.在一些具体的实施方式中，所述肺癌为非小细胞肺癌。67.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体的有效施用量为0.8～7.5mg/kg，优选为0.8mg/kg、2.5mg/kg或7.5mg/kg，所述紫杉醇的有效施用量为10mg/kg，所述卡铂的有效施用量为80mg/kg。68.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体的剂型为单剂量剂型，每剂含能够给予患者有效施用量的抗体量。69.在一些具体的实施方式中，所述药物还包括除vegf抗体、紫杉醇和卡铂以外的其他活性成分(其他剂)。70.在第五方面，本发明还提供一种肺癌方法，所述方法包括向患者施用有效量的抗人vegf抗体、紫杉醇和卡铂，所所述抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中：71.所述hcdr1选自seqidno：5-7任一项所示序列；72.所述hcdr2选自seqidno：8-10任一项所示序列；73.所述hcdr3选自seqidno：11-12任一项所示序列；74.所述lcdr1选自seqidno：13-14任一项所示序列；75.所述lcdr2选自seqidno：15-16任一项所示序列；和，76.所述lcdr3选自seqidno：17所示序列。77.在一些具体的实施方式中，所述重链可变区具有如seqidno：1所示序列，或与seqidno：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seqidno：3所示的序列，或与seqidno：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。78.在一些具体的实施方式中，所述抗体的重链恒定区具有如seqidno：2所示序列，或与seqidno：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述抗体的轻链恒定区具有如seqidno：4所示的序列，或与seqidno：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。79.在一些具体的实施方式中，所述肺癌为非小细胞肺癌。80.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体的有效施用量为0.8～7.5mg/kg，优选为0.8mg/kg、2.5mg/kg或7.5mg/kg，所述紫杉醇的有效施用量为10mg/kg，所述卡铂的有效施用量为80mg/kg。81.在第六方面，本发明还提供抗人vegf抗体、紫杉醇和卡铂的组合，用于肺癌，所述抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中：82.所述hcdr1选自seqidno：5-7任一项所示序列；83.所述hcdr2选自seqidno：8-10任一项所示序列；84.所述hcdr3选自seqidno：11-12任一项所示序列；85.所述lcdr1选自seqidno：13-14任一项所示序列；86.所述lcdr2选自seqidno：15-16任一项所示序列；和，87.所述lcdr3选自seqidno：17所示序列。88.在一些具体的实施方式中，所述重链可变区具有如seqidno：1所示序列，或与seqidno：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seqidno：3所示的序列，或与seqidno：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。89.在一些具体的实施方式中，所述抗体的重链恒定区具有如seqidno：2所示序列，或与seqidno：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述抗体的轻链恒定区具有如seqidno：4所示的序列，或与seqidno：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。90.在一些具体的实施方式中，所述肺癌为非小细胞肺癌。91.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体的有效施用量为0.8～7.5mg/kg，优选为0.8mg/kg、2.5mg/kg或7.5mg/kg，所述紫杉醇的有效施用量为10mg/kg，所述卡铂的有效施用量为80mg/kg。92.在一些具体的实施方式中，所述抗人vegf抗体的剂型为单剂量剂型，所述单剂量剂型包括能够给予患者所述有效施用量的所述抗人vegf抗体。93.本发明所述vegf抗体为人源化兔抗人vegf抗体，用于晚期或转移性结实体瘤的。基于临床实验的结果，本发明的方案，能够更有效的实现晚期或转移性实体瘤的，有利于增加晚期或转移性实体瘤患者的选择，使更多患者受益。94.术语定义和说明95.除非本发明另外定义，与本发明相关的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员所理解的含义。96.此外，除非本文另有说明，本文单数形式的术语应包括复数形式，复数形式的术语应包括单数形式。更具体地，如在本说明书和所附权利要求中所使用的，除非另外明确指出，否则单数形式“一种”和“这种”包括复数指示物。97.本文术语“包括”、“包含”和“具有”之间可互换使用，旨在表示方案的包含性，意味着所述方案可存在除所列出的元素之外的其他元素。同时应当理解，在本文中使用“包括”、“包含”和“具有”描述，也提供“由……组成”方案。98.术语“和/或”在本文使用时，包括“和”、“或”和“由所属术语链接的要素的全部或任何其他组合”的含义。99.本文术语“抗体”按最广义使用，是指包含来自免疫球蛋白重链可变区的足够序列和/或来自免疫球蛋白轻链可变区的足够序列，从而能够特异性结合至抗原的多肽或多肽组合。本文“抗体”涵盖各种形式和各种结构，只要它们展现出期待的抗原结合活性，示例性地，包括完整抗体和抗原结合片段。本文所指“期待的抗原结合活性”是指例如抗体通常以高亲和力特异性结合抗原和实质上相同的抗原，但不以高亲和力结合不相关抗原。亲和力通常以平衡解离常数(equilibriumdissociationconstant，kd)来反映，其中较低kd表示较高亲和力。示例性地，高亲和力通常指具有约10-7m或更低、约10-8m或更低、约1×10-9m或更低、约1×10-10m或更低、1×10-11m或更低或1×10-12m或更低的kd。kd计算方式如下：kd＝kd/ka，其中kd表示解离速率，ka表示结合速率。可采用本领域周知的方法测量平衡解离常数kd，如表面等离子共振(例如biacore)或平衡透析法测定。100.本文“抗体”包括一种典型的“四链抗体”，其属于由两条重链(hc)和两条轻链(lc)组成的免疫球蛋白；重链是指这样的多肽链，其在n端到c端的方向上由重链可变区(vh)、重链恒定区ch1结构域、铰链区(hr)、重链恒定区ch2结构域、重链恒定区ch3结构域组成；并且，当所述全长抗体为ige同种型时，任选地还包括重链恒定区ch4结构域；轻链是在n端到c端方向上由轻链可变区(vl)和轻链恒定区(cl)组成的多肽链；重链与重链之间、重链与轻链之间通过二硫键连接，形成“y”字型结构。由于免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不同，故其抗原性也不同。据此，可将本文“免疫球蛋白”分为五类，或称为免疫球蛋白的同种型，即igm、igd、igg、iga和ige，其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。同一类ig根据其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数目和位置的差别，又可分为不同的亚类，如igg可分为igg1、igg2、igg3、igg4，iga可分为iga1和iga2。轻链通过恒定区的不同分为κ链或λ链。五类ig中每类ig都可以有κ链或λ链。101.本文“抗体”可以来源于任何动物，包括但不限于人和非人动物，所述非人动物可选自灵长类动物、哺乳动物、啮齿动物和脊椎动物，例如骆驼科动物、大羊驼、原鸵、羊驼、羊、兔、小鼠、大鼠或软骨鱼纲(例如鲨)。102.本文“抗体”包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、单特异性抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、单价抗体、多价抗体、完整抗体、完整抗体的片段、裸抗体、缀合抗体、嵌合抗体、人源化抗体或全人抗体。103.本文“全长抗体”、“完好抗体”和“完整抗体”在本文中可互换使用，是指具有基本上与天然抗体结构相似的结构。104.本文术语“人源化抗体”是指，经基因工程改造的非人源抗体，其氨基酸序列经修饰以提高与人源抗体的序列的同源性。通常而言，人源化抗体的全部或部分cdr区来自于非人源抗体(供体抗体)，全部或部分的非cdr区(例如，可变区fr和/或恒定区)来自于人源免疫球蛋白(受体抗体)。人源化抗体通常保留或部分保留了供体抗体的预期性质，包括但不限于，抗原特异性、亲和性、反应性、提高免疫细胞活性的能力、增强免疫应答的能力等。105.本文术语“可变区”是指抗体重链或轻链中牵涉使抗体结合抗原的区域，“重链可变区”与“vh”、“hcvr”可互换使用，“轻链可变区”与“vl”、“lcvr”可互换使用。天然抗体的重链和轻链的可变域(分别是vh和vl)一般具有相似的结构，每个域包含四个保守的框架区(fr)和三个高变区(hvr)。参见例如kindtetal.,kubyimmunology,6thed.,w.h.freemanandco.,p.91(2007)。单个vh或vl域可足以赋予抗原结合特异性。106.本文术语“互补决定区”与“cdr”可互换使用，通常指重链可变区(vh)或轻链可变区(vl)的高变区(hvr)，该部位因在空间结构上可与抗原表位形成精密的互补，故又称为互补决定区，其中，重链可变区cdr可缩写为hcdr，轻链可变区cdr可缩写为lcdr。本文术语“构架区”或“fr区”可互换，是指抗体重链可变区或轻链可变区中除cdr以外的那些氨基酸残基。通常典型的抗体可变区由4个fr区和3个cdr区按以下顺序组成：fr1-cdr1-fr2-cdr2-fr3-cdr3-fr4。107.对于cdr的进一步描述，参考kabat等人,j.biol.chem.,252:6609-6616(1977)；kabat等人,美国卫生与公共服务部，“sequencesofproteinsofimmunologicalinterest”(1991)；chothia等人,j.mol.biol.196:901-917(1987)；al-lazikanib.等人,j.mol.biol.,273:927-948(1997)；maccallum等人,j.mol.biol.262:732-745(1996)；abhinandan和martin,mol.immunol.,45:3832-3839(2008)；lefrancm.p.等人,devp.immunol.,27:55-77(2003)；以及honegger和plückthun,j.mol.biol.,309:657-670(2001)。本文“cdr”可由本领域公知的方式加以标注和定义，包括但不限于kabat编号系统、chothia编号系统或imgt编号系统，使用的工具网站包括但不限于abrsa网站(http://cao.labshare/abrsa/cdrs.php)、abysis网站(www.abysis.org/abysis/sequence_input/key_annotation/key_annotation.cgi)和imgt网站(http://www.imgt.org/3dstructure-db/cgi/domaingapalign.cgi#results)。108.示例性地，seqidno：1或3所示vh或vl序列的cdr如下表所示：其中kabat和chothia使用abysis网站，imgt使用imgt网站。109.表1抗vegf抗体重链及轻链cdr区氨基酸序列表[0110][0111]本文术语“重链恒定区”是指抗体重链的羧基端部分，其不直接参与抗体与抗原的结合，但是表现出效应子功能，诸如与fc受体的相互作用，其相对于抗体的可变结构域具有更保守的氨基酸序列。“重链恒定区”至少包含：ch1结构域，铰链区，ch2结构域，ch3结构域，或其变体或片段。“重链恒定区”包括“全长重链恒定区”和“重链恒定区片段”，前者具有基本上与天然抗体恒定区基本相似的结构，而后者仅包括“全长重链恒定区的一部分”。示例性地，典型的“全长抗体重链恒定区”由ch1结构域-铰链区-ch2结构域-ch3结构域组成；当抗体为ige时，其还包括ch4结构域；当抗体为重链抗体时，则其不包括ch1结构域。示例性地，典型的“重链恒定区片段”可选自ch1、fc或ch3结构域。[0112]本文术语“轻链恒定区”是指抗体轻链的羧基端部分，其不直接参与抗体与抗原的结合，所述轻链恒定区可选自恒定κ结构域或恒定λ结构域。[0113]本文术语“fc”是指完整抗体经木瓜蛋白酶水解而成的抗体羧基端部分，典型地，其包含抗体的ch3和ch2结构域。fc区包括例如天然序列fc区、重组fc区和变体fc区。尽管免疫球蛋白重链的fc区的边界可以略微变化，但是人igg重链的fc区通常被定义为从cys226位置的氨基酸残基或从pro230延伸至其羧基末端。fc区的c末端赖氨酸(根据kabat编号系统的残基447)可以例如在抗体的产生或纯化过程中，或通过对编码抗体重链的核酸重组工程化而除去，因此，fc区可包括或不包括lys447。[0114]本文术语“同一性”可通过以下方式计算获得：为确定两个氨基酸序列或两个核酸序列的“同一性”百分数，将所述序列出于最佳比较目的比对(例如，可以为最佳比对而在第一和第二氨基酸序列或核酸序列之一或二者中引入空位或可以为比较目的而抛弃非同源序列)。随后比较在对应氨基酸位置或核苷酸位置处的氨基酸残基或核苷酸。当第一序列中的位置由第二序列中对应位置处的相同氨基酸残基或核苷酸占据时，则所述分子在这个位置处是相同的。[0115]考虑到为最佳比对这两个序列而需要引入的空位的数目和每个空位的长度，两个序列之间的同一性百分数随所述序列共有的相同位置变化而变化。[0116]本文术语“药物”是指用以预防、及诊断疾病的物质，包括“药物组合物”或“药物组合”，示例性地，所述药物还包括细胞剂，例如用car-t细胞或car-nk细胞。“药物组合物”是指这样的制剂，其以允许包含在其中的活性成分的生物学活性有效的形式存在，并且不含有对施用所述药物组合物的受试者具有不可接受的毒性的另外的成分，所述活性成分可以为一种或多种。本文所用的术语“组合”或“药物组合”是指非固定组合，其中活性剂和至少一种另外的活性剂可以同时或在时间间隔内单独施用，特别是在这些时间间隔允许组合配偶体显示合作(例如，协同)效应的情况下。术语“非固定组合”意指活性成分(例如，一种活性剂和至少一种另外的活性剂)均作为分开的实体同时或在没有特定时间限制的情况下顺序地施用于患者，其中这种施用提供了患者体内两种化合物的有效水平。[0117]本文术语“”是指外科手术或药物处理(surgicalortherapeutictreatment)，其目的是预防、减缓(减少)对象中不希望的生理变化或病变，如癌症或肿瘤的进展。有益的或所希望的临床结果包括但不限于症状的减轻、疾病程度减弱、疾病状态稳定(即，未恶化)、疾病进展的延迟或减慢、疾病状态的改善或缓和、以及缓解(无论是部分缓解或完全缓解)，无论是可检测的或不可检测的。需要的对象包括已患有病症或疾病的对象以及易于患上病症或疾病的对象或打算预防病症或疾病的对象。当提到减缓、减轻、减弱、缓和、缓解等术语时，其含义也包括消除、消失、不发生等情况。[0118]本文术语“患者”或者“受试者”是指接受对如本发明所述的特定疾病或病症的的生物体。“患者”或者“受试者”的实例包括接受疾病或病症的哺乳动物，如人、灵长类动物(例如，猴)或非灵长类哺乳动物。[0119]本文术语“有效施用量”指单独给予或与另一剂组合给予细胞、组织或对象时能有效防止或缓解疾病病症或该疾病进展的剂用量。“有效施用量”还指足以缓解症状，例如、治愈、防止或缓解相关医学病症，或、治愈、防止或缓解这些病症的速度增加的化合物或具有作用的细胞(例如car-t细胞，car-nk细胞)的用量。[0120]本文术语“单剂量剂型”是指每剂包含单次给予受试者或患者有效施用量的药物。示例性地，单剂量剂型中所含的药物量可通过有效剂量换算。例如，按mg/m2计算的有效施用量，可根据人的体表面积，将单次的有效施用量换算成为单剂量剂型中每剂药的药物含量。例如，按mg/kg计算的有效施用量，可根据人的体重，将单次的有效施用量换算成单剂量剂型中每剂药的药物含量。[0121]本文术语“剂”是指具有药物活性的成分，其不但包括抗人vegf抗体，卡铂和紫杉醇，还可以进一步包含其他具有药物活性的成分，示例性地，本发明所述剂包括免疫检查点抑制剂，例如靶向pd-1或pd-l1的抗体。[0122]本文术语“癌症”指向或描述哺乳动物中典型地以不受调节的细胞生长为特征的生理状况。此定义中包括良性和恶性癌症。本文术语“肿瘤”或“瘤”是指所有赘生性(neoplastic)细胞生长和增殖，无论是恶性的还是良性的，及所有癌前(pre-cancerous)和癌性细胞和组织。术语“癌症”和“肿瘤”在本文中提到时并不互相排斥。[0123]术语“晚期或转移性实体瘤”是指组织学、细胞学或影像学上所证实诊断的晚期、不可切除和/或转移性恶性实体瘤。在全文中，“晚期或转移性实体瘤”是实体瘤的下位概念，属于实体瘤的下位适应症。[0124]本文术语“最大耐受量(maximaltolerabledose，mtd)”被定义为超过此的剂量水平则发生过高的毒性。[0125]本文术语“不良事件(adverseevent，ae)”是指受试者接受研究药物时出现的任何不良的医学事件，但不一定与有因果关系。不良事件可以是任何不利的和非意求的体征(包括异常的实验室发现)、症状或疾病，在时间上与用药有联系，但未必与用药相关。[0126]本文术语“严重不良事件(significantadverseevent，sae)”是指符合以下至少一条标准的不良事件，即不良事件导致受试者死亡、危及生命、住院或住院时间延长、永久或显著的残疾或功能丧失、以及先天畸形或出生缺陷。[0127]本文术语“剂量限制性毒性(doselimitingtoxicity，dlt)”，定义为以下任何一项与试验药物肯定有关、可能有关或无法判定的不良事件：[0128](1)4级中性粒细胞减少持续≥3天；[0129](2)4级贫血；[0130](3)≥3级中性粒细胞减少伴发热；[0131](4)4级血小板减少或伴有出血的3级血小板减少；[0132](5)≥3级非血液学毒性(除外3级恶心、呕吐、发热、食欲减退、碱性磷酸酶异常，3级高血压如果使用降压药物后血压能良好控制(收缩压《140mghg和舒张压《90mghg)，或者3级蛋白尿如果2周内恢复至《2g/24h也需除外)；[0133](6)任何级别的动脉栓塞；[0134]以上不良事件均根据美国癌症研究所的常规毒性判定标准(nci-ctc)4.0版分级。[0135]≥3级的输液相关反应不属于dlt，但需要停止用药，并补充入组新的受试者。[0136]本文术语“客观缓解率(objectiveresponserate，orr)”，被定义为确证的cr或pr的发生率，用确证的放射学方法评价靶病灶和非靶病灶，实体瘤的疗效评价标准参照recist标准1.1判断。[0137]本文术语“疾病控制率(diseasecontrolrate，dcr)”：定义为确证的cr、pr以及sd的发生率，用确证的放射学方法评价目标病灶和非目标病灶，实体瘤的疗效评价标准参照recist标准1.1判断。[0138]本文术语“无进展生存期(progressfreesurvival，pfs)”：从首次服药之日起到首次观察到疾病进展(以影像学为准)之间的时间，如果在观察到疾病进展前就因其它原因死亡的患者，则计算从首次服药之日起到死亡的天数。计算时将采用肿瘤评估的实际时间。对于分析时仍未出现疾病进展或死亡的患者，无进展生存期将以最后一次肿瘤评估的时间作为截止日期。对从基线期后就未进行过肿瘤评价的无进展生存患者，将以1天作为截止日期。研究者的判断将用于确定进展时间。[0139]本文术语“cr”是指completeresponse，即完全缓解；“pr”是指partialresponse，即部分缓解；sd是指stabledisease，即疾病稳定；“pd”是指progressdisease。[0140]术语“cmax”是在最大或峰值浓度点测得的活性剂的血浆浓度。[0141]术语“t1/2”又称生物半效期或者是生物半衰期，指的是血液中药物浓度或者是体内药物量减低到二分之一所花费的时间。[0142]auc0-∞：从零到无穷大时间内血药浓度-时间曲线下面积。[0143]auc0-t：从零到最后可测浓度的血药浓度-时间曲线下面积。[0144]安全性分析集(ss,safeanalysisset)：所有至少使用过一次试验用药的全部患者。[0145]全分析集(fas,fullanalysisset)：按照意向性分析(itt)原则，对至少使用一次试验药物的全部病例进行疗效分析。对主要疗效指标缺失值不进行结转。[0146]术语“q2w”是指每两周给药一次。附图说明[0147]图1.各剂量组受试者后pfs(天)情况；[0148]图2.所有受试者后pfs(天)情况；[0149]图3.vegf抗体对肺癌模型的肿瘤抑制效果；[0150]图4.vegf抗体与paclitaxel、carboplatin联用，对肺癌模型的肿瘤抑制效果。具体实施方式[0151]下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。[0152]本发明实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。[0153]下述实施例使用的vegf抗体(下称本发明vegf抗体)由山东先声麦得津生物制药有限公司生产和提供，于2-8℃保存。本发明vegf抗体的序列信息如下所示。[0154]重链可变区(seqidno：1)：[0155]evqlvesggglvkpggslrlscaasgfsfsnndvmcwvrqapgkglewigcimttdvvteyanwaksrftvsrdsaknsvylqmnslraedtavyfcardsvgsplmsfdlwgpgtlvtvss；[0156]重链恒定区(seqidno：2)：[0157]astkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk；[0158]轻链可变区(seqidno：3)：[0159]diqmtqspsslsasvgdrvtincqasqsiynnnelswyqqkpgkppklliyrastlasgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedvatyycggyksysndgngfgggtkveik；[0160]轻链恒定区(seqidno：4)：[0161]rtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec。[0162]实施例1vegf抗体在晚期或转移性实体瘤患者中的临床试验[0163]研究目的[0164]研究标准方案无效或无标准方案的晚期或转移性实体肿瘤患者单次和多次静脉滴注本发明vegf抗体的安全性和耐受性，以及药代动力学参数。通过客观缓解率(orr)、疾病控制率(dcr)等指标观察本发明vegf抗体单药的抗肿瘤疗效)。[0165]研究设计[0166]采取多中心、开放、剂量递增设计，选择晚期或转移性实体瘤患者作为受试者。剂量组为2mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7.5mg/kg，考察单次和多次给药的耐受性。剂量递增以前一剂量组给药后28天内(d1-d28)发生的剂量限制性毒性(dlt)作为依据，期间采集血样标本用于药物浓度测定，以及vegf和抗体滴度的测定。所有受试者持续给药，直至疾病进展或出现不能耐受的不良反应。[0167]剂量递增整体采用3+3设计原则。试验过程中，如同一剂量组≥1/3的受试者发生dlt，则应终止剂量递增，该剂量组为最大试验剂量，前一剂量组为最大耐受剂量(mtd)。[0168]受试者人[0169]晚期或转移性实体瘤患者。[0170]入选标准包括：[0171]1)年龄：18～74岁；[0172]2)组织学或细胞学证实的进展期或转移性恶性实体肿瘤；[0173]3)经过标准抗肿瘤后失败，或现阶段无标准方案者；[0174]4)至少有一个可测量的肿瘤病灶；[0175]5)ecogps评分0-1；[0176]6)有生育能力的合格患者(男性和女性)必须同意在试验期间和末次给药后至少12周内使用可靠的避孕方法(激素或屏障法或禁欲)。育龄期的女性患者在入选前7天内的血妊娠试验必须为阴性；[0177]7)受试者须在试验前对本研究知情同意，并自愿签署书面的知情同意书；[0178]排除标准包括：[0179]1)既往使用过贝伐珠单抗等抗vegf蛋白类药物；[0180]2)组织学证实为肺鳞癌或头颈部鳞癌；[0181]3)乙肝活动期；[0182]4)有症状的脑转移；[0183]5)入组前检查有蛋白尿的患者，在筛选期内的两次检查中(非同一天)，其中任意一次出现尿蛋白≥1+；[0184]6)入组前4周内接受过大型外科手术(不包括穿刺活检)或出现过显著外伤；[0185]7)入组前3个月内有活动性出血；[0186]8)入组前6个月内出现过心肌梗死或脑卒中；[0187]9)不稳定性心绞痛，充血性心力衰竭或，纽约心脏病学会(nyha)ⅱ级心衰，未能控制的心律失常，单药不可控制的高血压(收缩压》140mmhg和/或舒张压》90mmhg)；[0188]10)妊娠期或哺乳期女性；[0189]11)已知对使用的药物或辅料过敏。[0190]退出标准包括：[0191]根据gcp及ich指导原则，所有受试者在试验期间都有权利在研究任何时期退出试验，此外，如试验过程发生下列情况，受试者将退出试验。[0192]1)有疾病进展(pd)的证据；[0193]2)≥3级的输液相关反应；[0194]3)脱落；[0195]4)参加试验后未用试验药物；[0196]5)研究者认为受试者不适合继续使用试验药物(例如不能耐受的不良反应)；[0197]除上述情况外，试验过程中其他严重偏离或违反方案，并对药物耐受性、安全性或药动学评价造成影响。[0198]给药途径[0199]静脉滴注给药。[0200]试验步骤[0201]试验分三个阶段，包括筛选期、试验期和随访期。[0202]筛选期：[0203]筛选期14天，进行基线评估，确认受试者符合所有入组条件并且不具有排除标准中的任何条件。[0204]试验期：[0205]单次给药阶段，给药当日进行本发明vegf抗体静脉滴注后观察28天，行生命体征、体格检查以及血尿常规、血生化、凝血功能等实验室检查评估安全性并严密监测不良事件发生情况，采集血样本进行药代动力学研究。在给药后29±3天进行肿瘤评估。[0206]多次给药阶段，受试者接受3次静脉给药，每次给药间隔时间为2周，从第1次给药至第3次给药后29±2天内，行生命体征、体格检查以及血尿常规、血生化、凝血功能等实验室检查评估安全性并严密监测不良事件发生情况，采集血样本进行药代动力学研究。在第3次给药后29±3天将进行安全性和疗效评估。[0207]随访期：[0208]如受试者完成4次给药和末次给药后28天观察，并且疗效评价为sd或sd以上，且耐受性良好，在受试者和研究者均同意的前提下，可以按原方案继续接受试验药物，每6周进行一次疗效评价，直至疾病进展或出现不能耐受的不良反应或满足其他退出标准。[0209]研究指标[0210]安全性指标：包括不良事件(根据ctcae4.0分级)、生命体征、体格检查、ecog体力状况评分、实验室及辅助检查值(包括血常规、尿常规、肝功能、肾功能、血脂、空腹血糖、血电解质、12导联心电图等)。[0211]有效性指标：包括客观缓解率(orr)、疾病控制率(dcr)以及无进展生存期(pfs)。[0212]药代动力学/药效学及免疫原性指标：所有血浆样本测定本发明vegf抗体浓度和vegf浓度。每次给药前以及末次给药后第15天和29天的血浆样本测定抗本发明vegf抗体滴度。pk参数包括kel、t1/2、tmax、cmax、auc、vd、cl、mrt、ar等。[0213]统计与分析[0214]安全性分析采用ss集。描述性统计所有安全性和耐受性评价指标。安全性分析包括不良事件和严重不良事件、生命体征、体格检查、实验室检查、心电图检查、ecog评分、药物暴露情况。[0215]疗效分析采用fas集。疗效指标包括orr、dcr和pfs。描述性统计orr、dcr，计算其例数和百分比。通过kaplan-meier生存曲线图描绘pfs。[0216]药代动力学分析：对血药浓度数据作非房室模型分析。药代动力学参数包括cmax、t1/2、auc0-∞、auc0-t，采用描述性统计。[0217]统计检验均采用双侧检验，p小于或等于0.05者被认为统计上有显著性差异。[0218]结果[0219]1.受试者人[0220]共入组25例受试者，不同受试者入组情况详见表2。25例受试者均纳入ss集和fas集。其中男性15例，女性10例；中位年龄为55岁，主要的肿瘤类型为结直肠癌(12例)、乳腺癌(4例)、胃癌(3例)，其他病理类型有肺癌、卵巢癌、宫颈癌、肝癌、胰体尾癌及十二指肠乳头癌各1例。所有受试者均存在转移病灶，其中3例(12％)受试者存在1个转移灶，11例(44％)受试者存在2个转移灶，9例(36％)存在3个转移灶，2例(8％)受试者转移灶数量＞3个。[0221]及既往史方面，受试者均接受过化疗，其中23例受试者接受过3个以上的化疗方案；23例受试者接受过原发灶的手术，8例受试者接受过转移灶手术；15例受试者接受过放疗。[0222]表2不同组别受试者入组情况[0223][0224]2.安全性[0225](1)mtd[0226]本研究最终确定mtd为5mg/kg。[0227](2)不良反应发生情况[0228]试验过程中常见不良反应有高血压(17例，68％)、蛋白尿(16例，64％)、乏力(8例，32％)以及皮疹(6例，24％)；实验室检查方面，主要包括尿血阳性(9例，36％)、白细胞计数降低(6例，24％)、血小板计数降低(5例，20％)、丙氨酸氨基转移酶升高(5例，20％)以及心电图改变(5例，20％)。多数不良反应转归良好。[0229](3)导致停止使用试验药物的不良事件发生情况[0230]试验过程中有12例受试者因不良事件停止使用试验药物；9例的不良事件与试验药物有关，包括4例蛋白尿，1例蛋白尿加重至3级，1例高血压，1例高血压加重，1例高胆红素血症；1例肠道出血，肠道穿孔可能。其他的导致停药的不良事件经研究者判断与试验药物无关。[0231](4)sae[0232]4例受试者发生4例次sae，分别为股骨骨折，肠道穿孔、肠道出血可能，蛋白尿及肠梗阻。整个试验中观察到的与研究药物相关的不良事件在同类药物研究中均有报道。试验过程中出现的最常见不良反应有高血压、蛋白尿、乏力和皮疹；实验室检查异常方面包括尿血阳性、白细胞计数降低、血小板计数降低、丙氨酸氨基转移酶升高以及心电图改变；其发生机制多与vegf通路抑制有关。在mtd范围内，试验药物的不良反应均可以得到有效控制，且对给药强度影响较小。[0233]3.药代动力学/药效学[0234]本试验不同剂量的药代动力学参数如下表所示。[0235]表3药代动力学参数[0236][0237][0238]4.有效性[0239]试验的有效性分析人为fas集。所有入组的25例受试者均纳入fas集、24例受试者至少进行1次肿瘤评估，1例受试者未进行肿瘤评估；完成首次用药后1第85天(12周)肿瘤评估的有11例受试者。[0240]根据第29天肿瘤评估结果，1例为orr(4％)，20例为dcr(80％)，其中1例为pr(4％)，19例为sd(76％)，4例为pd(16％)。1例(4％)未做肿瘤评估。根据第85天肿瘤评估结果，0例为orr(0％)，8例为dcr(32％)，其中8例为sd(32％)，3例(12％)为pd，14例(56％)未做肿瘤评估。[0241]本试验中所有受试者的中位pfs为122天，25％分位数为65天，75％分位数为126天。不同剂量组的pfs情况详见表4、图1-2。[0242]表4各剂量组后pfs(天)情况[0243][0244]结论：[0245]本发明所述vegf抗体的mtd为5mg/kg，在mtd范围内，试验药物的不良反应均可以得到有效控制。结果显示，本发明所述vegf抗体对标准失败的晚期恶性肿瘤患者具有疗效，第29天所有受试者的orr为4％，dcr为80％，第85天orr为0％，dcr为32％。综上所述，本发明所述vegf抗具有良好的安全性和耐受性，并初显示出抗肿瘤疗效。[0246]实施例2vegf抗体对人肺癌裸小鼠移植瘤模型的疗效评价[0247]2.1实验材料和肿瘤评估方法(本实施例使用2.1所述实验材料和肿瘤评估方法)[0248]受试药物：[0249]本发明vegf抗体由山东先声麦得津生物制药有限公司生产和提供；贝伐珠单抗(avastin)购自罗氏(roche)；紫杉醇(paclitaxel)购自海南全星制药有限公司；卡铂(carboplatin)购自齐鲁制药有限公司。药物配制方法：卡铂用5％葡萄糖溶液进行配制和稀释(购自贵州天地药业有限责任公司)，其他药物皆用无菌生理盐水(购自江苏淮安双鹤药业有限公司)进行配制和稀释。[0250]细胞系：[0251]nci-h460细胞：美国模式培养物集存库(atcc)。[0252]试剂：[0253]rpmi1640：gibco，货号：22400-089；[0254]胎牛血清：hyclone，货号：sv30087.03；[0255]抗菌-抗真菌剂(双抗)：gibco，货号：15240-062。[0256]实验动物：[0257]balb/cnude小鼠，雌性，6-8周，两次实验的体重范围依次为17.7-24.9g(实施例2.2)和17.3-23.6g(实施例2.3)，购自上海灵畅生物科技有限公司，生产许可证编号：scxk(沪)2018-0003，两次实验的动物合格证编号依次为20180003008266(实施例2.2)和20180003008991(实施例2.3)。饲养环境：spf级。[0258]肿瘤评估方法：[0259]肿瘤体积v＝0.5×a×b2，其中a为肿瘤的长径，b为肿瘤的短径；[0260]相对肿瘤体积rtv＝vt/v0，其中v0为分组时该动物的肿瘤体积；vt为后该动物肿瘤体积。[0261]相对肿瘤增值率t/c(％)＝trtv/crtv×100％，其中trtv为组平均rtv；crtv为阴性对照组平均rtv。[0262]肿瘤生长抑制率tgi(％)＝(1-t/c)×100％。[0263]2.2vegf抗体对人肺癌nci-h460裸小鼠移植瘤模型的疗效评价-单药[0264]nci-h460细胞培养在含10％胎牛血清的rpmi1640培养液(含双抗)中。当细胞饱和度为80％-90％，数量到达要求时，收取细胞，1×106nci-h460细胞于实验小鼠的皮下接种。待肿瘤生长至平均体积147.62mm3分组给药，分组给药当天定义为第0天(d0)，将小鼠随机分为8组(n＝8)，每组小鼠分别经尾静脉给予生理盐水(vehicle)，0.8mg/kg，2.5mg/kg或7.5mg/kg测试药本发明vegf抗体，0.8mg/kg，2.5mg/kg或7.5mg/kg对照药avastin，或经腹腔给予联用给药10mg/kgpaclitaxel和80mg/kgcarboplatin。本发明vegf抗体和avastin，每周给药2次，共给药3周，paclitaxel和carboplatin，每周给药1次，共给药2次。每周测3次瘤体积，称鼠重，记录数据，统计3周内的肿瘤大小变化和小鼠体重变化。[0265]给药后第20天，与溶剂对照组(生理盐水)相比，0.8mg/kg，2.5mg/kg和7.5mg/kg本发明vegf抗体显著抑制了肿瘤的生长，且呈现较好的剂量依赖性。0.8mg/kgavastin组，相对于溶剂对照组，未显示出抑制肿瘤生长的作用。2.5mg/kg和7.5mg/kgavastin组相对于溶剂对照组，显示出显著抑制肿瘤生长的效果，但未显示剂量依赖性。本发明vegf抗体在同剂量下的抑瘤效果都显著优于avastin。本发明vegf抗体和avastin在不同剂量下均未看到动物体重减轻或其他明显毒性反应。10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联用组也产生了一定的抑瘤作用，但小鼠体重下降明显。详见表5和图3。[0266]结果表明，本发明vegf抗体在0.8mg/kg，2.5mg/kg和7.5mg/kg剂量下对nci-h460小鼠肺癌模型都有显著抑瘤作用，且呈现较好的剂量依赖性，其抑瘤作用明显优于avastin。[0267]表5受试物对nci-h460异种移植瘤模型的抑瘤效果[0268][0269]注：a.显示数据为平均值±标准差(sd)。[0270]b.p值运用two-wayanova进行分析相对肿瘤体积所得，所显示的p值皆为各组与溶媒对照组进行比较的数值。[0271]2.3vegf抗体对人肺癌nci-h460裸小鼠移植瘤的疗效评价-联合化疗[0272]nci-h460细胞培养在含10％胎牛血清的rpmi1640培养液(含双抗)中。当细胞饱和度为80％-90％，数量到达要求时，收取细胞，1×106nci-h460细胞于实验小鼠的皮下接种。待肿瘤生长至平均体积147.79mm3分组给药，分组给药当天定义为第0天(d0)，将小鼠随机分为8组(n＝8)，每组小鼠分别经尾静脉给予生理盐水(vehicle)，2.5mg/kg或7.5mg/kg测试药(即本发明vegf抗体)，2.5mg/kg或7.5mg/kg对照药avastin，或经腹腔给予联用给药10mg/kgpaclitaxel和80mg/kgcarboplatin，或经尾静脉给予2.5mg/kg本发明vegf抗体和腹腔给予10mg/kgpaclitaxel和80mg/kgcarboplatin，或经尾静脉给予2.5mg/kgavastin和腹腔给予10mg/kgpaclitaxel和80mg/kgcarboplatin。本发明vegf抗体和avastin，每周给药2次，共给药3周，paclitaxel和carboplatin，每周给药1次，共给药2次。每周测3次瘤体积，称鼠重，记录数据，统计3周内的肿瘤大小变化和小鼠体重变化。[0273]给药后第20天，2.5mg/kg和7.5mg/kgavastin，相对于溶剂对照组(生理盐水)，均显示出显著抑制肿瘤生长的效果，但未显示剂量依赖性。2.5mg/kg和7.5mg/kg本发明vegf抗体，相对于溶剂对照组，均显示了显著抑制肿瘤生长的效果，且呈现剂量依赖性。在同剂量下，本发明vegf抗体的抑瘤效果都显著优于avastin。2.5mg/kgavastin+10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联合给药组相对于溶剂对照组，显示了显著抑制肿瘤生长的效果，相比于10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联合组和2.5mg/kgavastin单药组，抑瘤效果都显著增强。2.5mg/kg本发明vegf抗体+10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联合给药组，相对于溶剂对照组，显示了显著抑制肿瘤生长的效果，相比于10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联合组，抑瘤效果显著增强，但相比于2.5mg/kg本发明vegf抗体单药组，抑瘤效果稍有加强，但没有统计学差异。2.5mg/kg本发明vegf抗体+10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联合给药组相比于2.5mg/kgavastin+10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联合给药组，抑瘤作用有更优的趋势，但无统计学差异。给药过程中，10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联用组，2.5mg/kg本发明vegf抗体+10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联用组，2.5mg/kgavastin+10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin联用组中小鼠体重下降比较明显，后10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin停药后恢复，其他组的荷瘤鼠对受试药物在所有剂量下都显示出较好的耐受性，无死亡或发病现象。本发明vegf抗体或avastin与10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin的联用组相对于10mg/kgpaclitaxel+80mg/kgcarboplatin组没有明显的毒性增加。详见表6和图4。[0274]结果表明，本发明vegf抗体在2.5mg/kg和7.5m/kg的剂量下对nci-h460小鼠肺癌模型均有剂量依赖性的显著抑瘤作用，且抑瘤作用明显优于avastin。2.5mg/kg本发明vegf抗体和10mg/kg紫杉醇+80mg/kg卡铂的联用对nci-h460小鼠肺癌模型有显著抑瘤作用，其抑瘤效果显著强于10mg/kg紫杉醇+80mg/kg卡铂组。2.5mg/kg本发明vegf抗体+10mg/kg紫杉醇+80mg/kg卡铂三药联合的药效有优于2.5mg/kgavastin+10mg/kg紫杉醇+80mg/kg卡铂联合组的趋势，提示本发明vegf抗体较avastin更能增强化疗组合的效果。[0275]表6受试物对nci-h460异种移植瘤模型的抑瘤效果[0276][0277]注：a.显示数据为平均值±sd。[0278]b.p值运用two-wayanova进行分析相对肿瘤体积所得，所显示的p值皆为各组与溶媒对照组进行比较的数值。当前第1页12当前第1页12

技术特征：

1.包括抗人vegf抗体的剂在制备用于晚期或转移性实体瘤患者的药物中的应用，其特征在于，所述抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中：所述hcdr1选自seq id no：5-7任一项所示序列；所述hcdr2选自seq id no：8-10任一项所示序列；所述hcdr3选自seq id no：11-12任一项所示序列；所述lcdr1选自seq id no：13-14任一项所示序列；所述lcdr2选自seq id no：15-16任一项所示序列；和，所述lcdr3选自seq id no：17所示序列。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述重链可变区具有如seq id no：1所示序列，或与seq id no：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seq id no：3所示的序列，或与seq id no：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。3.根据权利要求1～2任一项所述的应用，其特征在于，所述抗体的重链恒定区具有如seq id no：2所示序列，或与seq id no：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述抗体的轻链恒定区具有如seq id no：4所示的序列，或与seq id no：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。4.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述实体瘤为经组织学、细胞学或影像学证实的进展期实体瘤或转移性恶性实体肿瘤。5.根据权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于，所述实体瘤为结直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、肝癌、胰体尾癌或十二指肠乳头癌。6.根据权利要求1～5任一项所述的应用，其特征在于，所述患者为缺少标准疗法或者标准疗法无效的患者。7.根据权利要求1～6任一项所述的应用，其特征在于，所述患者既往接受过化疗、放疗和/或手术方案。8.根据权利要求1～7任一项所述的应用，其特征在于，所述患者存在或手术切除前存在转移病灶，可选地，所述转移病灶为1处、2处、3处或大于3处。9.根据权利要求1～8任一项所述的应用，其特征在于，所述抗人vegf抗体的有效施用量为1.5～8mg/kg，优选2mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg或7.5mg/kg；优选地，所述抗人vegf抗体的剂型为单剂量剂型，每剂包含能够给予患者所述有效施用量的抗体量。10.根据权利要求1～9任一项所述的应用，其特征在于，所述药物的活性成分仅包括所述抗人vegf抗体，或者，所述所述药物还包括所述抗人vegf抗体以外的其他活性成分。11.包括抗人vegf抗体、紫杉醇和卡铂的剂在制备用于肺癌的药物中的应用，其特征在于，所述抗体的重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述抗体的轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中：所述hcdr1选自seq id no：5-7任一项所示序列；所述hcdr2选自seq id no：8-10任一项所示序列；所述hcdr3选自seq id no：11-12任一项所示序列；
所述lcdr1选自seq id no：13-14任一项所示序列；所述lcdr2选自seq id no：15-16任一项所示序列；和，所述lcdr3选自seq id no：17所示序列。12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述重链可变区具有如seq id no：1所示序列，或与seq id no：1相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述轻链可变区具有如seq id no：3所示的序列，或与seq id no：3相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。13.根据权利要求11或12所述的应用，其特征在于，所述抗体的重链恒定区具有如seq id no：2所示序列，或与seq id no：2相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列，所述抗体的轻链恒定区具有如seq id no：4所示的序列，或与seq id no：4相比具有至少95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。14.根据权利要求11～13任一项所述的应用，其特征在于，所述肺癌为非小细胞肺癌。15.根据权利要求11～14任一项所述的应用，其特征在于，所述抗人vegf抗体的有效施用量为0.8～7.5mg/kg，优选为0.8mg/kg、2.5mg/kg或7.5mg/kg，所述紫杉醇的有效施用量为10mg/kg，所述卡铂的有效施用量为80mg/kg。16.根据权利要求15所述的应用，其特征在于，所述抗人vegf抗体的剂型为单剂量剂型，每剂含能够给予患者有效施用量的抗体量。

技术总结

本发明涉及抗人VEGF抗体在制备实体瘤的药物中的应用，具体涉及抗人VEGF抗体在制备晚期或转移性实体瘤的药物中的应用，以及抗人VEGF抗体和紫杉醇、卡铂的组合在制备用于肺癌的药物中的应用。于肺癌的药物中的应用。

技术研发人员：

薛黎婷 杨文清 石明亮 刘恋 任晋生

受保护的技术使用者：

江苏先声药业有限公司

技术研发日：

2022.06.30

技术公布日：

2022/12/30