益生菌滴剂的制作方法

1.本发明是有关于一种益生菌滴剂(probioticdrop)，其中以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂包含有：1-15wt％的益生菌；31-50wt％的葵花籽油(sunfloweroil)；31-50wt％的橄榄油(oliveoil)；以及17-30wt％的三酸甘油酯(triglyceride)。

背景技术

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：：2.益生菌(probiotics)可选择性地刺激肠道中的原生细菌(nativebacteria)的生长，改变肠道微生物(intestinalmicroflora)的组成、数量或性质，并且当它呈适当数量来被投药时，可赋予宿主一健康益处(healthbenefit)。目前已知可作为益生菌使用的微生物包括：乳杆菌属(lactobacillus)、乳球菌属(lactococcus)、小球菌属(pediococcus)、肠球菌属(enterococcus)、链球菌属(streptococcus)、双歧杆菌属(bifidobacterium)、芽孢杆菌属(bacillus)以及明串珠菌属(leuconostoc)等物种。3.已有许多研究指出，益生菌具有抑制肠胃道病原菌生长、缓和乳糖不耐症(lactoseintolerance)、预防和/或胃肠病(gastrointestinaldisease)、免疫调节(immunoregulation)、抗菌(anti-bacterial)、抗癌(anti-cancer)以及降血压(antihypertension)等功效。4.然而，在益生菌制剂(probioticpreparations)的制备过程中，会因选用的剂型种类以及储存环境(例如，温度以及湿度)的不同而影响益生菌制剂中的益生菌的存活时间，进而导致益生菌制剂无法维持发挥效用所需的菌数。因此，如何维持益生菌制剂中的益生菌菌数，已成为本领域的相关研究人员所致力的目标。5.近年来，本领域的相关研究人员已有尝试通过令益生菌分散于油脂类溶剂中来提高益生菌的存活率。例如，cn105707897a揭示一种益生菌脂性混悬液滴剂，其包含有益生菌粉、植物油、中链酸甘油酯(mediumchainglyceride)、蔗糖单甘酯(sucromonoglyceride)以及维生素e(vitamine)。在该件中国专利公开案的实施例中，使用葵花籽油(sunfloweroil)来分别配制罗伊氏乳杆菌(lactobacillusreuteri)与植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)的脂性混悬液滴剂并证明该等益生菌的菌数可被维持。6.虽然已存在有上述文献报导，本技艺中仍然存在有一需要去发展出一种能够有效地提升益生菌的性的益生菌制剂来供产业界所需。技术实现要素：7.于本发明中，申请人发现一含有益生菌、葵花籽油(sunfloweroil)、橄榄油(oliveoil)以及三酸甘油酯(triglyceride)的益生菌滴剂(probioticdrop)能够有效地提升益生菌的性，进而在长期储存下仍可达到维持益生菌的活性的效用。8.于是，本发明提供一种益生菌滴剂，其中以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂包含有：9.1-15wt％的益生菌；10.31-50wt％的葵花籽油；11.31-50wt％的橄榄油；以及12.17-30wt％的三酸甘油酯。13.较佳地，葵花籽油与橄榄油具有实质上相同的含量。14.较佳地，该滴剂进一步包含有：0.1-1.5wt％的蔗糖单甘酯；以及0.01-0.05wt％的维生素e。15.较佳地，该益生菌是选自于由下列所构成的组：乳杆菌属物种(lactobacillusspp.)、乳球菌属物种(lactococcusspp.)、小球菌属物种(pediococcusspp.)、肠球菌属物种(enterococcusspp.)、链球菌属物种(streptococcusspp.)、双歧杆菌属物种(bifidobacteriumspp.)、芽孢杆菌属物种(bacillusspp.)、明串珠菌属物种(leuconostocspp.)，以及它们的组合。16.更佳地，该益生菌是选自于由下列所构成的组：鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosus)、动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)，以及它们的组合。17.较佳地，该滴剂进一步包含有一干燥剂。附图说明18.本发明的上述以及其它目的、特征与优点，在参照以下的详细说明与较佳实施例和随文检附的图式后，将变得明显，其中：19.图1显示各种含有鼠李糖乳杆菌mp108的滴剂在储存于37℃下细菌浓度随着时间的变化，其中滴剂1至滴剂7具有一如下面表2所示的配方；以及20.图2显示各种含有动物双歧杆菌乳亚种cp-9的滴剂在储存于37℃下细菌浓度随着时间的变化，其中滴剂1至滴剂7大体上具有一如下面表2所示的配方，不同处在于：以动物双歧杆菌乳亚种cp-9的菌粉来代替鼠李糖乳杆菌mp108的菌粉。具体实施方式21.为了这本说明书的目的，将被清楚地了解的是：文字“包含有(comprising)”意指“包含但不限于”，以及文字“包括(comprises)”具有一对应的意义。22.除非另外有所定义，在本文中所使用的所有技术性与科学术语具有熟悉本发明所属技艺的人士所共同了解的意义。一熟悉本技艺者会认知到许多与那些被描述于本文中者相似或等效的方法和材料，它们可被用于实施本发明。当然，本发明决不受到所描述的方法和材料的限制。23.本发明提供一种益生菌滴剂(probioticdrop)，其中以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂包含有：24.1-15wt％的益生菌；25.31-50wt％的葵花籽油(sunfloweroil)；26.31-50wt％的橄榄油(oliveoil)；以及27.17-30wt％的三酸甘油酯(triglyceride)。28.依据本发明，葵花籽油与橄榄油具有实质上相同的含量。29.如本文中所使用的，术语“实质上相同(substantiallyequalto)”意指具有等量(equivalent)或相差少于1.5wt％的含量。较佳地，葵花籽油与橄榄油具有完全相同的含量。30.依据本发明，该滴剂具有一范围落在8.5至10.6logcfu/ml内的细菌浓度的益生菌。在本发明的一个较佳具体例中，该滴剂具有一为10.4logcfu/ml的细菌浓度的益生菌。在本发明的另一个较佳具体例中，该滴剂具有一为10.6logcfu/ml的细菌浓度的益生菌。31.依据本发明，该益生菌可以是天然的材料(naturalmaterial)或经加工处理的产物(processedproduct)[例如，经冷冻干燥(lyophilized)或喷雾干燥(spray-dried)的产物]。较佳地，该益生菌是一经加工处理的产物。更佳地，该益生菌是一经冷冻干燥继而予以研磨所得到的菌粉。[0032]依据本发明，该益生菌可以是选自于由下列所构成的组：乳杆菌属物种(lactobacillusspp.)、乳球菌属物种(lactococcusspp.)、小球菌属物种(pediococcusspp.)、肠球菌属物种(enterococcusspp.)、链球菌属物种(streptococcusspp.)、双歧杆菌属物种(bifidobacteriumspp.)、芽孢杆菌属物种(bacillusspp.)、明串珠菌属物种(leuconostocspp.)，以及它们的组合。[0033]较佳地，该益生菌是选自于由下列所构成的组中的乳杆菌属物种：鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosus)、植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)、嗜酸乳杆菌(lactobacillusacidophilus)、干酪乳杆菌(lactobacilluscasei)、副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)、罗伊氏乳杆菌(lactobacillusreuteri)、保加利亚乳杆菌(lactobacillusbulgaricus)、戴白氏乳杆菌(lactobacillusdelbrueckii)、约氏乳杆菌(lactobacillusjohnsonii)、瑞士乳杆菌(lactobacillushelveticus)、加氏乳杆菌(lactobacillusgasseri)、发酵乳杆菌(lactobacillusfermentum)，以及它们的组合。在本发明的一个较佳具体例中，该益生菌是鼠李糖乳杆菌mp108。[0034]较佳地，该益生菌是选自于由下列所构成的组中的双歧杆菌属物种：动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacteriumanimalissubsp.lactis)、两歧双歧杆菌(bifidobacteriumbifidum)、乳双歧杆菌(bifidobacteriumlactis)、长双歧杆菌(bifidobacteriumlongum)[例如，长双歧杆菌长双歧亚种(bifidobacteriumlongumsubsp.longum)]、短双歧杆菌(bifidobacteriumbreve)、青春双歧杆菌(bifidobacteriumadolescentis)、婴儿双歧杆菌(bifidobacteriuminfantis)，以及它们的组合。在本发明的一个较佳具体例中，该益生菌是动物双歧杆菌乳亚种cp-9。[0035]另择地，该益生菌亦可选自于由下列所构成的组：乳酸乳球菌(lactococcuslactis)、嗜热链球菌(streptococcusthermophilus)、凝结芽孢杆菌(bacilluscoagulans)，以及它们的组合。[0036]依据本发明，以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂进一步包含有：[0037]0.1-1.5wt％的醇酯类乳化剂(alcoholestertypeemulsifyingagent)；以及[0038]0.01-0.05wt％的维生素e(vitamine)。[0039]较佳地，该醇酯类乳化剂是选自于由下列所构成的组：蔗糖甘油酯(sucroglyceride)、聚山梨醇酯80(polysorbate80)、聚甘油脂肪酸酯(polyglycerolfattyacidester)，以及它们的组合。在本发明的一个较佳具体例中，该醇酯类乳化剂是蔗糖单甘酯(sucromonoglyceride)。[0040]依据本发明，该滴剂可进一步包含有一干燥剂(desiccatingagent)。[0041]适用于本发明的干燥剂可以是商业上可购得的产品，包括，但不限于：干燥锭(desiccanttablet)(购自于aptarcsptechnologies，产品型号为m-3061-133activetablet)以及干燥膜(desiccantfilm)(购自于csptechnologies，产品型号为m-0026active-striptm)。[0042]依据本发明，该滴剂可进一步包含有其他被广泛地使用于药物制造技术的药学上可接受的添加剂(additives)，例如，防腐剂(preservative)、抗氧化剂(antioxidant)、吸收增强剂(absorptionenhancer)以及稳定剂(stabilizingagent)。有关这些添加剂的选用与数量是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。[0043]在本发明的一个较佳具体例中，以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂包含有：7wt％益生菌、31.94wt％葵花籽油、31.94wt％橄榄油、28.9wt％三酸甘油酯、0.2wt％蔗糖单甘酯以及0.02wt％维生素e。[0044]在本发明的另一个较佳具体例中，以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂包含有：7wt％益生菌、47.94wt％葵花籽油、15.94wt％橄榄油、28.9wt％三酸甘油酯、0.2wt％蔗糖单甘酯以及0.02wt％维生素e。[0045]在本发明的又另一个较佳具体例中，以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂包含有：7wt％益生菌、15.94wt％葵花籽油、47.94wt％橄榄油、28.9wt％三酸甘油酯、0.2wt％蔗糖单甘酯以及0.02wt％维生素e。[0046]依据本发明的益生菌滴剂可呈单一剂量或是分成数个剂量的形式而被口服地(orally)投药。[0047]本发明将就下面的实施例来做进一步说明，但应了解的是，该等实施例仅是供例示说明用，而不应被解释为本发明的实施上的限制。[0048]《实施例》[0049]一般实验材料：[0050]1.益生菌菌株：[0051]在下面实施例中拿来进行功效评估的益生菌菌株已被寄存于的食品工业发展研究所(foodindustryresearchanddevelopmentinstitute，firdi)的生物资源保存及研究中心(bioresourcecollectionandresearchcenter，bcrc)(300新竹市食品路331号，)，并且已公众可获得。另外，该等益生菌菌株亦有依据布达佩斯条约(thebudapesttreaty)的规定分别被寄存于德国微生物保藏中心(deutschesammlungvonmikroorganismenundzellkulturengmbh，dsmz)以及中国典型培养物保藏中心(chinacenterfortypeculturecollection，cctcc)。为表清楚，各个益生菌菌株的相关资讯(包括：学名、相关出处、寄存编号以及寄存日期等)已被整合于下面表1中。[0052]表1.各个益生菌菌株的相关资讯[0053][0054]2.各种益生菌菌株的菌粉的制备：[0055]首先，将上面第1项当中所述的2种益生菌菌株分别接种至补充有0.05％半胱胺酸(cysteine)的mrs肉汤培养基(mrsbroth)中，并于37℃下进行培养历时24小时，俾以活化菌株。接着，将该等经活化的菌株分别以一为2％(v/v)的接种量接种至mrs肉汤培养基中，并于一厌氧条件下以及37℃下进行培养历时隔夜。所形成的培养物在以平板计数培养基来进行菌数计数后，于4℃下以3,000rpm来进行离心历时10分钟，接着去除上清液，而所得到的沉淀物(pellets)分别被拿来与冻干保护剂(freeze-dryingprotectingagent)进行混合。接着，将所得到的混合物置于-196℃的液态氮桶中进行急速冷冻，然后予以干燥。之后，以一粉碎机(pulverizer)(型号为comilu20，厂牌为quadro)予以研磨，继而使用40筛孔的筛网来进行过筛，藉此而分别得到鼠李糖乳杆菌mp108与动物双歧杆菌乳亚种cp-9的菌粉(分别具有5.7×1011cfu/g与3.7×1011cfu/g的细菌浓度)。[0056]3.下面实施例中所使用的葵花籽油(sunfloweroil)、橄榄油(oliveoil)以及花生油(peanutoil)这3种植物油分别是购自于桂格食品股份有限公司、宜豆企业有限公司以及泰山企业股份有限公司。[0057]4.下面实施例中所使用的三酸甘油酯(triglyceride)、蔗糖单甘酯(sucromonoglyceride)以及维生素e(vitamine)分别是购自于玉霸企业有限公司、正兴食品添加剂有限公司以及信意企业股份有限公司。[0058]实施例1.制备含有益生菌的滴剂(drop)[0059]在本实施例中，申请人依据下面表2中所示配方来制备7种含有鼠李糖乳杆菌mp108的滴剂(也就是mp108的滴剂1至滴剂7)。有关各种滴剂的制备方法是依照下面所示的步骤而被进行：首先，将植物油、三酸甘油酯、蔗糖单甘酯以及维生素e予以混合并进行搅拌直到乳化(emulsification)，接着，缓慢地加入菌粉，并予以充分搅拌，而得到含有益生菌(细菌浓度为10.6logcfu/ml)的滴剂，每个滴剂的体积为8ml，总重量为7.6g。[0060]表2.含有益生菌的滴剂的配方[0061][0062]另外，大体上依据上面表2中所示配方来制备7种含有动物双歧杆菌乳亚种cp-9的滴剂(也就是cp-9的滴剂1至滴剂7)，不同处在于：以动物双歧杆菌乳亚种cp-9的菌粉来代替鼠李糖乳杆菌mp108的菌粉，并使得该等滴剂含有细菌浓度为10.4logcfu/ml的益生菌。[0063]实施例2.使用不同植物油所制得的含有益生菌的滴剂对于益生菌的性(stability)的影响[0064]于本实施例中，为探讨使用不同植物油所制得的含有益生菌的滴剂在提升益生菌的性上的效用比较，申请人将依据上面实施例1所得到的14种含有益生菌的滴剂拿来进行性试验(stabilitytest)。[0065]实验方法：[0066]将该14种含有益生菌的滴剂置于一温度被设定为37℃的恒温恒湿机(constanttemperatureandhumiditychamber)(型号为ath-120，购自于隆盛精密工业有限公司)中储存历时28天，并在开始储存前(也就是第0天)以及在开始储存后的第14天与第28天时，对该14种含有益生菌的滴剂各取2ml并分别加入18ml的0.1％蛋白胨稀释剂(peptonediluent)(购自于merck)予以稀释，继而以平板计数培养基来进行菌数计数。[0067]结果：[0068]图1显示各种含有鼠李糖乳杆菌mp108的滴剂在储存于37℃下细菌浓度随着时间的变化。从图1可见，滴剂1至滴剂7所含有的菌数会随着储存时间的增加而逐渐地减少，其中滴剂3、滴剂4与滴剂5所含有的菌数的减少幅度是明显小于滴剂1、滴剂2、滴剂6以及滴剂7所具者。特别地，滴剂3、滴剂4与滴剂5在储存历时28天后，细菌浓度都还能够维持在8.5logcfu/ml以上，其中又以滴剂3的细菌浓度最高。[0069]图2显示各种含有动物双歧杆菌乳亚种cp-9的滴剂在储存于37℃下细菌浓度随着时间的变化。从图2可见，滴剂1、滴剂2、滴剂6以及滴剂7所含有的菌数会随着储存时间的增加而减少，相对地，滴剂3、滴剂4与滴剂5所含有的菌数则呈现出缓慢减少的情形，且细菌浓度都还能够维持在9logcfu/ml以上，其中又以滴剂3的细菌浓度最高。[0070]这些实验结果显示：相较于单独使用葵花籽油与橄榄油，或将它们任一者与花生油组合使用，组合使用葵花籽油与橄榄油所制得的滴剂在提升益生菌的性上能够展现出更优异的效用。[0071]实施例3.添加有干燥剂(desiecatingagent)的含有益生菌的滴剂对于益生菌的性的影响[0072]于本实施例中，为了解在消费者每天使用时接触空气而可能发生油脂氧化的情况下，本发明的含有益生菌的滴剂是否仍能具有上面的优异效用以及干燥剂是否能进一步提升此效用，申请人将依据上面实施例1所得到的mp108的滴剂3拿来进行下面的实验，并且另外制备一添加有干燥剂的滴剂来进行比较。[0073]实验方法：[0074]首先，大体上依据上面表2中所示的滴剂3的配方来制备，并额外添加一颗干燥锭(desiccanttablet)[购自于aptarcsptechnologies，产品型号为m-3061-133activetablet，8.2mm(宽)×17.7mm(长)×2.5mm(高)]，藉此而得到一添加有干燥剂的滴剂(下称滴剂3-1)。[0075]接着，将滴剂3与滴剂3-1置于一温度被设定为25℃的恒温恒湿机中储存历时168天，且在储存的期间，每天令滴剂接触空气历时30秒，俾以模拟消费者的使用情境，并在开始储存前(也就是第0天)以及在开始储存后的第112天、第140天与第168天时，对该2种滴剂各取2ml并分别加入18ml的0.1％蛋白胨稀释剂予以稀释，继而以平板计数培养基来进行菌数计数。[0076]结果：[0077]下面表3显示滴剂3与滴剂3-1在储存于25℃下细菌浓度随着时间的变化。[0078]表3.滴剂3与滴剂3-1的细菌浓度[0079][0080]从表3可见，在储存历时第112天至第168天的期间，滴剂3与滴剂3-1所含有的菌数皆能够维持在9.4logcfu/ml以上，特别地，滴剂3-1在储存历时168天后，细菌浓度仍维持在10logcfu/ml。这个实验结果显示：在每天使用的情况下，本发明的含有益生菌的滴剂仍可有效地维持益生菌的性，并且对本发明的含有益生菌的滴剂添加以干燥剂能获致更佳的效用。[0081]综合以上的实验结果，申请人认为：组合使用葵花籽油与橄榄油所制得的滴剂能够有效地提升益生菌的性，而具有在长期储存下仍维持益生菌的活性的效用，并可进一步添加干燥剂来达到更为显著的优异效用。[0082]于本说明书中被引述的所有专利和文献以其整体被并入本案作为参考资料。若有所冲突时，本案详细说明(包含界定在内)将占上风。[0083]虽然本发明已参考上述特定的具体例被描述，明显地在不背离本发明的范围和精神下可作出很多的修改和变化。因此意欲的是，本发明仅受如随文检附的权利要求书所示者的限制。当前第1页12当前第1页12

技术特征：

1.一种益生菌滴剂，其特征在于：以所述滴剂的总重量为计算基础，所述滴剂包含有：1-15wt％的益生菌；31-50wt％的葵花籽油；31-50wt％的橄榄油；以及17-30wt％的三酸甘油酯。2.根据权利要求1所述的益生菌滴剂，其特征在于：葵花籽油与橄榄油具有实质上相同的含量。3.根据权利要求1所述的益生菌滴剂，其特征在于：所述滴剂进一步包含有：0.1-1.5wt％的蔗糖单甘酯；以及0.01-0.05wt％的维生素e。4.根据权利要求1所述的益生菌滴剂，其特征在于：所述益生菌是选自于由下列所构成的组：乳杆菌属物种(lactobacillus spp.)、乳球菌属物种(lactococcus spp.)、小球菌属物种(pediococcus spp.)、肠球菌属物种(enterococcus spp.)、链球菌属物种(streptococcus spp.)、双歧杆菌属物种(bifidobacterium spp.)、芽孢杆菌属物种(bacillus spp.)、明串珠菌属物种(leuconostoc spp.)，以及它们的组合。5.根据权利要求4所述的益生菌滴剂，其特征在于：所述益生菌是选自于由下列所构成的组：鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)、动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)，以及它们的组合。6.根据权利要求1所述的益生菌滴剂，其特征在于：所述滴剂进一步包含有一干燥剂。

技术总结

本发明涉及益生菌滴剂。本发明揭示一种益生菌滴剂，其中以该滴剂的总重量为计算基础，该滴剂包含有：1-15wt％的益生菌；31-50wt％的葵花籽油；31-50wt％的橄榄油；以及17-30wt％的三酸甘油酯。的三酸甘油酯。的三酸甘油酯。

技术研发人员：

何协勋 陈敬伟 黄玉芬 许宸泓 蔡欣宇

受保护的技术使用者：

锦乔生物科技有限公司

技术研发日：

2021.07.05

技术公布日：

2022/12/29