一种刺梨生物冻干制剂的制备方法与流程

1.本发明属于生物食品加工技术领域，尤其涉及一种刺梨生物冻干制剂的制备方法。

背景技术：

2.刺梨因果皮上密生小肉刺，俗称之为“刺梨”，又名山王果、送春归、茨梨、木梨子等，系蔷薇科蔷薇属多年生落叶小灌木。夏花秋实，果实多为扁圆球形，果肉脆，成熟后有浓芳香味。刺梨营养丰富，含sod、vc、vp1、vp2、vb1、 vb2、vb-谷甾醇、ve、va、vd、vk、钙、磷、铁，单宁、刺梨三萜、脂肪酶、刺梨黄酮、膳食纤维及微量元素硒、锌等营养素。其中sod、vc、黄酮为植物含量之最。刺梨被誉为“sod之王”、“维c之王”，民间称“魔梨”“延年果”，被誉为生命“营养库”。
3.sod被视为生命科技中最具神奇魔力的酶。sod是具有抗衰老、免疫调节、调节血脂、抗辐射、美容功能的物质之一，法定编号为 ecl.15.1.1；cas[905489]1。sod作为一种人体内最重要的酶之一，由于sod 能够清除自由基，因而可以延缓衰老。人之所以会衰老，老化迹象一点一滴出观，如素沉淀、体力衰退、是因为体内产生氧化作用，抗氧化剂的补充有助于降低氧化的速度，减慢衰老的脚步。防治自身免疫性疾病，sod对各类自身免疫性疾病都有一定的疗效。抗氧化，医学报告指出，抗氧化能力的衰退期已提前至 40岁左右，光靠蔬果已经不足以消除人体内外共同形成的氧化压力。预防慢性病，自由基是科学家已发现导致各种慢性病与老化的罪魁祸首，故说它是“万病之源”，是人体健康的大敌，自由基对身体的伤害是日积月累。要使身体健康，氧化速度慢，就要保持体内sod的充足；遗憾的是在25岁以后体内sod活性和浓度在逐渐降低，所以我们必须补充外源性sod，以弥补人体缺失的sod，这样人体才会健康。
[0004][0005]
经检测刺梨鲜果、原汁(不杀菌或非加热杀菌)均含有3种sod，三种酶所占比例为：第一种65.3％；第二种14.4％；第三种20.3％。胜似癌症等病症及抗衰老、美容的“复方制剂”，由此可见，刺梨具有以下作用：1、增强机体抵抗能力，提高免疫力，抵抗病毒，预防疾病。刺梨中的sod对缓解疲劳、提高免疫力、补充能量等均有明显效果。2、防癌抗癌：刺梨富含超氧化物歧化酶(sod)10000u/ml。sod是国际公认具有防癌作用的活性物质，此外，sod 对提高免疫力、抗辐射等均有明显效果，是“百病之源”活性氧自由基的头号杀手。肿瘤的诱因众多，但是不管是何种原因诱发的肿瘤，最终都是因自由基破坏抑癌基因表达，同时活化原癌基因导致的。sod进入到人体细胞以后，dna就会被保护，同时进行自我修复，让身体中的抑癌基因和原癌基因稳定、平衡，提升骨髓造血功能、激发并提升机体免疫力，让趋于突变的细胞在癌变以前被破坏掉，同时防止其游离到身体的其他部位，达到防癌抗癌的目的。而刺梨中的维生素e和b-谷甾醇、sod及过氧化氢酶则组成一个消除超氧化物阴离子的自由基等活性氧的防护体系，具有防癌抗癌作用。3、抗衰老。sod是国际公认的抗衰老药物。刺梨中含有丰富的超氧化物岐化酶(sod)，食用刺梨鲜果、原汁(不杀菌或非加热杀菌)可提高人
体内sod的活力，降低过氧化脂质(lpo)，有明显的抗衰老作用。sod还具有修复受损细胞的功效，使细胞活力大大增强。sod具有清除人体自由基的功效！4、具有镇静作用，能使人快速入睡。sod用于临床上失眠，能清除体内过多的自由基，改善和组织器官功能紊乱和障碍，从而达到睡眠障碍的目的。此外，刺梨中还含有vc、维生素b1(硫胺酸)、维生素b2(核黄素)等营养元素，具有抗氧化、护肤美容、排铅作用、坏血病、脚气病、健脾助消化解疼痛、降三高、防治糖尿病等保健作用。
[0006]
目前，关于将刺梨冻干制备成方便食品的文献有一些，例如：
[0007]
1、申请号cn202110915141.6，公开了一种刺梨冻干粉及其加工方法，刺梨冻干粉包括刺梨原液和果葡糖浆，该工艺步骤一、刺梨果洗净控干水分后压榨取汁，得到刺梨原液，将刺梨原液与果葡糖浆按比例混合后得到混合液；步骤二、将混合液放入速冻库中进行速度，冻结温度为-40～-35℃；步骤三、将冻结后的混合液转移到真空冻干机内进行真空干燥得到半成品，真空度为≤100pa，在真空环境下进行加热促进干燥，加热温度为30～55℃。该方法在-40～-35℃条件下冻结，将混合液中的游离水等所有水分冻结成固态，在高真空条件下快速干燥，真空环境可以改变水的沸点，使的原料中的固态冰可以在低温下进行升华转变成气态，从而使水分干燥掉，并且最大程度保留原料的颜，形状，口感等，而最主要是保留原料的活性成分。但是，该方案没有采取后续的工艺过程控湿和产品防潮工艺，刺梨因其含有糖类、淀粉、树脂、果胶、黏液质、糅质、无机盐等亲水性成分，冻干制品极易吸潮，因吸湿而变软、结块、潮解甚至液化，从而霉变、滋生细菌，变质，食用很不安全。而且，该方案也没有采用杀菌工艺，原料都在非洁净区操作，污染是肯定的的，长时间放置，加上吸潮，内部滋生细菌也是肯定的，质量得不到保证。因此，货架期很短，商业性很差且很不安全。
[0008]
2、申请号201610354549x，公开了一种金刺梨真空冷冻干燥处理工艺，该工艺步骤(4)将真空干燥仓真空度提升为100—150pa，温度控制70—80℃，保持6—10小时。sod为生物蛋白酶具有生物活性，高于60℃就容易使刺梨中的 sod生物蛋白酶失活，温度控制70—80℃，保持6—10小时，sod大部分被灭活，vc、黄酮会被大量破坏，而失去其应有的价值。
[0009]
3、申请号cn201510774934.5，公开了一种无籽刺梨冻干片的生产方法，该方法包括如下步骤：a、原料处理：将新鲜无籽刺梨洗净、切片并晾干表面水分； b、冻结；c、真空干燥：控制真空冷冻干燥机内的真空度为20～40pa、干燥温度为-25～-18℃，控制干燥时间3～6h；d、解析干燥：将真空冷冻干燥机内的真空度逐渐降低至5～10pa、干燥温度逐渐上升至35～50℃后，干燥5～15min，得到无籽刺梨冻干片；e、无菌包装；用该方法生产得到的无籽刺梨冻干片能保持原有的风味和形态，营养和功能成分不流失，符合食用菌卫生标准gb7096-2003中的规定，含水率指标低于国标的1/2。但是，该方案存在以下不足：
①
无论是有籽刺梨或是无籽刺梨，都分为可食部分和非可食部分，可食部分主要是果肉，非可食部分主要是果皮和籽，如榨汁，出汁率一般在50％左右，即还有很大一部分是不可食的。
②
该方案在切片前没有去皮工艺，按照实施例一、二，挑选直径3-8cm 的无籽刺梨，切片后，其制成品无籽刺梨冻干片的直径最小可能为0.5cm，食用方法只有咀嚼。虽经冻干工艺，并没有将冻干片冻成粉末，果皮中非可食的不溶性长纤维仍在冻干片周围包裹住，咀嚼后不溶性长纤维无法下咽，从而影响产品品质。
③
该技术方案没有控湿工艺，虽然在实施例二、三中e、包装：将干燥的产品及时取出，，但在工业化生产中也是有一定的时间差的。无籽刺梨冻干片含水率应在5％以下，况且，刺梨本身含有糖类、淀粉、树脂、果胶、黏液质、糅质、无机盐等
亲水性成分，具有很强的吸湿性，易吸收空气中的水分，在此工况下，很难保证无籽刺梨冻干片的质量。
④
该技术方案虽然为无菌包装，但没有杀菌工艺，在此工况下，很难保证无籽刺梨冻干片的质量。
[0010]
4、专利申请201610464953.2，公开了一种刺梨冻干颗粒的制备方法，具进一步，本发明提供一种刺梨冻干颗粒的制备方法，还可以具有这样的特征：具体步骤为：(a)、将刺梨原汁静置至少5h，过滤；(b)、真空浓缩至原体积的1/4～ 1/5；(c)、在浓缩液中加入保护剂，并搅拌至其完全溶解，过滤后调节ph至6～ 8；(d)、进行真空冷冻干燥过程；(e)、粉碎后无菌包装，获得刺梨冻干颗粒。其中，步骤(e)中，粉碎和无菌包装均在温度不超过25℃、空气相对湿度不超过40％的环境中进行。并采用铝塑复合袋密封，获得刺梨冻干颗粒。但是，该技术方案存在的不足和缺点：
①
刺梨原汁在空气中静止5小时，vc、sod、黄酮等被氧化，降低其含量。
②
在非洁净区，刺梨原汁在空气中静止5小时，原汁会受到污染，没有杀菌工艺，冻干品虽然粉碎、包装在无菌间进行，但仍无法确保产品质量。
③
虽然在浓缩液中加入了保护剂，葡萄糖可避免溶液在干燥时结块，使干燥后产品疏松易碎。但刺梨本身含有含有糖类、淀粉、树脂、果胶、黏液质、糅质、无机盐等亲水性成分，具有很强的吸湿性和具有很强的粘性，其流动性、润滑性、易成型性很差，从该技术方案中的工艺来看，工艺过程很难顺利进行，制成的刺梨冻干颗粒产品质量很难保证。
[0011]
由于刺梨储存期较短，本身含有较多的单宁，苦涩味较重，较难被接受；刺梨含有丰富的超氧化物歧化酶(sod)等为生物活性蛋白酶，如榨汁，为延长其货架期需要杀菌，而采用传统加热杀菌将会破坏其中的超氧化物歧化酶(sod) 等生物活性而失去其应有的价值，也会破坏其他营养成分如vc、酮类等。在将刺梨纯汁做成冻干制品时，由于刺梨纯汁冻干制品中，除了含药理作用明确的具有强烈的生理活性、化学成分外，还含有多糖、果胶、黏液质等亲水性成分，具有很强的吸湿性，冻干制品因吸湿而变软、结块、潮解、霉变、滋生细菌甚至液化，而影响其药理和保健价值。同时，超氧化物歧化酶(sod)在体内的半衰期较短，除少量多次服用或食用外，还应长期维持其在体内的含量水平。
[0012]
刺梨鲜果在果蔬类食品中独有的营养价值，对人的健康、抗衰、美容如此重要，但是，现有技术还没有克服刺梨冻干制剂或制品高温杀菌或不杀菌、防潮技术的不足，未能研究出一种能最大程度的保留刺梨冻干制剂或制品的营养成分及其医药价值和防潮、便于携带、食用方便，且能维持sod在体内含量水平的刺梨冻干产品。

技术实现要素：

[0013]
本发明针对以上技术存在的问题和不足，提供了一种刺梨生物冻干制剂的制备方法。本技术将刺梨纯汁非热杀菌后，经冻干并与辅料混合，再根据实际情况进一步加工制成所需制剂，得到刺梨生物冻干制剂，刺梨生物冻干制剂中vc、黄酮破坏少含量高且稳定性好，超氧化物歧化酶(sod)酶活性不被破坏甚至提高或激活sod酶活性，最大程度保留了刺梨鲜果的营养成分及其营养价值，该产品防潮、便于携带、食用方便，同时还能够长期维持sod在体内的含量水平，具有良好的市场前景。
[0014]
为了能够达到上述所述目的，本发明采用以下技术方案：
[0015]
一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括：采用超高压(hpp+)对刺梨纯汁进行非热杀菌处理，将无菌刺梨纯汁快速冻结后，在低温环境下先后进行真空升华干燥、真空解析
干燥进行处理，与辅料混合成混合物料后，再根据实际情况进一步加工制成所需的片剂、颗粒剂、粉剂或胶囊，得到所述刺梨生物冻干制剂。
[0016]
进一步地，所述颗粒剂是混合物料经造粒、微囊化、无菌包装后制得；所述片剂是混合物料经造粒、压片、包衣、铝塑泡罩或无菌袋装或瓶装包装后制得。
[0017]
所述微囊化是利用天然的或合成的高分子成膜材料即囊材把混合物料造粒即囊心物后包嵌形成半透性或密封囊膜、直径为5～250μm的微小胶囊。
[0018]
进行造粒、微囊化、包衣、包装等工艺主要是防潮作用，防止产品吸潮而变质；微囊包嵌或微囊化胶囊即微囊化为刺梨生物冻干制剂的缓释工艺。微囊包嵌或微囊化胶囊即微囊化具有防潮和缓释作用，以维持sod在体内的含量水平。
[0019]
进一步地，所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0020]
(1)预处理：将刺梨鲜果洗净并风干表面水分，备用；
[0021]
(2)榨汁：将步骤(1)处理好的刺梨鲜果送入榨汁机中进行榨汁，经两次过滤除渣，得到刺梨纯汁；
[0022]
(3)非热杀菌(hpp+)处理：将步骤(2)的刺梨纯汁用大包装塑料袋或塑料瓶密封，再将装有刺梨纯汁的塑料袋或塑料瓶送入uhp、hhp或hpp超高压容器的高压舱内，并加入介质，然后密封高压舱，对超高压容器施加压力并保压进行杀菌，得到无菌刺梨纯汁；
[0023]
(4)大包装清洗消毒：将步骤(3)的无菌刺梨纯汁大包装经洁净空气风幕传送至无菌环境下进行清洗并消毒、杀菌；所述大包装为塑料软包装或塑料瓶灌装；
[0024]
(5)快速冻结：在无菌环境下，将步骤(4)清洗消毒的大包装拆开，将无菌刺梨纯汁分装到支架分层托盘内，送入至速冻库或冻干机内进行快速冻结，得到冻结刺梨纯汁；
[0025]
(6)真空升华干燥：将步骤(5)的冻结刺梨纯汁支架分层托盘送入到升华干燥室进行真空升华干燥，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气被除去，从而得到杀菌后冷冻干燥的刺梨纯汁冻干品，即真空升华干燥品；
[0026]
(7)真空解析干燥：将真空升华干燥品收集后与辅料一起分别装入支架分层托盘内送入真空解析干燥室进行真空解析干燥，将残留于升华冻干品和辅料中的水分蒸发一部分，得到真快解析干燥品和干燥辅料；
[0027]
(8)混合：按照重量份配比，将真空解析干燥品和干燥辅料在一定转速下进行搅拌混合均质，再根据实际情况进一步加工制成所需制剂，得到所述刺梨生物冻干制剂。
[0028]
进一步地，在步骤(2)，所述第一次过滤的滤网为200～300目，第二次过滤的滤网为400～800目。
[0029]
过滤目的是除去果汁中的纤维素、果胶等无效成分，降低刺梨果汁冻干后的收率，含水量10％的冻干粉收率≤5％，以此提高冻干粉有效成分含量、克服服用剂量大的缺点和降低冻干制品的吸湿性。
[0030]
进一步地，在步骤(3)，所述介质为水或高级液压油；当超高压容器内的介质为水时，对塑料软包装或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以400～600mpa的压力，保压时间5～15min；当超高压容器内的介质为高级液压油时，对塑料软包装或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以100～1000mpa的压力；保压时间为1～30min。
[0031]
本技术采用超高压灭菌技术(ultra—high pressure processing简称uhp)或高静压技术(high hydrostatic pressure,简称hhp)或高压杀菌技术(high pressure
processing,简称hpp)进行非热杀菌，因为非热杀菌(hpp+)能杀死塑料软包装或塑料瓶包装刺梨纯汁中的细菌、霉菌和酵母菌，且不会像高温杀菌那样造成塑料软包装或塑料瓶包装刺梨纯汁中sod等活性成分被大量灭活和vc、vp等营养成分被大量破坏。
[0032]
进一步地，在步骤(5)，所述快速冻结的温度为-30～-40℃。
[0033]
进一步地，在步骤(6)，所述真空升华干燥的真空度为30～150pa，温度为30～40℃，所述真空升华干燥品的含水率为10
±
2％。
[0034]
进一步地，在步骤(7)，所述真空解析干燥的真空度为5～30pa，温度为 40～60℃，空气相对湿度为20～40％，所述真快解析干燥品的含水率为5
±
2％；所述辅料由微晶纤维素、微粉硅胶、糊精按照质量比＝(0.3～0.4):(0.3～0.4): (0.2～0.4)混合制成的混合辅料，且三者质量比相加为1。
[0035]
所述辅料具有防吸湿、润滑、缓释等作用，辅料的添加是为了确保刺梨生物冻干制剂工艺过程顺利进行和确保成品安全有效，辅料应具有良好的流动性、吸湿性、易成型性、润滑性，辅料可以是单一辅料也可以是组合辅料，辅料载药量不得低于自身重量。
[0036]
升华干燥室的门与非控湿区无菌间或洁净区连通，其余与非控湿区无菌间隔绝；将杀菌后的刺梨纯汁在-30～-40℃下快速冻结，然后在30～150pa的真空环境内，使冻结的水分子在30～40℃温度下直接升华成为水蒸气被除去，从而得到冷冻干燥的、含水率为10
±
2％的杀菌后刺梨纯汁冻干品。
[0037]
进一步地，在步骤(8)，所述真空解析干燥品和干燥辅料的质量比＝1:x，且x≤1。
[0038]
真空解析干燥时将升华冻干品和辅料在5～30pa的真空环境内，将残留于升华冻干品中的水分在40～60℃温度下蒸发一部分，使其含水率达到5
±
2％的要求。真空解析干燥室及与其连通室要进行控湿处理，空气相对湿度控制为20～ 40％，真空解析干燥室的门与控湿区无菌间连通，其余与控湿区无菌间隔绝；控湿区无菌间空气压力比非控湿区无菌间空气压力大5pa以上。
[0039]
进一步地，所述刺梨生物冻干制剂为颗粒剂时，混合物料经造粒、微囊化、无菌包装后制得；所述刺梨生物冻干制剂为片剂时，混合物料经造粒、压片、包衣、铝塑泡罩或无菌袋装或瓶装包装后制得；所述转速是500～600r/min。当采用流化包衣方法包衣时，流化温度≤60℃。
[0040]
造粒是采用干法造粒：是指将冻干品与辅料混匀后，使之通过压片机压成一定硬度和直径的薄片，再通过颗粒粉碎机粉碎成一定大小颗粒的冻干制剂，包括滚压、碾压、整粒等方法。真空解析干燥品与辅料混合和干法造粒步骤可以在一台设备中进行。
[0041]
微囊为微囊包嵌，即微囊化，是运用一定的方法和设备，利用天然的或合成的高分子成膜材料即囊材把刺梨冻干品造粒即囊心物后包嵌形成半透性或密封囊膜、直径为5～250μm的微小胶囊；微囊包嵌或微囊化胶囊即微囊化具有防潮和缓释作用，以维持sod在体内的含量水平。
[0042]
压片是指刺梨冻干品及其混合物造粒后或造粒微囊包嵌即微囊化后，采用旋转多冲压片技术进行压片。片剂采用铝塑泡罩包装，即采用泡罩包装机对经包衣后的刺梨冻干制剂进行包装，同时具有印刷、打印功能。
[0043]
包衣是指将压片后的刺梨冻干制剂，采用滚转式或流化包衣方法进行包衣。当采用流化包衣方法进行包衣时，热空气温度≤60℃，高于60℃会破坏超氧化物歧化酶sod的活
性。包衣时流化温度≤60℃。
[0044]
采用干法造粒技术：由于刺梨冻干粉为微细粉，比表面积大，吸湿能力强；经干法造粒后，形成较大颗粒，降低了比表面积，从而降低其吸湿性。采用微囊包嵌或微囊化技术，冻干制剂即囊心物经天然或合成的囊材包覆后，形成一种半透性或全封闭的膜，可有效隔阻刺梨冻干制剂吸湿。压片后的刺梨冻干制剂采用包衣技术，对成型后的刺梨冻干制剂进行包衣，有效隔阻刺梨冻干制剂吸湿。对包衣后的刺梨冻干制剂进行泡罩包装或对颗粒进行真空包装，可避免因在食用或服用时，因全部打开而与空气接触而吸湿。
[0045]
进一步地，所述刺梨生物冻干制剂中vc含量为≥30mg/g、sod(超氧化物歧化酶)生物活性含量为≥20000～50000u/g、黄酮含量为≥4mg/g。所述刺梨生物冻干制剂中未检出致病菌——沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌；所述刺梨生物冻干制剂的临界相对湿度≥70％。在相对湿度60～75％的环境下，质保期 18个月。本技术制得的刺梨生物冻干制剂符合要求。
[0046]
进一步地，所述无菌环境的洁净级别不低于30万级。
[0047]
大包装清洗消毒、快速冻结、真空升华干燥工艺均在无菌间或洁净区非控湿区内进行，洁净级别不低于30万级，相对湿度40～65％，非洁净区与洁净区由洁净空气风幕隔阻，洁净区空气压力大于非洁净区空气压力5pa以上；真空解析干燥、真空解析干燥品与辅料混合、造粒、微囊包嵌或微囊化、压片、包衣、片剂铝塑泡罩或无菌袋装或瓶装包装和颗粒剂无菌包装工艺均在控湿区内进行，相对湿度为20～40％，控湿区与非控湿区由洁净空气风幕隔阻，控湿区空气压力大于非控湿区空气压力5pa以上；非洁净区与室外由空气风幕隔阻，非洁净区空气压力大于室外空气压力10pa以上；无菌间或洁净区控湿区，空气相对湿度20～ 40％。
[0048]
当然，制备工艺还包括装箱贴标、入库，是将包装好的刺梨冻干制剂进行装箱、贴标，入库。
[0049]
在整个生产过程中，无菌洁净区空气压力比非洁净区空气压力大5pa；非洁净区空气压力比室外环境空气压力大105pa。
[0050]
本技术中，刺梨鲜果洗净风干、榨汁、非热(hpp+)杀菌、装箱贴标包装均在非洁净区进行；大包装清洗消毒、速冻库冻结、真空升华干燥步骤均在无菌间或洁净区非控湿区进行，洁净级别不低于30万级，非控湿区相对湿度40～ 65％；与辅料一起真空解析干燥、与辅料混合、干法造粒、微囊包嵌或微囊化、压片、包衣、片剂铝塑泡罩或无菌袋装或瓶装包装和颗粒剂无菌包装均在无菌间或洁净区控湿区进行，空气相对湿度20～40％。
[0051]
快速冻结、真空升华干燥与真空解析干燥可以在一台冻干机内进行。真空升华干燥与真空解析干燥可以在一台冻干机内进行。速冻库的门与无菌间或洁净区连通，其余与无菌间隔绝。快速冻结，可以在冻干机内部的冻干箱内进行，也可在专用的速冻库内进行；与辅料混合和干法造粒步骤可以在一台设备中进行。
[0052]
升华干燥室的门与非控湿区无菌间或洁净区连通，其余与非控湿区无菌间隔绝；解析干燥室的门与控湿区无菌间连通，其余与控湿区无菌间隔绝；控湿区无菌间与非控湿区无菌间由洁净空气风幕隔阻；控湿区无菌间空气压力比非控湿区无菌间空气压力大5pa以上；无菌间空气压力比非无菌环境空气压力大10pa以上；非洁净区与室外由空气风幕隔阻。当采用流化包衣法进行包衣时，热空气温度≤60℃，高于60℃会破坏超氧化物歧化酶
sod的活性，因此要控好温度。
[0053]
由于本发明采用了以上技术方案，具有以下有益效果：
[0054]
(1)本技术刺梨鲜榨果汁后采用滤网为400～800目的过滤机进行二次过滤，除去了果汁中的纤维素、果胶、黏液质、糅质等无效成分，降低刺梨果汁冻干后的收率，含水量10％的冻干粉收率≤5％，提高了冻干粉有效成分含量、克服服用剂量大的缺点和降低了冻干制品的吸湿性。
[0055]
(2)本技术采用非热(hpp+)杀菌和真空冻干方式，能保留刺梨冻干品中 sod生物蛋白酶的活性，确保刺梨冻干制剂中的vc、黄酮等破坏较小，从而保留刺梨营养价值；同时便于携带、方便食用，让刺梨在防治疾病、保健、抗衰、美容等方面发挥应有的作用。
[0056]
(3)由于刺梨冻干制剂含有多糖、果胶、黏液质等亲水性成分，具有很强的吸湿性，因吸湿而变软、结块、潮解、霉变、滋生细菌甚至液化，而影响其药理和保健价值，所以刺梨冻干制剂的防潮很重要。在制备过程中，相关关键步骤均在相对湿度20～40％的环境下进行，并结合制剂类型，在制备过程中采用防吸湿技术，从而避免了因工艺环境湿度过大，刺梨冻干制剂吸湿而影响产品质量。另外，采用微囊包嵌或微囊化、包衣技术不仅可以有效防吸湿，同时还具有缓释作用，由于超氧化物歧化酶sod在体内的半衰期较短，刺梨冻干制剂通过微囊化和包衣，高含量的sod不断地缓慢地进行释放，以此维持体内一定含量水平的sod，从而达到和保健目的。
[0057]
(4)本技术快速冻结、升华干燥、解析干燥一般由一体机来完成。而刺梨纯汁冻干后的收率一般小于5％，如采用一体机，快速冻结需要8～12小时，升华干燥需要6～10小时，如批量生产，势必影响生产效率；升华干燥、解析干燥一般由一体机来完成，但由于刺梨纯汁冻干后的收率一般小于5％，刺梨纯汁用量大，装、卸盘耗时长，冻干制剂与空气接触时间长，不可避免的会吸湿，而影响产品质量。因此，本工艺流程中把快速冻结、升华干燥、解析干燥三个程序分开且解析干燥程序是在控湿区内进行，这就避免了因装、卸盘耗时长，吸湿时间长而影响产品质量，同时提高生产效率。
[0058]
(5)现有的片剂、胶囊、颗粒等中药固体制剂的生产工艺流程中均没有对原料进行杀菌、消毒的工艺，在成分提取、纯化、浓缩、干燥等工艺中虽然可能在洁净区进行，但在中药原料可能是带菌的，这就给成品药带来安全风险。本技术刺梨生物冻干制剂由于采用了hpp+非热杀菌杀菌前处理，致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌)不得检出，就避免了这种风险。
附图说明
[0059]
为了更清楚地说明本发明实例或现有技术中的技术方案，下面将对实施实例或现有技术描述中所需要的附图做简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图：
[0060]
图1为本技术刺梨生物冻干制剂工艺流程图；
[0061]
图2为本技术刺梨生物冻干制剂包衣片剂测定的临界相对湿度(crh)图；
[0062]
图3为本技术刺梨生物冻干制剂非包衣片剂测定的临界相对湿度(crh)图；
[0063]
图4为本技术刺梨生物冻干制剂颗粒剂测定的临界相对湿度(crh)图。
具体实施方式
[0064]
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
[0065]
实施例1
[0066]
一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0067]
(1)预处理：将刺梨鲜果洗净并风干表面水分，备用；
[0068]
(2)榨汁：将步骤(1)处理好的刺梨鲜果送入榨汁机中进行榨汁，经两次过滤除渣，得到刺梨纯汁；所述第一次过滤的滤网为300目，第二次过滤的滤网为600目，含水量10％的冻干粉收率约5％；
[0069]
(3)非热杀菌(hpp+)：将步骤(2)的刺梨纯汁用大包装塑料袋或塑料瓶灌装密封，再将装有刺梨纯汁的塑料袋或塑料瓶送入hpp超高压容器的高压舱内，并加入介质水，然后密封高压舱，对超高压容器施加压力并保压进行杀菌，得到无菌刺梨纯汁；对塑料软包装或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以600mpa的压力，保压时间为5min；
[0070]
(4)大包装清洗消毒：将步骤(3)的无菌刺梨纯汁大包装经洁净空气风幕传送至无菌环境下进行清洗并消毒、杀菌；
[0071]
(5)快速冻结：在无菌环境下，将步骤(4)清洗消毒的大包装拆开，将无菌刺梨纯汁分装到支架分层托盘内，送入至速冻库或冻干机内进行快速冻结，得到冻结刺梨纯汁；所述快速冻结的温度为-35℃；
[0072]
(6)真空升华干燥：将步骤(5)的冻结刺梨纯汁支架分层托盘送入到升华干燥室进行真空升华干燥，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气被除去，从而得到杀菌后冷冻干燥的刺梨纯汁冻干品，即真空升华干燥品；所述真空升华干燥的真空度为50pa，温度为35℃，所述真空升华干燥品的含水率为10
±
2％；
[0073]
(7)真空解析干燥：将真空升华干燥品收集后与辅料一起分别装入支架分层托盘内送入真空解析干燥室进行真空解析干燥，将残留于升华冻干品和辅料中的水分蒸发一部分，得到真快解析干燥品和干燥辅料；所述真空解析干燥的真空度为10pa，温度为50℃，空气相对湿度为20％，所述真快解析干燥品的含水率为5
±
2％；所述辅料由微晶纤维素、微粉硅胶、糊精按照质量比＝0.3:0.3:0.4混合制成的混合辅料。
[0074]
(8)混合：按照重量份配比，将真空解析干燥品和干燥辅料在一定转速下进行搅拌混合均质，经造粒、压片、包衣、铝塑泡罩包装工艺后，得到所述刺梨生物冻干制剂，为铝塑泡罩包装包衣片剂；所述真空解析干燥品和干燥辅料的质量比为1:1；所述刺梨生物冻干制剂为包衣片剂；所述转速是600r/min；所述刺梨生物冻干制剂中vc含量≥30mg/g、sod(超氧化物歧化酶)生物活性含量为≥20000～50000u/g、黄酮含量为≥4mg/g；致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌)不得检出；所得的刺梨生物冻干制剂的临界相对湿度≥70％，在相对湿度60～75％的环境下，质保期18个月。
[0075]
进一步地，所述无菌环境的洁净级别不低于30万级；包衣时流化温度≤ 60℃；无菌间或洁净区控湿区，空气相对湿度20～40％。
[0076]
实施例2
[0077]
一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0078]
(1)预处理：将刺梨鲜果洗净并风干表面水分，备用；
[0079]
(2)榨汁：将步骤(1)处理好的刺梨鲜果送入榨汁机中进行榨汁，经两次过滤除渣，得到刺梨纯汁；所述第一次过滤的滤网为300目，第二次过滤的滤网为800目；
[0080]
(3)非热杀菌(hpp+)：将步骤(2)的刺梨纯汁用大包装塑料袋或塑料瓶灌装密封，再将装有刺梨纯汁的塑料袋或塑料瓶送入hpp超高压容器的高压舱内，并加入介质高级液压油，然后密封高压舱，对超高压容器施加压力并保压进行杀菌，得到无菌刺梨纯汁；对塑料软包装或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以 500mpa的压力，保压时间为20min；
[0081]
(4)大包装清洗消毒：将步骤(3)的无菌刺梨纯汁大包装经洁净空气风幕传送至无菌环境下进行清洗并消毒、杀菌；
[0082]
(5)快速冻结：在无菌环境下，将步骤(4)清洗消毒的大包装拆开，将无菌刺梨纯汁分装到支架分层托盘内，送入至速冻库或冻干机内进行快速冻结，得到冻结刺梨纯汁；所述快速冻结的温度为-40℃；
[0083]
(6)真空升华干燥：将步骤(5)的冻结刺梨纯汁支架分层托盘送入到升华干燥室进行真空升华干燥，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气被除去，从而得到杀菌后冷冻干燥的刺梨纯汁冻干品，即真空升华干燥品；所述真空升华干燥的真空度为100pa，温度为40℃，所述真空升华干燥品的含水率为10
±
2％；
[0084]
(7)真空解析干燥：将真空升华干燥品收集后与辅料一起分别装入支架分层托盘内送入真空解析干燥室进行真空解析干燥，将残留于升华冻干品和辅料中的水分蒸发一部分，得到真快解析干燥品和干燥辅料；所述真空解析干燥的真空度为20pa，温度为45℃，空气相对湿度为40％，所述真快解析干燥品的含水率为5
±
2％；所述辅料由微晶纤维素、微粉硅胶、糊精按照质量比＝0.4:0.4:0.2混合制成的混合辅料。
[0085]
(8)混合：按照重量份配比，将真空解析干燥品和干燥辅料在一定转速下进行搅拌混合均质，经造粒、压片、无菌袋装包装工艺后，得到所述刺梨生物冻干制剂，为无菌袋装包装非包衣片剂；所述真空解析干燥品和干燥辅料的质量比＝1:0.8；所述刺梨生物冻干制剂为非包衣片剂；所述转速是520r/min；所述刺梨生物冻干制剂中vc含量为≥33mg/g、sod(超氧化物歧化酶)生物活性含量≥ 22000～55000u/g、黄酮含量为≥4.4mg/g。
[0086]
进一步地，所述无菌环境的洁净级别不低于30万级；无菌间或洁净区控湿区，空气相对湿度20～40％；所得的刺梨生物冻干制剂的临界相对湿度≥70％，在相对湿度60～75％的环境下，质保期18个月。
[0087]
实施例3
[0088]
一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0089]
(1)预处理：将刺梨鲜果洗净并风干表面水分，备用；
[0090]
(2)榨汁：将步骤(1)处理好的刺梨鲜果送入榨汁机中进行榨汁，经两次过滤除渣，得到刺梨纯汁；所述第一次过滤的滤网为200目，第二次过滤的滤网为800目；
[0091]
(3)非热杀菌(hpp+)：将步骤(2)的刺梨纯汁用大包装塑料袋或塑料瓶灌装密封，再将装有刺梨纯汁的塑料袋或塑料瓶送入uhp、hhp或hpp超高压容器的高压舱内，并加入介质高级液压油，然后密封高压舱，对超高压容器施加压力并保压进行杀菌，得到无菌刺梨纯汁；当超高压容器内的介质为高级液压油时，对塑料软包装或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以100mpa的压力；保压时间为 30min；
[0092]
(4)大包装清洗消毒：将步骤(3)的无菌刺梨纯汁大包装经洁净空气风幕传送至无菌环境下进行清洗并消毒、杀菌；
[0093]
(5)快速冻结：在无菌环境下，将步骤(4)清洗消毒的大包装拆开，将无菌刺梨纯汁分装到支架分层托盘内，送入至速冻库或冻干机内进行快速冻结，得到冻结刺梨纯汁；所述快速冻结的温度为-30℃；
[0094]
(6)真空升华干燥：将步骤(5)的冻结刺梨纯汁支架分层托盘送入到升华干燥室进行真空升华干燥，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气被除去，从而得到杀菌后冷冻干燥的刺梨纯汁冻干品，即真空升华干燥品；所述真空升华干燥的真空度为150pa，温度为30℃，所述真空升华干燥品的含水率为10
±
2％；
[0095]
(7)真空解析干燥：将真空升华干燥品收集后与辅料一起分别装入支架分层托盘内送入真空解析干燥室进行真空解析干燥，将残留于升华冻干品和辅料中的水分蒸发一部分，得到真快解析干燥品和干燥辅料；所述真空解析干燥的真空度为30pa，温度为40℃，空气相对湿度为30％，所述真快解析干燥品的含水率为5
±
2％；所述辅料由微晶纤维素、微粉硅胶、糊精按照质量比＝0.35:0.35:0.3 混合制成的混合辅料。
[0096]
(8)混合：按照重量份配比，将真空解析干燥品和干燥辅料在一定转速下进行搅拌混合均质，经造粒、微囊化、无菌包装工艺后，得到所述刺梨生物冻干制剂，为无菌包装颗粒剂；所述真空解析干燥品和干燥辅料的质量比＝1:0.9；所述刺梨生物冻干制剂为无菌包装颗粒剂；所述转速是500r/min；所述刺梨生物冻干制剂颗粒剂中vc含量≥31.5mg/g、sod(超氧化物歧化酶)生物活性含量≥ 21000～52000u/g、黄酮含量为≥4.2mg/g；所得的刺梨生物冻干制剂的临界相对湿度≥70％，在相对湿度60～75％的环境下，质保期18个月。
[0097]
进一步地，所述无菌环境的洁净级别不低于30万级；无菌间或洁净区控湿区，空气相对湿度20～40％。
[0098]
实施例4
[0099]
一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0100]
(1)预处理：将刺梨鲜果洗净并风干表面水分，备用；
[0101]
(2)榨汁：将步骤(1)处理好的刺梨鲜果送入榨汁机中进行榨汁，经两次过滤除渣，得到刺梨纯汁；所述第一次过滤的滤网为300目，第二次过滤的滤网为400目；
[0102]
(3)非热杀菌(hpp+)：将步骤(2)的刺梨纯汁用大包装塑料袋或塑料瓶灌装密封，再将装有刺梨纯汁的塑料袋或塑料瓶送入uhp、hhp或hpp超高压容器的高压舱内，并加入介质高级液压油，然后密封高压舱，对超高压容器施加压力并保压进行杀菌，得到无菌刺梨纯汁；当超高压容器内的介质为高级液压油时，对塑料软包装或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以1000mpa的压力；保压时间为1min；
[0103]
(4)大包装清洗消毒：将步骤(3)的无菌刺梨纯汁大包装经洁净空气风幕传送至无菌环境下进行清洗并消毒、杀菌；
[0104]
(5)快速冻结：在无菌环境下，将步骤(4)清洗消毒的大包装拆开，将无菌刺梨纯汁分装到支架分层托盘内，送入至速冻库或冻干机内进行快速冻结，得到冻结刺梨纯汁；所述快速冻结的温度为-40℃；
[0105]
(6)真空升华干燥：将步骤(5)的冻结刺梨纯汁支架分层托盘送入到升华干燥室进行真空升华干燥，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气被除去，从而得到杀菌后冷冻干燥
的刺梨纯汁冻干品，即真空升华干燥品；所述真空升华干燥的真空度为30pa，温度为40℃，所述真空升华干燥品的含水率为10
±
2％；
[0106]
(7)真空解析干燥：将真空升华干燥品收集后与辅料一起分别装入支架分层托盘内送入真空解析干燥室进行真空解析干燥，将残留于升华冻干品和辅料中的水分蒸发一部分，得到真快解析干燥品和干燥辅料；所述真空解析干燥的真空度为5pa，温度为60℃，空气相对湿度为35％，所述真快解析干燥品的含水率为 5
±
2％；所述辅料由微晶纤维素、微粉硅胶、糊精按照质量比＝0.25:0.25:0.5混合制成的混合辅料。
[0107]
(8)混合：按照重量份配比，将真空解析干燥品和干燥辅料在一定转速下进行搅拌混合均质，经造粒、压片、包衣、瓶装包装工艺后，得到所述刺梨生物冻干制剂，为瓶装包装包衣片剂；所述真空解析干燥品和干燥辅料的质量比＝1:0.7；所述刺梨生物冻干制剂为包衣片剂；所述转速是580r/min；所述刺梨生物冻干制剂中vc含量≥35mg/g、sod(超氧化物歧化酶)生物活性含量≥ 23000～58000/g、黄酮含量≥4.7mg/g；所得的刺梨生物冻干制剂的临界相对湿度≥70％，在相对湿度60～75％的环境下，质保期18个月。
[0108]
进一步地，所述无菌环境的洁净级别不低于30万级；包衣流化温度≤60℃；无菌间或洁净区控湿区，空气相对湿度20～40％；致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌)不得检出。
[0109]
实施例5
[0110]
一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0111]
(1)预处理：将刺梨鲜果洗净并风干表面水分，备用；
[0112]
(2)榨汁：将步骤(1)处理好的刺梨鲜果送入榨汁机中进行榨汁，经两次过滤除渣，得到刺梨纯汁；所述第一次过滤的滤网为250目，第二次过滤的滤网为700目；
[0113]
(3)非热杀菌(hpp+)：将步骤(2)的刺梨纯汁用大包装塑料袋或塑料瓶灌装密封，再将装有刺梨纯汁的塑料袋或塑料瓶送入uhp、hhp或hpp超高压容器的高压舱内，并加入介质高级液压油，然后密封高压舱，对超高压容器施加压力并保压进行杀菌，得到无菌刺梨纯汁；当超高压容器内的介质为高级液压油时，对塑料软包装或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以500mpa的压力；保压时间为 15min；
[0114]
(4)大包装清洗消毒：将步骤(3)的无菌刺梨纯汁大包装经洁净空气风幕传送至无菌环境下进行清洗并消毒、杀菌；
[0115]
(5)快速冻结：在无菌环境下，将步骤(4)清洗消毒的大包装拆开，将无菌刺梨纯汁分装到支架分层托盘内，送入至速冻库或冻干机内进行快速冻结，得到冻结刺梨纯汁；所述快速冻结的温度为-35℃；
[0116]
(6)真空升华干燥：将步骤(5)的冻结刺梨纯汁支架分层托盘送入到升华干燥室进行真空升华干燥，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气被除去，从而得到杀菌后冷冻干燥的刺梨纯汁冻干品，即真空升华干燥品；所述真空升华干燥的真空度为90pa，温度为35℃，所述真空升华干燥品的含水率为10
±
2％；
[0117]
(7)真空解析干燥：将真空升华干燥品收集后与辅料一起分别装入支架分层托盘内送入真空解析干燥室进行真空解析干燥，将残留于升华冻干品和辅料中的水分蒸发一部分，得到真快解析干燥品和干燥辅料；所述真空解析干燥的真空度为25pa，温度为50℃，空气相对湿度为30％，所述真快解析干燥品的含水率为5
±
2％；所述辅料由微晶纤维素、微粉
硅胶、糊精按照质量比＝0.3:0.3:0.4混合制成的混合辅料。
[0118]
(8)混合：按照重量份配比，将真空解析干燥品和干燥辅料在一定转速下进行搅拌混合均质，经造粒、压片、铝塑泡罩包装工艺后，得到所述刺梨生物冻干制剂，为铝塑泡罩包装非包衣片剂；所述真空解析干燥品和干燥辅料的质量比＝1:1；所述刺梨生物冻干制剂为非包衣片剂；所述转速是550r/min；所述刺梨生物冻干制剂中vc含量≥30mg/g、sod(超氧化物歧化酶)生物活性含量为≥ 20000～50000u/g、黄酮含量为≥4mg/g；所得的刺梨生物冻干制剂的临界相对湿度≥70％，在相对湿度60～75％的环境下，质保期18个月。
[0119]
进一步地，所述无菌环境的洁净级别不低于30万级；无菌间或洁净区控湿区，空气相对湿度20～40％；致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌) 不得检出。
[0120]
为了验证本发明技术方案的创造性和与公开的现有技术对比具有先进性，做如下实验：
[0121]
对比例1
[0122]
与实施例1不同之处在于：一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，杀菌采用高温杀菌，即将刺梨鲜榨果汁加热到75℃～90℃，灭菌时间15～16s，然后无菌灌装，其他条件不变。
[0123]
为了进一步说明本发明能够达到所述技术效果，做以下实验：
[0124]
实验一：
[0125]
刺梨纯汁非热杀解析干燥品及其冻干制剂主要成份含量测定。
[0126]
1.试验目的
[0127]
刺梨纯汁解析干燥品与辅料混合经造粒等工艺后制成的刺梨冻干制剂主要成份含量变化情况。
[0128]
2.试验材料
[0129]
2.1受试品
[0130]
2.1.1刺梨纯汁解析干燥品
[0131]
按照实施例1的方法，刺梨经榨汁、过滤、非热杀菌、大包装清洗消毒、快速冻结、真空升华干燥、真空解析干燥工艺后，制得解析干燥品。
[0132]
2.1.2刺梨生物冻干制剂；
[0133]
按照实施例1的方法，将非热杀菌刺梨纯汁解析干燥品或冻干粉与辅料混合，解析干燥品与辅料质量比为1:1，经造粒、压片、包衣、包装等工艺后，得到刺梨生物冻干制剂,为铝塑泡罩包装包衣片剂，0.6g/片。
[0134]
2.2实验分组
[0135]
取12份刺梨纯汁解析干燥品，2g/份，作为对照组，分别编号。
[0136]
取12份刺梨生物制剂，3片/份，0.6g/片，作为考察组，分别编号。
[0137]
3.实验方法
[0138]
3.1vc(抗坏血酸)检测方法：gb 5009.86-2016(第二法)
[0139]
3.2sod(超氧化物歧化酶)检测方法：ctc-vm-007-2012
[0140]
3.3黄酮检测方法：《保健食品检验与评价技术规范2003版》第四章总黄酮
[0141]
3.4评价指标
[0142]
分别检测刺梨纯汁解析干燥品和刺梨生物制剂vc、sod、黄酮含量。
[0143]
由于刺梨生物制剂是按刺梨纯汁解析干燥品与辅料质量比为1:1的比例，为使刺梨纯汁解析干燥品和刺梨生物制剂具有可比性，刺梨纯汁解析干燥品的单个样本检测数据的二分之一作为统计数据。
[0144]
3.5委托中国检验检疫科学研究院综合检测中心检测
[0145]
报告编号∶caiqs002100391300607。
[0146]
4.统计分析
[0147]
采用《临床医师统计学助手v10.0》统计软件，实验数据以means
±
sd 表示，各指标以组间两样本均数t检验进行统计分析，p*＜0.05、p**＜0.01、p*** ＜0.001，有显著性差。
[0148]
5.实验结果
[0149]
实验结果如下表1所示。
[0150]
表1 vc、sod、黄酮对照组和考察组检测数据
[0151][0152][0153]
注：对照组的数据为实际检测数据的1/2。
[0154]
表2 vc、sod、黄酮两组样本均数
[0155][0156]
从表2可看出，对照组与考察组相比，vc、sod、黄酮含量分别降低1.84％、 1.14％、2.79％，其p值均大于0.05，对照组与考察组即刺梨纯汁解析干燥品与刺梨生物制剂相比，vc、sod、黄酮含量的差异没有显著性，也就是说，刺梨纯汁解析干燥品与辅料混合，经造粒、压片、包衣、包装等工艺后，得到的刺梨生物冻干制剂，其vc、sod、黄酮受到破坏的程度很小，二者没有显著差异。
[0157]
实验二：
[0158]
加热杀菌与非热杀菌对刺梨原汁主要营养成分破坏的实验。
[0159]
1.试验目的
[0160]
考察加热杀菌与非热杀菌对刺梨原汁主要营养成分破坏的情况。
[0161]
2.试验材料
[0162]
2.1受试品
[0163]
表3选用同一批刺梨鲜果榨汁
[0164][0165]
2.2实验分组
[0166]
2.2.1依照刺梨鲜榨原汁采用高温杀菌与非热杀菌得到的刺梨纯汁，共分3 组，每
组12份，分别编号。
[0167]
2.2.2 1组刺梨鲜榨原汁作为对照组，2、3组作为考察组。
[0168]
3.实验方法
[0169]
3.1vc(抗坏血酸)检测方法gb 5009.86-2016(第二法)。
[0170]
3.2sod(超氧化物歧化酶)检测方法：按照ctc-vm-007-2012。
[0171]
3.3黄酮检测方法：根据《保健食品检验与评价技术规范2003版》第四章总黄酮。
[0172]
3.4评价指标
[0173]
高温杀菌与非热杀菌方法对刺梨原汁杀菌，检测杀菌后的刺梨纯汁vc、 sod、黄酮含量。
[0174]
3.5委托中国检验检疫科学研究院综合检测中心检测检测
[0175]
报告编号：caiqs002000391300407。
[0176]
4.统计分析
[0177]
采用《临床医师统计学助手v10.0》统计软件，实验数据以means
±
sd表示，各指标以组间两样本均数t检验进行统计分析，p*＜0.05、p**＜0.01、p*** ＜0.001，有显著性差。
[0178]
6.实验结果
[0179]
表4 vc、sod、黄酮各组检测数据
[0180][0181]
[0182]
表5 vc、sod、黄酮各组样本均数
[0183][0184]
从表5、表6可以看出，vc、黄酮两项指标，考察组2、3与对照组1相比，数据都减小，即不论那种杀菌方法，vc、黄酮都受到不同程度的破坏，但2组加热杀菌方法，受破坏的程度要大，2组vc、黄酮分别减少50.49％、49.17％，与1组相比，p值均小于0.001，差异具有显著性；非热高压杀菌考察组3虽然受到破坏，vc、黄酮分别减少3.38％、4.17％，p值大于0.05，差异没有显著性，也就是说非热杀菌vc、黄酮营养成分破坏最小，是最好的杀菌方法且其差异没有显著性。
[0185]
2组加热杀菌与3组的非热杀菌相比较，2组的vc、黄酮受到破坏的程度要大的多，其p值均小于0.001，差异具有显著性。
[0186]
表6 vc、sod、黄酮各组检测数据比较
[0187][0188]
[0189]
从表5、表6可以看出，2组加热杀菌方法与1组相比较，sod减少30.36％， sod受到破坏的程度较大，其p值小于0.001，差异具有显著性。
[0190]
从表5、表6可以看出，非热高压杀菌3组的sod与1组比较，非但没有减少，而且增加了56.98％，其差异具有显著性；非热高压杀菌3组与加热杀菌2 组相比，sod高出125.41％，其差异具有显著性。
[0191]
高压杀菌其目的是杀灭有害菌，钝化(抑制)酶活性，以防止食品、果汁等发酵、腐败、变质。
[0192]
在国际、国内，这也是我们首次发现刺梨原汁非热高压杀菌，sod不仅没有受到破坏，而且提高了刺梨纯汁sod的活性含量。
[0193]
在我们实际的产品检测中，sod的活性含量很多时候会突破10000u/g，达到12500u/g，其形成机理尚不清楚，但从理论上应该有以下几方面的原因：
[0194]
①
通过高压杀菌，在高压下细胞破壁，存在于细胞内的sod被释放出来。
[0195]
②
超氧化物歧化酶(cu/zn sod)的两个亚基铜和锌与活性位点上的组氨酸侧链形成配位键，主要通过疏水和静电相互作用结合在一起，当疏水和静电相互作用不足以使其结合时，就没有sod活性；在压力作用下使其结合，才具有sod 活性并释放出来。mn sod和fe sod的活性位点具有同样类型的氨基酸与金属离子配位。
[0196]
③
在细胞内或细胞外有游离的蛋白组件或片段或短链蛋白和金属离子，在正常的果液汁或果肉中，它们都处于游离状态，当受到压力后，使它们结合成为可能。
[0197]
7.实验结论
[0198]
从以上实验可知，刺梨纯汁加热杀菌，vc、sod、黄酮被大量破坏，而采用非热高压杀菌，vc、黄酮破坏很小且能够激活刺梨纯汁中的sod的活性。
[0199]
实验三：
[0200]
刺梨纯汁杀菌与非杀菌制得冻干粉微生物检测实验。
[0201]
1.试验目的
[0202]
考察刺梨纯汁杀菌与非杀菌制得的冻干粉微生物指标情况。
[0203]
2.受试品
[0204]
2.1刺梨纯汁杀菌冻干粉或解析干燥品
[0205]
按照实施例1的方法，刺梨经榨汁、过滤、非热杀菌、大包装清洗消毒、快速冻结、真空升华干燥、真空解析干燥工艺后，制得杀菌解析干燥品或冻干粉。
[0206]
2.2刺梨纯汁非杀菌冻干粉或解析干燥品
[0207]
按照实施例1的方法，刺梨经榨汁、过滤、(不进行非热杀菌)大包装清洗消毒、快速冻结、真空升华干燥、真空解析干燥工艺后，制得非杀菌解析干燥品或冻干粉。
[0208]
3.实验方法
[0209]
3.1分别取样刺梨纯汁杀菌冻干粉和刺梨纯汁非杀菌冻干粉，分别编为1号、 2号，平行做两份。
[0210]
3.2测定方法
[0211]
致病菌包括沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌，按gb/t 4789.21规定的方法测定。
[0212]
3.3测定指标
[0213]
分别测定刺梨纯汁非杀菌冻干粉和刺梨纯汁杀菌冻干粉微生物指标，致病菌包括沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌。
[0214]
4.测定结果
[0215]
刺梨纯汁杀菌冻干粉和刺梨纯汁非杀菌冻干粉微生物测定结果，如下表表7 所示。
[0216]
表7
[0217]
编号沙门氏菌志贺氏菌金黄葡萄球菌1未检出未检出未检出2检出检出检出1
′
未检出未检出未检出2
′
检出检出检出
[0218]
从以上表7测定结果可知，刺梨杀菌冻干粉全部没有检测出致病菌，而不杀菌的刺梨冻干粉全部检出致病菌，说明冻干粉在前工艺杀菌的重要性。刺梨鲜果本身可能带菌，在转运、清洗、榨汁、过滤的过程中均可能被污染，因此，作为食品，要保证产品无致病菌，就必须采用杀菌工艺，才能确保产品质量及安全。
[0219]
实验四：
[0220]
刺梨冻干粉与刺梨生物制剂潮解实验
[0221]
1.实验方法
[0222]
按照实施例1、实施例2、实施例3的方法，分别制得非热杀菌解析干燥品即刺梨冻干粉和刺梨生物冻干制剂的包衣片剂、非包衣片剂、颗粒剂。
[0223]
将制备好的刺梨冻干粉(非热杀菌解析干燥品)和不包装的刺梨生物冻干制剂包衣片剂、非包衣片剂、颗粒剂即裸片适量，分别平铺在纸上，在室温rh75％的环境中放置30d，每3天观察受试品外观情况。受试品溶化变形且粘连在一起的定为易吸湿(+++)；受试品潮湿、不溶化变形的为较易吸湿(++)；受试品微潮的为(+)；受试品看不出变化的定为(一)。
[0224]
2.实验结果
[0225]
表8刺梨冻干粉与刺梨生物制剂潮解实验
[0226]
序号观察时间冻干粉包衣片剂非包衣片剂颗粒剂备注1第3天+
‑‑‑‑
2第6天++
‑‑‑‑
3第9天+++
‑‑‑‑
4第12天完全液化
‑‑‑‑
5第15天完全液化
‑‑‑‑
6第18天完全液化
‑‑‑‑
7第21天完全液化
‑‑‑‑
8第24天完全液化
‑‑‑‑
9第27天完全液化
‑‑‑‑
10第30天完全液化
‑‑‑‑
[0227]
从表8可看出，非热杀菌解析干燥品即冻干粉第3天轻微吸潮；第6天吸潮，但没有
溶化变形；第9天吸潮，溶化变形且粘连在一起；第12天起就完全液化了。而梨生物冻干制剂的包衣片剂、非包衣片剂、颗粒剂在第30天没有看到在外观上有什么变化。
[0228]
说明在工业生产中，非热杀菌解析干燥品即冻干粉不进行后续的与合适的辅料混合和颗粒剂经造粒、微囊化或片剂经造粒、压片、包衣等工业工艺过程控湿及防吸潮工艺处理，很难保证其质量的稳定性。而梨生物冻干制剂的包衣片剂、非包衣片剂、颗粒剂由于事先与合适的辅料混合并经过造粒、微囊化、压片、包衣等工业工艺过程控湿及防吸潮工艺处理，很好的保证了其质量的稳定性。
[0229]
实验五：
[0230]
刺梨生物冻干制剂临界相对湿度的测定
[0231]
1.实验目的
[0232]
测定本技术方案制得的刺梨生物冻干制剂的包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂的临界相对湿度，以确保产品质量。
[0233]
2.受试品
[0234]
分别按照实施例1、实施例2、实施例3的方法，分别制成刺梨生物冻干制剂的包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂。
[0235]
3.实验方法
[0236]
将制备好的刺梨生物冻干制剂包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂适量，分别干燥至恒重后，分别在已恒重的扁称量瓶底部均匀放入包衣片剂、非包衣片剂和厚约2mm的颗粒剂，准确称量后分别置于不同rh％的8种不同盐的过饱和溶液的干燥器内，于室温保持7d后称重。由于环境湿度对包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂影响很大，为此测定包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂临界相对湿度。
[0237]
按表9配制不同盐的过饱和溶液，分别置于玻璃干燥器中，室温放置48小时，使其内部湿度平衡构成不同相对湿度的环境，将已干燥至恒重的样品包衣片剂、非包衣片剂各2片、重量1.20g和颗粒剂1.00g置恒重的扁称量瓶中，精密称量，打开称量瓶盖，放入上述不同湿度的干燥器中，恒温中吸湿至恒重，精密称定计算吸湿率，平行做2份，分别测定临界相对湿度(crh)结果见表10、 11、12和图2、3、4。
[0238]
表9不同盐饱和溶液在25℃时的相对湿度
[0239][0240][0241]
表10包衣片剂临界相对湿度测定数据
[0242]
编号rh22.4533.0042.7657.7075.2884.2692.48100.00片剂重(g)1.201.201.201.201.201.201.201.201水分重(g)0.000.010.030.070.220.430.740.96吸水率(％)0.000.832.505.8318.3335.8361.6780.00片剂重(g)1.201.201.201.201.201.201.201.202水分重(g)0.000.020.040.080.200.440.760.94吸水率(％)0.001.673.336.6716.6736.6763.3378.33
平均吸水率(％)0.001.252.926.2517.5036.2562.5079.17
[0243]
表11非包衣片剂临界相对湿度测定数据
[0244]
编号rh22.4533.0042.7657.7075.2884.2692.48100.00片剂重(g)1.201.201.201.201.201.201.201.201水分重(g)0.000.020.040.080.230.440.761.00吸水率(％)0.001.673.336.6719.1736.6763.3383.33片剂重(g)1.201.201.201.201.201.201.201.202水分重(g)0.000.010.030.080.240.450.770.95吸水率(％)0.000.832.506.6720.0037.5064.1779.17平均吸水率(％)0.001.252.926.6719.5837.0863.7581.25
[0245]
表12颗粒剂临界相对湿度测定数据
[0246][0247][0248][0249]
4.结果分析
[0250]
分别以表10、11、12中的吸湿或吸水百分率％为纵坐标，相对湿度rh％为横坐标分别作图，作图中曲线两端的切线，两切线交点对应的横坐标即为临界相对湿度，得到图2、图3、图4。由以上实验项目可得出，刺梨生物冻干制剂包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂的临界相对湿度crh分别为74.92％、72.41％、 72.37％，即刺梨生物冻干制剂包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂在包装、贮存、转运时等，环境湿度必须控制在72％、74％以下，以减少水分对刺梨冻干制剂包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂的性质及稳定性的影响。
[0251]
从以上实验可知，刺梨生物冻干制剂包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂的临界相对湿度crh分别为74.92％、72.41％、72.37％，这只是包衣片剂、非包衣片剂和颗粒剂在裸片的情况下的临界相对湿度，如包衣片剂、非包衣片剂经铝塑泡罩包装或无菌袋装或瓶装和颗粒剂无菌包装后，其临界相对湿度更高，其货架期更长，从而更保障产品的稳定性。
[0252]
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在没有背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无
论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同含义和范围内的所有变化囊括在本发明的保护范围之内。

技术特征：

1.一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：采用超高压对刺梨纯汁进行非热杀菌处理，将无菌刺梨纯汁快速冻结后，在低温环境下先后进行真空升华干燥、真空解析干燥进行处理，与辅料混合成混合物料后，再根据实际情况制成片剂、颗粒剂、粉剂或胶囊，得到所述刺梨生物冻干制剂。2.根据权利要求1所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：所述颗粒剂是混合物料经造粒、微囊化、无菌包装后制得；所述片剂是混合物料经造粒、压片、包衣、铝塑泡罩或无菌袋装或瓶装包装后制得。3.根据权利要求1或2所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)预处理：将刺梨鲜果洗净并风干表面水分，备用；(2)榨汁：将步骤(1)处理好的刺梨鲜果送入榨汁机中进行榨汁，经两次过滤除渣，得到刺梨纯汁；(3)非热杀菌处理：将步骤(2)的刺梨纯汁用大包装塑料袋或塑料瓶密封，再将装有刺梨纯汁的塑料袋或塑料瓶送入超高压容器的高压舱内，并加入介质，然后密封高压舱，对超高压容器施加压力并保压进行杀菌，得到无菌刺梨纯汁；(4)大包装清洗消毒：将步骤(3)的无菌刺梨纯汁大包装经洁净空气风幕传送至无菌环境下进行清洗并消毒、杀菌；所述大包装为塑料软包装或塑料瓶灌装；(5)快速冻结：在无菌环境下，将步骤(4)清洗消毒的大包装拆开，将无菌刺梨纯汁分装到支架分层托盘内，送入至速冻库或冻干机内进行快速冻结，得到冻结刺梨纯汁；(6)真空升华干燥：将步骤(5)的冻结刺梨纯汁支架分层托盘送入到升华干燥室进行真空升华干燥，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气被除去，从而得到杀菌后冷冻干燥的刺梨纯汁冻干品，即真空升华干燥品；(7)真空解析干燥：将真空升华干燥品收集后与辅料一起分别装入支架分层托盘内送入真空解析干燥室进行真空解析干燥，将残留于升华冻干品和辅料中的水分蒸发一部分，得到真快解析干燥品和干燥辅料；(8)混合：按照重量份配比，将真空解析干燥品和干燥辅料在一定转速下进行搅拌混合均质，再根据实际情况制成片剂、颗粒剂、粉剂或胶囊，得到所述刺梨生物冻干制剂。4.根据权利要求3所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：在步骤(2)，所述第一次过滤的滤网为200～300目，第二次过滤的滤网为400～800目。5.根据权利要求3所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：在步骤(3)，所述介质为水或高级液压油；当超高压容器内的介质为水时，对塑料袋或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以400～600mpa的压力，保压时间5～15min；当超高压容器内的介质为高级液压油时，对塑料袋或塑料瓶包装的刺梨纯汁施以100～1000mpa的压力；保压时间为1～30min。6.根据权利要求3所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：在步骤(5)，所述快速冻结的温度为-30～-40℃。7.根据权利要求3所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：在步骤(6)，所述真空升华干燥的真空度为30～150pa，温度为30～40℃，所述真空升华干燥品的含水率为10
±
2％。8.根据权利要求3所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：在步骤(7)，
所述真空解析干燥的真空度为5～30pa，温度为40～60℃，空气相对湿度为20～40％，所述真快解析干燥品的含水率为5
±
2％；所述辅料由微晶纤维素、微粉硅胶、糊精按照质量比＝(0.3～0.4):(0.3～0.4):(0.2～0.4)混合制成的混合辅料，且三者质量比相加为1。9.根据权利要求3所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：在步骤(8)，所述真空解析干燥品和干燥辅料的质量比＝1:x，且x≤1；所述转速是500～600r/min。10.根据权利要求3所述的一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，其特征在于：所述刺梨生物冻干制剂中vc含量为≥30mg/g、sod生物活性含量为≥20000～50000u/g、黄酮含量为≥4mg/g；所述刺梨生物冻干制剂中未检出致病菌——沙门氏菌、志贺氏菌、金黄葡萄球菌；所述刺梨生物冻干制剂的临界相对湿度≥70％。

技术总结

本发明公开了一种刺梨生物冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：采用超高压容器对刺梨纯汁进行非热杀菌(HPP

技术研发人员：

杨梦海 张笑寒

受保护的技术使用者：

春归保健科技有限公司

技术研发日：

2022.08.31

技术公布日：

2022/11/18