组合物的用途、化妆品组合物及其应用的制作方法

1.本技术涉及化妆品技术领域，尤其涉及一种具有抗炎症作用的组合物的用途、化妆品组合物及其应用。

背景技术：

2.机体无时无刻都暴露在各种环境刺激中产生一系列的炎症反应。特别是肌肤屏障受损的易感人，肌肤会受到更多的刺激。抑制单一来源的炎症刺激可能已经无法满足这些消费者的正常需求。
3.尽管现有技术有报道具有抗炎作用的组合物，但是这些组合物不能以尽量少的成分来有效抑制多种来源的炎症刺激。

技术实现要素：

4.针对现有技术存在的问题，本技术的发明人意外地发现，通过将依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物以特定的比例组合，能够在抑制多种外界环境刺激导致的炎症反应方面产生协同效果，从而完成了本技术。
5.具体来说，本技术涉及如下方面：
6.1、一种组合物在制备抗炎成分或产品中的用途，其中，所述组合物包括依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比为1：(0.1～800)。
7.2、根据项1所述的用途，其中，所述依克多因的衍生物包括依克多因甲酯、羟基依克多因、依克多因的盐中的一种或两种以上。
8.3、根据项1或2所述的用途，其中，以所述组合物的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和为0.1-10wt％。
9.4、根据项1-3中任一项所述的用途，所述组合物制备的抗炎成分或抗炎产品用于化妆品中。
10.5、根据项1-4中任一项所述的用途，其中，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料、活性成分。
11.6、一种化妆品组合物，包括依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比为1：(0.1～800)。
12.7、根据项6所述的组合物，所述依克多因的衍生物包括依克多因甲酯、羟基依克多因、依克多因的盐中的一种或两种以上。
13.8、根据项6或7所述的组合物，以所述组合物的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和为0.1-10wt％。
14.9、根据项6-8中任一项所述的组合物，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料、活性成分。
15.10、如项5-8中任一项所述的组合物在化妆品中的用途。
16.技术效果：
17.(1)本技术将依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物以特定比例合用，产生了协同抗炎效果。
18.(2)通过将依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物合用，节省了依克多因或其衍生物的用量，从而节省了原料成本，并且能够获得更好的抗炎效果。
具体实施方式
19.下面结合实施例进一步说明本技术，应当理解，实施例仅用于进一步说明和阐释本技术，并非用于限制本技术。
20.除非另外定义，本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料，本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下，以本说明书包括其中定义为准，另外，材料、方法和例子仅供说明，而不具限制性。以下结合具体实施例对本技术作进一步的说明，但不用来限制本技术的范围。
21.依克多因(ecotin，四氢甲基嘧啶羧酸)，是一种小分子的环状氨基酸衍生物，多为极端环境微生物在渗透压胁迫下合成的一类渗透压补偿溶质，在高盐、高温、高紫外线辐射的极端条件下，能够使嗜盐菌免受伤害。
22.依克多因的衍生物包括依克多因的酯、依克多因的羟基取代物、依克多因的盐等，其通常具有与依克多因相似的功效。
23.依克多因或其衍生物作为功效成分效果明显，由于其复杂的工艺方式，产量问题一直备受关注，因此价格难以下降，添加到化妆品中，添加量少，效果不明显，添加量过大，会造成化妆品成本过高。
24.橄榄叶提取物具有抗氧化、抗菌、加强免疫系统等功效。且橄榄叶提取物来源广泛，价格低廉。
25.尽管橄榄叶提取物具有上述功效，但是并未提示其可以明显提高其它成分的上述功效。
26.本技术提供了一种组合物在制备抗炎成分或产品中的用途，所述组合物包括依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比为1：(0.1～800)，通过将依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物，按照质量比为1：(0.1～800)的方式组合使用，具有协同增效的抗炎效果，实现了对多种炎症因子所引起的炎症的协同抑制作用，该作用减少了依克多因或其衍生物的用量，节省了生产成本，鉴于上述作用，该组合物可用于制备抗炎成分或产品。
27.在本技术的一些实施方式中，依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物制备的抗炎成分或抗炎产品用于化妆品中。
28.在本技术的一些实施方式中，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比为1：(0.1～800)，优选为1：(0.3～800)；例如，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比可以为1：0.1、1：0.2、1：0.3、1：0.4、1：0.5、1：0.6、1：0.7、1：0.8、1：0.9、1：1、1：5、1：10、1：15、1：20、1：25、1：30、1：40、1：50、1：60、1：70、1：80、1：90、1：100、1：110、1：120、1：130、1：140、1：150、1：160、1：170、1：180、1：190、1：200、1：210、1：220、1：230、1：240、
1：250、1：260、1：270、1：280、1：290、1：300、1：310、1：320、1：330、1：340、1：350、1：360、1：370、1：380、1：390、1：400、1：410、1：420、1：430、1：440、1：450、1：460、1：470、1：480、1：490、1：500、1：510、1：520、1：530、1：540、1：550、1：560、1：570、1：580、1：590、1：600、1：610、1：620、1：630、1：640、1：650、1：660、1：670、1：680、1：690、1：700、1：710、1：720、1：730、1：740、1：750、1：760、1：770、1：780、1：790、1：800或其之间的任意范围。
29.在本技术的一些实施方式中，所述依克多因的衍生物包括依克多因的酯、依克多因的羟基取代物、依克多因的盐，例如，依克多因甲酯、羟基依克多因(1,4,5,6-四氢-2-甲基-5-羟基-4-嘧啶羧酸)、依克多因钠盐、依克多因钾盐等中的一种或两种以上。
30.在本技术的一些实施方式中，以所述组合物的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和为0.1-10wt％；
31.例如，以所述化妆品的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和可以为0.1wt％、1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％、10wt％或其之间的任意范围。
32.在本技术的一些实施方式中，以所述组合物的总重量计，所述依克多因的衍生物的质量百分比为0.001wt％-5wt％，例如，0.001wt％、0.005wt％、0.01wt％、0.05wt％、0.1wt％、0.5wt％、1wt％、1.5wt％、2wt％、2.5wt％、3wt％、3.5wt％、4wt％、4.5wt％、5wt％或其之间的任意范围。
33.在本技术的一些实施方式中，以所述组合物的总重量计，所述橄榄叶提取物的的质量百分比为0.1wt％-5wt％，例如，0.1wt％、0.5wt％、1wt％、1.5wt％、2wt％、2.5wt％、3wt％、3.5wt％、4wt％、4.5wt％、5wt％或其之间的任意范围。
34.在本技术的一些实施方式中，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料、活性成分等，所述辅料例如为，溶剂、保湿剂、螯合剂、润肤剂、皮肤调理剂、乳化剂、芳香剂、防腐剂、增稠剂、ph调节剂中的一种或两种以上。
35.在本技术的一些实施方式中，所述活性成分例如为，保湿剂选自甘油、聚甘油醚-26、丁二醇、聚甘油-6、1，3-丙二醇中的一种或多种；螯合剂选自edta-2na、edta-3na、中的一种或多种；润肤剂选自硅油及合成油脂、植物油脂等；防腐剂选自苯氧乙醇、尼泊金酯类、苯甲酸及其盐类、脱氢乙酸及其盐类、双乙酸钠等；增稠剂选自黄原胶、卡拉胶、卡波姆、高分子纤维素、聚丙烯酸钠、丙烯酸(酯)类共聚物等；ph调节剂选自三乙醇胺、氨甲基丙醇、精氨酸、无机碱类等。
36.在本技术的一些实施方式中，所述橄榄叶提取物是指利用超声波提取，溶剂提取、超临界流体萃取方式提取的橄榄叶所得到的提取物。
37.在本技术的一些实施方式中，所述橄榄叶提取物可以通过市售购买，也可以自行提取。市售品包括但不限于draco橄榄叶提取浓缩液、hallstar油橄榄提取物、berkem sas油橄榄提取物。自行提取的方式为提取橄榄叶常用的方式，该提取方式只要能够使橄榄叶提取物具有常规的功效就没有特别的限制，例如，利用溶剂、或溶剂与超声辅助和/或生物酶的相互配合来对橄榄叶进行提取，所述溶剂可以是水和/或醇类。例如，可以以水和/或乙醇为提取溶剂对粉碎的橄榄叶进行提取；也可以以水和/或乙醇为提取溶剂，加入生物酶和/或使用超声辅助对粉碎的橄榄叶进行提取。
38.在本技术的一个具体的实施方式中，将油橄榄叶阴干，粉碎，溶于乙醇中，匀浆机
中混合匀浆，将匀浆好的物料置于超声波装置中，加入适当的乙醇溶液，进行超声萃取，得浓缩液；将所得浓缩液洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得橄榄叶提取物。
39.在本技术的一个具体的实施方式中，将油橄榄叶阴干，粉碎，溶于水中，匀浆机中混合匀浆，将匀浆好的物料置于超声波装置中，加入适当的水溶液，进行超声萃取，得浓缩液；将所得浓缩液洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得橄榄叶提取物。
40.本技术还提供了一种化妆品组合物，该组合物包含依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物，依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物的质量比为1：(0.1～800)。
41.在本技术的一个具体的实施方式中，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比可以为1：0.1、1：0.2、1：0.3、1：0.4、1：0.5、1：0.6、1：0.7、1：0.8、1：0.9、1：1、1：5、1：10、1：15、1：20、1：25、1：30、1：40、1：50、1：60、1：70、1：80、1：90、1：100、1：110、1：120、1：130、1：140、1：150、1：160、1：170、1：180、1：190、1：200、1：210、1：220、1：230、1：240、1：250、1：260、1：270、1：280、1：290、1：300、1：310、1：320、1：330、1：340、1：350、1：360、1：370、1：380、1：390、1：400、1：410、1：420、1：430、1：440、1：450、1：460、1：470、1：480、1：490、1：500、1：510、1：520、1：530、1：540、1：550、1：560、1：570、1：580、1：590、1：600、1：610、1：620、1：630、1：640、1：650、1：660、1：670、1：680、1：690、1：700、1：710、1：720、1：730、1：740、1：750、1：760、1：770、1：780、1：790、1：800或其之间的任意范围。
42.在本技术的一些实施方式中，所述依克多因的衍生物包括依克多因的酯、依克多因的羟基取代物、依克多因的盐，例如，依克多因甲酯、羟基依克多因(1,4,5,6-四氢-2-甲基-5-羟基-4-嘧啶羧酸)、依克多因钠盐、依克多因钾盐等中的一种或两种以上。
43.在本技术的一些实施方式中，以所述组合物的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和为0.1-10wt％；
44.例如，以所述化妆品的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和可以为0.1wt％、1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％、10wt％或其之间的任意范围。
45.在本技术的一些实施方式中，以所述组合物的总重量计，所述依克多因的衍生物的质量百分比为0.001wt％-5wt％，例如，0.001wt％、0.005wt％、0.01wt％、0.05wt％、0.1wt％、0.5wt％、1wt％、1.5wt％、2wt％、2.5wt％、3wt％、3.5wt％、4wt％、4.5wt％、5wt％或其之间的任意范围。
46.在本技术的一些实施方式中，以所述组合物的总重量计，所述橄榄叶提取物的的质量百分比为0.1wt％-5wt％，例如，0.1wt％、0.5wt％、1wt％、1.5wt％、2wt％、2.5wt％、3wt％、3.5wt％、4wt％、4.5wt％、5wt％或其之间的任意范围。
47.在本技术的一些实施方式中，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料、活性成分等，所述辅料例如为，溶剂、保湿剂、螯合剂、润肤剂、皮肤调理剂、乳化剂、芳香剂、防腐剂、增稠剂、ph调节剂中的一种或两种以上。
48.在本技术的一些实施方式中，所述活性成分例如为，保湿剂选自甘油、聚甘油醚-26、丁二醇、聚甘油-6、1，3-丙二醇中的一种或多种；螯合剂选自edta-2na、edta-3na、中的一种或多种；润肤剂选自硅油及合成油脂、植物油脂等；防腐剂选自苯氧乙醇、尼泊金酯类、苯甲酸及其盐类、脱氢乙酸及其盐类、双乙酸钠等；增稠剂选自黄原胶、卡拉胶、卡波姆、高分子纤维素、聚丙烯酸钠、丙烯酸(酯)类共聚物等；ph调节剂选自三乙醇胺、氨甲基丙醇、精
氨酸、无机碱类等。
49.在本技术的一些实施方式中，所述化妆品包括但不限于护肤水、护肤精华、护肤乳液、护肤膏霜、彩妆、香皂、洗面奶、沐浴露、护肤啫喱、精华液、眼霜、面膜的任一种。
50.本技术还提供上述组合物在化妆品中的用途。
51.本技术还提供上述化妆品组合物在制备抗炎成分或产品中的用途。
52.进一步地，所述抗炎成分可以用于化妆品中。
53.在本技术中，将依克多因与橄榄叶提取物组合，应用于hacat细胞中，可以有效抑制pma以及lps(来源于大肠杆菌)刺激导致的炎症il-6生成，具有抗炎的协同作用。
54.其中，佛波醇酯(phorbol-12-myistate-13-acetate,pma)是一种致炎剂，又是蛋白激酶c(pkc)激活剂。pkc是pma的受体，当pma插入细胞膜后直接活化pkc，从而刺激多种细胞内途径的激活。其中包括丝裂原活化蛋白激酶(mapks)和核因子κb b(nf-κb)，以及肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、白介素(il)-1b、il6/8、角质细胞来源的趋化因子(cxcl1/kc)，巨噬细胞炎症蛋白(mip)-2，前列腺素等。
55.脂多糖(lps,大肠杆菌来源)是革兰氏阴性菌外膜的重要结构成分，是研究最广泛的细菌免疫刺激成分之一。当外界病原微生物入侵时，免疫系统进化的受体会自动识别这些微生物，促进对微生物暴露的固有免疫反应，从而导致促炎反应。lps的刺激就能tlr-4识别。从而激活tlr-4并诱导细胞内信号级联，最终激活转录调控因子nf-κb、il-6。
56.本技术通过建立前炎症因子pma、lps刺激模型，可以模拟细菌、病毒、真菌、寄生虫等生物因子，酸、碱、坏死组织的分解产物等化学性因子导致的外界压力刺激，进而模拟多种炎症刺激。
57.实施例
58.本技术对试验中所用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述，在下面的实施例中，如果无其他特别的说明，％表示wt％，即重量百分数。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
59.实施例
60.分别配制依克多因或其衍生物(购于华熙生物)、橄榄叶提取物(draco natural products，sdnp-0034001109)的质量比为50:1-1:800的组合物，其中各个实施例的参数，如下：
61.实施例1(t1)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为3:1
62.实施例2(t2)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为1:1
63.实施例3(t3)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为1:5
64.实施例4(t4)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为1:8
65.实施例5(t5)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为1:20
66.实施例6(t6)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为1:150
67.实施例7(t7)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为1:300
68.实施例8(t8)中依克多因与橄榄叶提取物的质量比为1:800
69.实施例9(t9)中依克多因甲酯与橄榄叶提取物的质量比为1:1
70.实施例10(t
10
)在实施例1的基础上添加金盏花提取物，其中，金盏花提取物的含量为0.5％。
71.实施例11(t
11
)中依克多因甲酯与橄榄叶提取物的质量比为50:1。
72.对比例1(c1)只含有依克多因。
73.对比例2(c2)中只含有橄榄叶提取物。
74.实验例
75.实验例1组合物在pma诱导下对il6生成的影响
76.测试方法：以hacat细胞完全培养基(含10％ fbs、1％青链霉素)为稀释液，分别将上述组合物配制成5％的培养基，进行细胞实验。将hacat细胞与含不同浓度实验组活性物的培养基共培养1天后，用0.1μg/ml的pma溶液处理1天，收集上清液，采用elisa检测试剂盒检测il6的分泌量。在elisa检测的同时，将96孔板中加入细胞裂解液并离心，取上清进行bca蛋白定量。经过均一化处理后，通过后以对照组(只用pma处理)为基准，用百分数表示il6相对抑制率。结果见表1和表2。
77.表1
[0078][0079]
表2
[0080][0081][0082]
用graphpad prism统计软件进行分析处理。两两比较采用t检验，*p《0.05表示有统计学差异，**p《0.01表示有显著性统计学差异，***p《0.001为有极其显著的统计学差异。在本技术中，只要p《0.05即具有差异显著性，在满足差异显著性要求的基础上，il6抑制率％越大，组合物抗炎效果越好。
[0083]
由上表1和表2，可知对比例1-2均具有一定抗炎效果，并且对比例2的效果好于对比例1，实施例1-9与对比例2相比具有统计学差异，表明依克多因与橄榄叶提取物组合物比
单独添加依克多因或橄榄叶提取物，具有协同的抗炎效果。
[0084]
实验例2组合物在lps诱导下对il6生成的影响
[0085]
测试方法：以hacat细胞完全培养基(含10％ fbs、1％青链霉素)为稀释液，分别将上述组合物配制成5％的培养基，进行细胞实验。将hacat细胞与含不同浓度实验组活性物的培养基共培养1天后，用10μg/ml的lps溶液处理1天，收集上清液，采用elisa检测试剂盒检测il6/8的分泌量。在elisa检测的同时，将96孔板中加入细胞裂解液并离心，取上清进行bca蛋白定量。经过均一化处理后，通过后以对照组(只用lps处理)为基准，用百分数表示il6相对抑制率。结果见表3和表4。
[0086]
表3
[0087][0088][0089]
表4
[0090][0091]
用graphpad prism统计软件进行分析处理。两两比较采用t检验，*p《0.05表示有统计学差异，**p《0.01表示有显著性统计学差异，***p《0.001为有极其显著的统计学差异。在本技术中，只要p《0.05即具有差异显著性，在满足差异显著性要求的基础上，il6抑制率％越大，组合物抗炎效果越好。
[0092]
由表3和表4可知，对比例1-2均具有一定抗炎效果，并且对比例2的效果好于对比例1，实施例1-9与对比例2相比具有统计学差异，表明依克多因与橄榄叶提取物组合物比单独添加依克多因或橄榄叶提取物，具有协同的抗炎效果。
[0093]
由以上实验例1和实验例2可知：当用pma和lps进行炎症诱导时，单独添加依克多因、橄榄叶提取物的实验组对炎症因子il6具有较好的抑制效果，说明依克多因、橄榄叶提取物具有较好的抗炎效果。当在特定比例下对依克多因、橄榄叶提取物进行组合复配时，结
果发现依克多因和橄榄叶提取物的组合物对il6的抑制效果明显高于单独添加，并且具有统计学差异。因此得出结论：依克多因和橄榄叶提取物的组合物在抑制pma和lps诱导的炎症方面，具有协同效果。

技术特征：

1.一种组合物在制备抗炎成分或产品中的用途，其特征在于，所述组合物包括依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比为1：(0.1～800)。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述依克多因的衍生物包括依克多因甲酯、羟基依克多因、依克多因的盐中的一种或两种以上。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，以所述组合物的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和为0.1-10wt％。4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，所述组合物制备的抗炎成分或抗炎产品用于化妆品中。5.根据权利要求1-4中任一项所述的用途，其特征在于，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料、活性成分。6.一种化妆品组合物，其特征在于，包括依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物，所述依克多因或其衍生物与所述橄榄叶提取物的质量比为1：(0.1～800)。7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述依克多因的衍生物包括依克多因甲酯、羟基依克多因、依克多因的盐中的一种或两种以上。8.根据权利要求6或7所述的组合物，其特征在于，以所述化妆品组合物的总重量计，所述依克多因或其衍生物和所述橄榄叶提取物的含量之和为0.1-10wt％。9.根据权利要求6-8中任一项所述的组合物，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料、活性成分。10.如权利要求5-8中任一项所述的组合物在化妆品中的用途。

技术总结

本申请提供一种组合物，所述组合物包括依克多因或其衍生物和橄榄叶提取物。本申请将依克多因与橄榄叶提取物以低于市场化妆品的浓度组合，应用于HaCaT细胞中，可以有效抑制PMA以及LPS(来源于大肠杆菌)刺激导致的炎症IL-6生成，具有抗炎功效。具有抗炎功效。

技术研发人员：

戴丽云 吴越 杨凝真

受保护的技术使用者：

华熙生物科技股份有限公司

技术研发日：

2022.11.10

技术公布日：

2022/12/19