艾灸神阙穴对一次性力竭大鼠能量物质代谢及睾酮、皮质醇的影响

艾灸神阙穴对一次性力竭大鼠能量物质代谢
睾酮皮质醇的影响
刘海龙1ꎬ高㊀磊1ꎬ张治方2ꎬ吕天元2ꎬ张亚辉2ꎬ杨㊀鑫1ꎬ梁玉磊2
(1.中国人民解放军联勤保障部队第九二六医院ꎬ云南开远661699ꎻ2.河北中医学院ꎬ河北石家庄050200)
㊀㊀[摘要]㊀目的㊀观察艾灸神阙穴对一次性力竭大鼠能量物质代谢及血清睾酮㊁皮质醇水平的影响ꎮ方法㊀将50只雄性SD大鼠随机分为空白组㊁
对照组㊁力竭组㊁非经非穴组和神阙组ꎬ每组10只ꎮ除空白组㊁对照组外ꎬ其余组采用游泳实验建立一次性力竭模型ꎮ力竭游泳结束后ꎬ力竭组不予干预ꎬ神阙组即刻给予温和灸神阙穴15minꎬ非经非穴组即刻给予温和灸非经非穴点15minꎮ对照组温和灸神阙穴15minꎬ空白组不给予任何干预ꎮ力竭运动后4hꎬ检测各组大鼠血清乳酸(BLA)㊁肌酐(Cr)㊁尿素氮(BUN)㊁肌酸激酶
(CK)㊁乳酸脱氢酶(LDH)㊁皮质醇(C)㊁睾酮(T)水平并计算睾酮/皮质醇值ꎮ结果㊀力竭组大鼠血清BLA㊁BUN㊁CK㊁LDH㊁皮质醇水平均明显高于空白组(P均<0.05)ꎬ血清Cr㊁睾酮水平及睾酮/皮质醇值均明显低于空白组(P均<0.05)ꎻ神阙组大鼠血清BLA㊁BUN㊁CK㊁LDH㊁皮
质醇水平均低于力竭组和非经非穴组(P均<0.05)ꎬ血清Cr㊁睾酮水平及睾酮/皮质醇值均明显高于力竭组和非经非穴组(P均<0.05)ꎮ结论㊀艾灸神阙可通过调节能量物质代谢及睾酮㊁皮质醇水平ꎬ改善机体的疲劳状态ꎮ
[关键词]㊀力竭运动ꎻ神阙穴ꎻ温和灸ꎻ睾酮ꎻ皮质醇doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2021.04.008
[中图分类号]㊀R-332㊀[文献标识码]㊀A㊀[文章编号]㊀1008-8849(2021)04-0380-04
[作者简介]㊀刘海龙ꎬ男ꎬ主治医师ꎬ研究方向为中医康复的临床与实验研究ꎮ[通信作者]㊀梁玉磊ꎬE-mail:liangyulei136@163.com
[基金项目]㊀河北中医学院大学生创新创业训练计划项目(201914432021)
EffectofmoxibustionatShenque(CV8)onenergysubstancemetabolismandtestosterone
andcortisolcontentinonetimeexhaustionrats
LIUHailong1ꎬGAOLei1ꎬZHANGZhifang2ꎬLYVTianyuan2ꎬZHANGYahui2ꎬ
YANGXin1ꎬLIANGYulei2
(1.TheNo.926HospitalofthePLASupportUnitꎬKaiyuan661699ꎬYunnanꎬChinaꎻ2.HebeiUniversityofChineseMedicineꎬShijiazhuang050200ꎬHeibeiꎬChina)
Abstract:ObjectiveItistoexploretheeffectofmoxibustionatShenque(CV8)onenergysubstancemetabolismand
testosteroneandcortisolcontentinonetimeexhaustionrats.MethodsFiftymaleSprague ̄Dawleyratswererandomlydivid ̄edintoblankgroupꎬcontrolgroupꎬexhaustgroupꎬnon ̄acupointgroupandShenquegroupꎬwith10ratsineachgroup.Ex ̄cepttheratsinblankgroupandcontrolgroupꎬalltheratswereestablishedint
oexhaustivemodelsthroughswimming.AfterexhaustiveswimmingꎬtheexhaustiongroupwasgivennotreatmentinterventionꎬtheShenquegroupwasinstantlytreated
withmildmoxibustionatShenquepointfor15minutesꎬandthenon ̄acupointgroupwasinstantlytreatedwithmildmoxibus ̄tionatnon ̄meridianandnon ̄pointsfor15minꎬthecontrolgroupwastreatedwithmoxibustionatShenquepointfor15mi ̄
nutesꎬandtheblankgroupwasnotgivenanyintervention.At4hoursafterexhaustiveexerciseꎬthelevelsofserumlacticacid(BLA)ꎬcreatinine(Cr)ꎬureanitrogen(BUN)ꎬcreatinekinase(CK)ꎬlactatedehydrogenase(LDH)ꎬcortisol(C)andtestosterone(T)oftheratsineachgroupweredetectedꎬandthevalueoftestosterone/cortisolwascalculated.ResultsThelevelsofserumBLAꎬB
UNꎬCKꎬLDHꎬandcortisolintheexhaustiongroupweresignificantlyhigherthan
thoseintheblankgroup(allP<0.05)ꎬandthelevelsofserumCrꎬTandT/cortisolvaluesweresignificantlylowerthanthoseintheblankgroup(allP<0.05)ꎻthelevelsofserumBLAꎬBUNꎬCKꎬLDHꎬandcortisolofratsintheShenquegroupwerelowerthanthoseintheexhaustiongroupandthenon ̄acupointgroup(allP<0.05)ꎬthelevelsofserumCrꎬTandT/cortisolvaluesweresignificantlyhigherthanthoseintheexhaustiongroupandthenon ̄acupointgroup(P<0.05).ConclusionMoxibustionatShenquecanimprovethebody sfatiguestatebyregulatingthemetabolismofenergysubstancesandthelevelsofTandcortisol.
Keywords:exhaustedexerciseꎻShenque(CV8)ꎻmoxibustiontherapyꎻtestosteroneꎻcortisol
㊀㊀运动疲劳是由运动引起的机体生理改变而导致运动能力暂时下降的现象ꎬ最初研究围绕体育运动开展ꎬ抗运动性疲劳是为了提高运动员的竞技成绩ꎮ随着研究不断深入ꎬ应用范围逐渐扩大ꎬ临床实践中ꎬ部分康复患者由于恢复心切ꎬ常因自主超强度训练ꎬ引发运动性疲劳ꎬ导致方案不能正常开展ꎬ影响疗效ꎮ快速消除运动性疲劳ꎬ对康复训练患者同样具有重要意义ꎮ近些年来针灸在抗运动性疲劳方面的应用取得了一定成果[1-2]ꎬ艾灸神阙穴也具有缓解运动疲劳的作用[3-7]ꎬ但其相关作用机制仍不明确ꎮ本研究以一次性力竭运动大鼠为研究对象ꎬ模拟过度康复训练患者ꎬ观察不同干预方法对一次性力竭运动后4h大鼠血清尿素氮(BUN)㊁乳酸脱氢酶(LDH)㊁血乳酸(BLA)㊁肌酐(Cr)㊁肌酸激酶(CK)㊁皮质醇㊁睾酮水平及睾酮/皮质醇值的影响ꎬ以探讨艾灸神阙穴运动疲劳的价值及可能作用机制ꎬ为该法的临床应用提供实验依据ꎮ
1㊀实验材料与方法
1 1㊀实验动物与分组㊀清洁级SD大鼠50只ꎬ雄性ꎬ体质量(200ʃ10)gꎬ购于河北省实验动物中心ꎬ许可证号:SCXK(冀)2013-1-003ꎮ按照随机数字表将大鼠随机分为空白组㊁对照组㊁力竭组㊁神阙组㊁非经非穴组ꎬ每组10只ꎬ分笼饲养ꎬ每笼5只ꎮ饲养室温度保持在20~24ħꎬ湿度50%左右ꎬ明暗各12h(光照7:00 19:00)ꎬ所有动物自由进食水ꎮ大鼠适应性喂养7dꎬ并分别于第3天㊁第6天适应游泳1次ꎬ3min/次ꎮ实验遵循动物管理相关规定ꎮ
1 2㊀主要试剂与仪器㊀BUN试剂盒㊁Cr试剂盒(长春汇力生物技术有限公司ꎬ中国)ꎬLDH试剂盒㊁BLA试剂盒㊁CK试剂盒(南京建成生物工程研究所ꎬ中国)ꎬ皮质醇试剂盒㊁睾酮试剂盒(天津九鼎医学生物工程有限公司ꎬ中国)ꎮ自制恒温水箱(Φ200cmˑ80cm)ꎻ细艾条(Φ7mmˑ11.7cmꎬ河南南阳汉医艾绒有限公司ꎬ中国)ꎻ自制艾灸专用大鼠盒[8](国家实用新型专利ZL201120193244.8)ꎻTDL-5-A型离心机(上海安亭科学仪器厂ꎬ中国)ꎻAU400全自动生化分析仪[克勒格瓦尼(上海)分析仪器有限公
司ꎬ中国]ꎮ
1 3㊀模型制备㊀适应性喂养7d后ꎬ参照文献[9]
建立游泳力竭模型ꎮ除空白组㊁对照组外ꎬ其余组大
鼠均置于恒温水箱[水深50cmꎬ水温(30ʃ2)ħ]ꎬ
尾根部束体质量5%的铅皮(套在距基1~5cm
处)ꎬ行一次性力竭运动ꎮ力竭标准:大鼠游泳动作
明显失调ꎬ不能再坚持ꎻ下沉水过鼻尖5sꎬ无力返回
水面ꎮ造模过程中ꎬ力竭组和非经非穴组各有1只
大鼠死亡ꎮ
1 4㊀干预方法㊀神阙组:力竭游泳结束后ꎬ即刻将
大鼠置于艾灸专用大鼠盒中ꎬ温和灸神阙穴15minꎮ
非经非穴组:力竭游泳结束后ꎬ即刻将大鼠置于艾灸
专用大鼠盒中ꎬ温和灸非经非穴点(双侧胁下髂嵴
上25mmꎬ后正中线旁开20mm处)[10]15minꎮ力竭组:力竭游泳结束后ꎬ即刻将大鼠置于艾灸专用大鼠
盒中15minꎬ不予干预ꎮ对照组:将大鼠置于艾
灸专用大鼠盒中ꎬ温和灸神阙穴15minꎮ空白组:将
大鼠置于艾灸专用大鼠盒中15minꎬ不施任何干预ꎮ1 5㊀观察指标
1 5 1㊀力竭时间㊀由专人记录各造模大鼠力竭游
泳时间ꎬ精确到0.1sꎮ
1 5 2㊀血清生化指标㊀力竭游泳结束后4hꎬ各组
大鼠行乙醚轻度麻醉ꎬ然后断头取血约5mLꎬ于4ħꎬ3000r/min离心10min(离心半径8cm)ꎬ之后取上清液ꎬ-80ħ冷冻保存待测ꎮ采用全自动生化分析仪测定血清BUN㊁LDH㊁BLA㊁Cr㊁CK㊁皮质醇㊁睾酮水平ꎬ所有测试由河北中医学院科研中心完成ꎮ
1 6㊀统计学方法㊀数据处理运用SPSS13.0统计
软件ꎬ计量资料数据用均数ʃ标准差( xʃs)表示ꎬ
组间比较采用单因素方差分析(One-WayANO ̄VA)ꎬ两两比较采用t检验ꎬP<0.05为差异有统计学意义ꎮ
2㊀结㊀㊀果
2 1㊀各组大鼠力竭游泳时间比较㊀力竭组大鼠力
竭游泳时间为(425.33ʃ33.61)sꎬ非经非穴组为(426.15ʃ34.07)sꎬ神阙组为(423.04ʃ33.81)sꎬ3组比较差异无统计学意义(P>0.05)ꎮ
2 2㊀各组大鼠血清BLA㊁Cr㊁BUN㊁CK㊁LDH水平比较㊀与空白组比较ꎬ对照组大鼠血清BLA㊁Cr㊁BUN㊁CK㊁LDH水平均无明显变化(P均>0.05)ꎬ力竭组大鼠血清BLA㊁BUN㊁CK㊁LDH水平均明显升高而Cr水平明显降低(P均<0.05)ꎻ非经非穴组大鼠血清BLA㊁Cr㊁BUN㊁CK㊁LDH水平与力竭组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)ꎬ神阙组大鼠血清BLA㊁BUN㊁CK㊁LDH水平均明显低于力竭组和非经非穴组(P均<0.05)ꎬCr水平均明显高于力竭组和非经非穴组(P均<0.05)ꎮ见表1ꎮ
2 3㊀各组大鼠血清血睾酮㊁皮质醇含量及睾酮/皮
表1㊀各组大鼠血清BLA㊁Cr㊁BUN㊁CK㊁LDH水平比较( xʃs)
组别只数BLA/(mmol/L)Cr/(μmol/L)BUN/(mmol/L)CK/(IU/L)LDH/(IU/L)
空白组103.31ʃ0.3140.24ʃ4.318.42ʃ0.83145.12ʃ31.77807.44ʃ131.60对照组103.28ʃ0.4341.01ʃ3.828.52ʃ1.07143.29ʃ33.58801.26ʃ139.47力竭组94.55ʃ0.34①②31.67ʃ2.70①②14.34ʃ0.94①②695.04ʃ49.26①②1468.54ʃ212.96①②
非经非穴组94.30ʃ0.19①②33.28ʃ2.54①②14.14ʃ0.74①②674.10ʃ33.99①
②1292.58ʃ304.12①②神阙组102.99ʃ0.3640.87ʃ1.997.80ʃ1.66156.60ʃ34.01539.09ʃ128.86
㊀㊀注:①与空白组比较ꎬP<0.05ꎻ②与神阙组比较ꎬP<0.05ꎮ质醇值比较㊀与空白组比较ꎬ对照组大鼠血清睾酮㊁皮质醇水平及睾酮/皮质醇值均无明显变化(P均>0.05)ꎬ力竭组大鼠血清睾酮水平及睾酮/皮质醇值均明显降低而皮质醇水平明显升高(P均<0.05)ꎻ非经非穴组大鼠血清睾酮㊁皮质醇水平及睾酮/皮质醇值与力竭组比较差异均无统计学意义(P均>0 05)ꎬ神阙组大鼠血清睾酮水平及睾酮/皮质醇值均明显高于力竭组和非经非穴组(P均<0.05)ꎬ皮质醇水平均明显低于力竭组和非经非穴组(P均<0.05)ꎮ见表2ꎮ
表2㊀各组大鼠血清血睾酮㊁皮质醇水平
及睾酮/皮质醇值比较( xʃs)
组别只数睾酮/(ng/dL)皮质醇/(μg/dL)睾酮/皮质醇空白组1078.83ʃ9.365.49ʃ0.3614.36ʃ1.78对照组1079.20ʃ10.175.32ʃ0.4114.89ʃ1.93力竭组954.60ʃ3.50①②6.55ʃ0.69①②8.34ʃ0.97①②非经非穴组954.34ʃ2.90①②6.33ʃ0.80①②8.58ʃ1.02①②神阙组1077.77ʃ8.293.19ʃ0.8824.38ʃ1.61㊀㊀注:①与空白组比较ꎬP<0.05ꎻ②与神阙组比较ꎬP<0.05ꎮ3㊀讨㊀㊀论
疲劳的产生与长时间或高强度运动导致体内能量物质消耗㊁乳酸等代谢产物蓄积等因素有关[11]ꎮ游泳是强迫性消耗性运动ꎬ游泳时间的长短可反映机体组织㊁脏器的健康状况ꎬ反映机体综合的生理活力[12]ꎮ本实验结果显示ꎬ造模各组大鼠力竭游泳时间比较差异无统计学意义ꎬ说明各组大鼠的生理活力均衡ꎮ
糖原是机体能源储备的主要形式ꎬ主要存在于骨骼肌和肝脏ꎬ肌糖原主要为肌肉运动提供能量ꎮ
一般认为ꎬ机体运动早期ꎬ肌糖原分解释放三磷酸腺
苷(ATP)ꎬ随后逐渐分解脂肪ꎬ当运动进一步持续
时ꎬ机体便分解蛋白质ꎬ以弥补肌肉能量的不足ꎮBLA是肌糖无氧代谢产物ꎬ其浓度升高ꎬ使血液pH值下降ꎬ机体细胞工作能力下降ꎬ其是反映机体疲劳
程度的重要指标之一[13]ꎮ当蛋白质被消耗ꎬ肌肉组织分解加强ꎬ肌肉萎缩ꎬCr生成减少[14]ꎬ同时蛋白质分解ꎬ代谢产生BUNꎮBUN含量随运动负荷的增加而增加ꎬ其也是判断机体疲劳程度指标之一[15]ꎮCK主要分布在心肌㊁骨骼肌和脑组织中[16]ꎬ血清CK主要源于骨骼肌ꎬ过度训练后ꎬCK从细胞内大量溢出入血[17]ꎬ导致组织内ATP合成障碍ꎬ肌肉收缩能力降低ꎬ运动能力下降ꎮ血清LDH主要源于骨骼肌ꎬ当组织细胞受到破坏时ꎬLDH从细胞内溢出进入血液ꎬ引起血清LDH活性升高ꎬ其
也被认为是判断运动后肌肉损伤程度的重要指标[18-19]ꎮ睾酮由下丘脑-垂体-性腺轴释放ꎬ与运动能力㊁肌肉力量的增长和疲劳恢复等有密切关系ꎬ其可促进体内蛋白质合成ꎬ尤其是肌肉蛋白质的合成ꎬ减弱氨基酸分解代谢ꎬ又可通过提高肌肉糖原合成能力ꎬ增加其糖原的储备ꎬ对于大强度运动后能源物质的补充恢复起到至关重要的作用[20]ꎮ研究表明ꎬ短时间高强度运动后4~6h睾酮浓度达到最低点[21]ꎮ皮质醇由下丘脑-垂体-肾上腺轴释放ꎬ在运动中主要维持机体糖代谢正常ꎬ促进肝外组织蛋白分解ꎬ保持血糖浓度稳定ꎬ为运动提供能量[22]ꎮ总的来说ꎬ血睾酮浓度反映体内合成代谢的情况ꎬ
皮质醇浓度反映体内分解代谢的情况ꎬ通常把睾酮与皮质酮比值作为衡量合成-分解代谢平稳指标ꎬ其可以反映机体运动能力及疲劳程度[23]ꎮ
本实验研究结果发现ꎬ对照组血清BLA㊁Cr㊁BUN㊁CK㊁LDH㊁睾酮㊁皮质醇水平及睾酮/皮质醇值均无明显变化ꎬ说明单纯艾灸神阙穴对正常机体能量代谢及血睾酮㊁皮质醇的影响不显著ꎻ非经非穴组上述各指标与力竭组比较差异均无统计学意义ꎬ说明单纯艾灸疗法对机体刺激作用也不明显ꎻ神阙组血清BLA㊁BUN㊁LDH㊁CK㊁皮质醇水平明显低于力竭组ꎬCr㊁睾酮水平及睾酮/皮质醇值明显高于力竭组ꎬ说明艾灸神阙穴可通过调节能量物质代谢及睾酮㊁皮质醇水平以改善机体的疲劳状态ꎮ本实验为临床采用艾灸神阙穴方法运动疲劳提供了一定实验依据ꎮ
利益冲突:所有作者均声明不存在利益冲突ꎮ
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[收稿日期]㊀2020-06-11

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