一种促进种子萌发的沙藏方法

1.本发明涉及植物培养技术领域，具体涉及一种促进种子萌发的沙藏方法。

背景技术：

2.平邑甜茶(m.hupehensis rehd)是湖北海棠的一个变种，作为典型的自发性无融合生殖型，天然存在的植株大多数为三倍体(2n＝3x＝51)，通过实生繁殖的后代性状趋于母本而相对稳定，根系旺盛，长势均匀一致，而且不带病毒，很贴合现代果树无毒栽培的发展趋势。平邑甜茶是一种促进种子萌发的沙藏方法十分优良的苹果砧木，因其众多的优势而常常被应用于实际生产中。但实生繁殖需要通过一定的低温沙藏来打破种子的生理休眠，从而促进种子的萌发。一般的种子沙藏是在冬天将种子和一定湿度的细沙混合后埋于地下进行沙藏，受季节地点限制，且不能很好的观察到种子萌发情况，沙藏平邑甜茶大约需要30d或更多才能达到50％以上的萌发率；实验室一般也会通过简单的冰箱4℃进行沙藏，但普通的冰箱沙藏虽然方便，却很容易使种子发生低氧胁迫缺氧而死、湿度过低或过高都不利于种子萌发、沙藏时间过短不能萌发过长又会对胚根有冷胁迫，所以不能保证萌发率。因此需要一种促进种子萌发的沙藏方法既保证萌发率，同时又不受环境限制的方法来促进种子萌发。

技术实现要素：

3.为解决上述技术问题，本发明提供了一种促进种子萌发的沙藏方法。
4.一种促进种子萌发的沙藏方法，包括以下步骤：
5.(1)浸泡种子；
6.(2)将浸泡后的种子过滤并无重叠平铺在具有保湿能力的材料中，置于容器内，所述容器上留有透气口，将容器在4℃下沙藏20-30d；
7.(3)在沙藏1-5天和沙藏最后10天，每天打开容器在室温下透气，并保持种子表面湿润，去掉发霉种子；
8.(4)沙藏20-30d后，将容器置于常温下，遮光24-72h，且保持湿度和通风透气。
9.优选的，步骤(1)中用蒸馏水浸泡种子10-20h。
10.优选的，将浸泡后的种子过滤并无重叠平铺在两层湿纱布上，种子上再铺一层湿纱布，置于容器内。
11.优选的，所述纱布的密度为60-80
×
60-80。
12.优选的，步骤(3)中每天透气的时间为2-5min。
13.优选的，步骤(3)中室温条件为23-27℃。
14.优选的，在4℃下沙藏25d。
15.优选的，所述种子为苹果种子。
16.优选的，所述苹果种子为平邑甜茶种子。
17.与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
18.1、操作简单可行，不受环境和时间限制。
19.2、此方法结合了自然沙藏和冰箱沙藏的优势，每天打开透气也类似于变温沙藏，在持续的低温条件下，短暂而频繁的升温能够适当加快种子生命活动、恒定适宜的湿度以及充足的氧气有利于种子的呼吸作用，所以能够有效的促进种子萌发，很适用于实验和实际生产。
附图说明
20.图1为不同处理的种子沙藏过程中的耗氧情况，其中，a1：干种子，a2：浸泡1d，a3：沙藏5d，a4：沙藏10d，a5：沙藏15d，a6：沙藏20d，a7：沙藏25d，a8：沙藏30d；
21.图2为本发明不同的沙藏示意图；
22.图3为不同沙藏时间下平邑甜茶种子的萌发情况，其中，a表示受辐射胁迫的种子；b表示经实施例1处理的平邑甜茶种子；1、2、3、4和5分别表示沙藏15d、20d、25d、30d和35d；(1)表示沙藏种子的萌发情况，(2)表示萌发种子的生长情况。
具体实施方式
23.下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
24.用种子活力测定仪q2测定以下实施例和对比例的种子活力。
25.实施例1
26.(1)取平邑甜茶种子若干，蒸馏水浸泡过夜，12h；
27.(2)过滤后将种子无重叠平铺在带2层湿纱布的15cm玻璃皿中，种子上再铺1层湿纱布，每平方英寸纱布的密度为60
×
60，目的为保湿，盖好盖子，玻璃皿和盖子之间用小纸片保留一个透气口，用于透气，于4℃冰箱中沙藏25d；种子重叠容易发生毛细现象滞留水分而导致种子呼吸困难缺氧而死，湿纱布的标准为打湿拧至不滴水，有利于种子表面吸水保湿，玻璃皿事先酒精消毒，减少种子萌发的霉菌侵染可能性；
28.(3)在沙藏前5d(放进种子的当天记为第1天)和最后10d中每天打开玻璃皿于室温条件下透气2min，室温条件为25℃，并及时喷水保持种子表面湿润但不积水，去掉发霉种子，以防霉菌扩散；
29.(4)沙藏25d后，大约能够有超过1/3种子露白，取出后放于常温遮光条件下24h，且保持湿度和通风透气，沙藏后已经打破了种子的生理休眠，适当升温加快种子生命活动，促进萌发，即可在短时间内获得萌发率较高且长势均匀良好的发芽种子。
30.实施例2
31.(1)取平邑甜茶种子若干，蒸馏水浸泡15h；
32.(2)过滤后将种子无重叠平铺在带2层湿纱布的15cm玻璃皿中，种子上再铺1层湿纱布，每平方英寸纱布的经纬密度为60
×
80，目的为保湿，盖好盖子，玻璃皿和盖子之间用小纸片保留一个透气口，用于透气，于4℃冰箱中保存20d；种子重叠容易发生毛细现象滞留水分而导致种子呼吸困难缺氧而死，湿纱布的标准为打湿拧至不滴水，有利于种子表面吸
水保湿，玻璃皿事先酒精消毒，减少种子萌发的霉菌侵染可能性；
33.(3)在沙藏前5d(放进种子的当天记为第1天)和最后10d中每天打开玻璃皿于室温条件下透气3min室温条件为23℃左右，并及时喷水保持种子表面湿润但不积水，去掉发霉种子，以防霉菌扩散；
34.(4)沙藏20d，取出后放于常温遮光条件下36h，且保持湿度和通风透气，即可在短时间内获得萌发率较高且长势均匀良好的发芽种子。
35.实施例3
36.(1)取平邑甜茶种子若干，蒸馏水浸泡20h；
37.(2)过滤后将种子无重叠平铺在带2层湿纱布的15cm玻璃皿中，种子上再铺1层湿纱布，每平方英寸纱布的经纬密度为65
×
78，目的为保湿，盖好盖子，玻璃皿和盖子之间用小纸片保留一个透气口，用于透气，于4℃冰箱中保存20d；种子重叠容易发生毛细现象滞留水分而导致种子呼吸困难缺氧而死，湿纱布的标准为打湿拧至不滴水，有利于种子表面吸水保湿，玻璃皿事先酒精消毒，减少种子萌发的霉菌侵染可能性；
38.(3)在沙藏前5d(放进种子的当天记为第1天)和最后10d中每天打开玻璃皿于室温条件下透气5min室温条件为27℃左右，并及时喷水保持种子表面湿润但不积水，去掉发霉种子，以防霉菌扩散；
39.(4)沙藏30d后，取出后放于常温遮光条件下72h，且保持湿度和通风透气，即可在短时间内获得萌发率较高且长势均匀良好的发芽种子。
40.对比例1
41.在冬天，在西北农林科技大学做如下试验：于8℃的室外，将平邑甜茶种子与湿度适宜的细沙按质量比1:1000的比例混合后装网兜并做好标记，埋于土壤下50cm左右，30d-50d后筛掉细沙，统计种子萌发和胚根生长情况。
42.对比例2
43.4℃低温层积，取平邑甜茶种子若干，浸泡一夜(约12h)后铺在带湿纱布的15cm玻璃皿中，放于4℃冰箱中沙藏，每隔3-4d喷水保湿，30d-40d后统计萌发率。
44.统计实施例1与对比例1-2的种子的萌发率，结果见表1。
45.表1实施例与对比例种子的萌发率
[0046][0047]
选取50gy
12c6+
重离子辐射后的平邑甜茶种子分别用实施例1和对比例1-2的方法进行沙藏，统计不同的方法下辐射后的种子的萌发率，结果见表2。
[0048]
表2实施例与对比例经辐射后种子的萌发率
[0049][0050]
由表1和表2可知，在实施例的沙藏条件下的萌发率最高，能够有效促进种子萌发，
而且还能提高受辐射胁迫的种子萌发率。
[0051]
自然沙藏大约需要30d及以上才能保证50％以上的萌发率，优点是通风透气好、氧气充足，种子不容易因缺氧而死，缺点是冬天温度不稳定，经常性变温或温度过低。
[0052]
由图1可知，平邑甜茶种子在沙藏过程中的耗氧速率呈“快-慢-快”趋势，即种子在吸水膨胀后(沙藏前期)和即将萌发时(沙藏后期)需氧量大，尤其即将萌发种子，极容易发生低氧胁迫，所以需要经常通风透气，保持充足氧气；同时发现休眠种子的耗氧速率平稳，能够在低氧条件下保持正常呼吸；从a2可以看出，种子吸水后需氧量大，很容易发生低氧胁迫，这对种子保存需要保持干燥也算是一种有利证明。
[0053]
如图3所示，培养皿内的为沙藏的种子的萌发情况，展开的为萌发的种子的生长情况，平邑甜茶种子在沙藏15d的种子有个别萌发、20d有少量种子萌发、25d有过半种子已经萌发；而辐射的种子在沙藏15d的种子仅有3粒种子萌发、20d和25d也只有少量种子萌发、30d才有过半种子萌发。沙藏30d和35d，实施例1处理的和辐射处理的已经萌发种子的胚根均出现徒长或因冷害胁迫而发黄的情况，这说明沙藏时间过长也不太好。
[0054]
本发明通过对种子整个沙藏过程中的耗氧速率进行测定发现，种子在整个沙藏过程中的耗氧速率呈“快-慢-快”的趋势。其中沙藏15d和20d时的耗氧骤变曲线增多，结合种子实际萌发情况说明这些种子即将萌发。同时可以发现在测定种子活力过程中，休眠种子平均耗氧速率相对稳定、浸泡后的种子平均耗氧速率加快但是逐渐会由快变慢、沙藏25d和30d的种子平均耗氧速率最高，但也会逐渐变慢，这也说明休眠种子能够在低氧环境下进行正常的生命活动、而吸水后的种子耗氧速率增加很容易发生低氧胁迫、即将萌发或者已经萌发的种子生命活动更加频繁，需氧量更大，所以也更容易遭受低氧胁迫。因此结合自然沙藏的氧气充足特点，对普通的冰箱沙藏进行改进，控制好湿度，在不受环境和时间等条件限制下，既然保证了萌发率，而且还能够使萌发集中且提前萌发，适合实验和实际生产，简单可行。
[0055]
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。
[0056]
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
[0057]
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

技术特征：

1.一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)浸泡种子；(2)将浸泡后的种子过滤并无重叠平铺在具有保湿能力的材料中，置于容器内，所述容器上留有透气口，将容器在4℃下沙藏20-30d；(3)在沙藏1-5天和沙藏最后10天，每天打开容器在室温下透气，并保持种子表面湿润，去掉发霉种子；(4)沙藏20-30d后，将容器置于常温下，遮光24-72h，且保持湿度和通风透气。2.根据权利要求1所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，步骤(1)中用蒸馏水浸泡种子10-20h。3.根据权利要求1所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，将浸泡后的种子过滤并无重叠平铺在两层湿纱布上，种子上再铺一层湿纱布，置于容器内。4.根据权利要求3所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，每平方英寸所述纱布的经纬密度为60-80
×
60-80。5.根据权利要求1所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，步骤(3)中每天透气的时间为2-5min。6.根据权利要求1所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，步骤(3)中室温条件为23-27℃。7.根据权利要求1所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，在4℃下沙藏25d。8.根据权利要求1所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，所述种子为苹果种子。9.根据权利要求8所述的一种促进种子萌发的沙藏方法，其特征在于，所述苹果种子为平邑甜茶种子。

技术总结

本发明属于植物培养技术领域，具体为一种促进种子萌发的沙藏方法，包括以下步骤：(1)浸泡种子；(2)将浸泡后的种子过滤并无重叠平铺在具有保湿能力的材料中，置于容器内，所述容器上留有透气口，将容器在4℃下沙藏20-30d；(3)在沙藏1-5天和沙藏最后10天，每天打开容器在室温下透气，并保持种子表面湿润，去掉发霉种子；(4)沙藏20-30d后，将容器置于常温下，且遮光24-72h。该方法既保证了萌发率，又不受环境限制，促进了种子萌发。促进了种子萌发。促进了种子萌发。