(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611077941.0
(22)申请日 2016.11.30
(71)申请人 青岛康原药业有限公司
地址 266300 山东省青岛市胶州市营海工
业园青岛康原药业有限公司
(72)发明人 刘乃山 赵叶华
(51)Int.Cl.
C07K 14/59(2006.01)
C07K 1/30(2006.01)
(54)发明名称
(57)摘要
本发明公开了一种尿促性素粗品的提取方
附、脱附、沉淀、干燥后得到尿促性素粗品。该技
术的优点在于用本方法提取的尿促性素粗制品
产率高、效价高；且本方法工艺简单、生产成本
低，产量高，
可工业化生产。权利要求书1页 说明书2页CN 106519013 A 2017.03.22
C N 106519013
A
1.一种尿促性素粗品的提取方法，其特征在于：将绝经期妇女尿经吸附、脱附、沉淀、干燥得尿促性素粗品的方法。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：
（1）吸附工序：将绝经期妇女过滤，调pH，加高岭土，搅拌，静置，离心甩干，用酸水洗涤二次，甩干得吸附物;
（2）脱附工序：将吸附物称重，加纯化水搅拌，加氨水调pH，搅拌离心，得上清液，再洗脱，得上清液;
（3）沉淀：将上清液合并，调pH，离心，调上清液pH，加丙酮搅拌均匀后静置沉淀;
（4）干燥：沉淀后虹吸上层废液，沉淀物经过滤、洗涤抽干后放真空干燥箱中进行干燥， 干燥物即为尿促性素粗品。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（1）中， pH用冰乙酸调节至
4.1-4.5；加高岭土的量为每1000kg尿液中加入6kg高领土，搅拌时间为2小时；静置时间为6-8小时；用酸水洗涤时，酸水的pH为4.5，加入量为每1000kg尿液中加入4L酸水。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，加纯化水的量为每1kg吸附物中加入4L纯化水；用25%的氨水调pH至10.9-11.2，温度为4-8℃；再洗脱时纯化水和氨水的量都为第一次洗脱时量的1/2。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，pH用冰乙酸调至8.5；静置时间为1-1.5小时；上清液的pH用冰乙酸调至4.8-5.2；丙酮的加入比例为上清液的2倍；静置时间为6-8小时。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（4）中，吸水剂为五氧化二磷，干燥时真空度为-0.1Mpa。
7.根据权利要求1-6所述的方法制得的尿促性素粗品的效价收率可达95%以上。
权 利 要 求 书1/1页CN 106519013 A
一种尿促性素粗品的提取方法
技术领域
[0001]本发明涉及生物技术领域，具体地说涉及一种尿促性素粗品的提取方法。
背景技术
[0002]尿促性激素它是由人脑下垂体前叶部分分泌的一种糖蛋白促性腺激素，一般是从绝经期或绝经期后妇女的尿中经提取纯化而制得。妇女在行经期间HMG的含量有所波动，但较低，只有妇女进入绝经期或之后的十几年中，其尿中HMG的含量方达到高峰（60-100iu/L 尿），并能维持在一个稳定的水平上，HMG含有卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH），其所含比例近似1：1。
[0003]临床主要用于妇女因功能性不排卵所致的不育症；男性因激素水平低下所引起的精子过少或活力不足。另外，还用于诸如妇女闭经、月经不调、男女之性机能失调等症。
发明内容
[0004]本发明的目的是提供了一种尿促性素粗品的提取方法。
[0005]本发明的技术方案是：将绝经期妇女尿经吸附、脱附、沉淀、干燥后得尿促性素粗制品，包括以下步骤：
（1）吸附工序：将尿液过滤后，边搅拌边加冰乙酸，调节pH至4.1-4.5；按每1000kg尿液加入6kg高领土的比例，加入高岭土，搅拌2小时；搅拌均匀后，同时测定pH，使pH保持在4.1-4.5之间；静置6-8小时分层；然后将沉淀物放离心机中甩干得吸附物，按1000kg尿液加入4L 酸水的比例，用pH4.5的酸水（将纯化水加冰乙酸调pH4.5）洗涤二次；离心甩干，得吸附物。[0006]（2）脱附工序：将吸附物称重，按每1kg加入4L纯化水的比例，加入纯化水搅拌均匀，在4-8℃的条件下，加25%氨水调节pH，使pH保持在10.9-11.2之间，离心取上层清液；然后将沉淀物再按吸附物1:2的比例加纯化水搅拌均匀；然后再加25%氨水调pH10.9-11.2，搅拌1.5小时，搅拌离心得上清液。
[0007]（3）沉淀工序：用冰乙酸调节上清液pH8.5，静置1小时，离心取上清液；上清液用冰乙酸调pH至4.8-5.2；然后加2倍量（w/v）丙酮，搅拌均匀，静置沉淀6-8小时。
[0008]（4）干燥工序：沉淀完成后，虹吸去除上层废液，沉淀物用布氏漏斗过滤，待过滤物抽干时加入适量丙酮抽干，将抽干的沉淀物取出，置用五氧化二磷做吸水剂的空干燥箱中室温真空（-0.1Mpa）干燥，干燥物即为尿促性素粗品。
[0009]与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：
传统工艺生产的尿促性素粗品方法较复杂，且效价达不到3iu/mg，而采用本方法制备的尿促性素粗品，工艺简单，成本低，以绝经期妇女尿为原料，制得的尿促性素粗品效价达到9iu/mg以上，效价收率达95%以上。
具体实施方式
[0010]下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例
[0011]所述的尿促性素粗品经吸附、脱附、沉淀、干燥后得到尿促性素粗品，包括如下步骤：
1.粗品提取：取尿液1000kg，用纱布过滤后，边搅拌边加冰乙酸，调节pH至4.3，然后加入高岭土6kg，搅拌2小时，搅拌均匀后测得pH为4.3，静置7小时，然后将沉淀物放入离心机中甩干得吸附物20kg，然后加入4LpH为4.5的酸水洗涤两次，然后离心甩干得吸附物21kg。[0012]
2.脱附工序：将21kg吸附物加入84L纯化水搅拌均匀，然后加入温度为6℃的25%氨水2L调节pH至11.0，搅拌1.5小时，然后离心得上清液86L，然后将离心后的沉淀物加入42L 纯化水搅拌均匀后，然后再加入温度为6℃的25%氨水1L调节pH至11.1，然后离心得上清液43L，将两次上清液合并，体积为129L。
[0013] 3.沉淀工序：用冰乙酸调节上清液pH至8.5，静置1小时，离心取上清液129.1L；上清液用冰乙酸调至5.0，然后加入丙酮258L，搅拌均匀后，静置沉淀7小时。
[0014] 4.干燥工序：沉淀7小时后，虹吸去除上层液，沉淀物用布氏漏斗过滤，待过滤抽干时加入适量丙酮抽干，将抽干的沉淀物用布氏漏斗抽滤，然后用丙酮脱水两次，得到尿促性素粗品100g。经测定效价为 10iu/mg，效价收率为96.4%。
[0015]以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
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