酚在制备抑制小脑炎症反应药物中的用途

1.本发明属于医药技术领域，涉及酚(kaempferol)在抑制小脑炎症反应及相关的小脑萎缩、小脑共济失调、创伤性脑损伤、脑中风、阿尔茨海默病、帕金森氏病、多发性硬化症和亨廷顿氏舞蹈症等中枢神经系疾病的药物方面的用途。

背景技术：

2.小脑炎症反应与小脑萎缩、小脑共济失调、创伤性脑损伤、脑中风、阿尔茨海默病、帕金森氏病、多发性硬化症或亨廷顿氏舞蹈症等中枢神经系疾病相关。小脑炎症反应可导致肢体运动不协调、身体平衡能力受损、语言障碍等多种神经系统损伤症状。小胶质细胞是中枢神经系统的免疫细胞，脑损伤诱发小胶质细胞激活以及炎性因子和黏附分子释放，如白介素-1β(il-1β)、白介素-6(il-6)、肿瘤坏死因子α(tnfα)、单细胞趋化因子(mcp-1)、细胞间粘附分子(icam-1)等。这些因子相互作用和相互调节，导致神经元损伤、变性甚至死亡，控制神经炎症反应是延缓或这些神经系统疾病的突破点。
3.脂多糖(lps)是革兰阴性细菌细胞壁的主要成分，是一种强效炎症反应诱导剂。动物实验研究表明，小鼠经腹腔注射给予lps能够诱导脑组织星形胶质细胞和小胶质细胞活化，促进炎细胞因子在脑内的表达。lps诱导炎症反应已成为经典的制备炎症动物模型的试剂，被广泛用于具有抗炎活物的筛选、评价及机制研究。神经炎症反应是一个渐进发展的复杂级联过程，主要表现为神经胶质细胞的活化、增生，外周炎症细胞浸润及相关炎性细胞因子的表达。本研究应用lps腹腔注射作为小脑神经炎症的引发剂，检测小脑组织中il-1β、il-6、tnfα、mcp-1、icam-1的含量。
4.酚属于黄酮类化合物，来源于姜科植物的根茎，具有抗炎、抗氧化、防癌、抗癌、抗菌、抗病毒、抗癫痫、解痉、抗溃疡等方面的药理活性。目前关于酚抑制小脑炎症反应及其相关中枢神经系统疾病未见报道。

技术实现要素：

5.本发明应用腹腔注射lps诱导小脑炎症小鼠模型，评价了酚的抗小脑炎症反应的作用。本发明涉及的化合物酚结构式如式ⅰ所示：
[0006][0007]
本发明要解决的技术问题之一是：提供式(i)所示的酚在抑制小脑炎症反应方面相关药物及其他产品中的用途。
[0008]
本发明要解决的技术问题之二是：提供(i)所示的酚在预防和/或与小脑炎症反应相关的小脑萎缩、小脑共济失调、创伤性脑损伤、脑中风、阿尔茨海默病、帕金森氏病、多发性硬化症或亨廷顿氏舞蹈症等药物方面的用途。
[0009]
本发明化合物酚可显著降低lps诱导小鼠小脑组织炎症反应相关因子il-1β、il-6、tnfα、mcp-1、icam-1水平增高，表明酚具有显著的抗小脑炎症反应的作用。
[0010]
此外，以酚为有效成分制备的预防和/或抑制小脑炎症反应及相关的小脑萎缩、小脑共济失调、创伤性脑损伤、脑中风、阿尔茨海默病、帕金森氏病、多发性硬化症或亨廷顿氏舞蹈症的药物及其他产品，也属于本发明的保护范围。
[0011]
本发明还涉及本发明化合物和常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。
[0012]
本发明化合物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明化合物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。
[0013]
本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。
[0014]
本发明化合物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射和穴位注射等。
[0015]
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。
[0016]
本发明化合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
[0017]
有益技术效果：本化合物药理活性突出，适用于神经系统多种疾病的用途。
附图说明
[0018]
图1酚对lps诱导小鼠小脑组织中il-1β水平的影响。数据表示为均值
±
sd。与对照组比较，##p《0.01；与lps模型组比较，**p《0.01。
[0019]
图2酚对lps诱导小鼠小脑组织中il-6水平的影响。数据表示为均值
±
sd。与对照组比较，##p《0.01；与lps模型组比较，**p《0.01。
[0020]
图3酚对lps诱导小鼠小脑组织中tnfα水平的影响。数据表示为均值
±
sd。与对照组比较，##p《0.01；与lps模型组比较，**p《0.01。
[0021]
图4酚对lps诱导小鼠小脑组织中mcp-1水平的影响。数据表示为均值
±
sd。与对照组比较，##p《0.01；与lps模型组比较，**p《0.01。
[0022]
图5酚对lps诱导小鼠小脑组织中icam-1水平的影响。数据表示为均值
±
sd。与对照组比较，##p《0.01；与lps模型组比较，**p《0.01。
具体实施方式
[0023]
酚对lps诱导小鼠小脑组织神经炎症的作用
[0024]
1.实验方法
[0025]
1.1动物分组及给药
[0026]
试剂lps(sigma公司)；il-1β，il-6，tnfα、mcp-1检测elisa试剂盒(吉泰依科赛生物技术有限公司)。
[0027]
实验动物成年雄性balb/c小鼠，体重20～22g，斯贝福(北京)生物技术有限公司，动物质量合格证号：syxk(京)2016-0002。正常条件下饲养，温度(25
±
1℃)，相对湿度55％～65％，12h光照周期，自由进食进水。
[0028]
动物分组及给药动物适应3天后随机分组：正常对照组、lps模型组、酚给药组。酚给药组腹腔注射酚50mg/kg，连续给药7天，每天1次；正常对照组、lps模型组腹腔注射等体积溶剂。末次给药后，lps模型组、酚给药组腹腔注射lps 5mg/kg；正常对照组腹腔注射等体积生理盐水。lps注射后6小时取材，分离小鼠小脑组织(每组9只)，冻存于-80℃冰箱用于elisa检测。
[0029]
1.2elisa检测
[0030]
称取小鼠小脑组织，按照100mg组织加入1ml预冷生理盐水。使用手持匀浆机冰上研磨，制备匀浆液，4500r/min，4℃，离心15min，取上清液。bca法测定蛋白含量，elisa试剂盒分别检测小脑组织上清液il-1β、il-6、tnfα、mcp-1及icam-1含量。按照说明书进行，简要操作步骤如下：96孔elisa板中加入待测样本或不同浓度梯度的标准品溶液，再加入生物素化抗体工作液，于室温孵育2h，充分洗涤后弃去样品与生物素化抗体工作液，除空白孔外加入hrp标记二抗，室温孵育60min；弃去二抗溶液后充分洗涤，加入显底物，室温避光孵育15min；加入终止液后10min之内检测450nm处吸光度值，通过绘制标准曲线计算炎症因子的含量。
[0031]
实验结果：
[0032]
与正常对照组相比较，lps模型组小鼠小脑组织中炎症反应相关因子il-1β、il-6、tnfα、mcp-1及icam-1水平均显著增高；而酚50mg/kg给药组可显著降低lps诱导小鼠小脑组织中炎症反应相关因子il-1β(表1，图1)、il-6(表2，图2)、tnfα(表3，图3)、mcp-1(表4，图4)和icam-1(表5，图5)的增高。
[0033]
表1 酚对lps诱导小鼠小脑组织中il-1β水平的影响
[0034]
组别il-1β(pg/mg蛋白)正常对照组65.32
±
12.42lps模型组338.2
±
64.38##lps+酚50mg/kg组116.9
±
43.81**
[0035]
表2 酚对lps诱导小鼠小脑组织中il-6水平的影响
[0036]
组别il-6(pg/mg蛋白)正常对照组61.17
±
15.1lps模型组150.5
±
38.2##lps+酚50mg/kg组106.6
±
30.72**
[0037]
表3 酚对lps诱导小鼠小脑组织中tnfα水平的影响
[0038]
组别tnfα(pg/mg蛋白)正常对照组252.2
±
118.2lps模型组526.2
±
303.0##
lps+酚50mg/kg组349.2
±
279.4**
[0039]
表4 酚对lps诱导小鼠小脑组织中mcp-1水平的影响
[0040][0041][0042]
表5 酚对lps诱导小鼠小脑组织中icam-1水平的影响
[0043]
组别icam-1(pg/mg蛋白)正常对照组171.3
±
38.56lps模型组751.1
±
258.6##lps+酚50mg/kg组358.1
±
99.48**。

技术特征：

1.如通式(i)所示化合物酚或其药学上可接受的盐在制备抑制小脑炎症反应药物中的应用，2.如通式(i)所示化合物酚或其药学上可接受的盐在制备预防和/或小脑炎症反应导致的急慢性中枢神经系统疾病的药物中的应用，3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的小脑炎症反应相关的急慢性神经系统疾病包括小脑萎缩、小脑共济失调、创伤性脑损伤、脑中风、阿尔茨海默病、帕金森氏病、多发性硬化症或亨廷顿氏舞蹈症。4.一种药物组合物在制备抑制小脑炎症反应药物中的应用，其特征在于，所述药物组合物包含通式(i)所示化合物酚或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体，5.一种药物组合物在制备预防和/或小脑炎症反应相关的急慢性中枢神经系统疾病药物中的应用，其特征在于，所述药物组合物包含通式(i)所示化合物酚或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体，

技术总结

本发明公开了一种式(I)化合物酚在制备抑制小脑炎症反应药物中的用途，属于医药技术领域。药理实验证明：酚可显著降低LPS诱导的小鼠小脑组织炎症因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、单核细胞趋化因子(MCP-1)和细胞间粘附分子(ICAM-1)水平，具有显著的抑制小脑炎症反应的活性。因此，该化合物可用于制备预防和/或小脑炎症反应及相关的小脑萎缩、小脑共济失调、创伤性脑损伤、脑中风、阿尔茨海默病、帕金森氏病、多发性硬化症或亨廷顿氏舞蹈症药物方面的用途，具有较高的临床应用价值和开发前景。景。景。