专利名称:TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC炎症反应模型的制备方法 专利类型:发明专利
发明人:黄午阳,王兴娜,李春阳,闫征,王帆,王健
申请号:CN201310718727.9
申请日:20131224
公开号:CN104726393A
公开日:
20150624
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及一种TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC炎症反应模型的制备方法,属于生物技术领域。内容包括:1)HUVEC细胞培养:HUVEC细胞用M199完全培养基置于37℃,5%CO的温箱中培养。2)HUVEC样品制备:待细胞长满至80%-90%单层,用15ml的1mg/ml的I型胶原酶消化15-20min制备成细胞悬液,调整细胞浓度为1*10/ml。3)HUVEC细胞同步化:取2ml细胞悬液至6孔板进行培养,当细胞长满至90%时,换无血清的培养基进行饥饿培养24h,使所有细胞同步化。
4)TNF-α诱导HUVEC细胞炎症反应:加入终浓度为10ng/ml的TNF-α,刺激HUVEC细胞6h,取细胞上清液ELISA法测定细胞炎症因子MCP-1、ICAM-1、VCAM-1,蛋白含量均升高。本发明建立起的HUVEC炎症反应细胞模型,简便易行,可用于炎症反应机理研究和抗炎药物的体外细胞实验。
地址:210014 江苏省南京市钟灵街50号
国籍:CN