[19]
中华人民共和国国家知识产权局
[12]发明专利申请公开说明书
[11]公开号CN 1847404A
[43]公开日2006年10月18日
[21]申请号200510024866.7[22]申请日2005.04.04
[21]申请号200510024866.7
[71]申请人蒋来高
地址200050上海市长宁区江苏路128号106室
[72]发明人蒋来高 [51]Int.CI.C12P 21/00 (2006.01)
权利要求书 2 页 说明书 7 页
[54]发明名称
[57]摘要
本发明提供一种人体初乳提取物高纯度乳铁蛋
白(Lf)的提取工艺及其制品，所述提取工艺包括以
下工艺步骤：收集健康产妇多余初乳；离心除去杂
质、脂肪；凝乳，除去酪蛋白；收集凝乳后的上清
液(乳清蛋白)；300PS膜处理；真空浓缩；冷冻干
燥，获得纯度为98％的乳铁蛋白提取物。一种高纯
度乳铁蛋白制品，包括乳铁蛋白和添加剂。所述Lf
提取物采用上述方法制成；所述添加剂为免疫球蛋
白、氨基酸、中草药、生物制剂、各类乳品之一或
其组合；所述产品形态可以为片剂、胶囊及口服液。
其质量百分比分别为，Lf提取物15～80％，添加剂
15～80％。本发明的最终产品的添加剂科学合理，
针对性强。
200510024866.7权 利 要 求 书第1/2页 1、一种人体初乳提取无乳铁蛋白L f的提取工艺，包括以下工艺步骤： 收集健康产妇多余初乳；
离心去杂质、脂肪；
巴氏灭菌；
凝乳，去除酪蛋白；
收集凝乳后的上清液；
超滤过膜处理；
真空浓缩；
冷冻干燥。
2、根据权利要求1所述的人体初乳提取物乳铁蛋白Lf提取工艺，其特征在于： 所述离心除去杂质、脂肪分为二步，首先在8～12℃下，以600～800r/min离心10分钟，除去细胞和杂质；然后再在30～40℃下，以2500～3000r/min离心10分钟除去脂肪。
3、根据权利要求1或2所述的人体初乳提取物乳铁蛋白Lf提取工艺，其特征在于：所述巴氏灭菌的温度为63.5℃，时间为30分钟。
4、根据权利要求1或2所述的人体初乳提取物乳铁蛋白Lf提取工艺，其特征在于： 所述的凝乳步骤中，凝乳方法采用36℃下凝乳酶法、微生物法或离子交换法之一方法。
5、根据权利要求1或2所述的人体初乳提取物乳铁蛋白Lf提取工艺，其特征在于： 所述的超滤过膜处理，系先后采用300P S和1000P S膜处理方法。
6、根据权利要求1或2所述的人体初乳提取物乳铁蛋白Lf提取工艺，其特征在于： 所述的浓缩方法系采用真空浓缩的方法处理。
200510024866.7权 利 要 求 书 第2/2页
7、根据权利要求1或2所述的人体初乳提取物乳铁蛋白Lf提取工艺，其特征在于：
所述的冷冻干燥工艺系采用-40℃下的低温冷冻干燥方法。
8、一种乳铁蛋白制品，包括乳铁蛋白L f和添加剂，其特征在于：
所述乳铁蛋白Lf提取物采用权利要求1至7中任一权利要求所述方法制成，所
述添加剂可以为免疫球蛋白、氨基酸、中草药、生物制剂、各类乳制品之一或其
组合，其质量百分比分别为乳铁蛋白提取物15～80％，添加剂15～80％。
9、根据权利要求8所述的乳铁蛋白制品，其特征在于：所述的免疫球蛋白可以是IgA、IgG，可以是血清型，也可以是分泌型；所述的氨基酸可以是牛黄酸或十八种人体
必需氨基酸；所述的中草药可以是人参、黄芪、芦荟、枸杞子。可以是原药也可
以是提取物；所述的生物制剂可以是各类生长因子、双岐或乳酸杆菌、抗生素、
抗病毒药物；所述的各类乳品可以是牛初乳粉剂、动植物蛋白粉剂。
10、根据权利要求8所述的乳铁蛋白制品，其特征在于：所述的添加剂中，各组分
的质量百分比分别为免疫球蛋白5～80％，氨基酸0～15％，中草药0～15％，生物
制剂0～15％，各类乳品0～5％。
200510024866.7说 明 书第1/7页人体初乳提取物乳铁蛋白Lf提取工艺及其制品
技术领域
本发明属于运用生物工程技术从人体母乳初乳中，分离提取乳铁蛋白Lf的技术领域。特别涉及一种人体初乳提取物乳铁蛋白L f的提取工艺及其制品。 背景技术
1、乳铁蛋白的基本结构
乳铁蛋白是哺乳动物(人、牛、马、羊)初乳形成阶段、泌乳期、涸乳期乳房腺体分泌物中主要的糖蛋白之一。它是一种具有多种生物学功能的蛋白质，它不仅参与铁的转运，而且还具有抗微生物、抗氧化、抗肿瘤、强力止痛和调节免疫系统的功能，被认为是一种新型的抗菌杀毒、抗癌去痛药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。
乳铁蛋白因其晶体呈红又称“红蛋白”，是一种铁结合性糖蛋白，相对分子质量77000±2000，其主体呈无柄银杏叶并列状结构，铁离子结合在两叶的切入部分(Fe 离子间隔2.8～4.3μm)椭圆形叶的大小为5.5μm×3.5μm×3.5μm。1分子乳铁蛋白中含有2个铁结合部位，15～16个甘露糖，5～6个半乳糖，10～11个乙酰葡萄糖胺和1个唾液酸，其中中性糖含量8.5％，氨基糖含量2.7％。人乳Lf多肽链由703个氨基酸残基组成，其上附有两条碳水化合物侧链，碳水化合物含量约7％。且人乳L f中谷氨酸(G l u)、天冬门氨酸(A s p)、亮氨酸(L u e)和丙氨酸(A l a)含量较高，所含唯一含硫氨基酸为半胱氨酸(Cys)，终端有一个丙氨酸(Ala)残基。人乳铁蛋白每分子有两个糖基和两种分子形态，其主要差别在于它们所含的糖类不同。分子 200510024866.7说 明 书 第2/7页中有2个金属结合位点，每个位点可结合一个Fe3+和一个HCO3-或CO3-2。根据乳铁蛋白结合Fe3+的多寡，可将之分为缺铁型乳铁蛋白、铁半饱和型乳铁蛋白和铁饱和型乳铁蛋白三种形式。不同形式的乳铁蛋白具有不同抗变性能力。
2、乳铁蛋白的功能及作用机理
A、乳铁蛋白的结合功能
乳铁蛋白可以与许多物质结合的属性是其多种生物学功能的基础。每分子饱和乳铁蛋白中含有两个Fe3+离子。乳铁蛋白不仅能结合Fe3+，而且对许多过渡金属如Cu2+、Ca2+、Al3+都有结合作用。乳
铁蛋白对铁的结合，避免了人体内OH+有害物质的生成。乳铁蛋白可通过催化自由基的形成参与吞噬细胞的杀死作用。研究显示铁离子是除乳酸菌以外的几乎所有细菌生长所必需的物质，而乳铁蛋白恰恰能通过与需铁菌的亲铁基团竞争铁，夺取细菌生长所需的Fe3+，从而使细菌的生长受到抑制。 此外，乳铁蛋白还可以与许多蛋白质和DNA结合，如酪蛋白、白蛋白、免疫球蛋白A和溶菌酶以及β-乳球蛋白。乳铁蛋白还能与细胞结合，许多细胞如肠细胞、淋巴细胞、血小板和乳房上皮癌细胞及许多微生物细胞外膜中都含有人乳铁蛋白受体。
B、乳铁蛋白的抗菌抑毒功能
肝细胞病毒(H C V)是一种有囊膜的单链R N A病毒，它可引起慢性肝炎、肝硬化及肝癌。乳铁蛋白可通过结合在肝病毒C的囊膜蛋白上而阻止病毒与靶细胞结合；轮状病毒的基因组是包裹在3层衣壳内的10段不同的R N A片段，乳铁蛋白能阻止病毒吸附于靶细胞上从而防止感染。乳铁蛋白对爱滋病毒(HIV)也有较强的抑制作用。几乎所有的研究都表明乳铁蛋白阻止病毒感染细胞不是在感染后阻止病毒复制，而是直接结合于各类病毒粒子上而阻止其感染靶细胞。乳铁蛋白的另一杀菌方式是
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