(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910344544.2
(22)申请日 2019.04.26
(71)申请人 宋飞
地址 300381 天津市南开区水上北路爱俪
园1号楼1008号
(72)发明人 宋飞
(74)专利代理机构 北京科家知识产权代理事务
所(普通合伙) 11427
代理人 陈娟
(51)Int.Cl.
C12P 19/04(2006.01)
C08B 37/00(2006.01)
(54)发明名称一种甘草多糖的分离纯化工艺(57)摘要本发明公开了一种甘草多糖的分离纯化工艺，包括以下步骤：(1)将甘草切成片；(2)将甘草片加水浸泡；(3)弃掉浸泡液，再加入甘草片重量2-4倍的水，重复提取2-4次，减压浓缩；(4)加体积分数92-97％乙醇，静置4-12h，离心，过滤，干燥得到初提取 物；向初提取物中加体积分数92-97％乙醇浸泡2-6h，离心，过滤，干燥，重复2-4次，得到甘草多糖。本发明甘草多糖的分离纯化工艺，对甘草进行冷冻，并进行超声酶解，破坏甘草的细胞壁以利于甘草多糖的浸出，再经发酵工艺，后续分离纯化，提取工艺简单易行，甘草多糖的得率与含量较高，得到甘草多糖的活性较高，蛋白质残余率低，甘草多糖的纯度高，具有调节机体免疫功能、
抗疲劳的作用。权利要求书2页 说明书10页CN 109988795 A 2019.07.09
C N 109988795
A
权 利 要 求 书1/2页CN 109988795 A
1.一种甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将甘草切成片，得到甘草片；
(2)将甘草片加甘草片重量1-5倍的水浸泡1-4h；
(3)弃掉浸泡液，再加入甘草片重量2-4倍的水，升温至80-105℃，提取2-8h，重复提取2-4次，合并提取液，静置2-8h，取静置后的上清液减压浓缩至相对密度为1.055-1.075得到浓缩物；
(4)向浓缩物中加体积分数92-97％乙醇，使乙醇体积分数达到70-80％，静置4-12h，离心，过滤，干燥得到初提取物；向初提取物中加初提取物重量2-4倍体积分数92-97％乙醇浸泡2-6h，离心，过滤，干燥，重复2-4次，得到甘草多糖。
2.如权利要求1所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将甘草切成片得到甘草片，将甘草片粉碎至30-100目，得到甘草粉；
(2)将甘草粉加甘草粉重量1-5倍的水浸泡1-4h，过滤，得到浸泡后的甘草粉；
(3)将浸泡后的甘草粉加浸泡后的甘草粉重量10-20的水置于温度为-20～-10℃冷冻2-3h，然后置于温度为45-55℃解冻至温度为45-55℃，再加入浸泡后的甘草粉重量0.4-1％的果胶酶和甘草粉重量0.1-0.5％的木瓜蛋白酶在温度为45-55℃超声酶解3-9h，升温至94-98℃保温8-12min灭酶活，得到酶解混合物；向酶解混合物中加入发酵剂，在摇床温度为32-38℃，转速为120-180r/min，发酵时间10-20h，过滤，将滤液升温至94-98℃保温8-12min 灭菌，静置2-8h，取静置后的上清液减压浓缩至相对密度为1.055-1.075得到浓缩物；
(4)向浓缩物中加体积分数92-97％乙醇，使乙醇体积分数达到70-80％，静置4-12h，离心，过滤，干燥得到初提取物；向初提取物中加初提取物重量2-4倍体积分数92-97％乙醇浸泡2-6h，离心，过滤，干燥，重复2-4次，得到甘草多糖。
3.如权利要求2所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述步骤(1)中甘草片的厚度控制在1-5mm。
4.如权利要求2所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)中过滤用的滤网均为400目-1200目的滤网。
5.如权利要求2所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述步骤(3)中酶解混合物、发酵剂的质量比为1：(0.005-0.015)。
6.如权利要求2所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述步骤(3)中发酵剂的制备方法为：将2-5重量份玉米粉、2-5重量份发酵助剂、0.5-2重量份磷酸氢二钾、0.5-2重量份硫酸镁、0.5-2重量份海藻酸钠、0.5-2重量份柠檬酸铵加入950-990重量份水中混合均匀，升温至94-98℃保温8-12min灭菌，再加入10-20重量份酵母菌混合均匀，得到发酵剂。
7.如权利要求6所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述发酵助剂为蓝莓汁和/或葡萄汁。
8.如权利要求7所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述蓝莓汁的制备方法为：取新鲜蓝莓洗净，榨汁，过滤，得到蓝莓汁。
9.如权利要求7所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述葡萄汁的制备方法为：取新鲜葡萄洗
净，榨汁，过滤，得到葡萄汁。
10.如权利要求2所述甘草多糖的分离纯化工艺，其特征在于，所述步骤(4)中离心的转速为1500-2500r/min、时间为10-30min；所述步骤(4)中干燥的温度为60-90℃，时间为10-
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