双稳法由胆汁制取胆红素的方法

专利名称

：双稳法由胆汁制取胆红素的方法

技术领域

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本发明涉及用动物胆汁制取胆红素的改进方法，属于生化技术领域。
胆红素是贵重的药用原料，在现有技术中用动物胆汁制取胆红素的方法，基本上可以分为两大类，一类是溶剂萃取法，另一类是皂化酸解法，这两类方法的最大缺点是忽视了动物胆汁中存在两种不同状态的胆红素即游离胆红素占14～18%和以酯类状态存在的结合胆红素占86～82%。现用的萃取法实质上只萃取了游离胆红素，因此收率很低。而皂化酸解法也只提取了部分结合胆红素，目前使用最广的钙盐法在提取胆红素过程中，酸解取得的胆红素，长时间和酸接触，使其发生酸催化异构化，而造成较大的损失，因此胆红素的收率也较低。
本发明的目的在于发明一种用胆汁制取胆红素的改进方法，使用本方法不仅可以取得胆汁中的游离胆红素，并且可以提取胆汁中的绝大部分结合胆红素，本方法使胆汁中的结合胆红素经皂化酸解后生成的胆红素迅速脱离酸性环境而不因酸催化异构造成胆红素的较多损失而大大提高胆红素的收率。
本发明的实施方案是先用溶剂将胆汁中的游离胆红素萃取出来，然后在有溶剂存在的情况下，向胆汁中加入碱液，使胆汁中的结合胆红素生成水溶性胆红素盐，然后再加入酸，使酸解生成的胆红素迅速脱离酸性水相，而溶入有机溶剂，避免了胆红素因酸化异构造成的损失。
本发明的优点是既提取了胆汁中的游离胆红素，而且有效地提取了胆汁中的结合胆红素，因此胆红素的总收率大大提高，每100公斤牛胆汁可以提取胆红素30克，而现有技术中常用的钙盐法每100公斤胆汁只能提取8～12克胆红素。
实施例取100公斤已经滤去组织块等杂物的动物胆汁放入反应器内，然后再加入抗氧化防腐剂，浓度为4%的亚硫酸氢钠水溶液5公斤，及第一种溶剂醋酸乙酯2.5公斤和二氯甲烷2.5公斤，混合均匀后加热至60℃，在不停搅拌状态下缓慢加入浓度为4%的氢氧化钠水溶液共12.5公斤，然后加热至100℃保持2分钟后迅速加入冷水冷却至室温，再加入抗氧化防腐剂浓度为4%的亚硫酸氢钠5公斤和第二种溶剂浓度为0.1%的二氯甲烷乙醇溶液经充分搅拌后缓慢加入冰醋酸∶盐酸∶水的体积比为3∶2∶10的醋酸盐酸水溶液约12.5升控制反应器内PH值达到6左右。将反应物全部放入分液器内在避光情况下静置40～60分钟，这时分液器内的反应物分为三个液相层，最上层为黄水相层，中层为胶稠状黄白粗胆酸层，最下层为红棕胆红素萃取液。分离出最下层的红棕胆红素萃取液于蒸馏器内，再加入0.25公斤浓度为4%的亚硫酸氢钠水溶液加热至80℃蒸馏回收二氯甲烷溶剂，根据蒸出的溶剂量推算，蒸馏器内快蒸干时停止加热，然后用乙醇将反应器内的胆红素悬浮液冲洗到布氏漏斗内，抽滤干后，依次用无水乙醇、丙酮、甲醇、乙醚对布氏漏斗内的胆红素结晶进行冲洗，然后再将冲洗干净的胆红素结晶保持60℃真空干燥4小时，得到含量在80%以上，符合中华人民共和国卫生部WS1-12(B-12)-39标准的合格胆红素结晶约30克。

权利要求

1.一种用动物胆汁制取胆红素的方法，其特征在于先在胆汁中加入醋酸乙脂和二氯甲烷混合溶剂萃取游离胆红素，再加入氢氧化钠水溶液进行皂化，然后再加入二氯甲烷、醋酸和盐酸混合液进行酸解控制PH值达到6，分出最下层结合胆红素萃取液，蒸出溶剂得到胆红素结晶。

全文摘要

本发明公开了一种用动物胆汁制取胆红素的改进方法，它不同于现有技术中常用的钙盐法，而是先在胆汁中加入醋酸乙酯和二氯甲烷混合溶剂萃取出胆汁中的游离胆红素后，再加入碱液对胆汁中的结合胆红素进行皂化，皂化后先加入二氯甲烷和乙醇混合溶剂再加醋酸和盐酸混合液进行酸解，使分解出的胆红素迅速脱离酸性环境进入溶剂，防止了胆红素的酸催化异构损失，分出最下层的胆红素萃取液，蒸出溶剂得到胆红素结晶。本方法的胆红素收率高出现有技术一倍以上，每100公斤牛胆汁可制取胆红素30克。