SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量.

(二)、蛋白质标准样品迁移率和待测样品分 子量的计算 1、根据蛋白质分子量对数和电泳迁移率的关 系,精确测量溴酚蓝和各种蛋白质迁移距 离 。把溴酚蓝迁移的距离定为d1,蛋白质 把溴酚蓝迁移的距离定为d1, 迁移距离定为d2,并以D1定为凝胶染前 迁移距离定为d2,并以D1定为凝胶染前 的长度,D2定为 凝胶染后的长度。 的长度,D2
sds聚丙烯酰胺凝胶电泳定为 凝胶染后的长度。 2、根据公式:Rm=d2d1×D1D2计算各 根据公式:Rm=d2d1×D1D2计算各 种蛋白质的迁移率 。
3、以标准蛋白质的迁移率为横座标,以其对 以标准蛋白质的迁移率为横座标, 应的分子量对数为纵座标,绘制标准曲线, 应的分子量对数为纵座标,绘制标准曲线, 可得到一条直线,然后根据未知样品的迁移 可得到一条直线, 率,在半对数座标图上查出其对应的分子量。 在半对数座标图上查出其对应的分子量。 4、 实验需多次重复。 实验需多次重复。

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