蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳配方

6%
8%
10%
12%
15%
5mL
sds聚丙烯酰胺凝胶电泳10mL
5mL
10mL
5mL
10mL
5mL
10mL
5mL
10mL
H2O
2.6mL
5.3mL
2.3mL
4.6mL
1.9mL
4mL
1.6mL
3.3mL
1.1mL
2.4mL
30% mix
1mL
2mL
1.3mL
2.7mL
1.7mL
3.3mL
2mL
4mL
2.5mL
5mL
1.5M Tris pH 8.8
1.3mL
2.5mL
1.3mL
2.5mL
1.3mL
2.5mL
1.3mL
2.5mL
1.3mL
2.5mL
10% SDS
50uL
100uL
50uL
100uL
50uL
100uL
50uL
100uL
50uL
100uL
10% APS
50uL
100uL
50uL
100uL
50uL
100uL
50uL
100uL
50uL
100uL
TEMED
4uL
8uL
3uL
6uL
2uL
4uL
2uL
4uL
2uL
4uL
分离胶;一块胶配5mL
Stacking Gel
                5%
      2mL
      5mL
H2O
1.46mL
3.6mL
30% mix
330uL
830uL
1.5M Tris pH6.8
170uL
420uL
10% SDS
20uL
50uL
10% AP
20uL
50uL
TEMED
2uL
5uL
每一块胶需要约4mL, 留出约2-3cm的距离,用水封口,防止空气接触。室温放置30min后,可以看到水和胶的界面重新出现。弃去上层水,倒入凝缩胶。
凝缩胶:一块胶配2mL
10%(W/V)过硫酸铵
        1 称取1g APS
        2加入10mL 去离子水
        3储存于4℃可使用两周时间,过期失去催化作用。
5* Tris-Glycine Buffer (SDS-PAGE电泳缓冲液)
        1.
Tris                15.1g
        Gly                  94g
        SDS                  5g
        2加入800mL去离子水,搅拌溶解
        3定容至1L,室温保存。
5*SDS-PAGE Loading Buffer
        1.10ml 离心管
        1M Tris-HCl (pH6.8)              1.25mL
        SDS                          0.5g
        BPB                          25mg
        甘油                          2.5ml
        2加去离子水溶液后定容至5mL
        3小份(500uL/份)分装后,于室温保存
        4使用前将25uL的2-ME加到每小份中
        5加入2-ME的Loading Buffer 可在室温下保存一个月左右。

本文发布于:2024-09-21 00:31:06,感谢您对本站的认可!

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