专利名称:一种3×FLAG标签融合表达载体的制备方法及其应用 专利类型:发明专利
发明人:徐玉芳,姚文,李涛,张会勇,林楠,孙玉慧,连红梅,贾利华,李阳
申请号:CN202111457264.6
申请日:20211202pgl3
公开号:CN114150008A
公开日:
20220308
摘要:本发明提供了一种3×FLAG标签融合表达载体的制备方法,该方法为:用KpnI/XhoI双酶切pGL3Basic载体,得到KpnI/XhoI双酶切pGL3Basic载体的回收产物,以pRGEB32Bar‑Cas9质粒为模板,得到2×35S启动子PCR回收产物,连接反应得到中间载体pGL‑35S,双酶切后连接MCS退火引物,得到中间载体pGL‑35S‑MCS,双酶切后连接NosTer序列,得到中间载体 pGL‑35S‑MCS‑Nos,双酶切后连接变性退火的连接肽Linker引物,得到中间载体
pGL‑35S‑MCS‑Linker‑Nos,双酶切后连接3×FLAG标签退火引物,得到3×FLAG标签融合表达载体。本发明制备的3×FLAG标签融合表达载体框架较小,全长4088bp,适用于植物原生质体转化。
申请人:河南农业大学
地址:450002 河南省郑州市金水区农业路63号
国籍:CN
代理机构:西安汇恩知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:张伟花