此说明书仅适用于此说明书仅适用于全血基因组全血基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒，，使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容，，若有任何疑问若有任何疑问，，欢迎致电厦门致善致善生物科技有限公司生物科技有限公司生物科技有限公司（（4006618810*************）进行咨询进行咨询，，您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站（（www.zsandx ）了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。。
一 产品简介
全血基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁粒，可以从新鲜、冷冻或抗凝全血中分离纯化高质 量的基因组DNA。纯化的DNA 片段不含蛋白质、有机质等污染，适用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD、AFLP 等多种分子生物学实验。
我们根据磁粒的独特分离作用，提供了一个极其简便的操作程序：样品裂解、磁粒吸附、洗涤以及洗脱。在最适的试剂及操作条件下，可获得高质量DNA。该方法具有简便、快捷、高效等特点，整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。 二 试剂盒组成及储存条件
品名
规格 货号 全血基因组DNA 提取试剂盒
100T
4hk021
本试剂盒仅供实验室使用，适用于处理100人份100~200ul 全血样品。
裂解液 120ml 磁粒 22ml 洗涤液 50ml ×3 洗脱液
25ml 二硫苏糖醇（DTT ） 5管 说明书
1份
储存条件储存条件：：本试剂盒所有试剂均可以室温保存，应避免阳光直射。当室温低于15℃时，裂解液中可能有结晶析出，38℃水浴加热几分钟，恢复澄清后即可使用，提取效率不受影响。本试剂盒有效期为12个月， 请于有效期内使用。
安全信息：试剂中含刺激性化合物，操作时应小心，避免沾染皮肤，眼睛和衣服，若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三 使用者自配试剂
DTT 溶液
使用浓度为1mol/L 。
试剂盒中每管粉末状DTT 加入去离子水配制成600ul ，即为1mol/L ，建议现配现用，配制好的DTT 溶液当次未使用完，可保存于4℃最多两周。
未溶解的粉末状DTT 请务必于冰箱4℃保存。
四 产品技术规格
检材类型
最高起始 用量范围
第一次洗脱 第二次洗脱 总提取量
体积 浓度
体积 浓度 全血
100~200ul
120u l
20～50 n g/u l
120u l
10～25n g/u l
3～6u g 本试剂盒为提取100~200ul 全血所设计，目标DNA 的产量决定于全血样品中白细胞的数量。对本试剂盒，所用200u l 全血样品中白细胞的数量不得多于2×106
个。
重要提示重要提示：： 客户可以根据使用需要选择洗脱一次和洗脱二次，两次洗脱的DNA 浓度如上，洗脱的DNA，根据使用
需要单独收集或者将第一次和第二次洗脱的DNA 收集在同一管中。
重要提示：本试剂盒所用磁粒载体在一定范围内可以特异性的吸附承载DNA ，标本中核酸含量过高，会导致磁粒载体的凝聚，降低目标DNA 的提取量和纯度。
五 使用者自备仪器和试剂
磁性分离架；
可调微量加液器及相应吸头； 旋涡混合器 ；
无水乙醇（分析纯）。
六 操作步骤
6.6.1 1 1 配制洗涤液配制洗涤液配制洗涤液
用无水乙醇按照1：1体积比稀释洗涤液，即1份的洗涤液加入1份的无水乙醇。稀释好后，做上标记表明为已加入乙醇的洗涤液，并确保瓶子盖严以防止挥发，配置好的洗涤液可置于室温长期保存。 6.2 操作步骤操作步骤：： 1
取100~200ul 抗凝全血 （若为冻存的请待其完全解冻后再进行）于1.5ml 离心管中，加入600ul 的裂解液和30ul 的1M DTT 溶液，用取液器反复吹打或用旋涡混合仪使其充分混合5分钟，以使其完全裂解。 2
加入200ul 磁粒。在吸取在吸取磁粒磁粒磁粒前前，必须先涡旋振荡装必须先涡旋振荡装磁粒磁粒磁粒的试剂瓶的试剂瓶30秒，以确保以确保磁粒磁粒磁粒悬浮状态均匀悬浮状态均匀悬浮状态均匀。。用取液器反复吹打或用旋涡混合仪充分混匀，使磁粒始终保持悬浮状态5分钟。 3 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸去液体，液体尽量吸取干净。 4 从磁架上取下离心管，加入600u l 裂解液，震荡混匀2分钟。
5 将离心管放置于磁架上静置30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时方可吸弃液体，液体尽量吸取干净。 6
从磁架上取下离心管，往离心管中加入800u l 已加入乙醇的洗涤液，震荡混匀1分钟。将离心管放置于磁架上，磁性分离30秒，尽量吸弃液体。 7 重复步骤6二次。
8
离心管始终放在磁架上，室温晾干10—15分钟，每隔几分钟，可能会从磁粒中渗出液体，聚集在离心管底部，用取液器将这些液体及时取出。乙醇残留会抑制后续试验乙醇残留会抑制后续试验，，所以晾干时要确保乙醇挥发干净所以晾干时要确保乙醇挥发干净。。但也不要干燥太长时但也不要干燥太长时间间，以免难以洗脱DNA 。晾干时间应根据磁粒用量晾干时间应根据磁粒用量、、实验室环境实验室环境、、温度等因素适当调节温度等因素适当调节，，以磁粒表面以磁粒表面、、离心管内壁没有明显液体、磁粒表面成光滑状态为界。 9
向离心管中加入洗脱液120u l ，震荡混匀5-10分钟，使磁粒始终保持悬浮状态。
10 磁分离，将离心管放置于磁架上静置约30秒，待磁粒完全吸附于离心管靠磁架一侧时小心吸取液体放入新的离心管中，
即为提取的基因组DNA 溶液。使用者可根据使用需要选择进行第二次洗脱，操作方法同上。
磁分离重要提示重要提示：： 本操作步骤适用于100~200ul 全血提取，若标本使用量增加，则应按照相应的
比例增加各种试剂的用量，以达到最佳提取目的。
七 DNA 纯化效果评估
DNA 纯度可用分光光度计检测，DNA 在260nm 处有吸收峰。检测时应使用本试剂盒中的洗脱液进行调零， OD260值控制在0.1到1.0之间，数值会比较准确。注：若检测时对DNA 溶液进行了稀释溶液进行了稀释，，则应用相同溶液对用于调零的洗脱液进行相同倍数的稀释行相同倍数的稀释。。
A260为1相当于50u g DNA ，A260/A280比值可提供DNA 纯度的一个参考。 使用本试剂盒分离的DNA 的浓度及纯度分析：
使用分光光度计测DNA 在260nm 、280nm 、320nm 处的光吸收值； 核酸浓度（u g /ml ）＝（A 260—A 320）×50 u g/ml ×稀释倍数；
核酸纯度的计算公式为(A 260-A 320)/(A 280-A 320) ，一般比值在1.7—2.0之间。
八 常见问题分析
常见问题 可能的原因
建议
得率低
全血样品中白细胞含量太低
适量增加全血样品的用量到250—400ul ，提取前先低速离心，取白细胞层进行实验。并确保最后加入的样品体积不大于200ul 。
取样前没有充分混匀全血样品
每次全样前充分混匀样品，确保白细胞充分均匀悬浮于待检样品中。
样品裂解不充分，初始样品使用量过多或样品白细胞含量超过2×106
个
正常样品使用量尽量不要超过200ul
白细胞含量较高的样品适量减少样品的使用量 按照相应的比例增加各种试剂的用量
洗脱步骤磁粒没有充分悬浮
洗脱步骤使磁粒始终保持悬浮状态 洗脱液中有磁粒残留 或 提取液呈浅黄
样品裂解不充分，初始样品使用量过多或样品白细胞含量超过2×106
个
正常样品使用量尽量不要超过200ul
白细胞含量较高的样品适量减少样品的使用量 按照相应的比例增加各种试剂的用量
洗涤过程不充分
可加长洗涤步骤的时间，确保洗涤时磁粒-DNA 复合物充分摇匀悬浮于洗涤液中
厦门致善生物科技有限公司
电话：4006618810************* 传真：************ E-mail ：
**************** 网址：www.zsandx
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议