膜材料抗菌实验

抗菌实验
1.摇菌
将大肠杆菌、枯草杆菌的抗菌膜菌液+5 mL培养液倒入10 mL离心管,37 °C摇床培养12 h。(最好早上8点摇菌
2. 使用无菌操作台
在操作面板上打开操作台的通风与照明,点燃酒精灯,用乙醇对手进行消毒。
3.配制溶液
(1)配制培养液
培养液配方:酵母提取物 0.5% (wt%);蛋白胨 1% (wt%);氯化钠NaCl 1% (wt%);去离子水 97.7% (wt%)
(2)配制培养基
培养液中加入 1.5% (wt%)琼脂粉并摇匀,放入高压锅灭菌。灭菌完成后,取出冷却至50℃左右(不烫手的温度)倒入一次性培养皿中,每个培养皿 10-15 mL。在琼脂凝固后将培养皿倒置,以防止水汽冷凝后滴落。
注意:使用高压锅时留意水位。(加水、排水、定期换水)
(3)配制生理盐水
1%的NaCl溶液。
4.灭菌
(1)高温灭菌
将培养液、培养基、离心管、头等放入入高压锅中进行20 min 灭菌处理。(高压锅经过加热、恒温、散热三个过程,大约需要3 h)
(2)膜片紫外灭菌
将实验制得的膜裁至与载玻片大小相当,分别放入培养皿中。先用乙醇对载玻片灭菌,再打开紫外照射进行灭菌,正反面各20 min。
5.接触杀菌
(1)稀释菌液
用生理盐水(0.9% NaCl溶液)将稳定期的浓菌液稀释3~4次,每次取0.5 mL菌液和4.5 mL生理盐水摇匀。
取50 μL(或100 μL,视膜片大小而定)稀释后的菌液滴于膜片正面,再小心盖上载玻片,轻压,使菌液分散均匀。然后用封口膜密封,放入37培养箱培养1~2h。注意每次要做空白对照组稀释菌液
6.涂板
(1)稀释
将培养一定时间后的膜片及载玻片浸入提前量取的10mL生理盐水中,摇匀。
(2)涂板
取100μL摇匀稀释后的菌液滴加到培养基上,用小玻璃珠滚匀,封口,倒置放入37℃培养箱培养12h。
7.查看结果
12h后取出培养基,正面拍照,存档,数菌,计算杀菌率。

本文发布于:2024-09-20 21:28:19,感谢您对本站的认可!

本文链接:https://www.17tex.com/tex/1/352606.html

版权声明:本站内容均来自互联网,仅供演示用,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系,我们将在24小时内删除。

标签:灭菌   高压锅   放入
留言与评论(共有 0 条评论)
   
验证码:
Copyright ©2019-2024 Comsenz Inc.Powered by © 易纺专利技术学习网 豫ICP备2022007602号 豫公网安备41160202000603 站长QQ:729038198 关于我们 投诉建议