谷氨酸调节剂与免疫疗法用以癌症的用途的制作方法

谷氨酸调节剂与免疫疗法用以癌症的用途
1.本技术是中国申请号为201780044939.x、发明名称为“谷氨酸调节剂与免疫疗法用以癌症的用途”且申请日为2017年5月19日的专利申请(pct 申请号为pct/us2017/033690)的分案申请。
2.相关申请
3.本技术要求2016年5月20日提交的美国临时申请序列号62/339,433的权益。
技术领域
4.本发明涉及谷氨酸调节剂和免疫性抗癌剂在癌症中的用途。
5.发明背景
6.谷氨酸是主要的兴奋性神经递质，负责调控正常脑功能中的信号传导。虽然谷氨酸信号传导的研究主要集中在中枢神经系统(cns)上，但其他研究已经强调了它们在外周组织中的功能作用。参见，例如，skerry t,genever p, glutamate signalling in non-neuronal tissues.trends pharmacol sci 2001,22:174
–ꢀ
181和frati c,marchese c,fisichella g,copani a,nasca mr,storto m,nicolettif,expression of functional mglu5 metabotropic glutamate receptors inhumanmelanocytes.j cell physiol 2000,183:364
–
372。
7.谷氨酸可通过作用于位于细胞表面的谷氨酸受体来发挥其信号传导能力。谷氨酸受体作为促离子型受体(iglur)或促代谢型谷氨酸受体(mglur)存在。iglur是配体门控离子通道，包括n-甲基-d-天冬氨酸(nmda)受体和非 nmda受体[α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸(ampa)受体](iglur1-4)和钾盐镁矾(ka)亚家族(iglur5-7、ka1和ka2)。mglur是通过偶联至三磷酸鸟苷(gtp)结合蛋白(g蛋白)介导其信号并刺激第二信使的结构域受体，如肌醇 1,4,5-三磷酸盐(ip3)、二酰基甘油(dag)和环腺苷单磷酸盐(camp)。已经鉴定了各种mglur亚型，并根据它们的序列同源性、药理学反应和细胞内第二信使进行分组。在配体结合后，由mglur1和mglur5组成的组i受体通过gq与磷脂酶c(plc)偶联，导致形成ip3和dag。组ii包括mglur2和mglur3，并且组 iii包括mglur4、mglur6、mglur7和mglur8。组ii和组iii均通过g
i/o
与腺苷酸环化酶负偶联，导致camp形成。参见，例如，teh j,chen s,metabotrobicglutamate receptors and cancerous growth,wires membr transp signal 2012, 1:211
–
220.doi:10.1002/wmts.21,2011wiley-vch verlag gmbh&co.kgaa, weinheim.第1卷,2012年3月/4月。
[0008]
谷氨酸也可以被转运。已经从哺乳动物中枢神经系统克隆了谷氨酸转运蛋白。两种主要在神经胶质[神经胶质谷氨酸和天冬氨酸转运蛋白(glast) 以及神经胶质谷氨酸转运蛋白(glt)]中表达，并且三种在神经元[eaac1、兴奋性氨基酸转运蛋白(eaat)4和eaat5]中表达。参见，例如，seal,r, amara,s,(1999)excitatory amino acid transporters:a family in flux.annu.rev. pharmacol.toxicol.39:431
–
456。关于谷氨酸转运的进一步信息可以在文献中到。参见，例如，meldrum b,glutamate as a neurotransmitter in the brain: review of physiology and pathology,j.nutr.130:1007s-1015s,2000。
[0009]
谷氨酸也可以被代谢。谷氨酸代谢反应可以由受活化剂和抑制剂调控的酶催化。例如，在n-乙酰谷氨酸合成酶(nags)的存在下l-谷氨酸至n-乙酰基 l-谷氨酸的转化被l-精氨酸活化并被琥珀酸盐、辅酶a、n-乙酰基-l-天冬氨酸和n-乙酰基-l-谷氨酸抑制。参见，例如，shigesada k,tatibana m,n
‑ꢀ
acetylglutamate synthetase from rat-liver mitochondria.partial purification andcatalytic properties.eur j biochem.1978；84:285
–
291.doi: 10.1111/j.14321033.1978.tb12167.x。类似地，谷氨酰胺至谷氨酸的转化可由酶催化，所述酶包括谷氨酰胺酶(gls/gls2)、磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶 (ppat)和谷氨酰胺-果糖-6-磷酸转氨酶(gfpt1和gfpt2)。参见，例如，holmese,wyngaarden j,kelley w,human glutamine phosphoribosylpyrophosphateamidotransferase.two molecular forms interconvertible by purine ribonucleotidesand phosphoribosylpyrophosphate.j biol chem 1973；248:6035
–
6040，以及hu c 等人molecular enzymology of mammalian delta1-pyrroline-5-carboxylatesynthase.alternative splice donor utilization generates isoforms with differentsensitivity to ornithine inhibition.j biol chem.1999；274:6754
–
6762. doi:10.1074/jbc.274.10.6754。
[0010]
已知谷氨酰胺作为谷氨酸的前体可保护身体免于营养物质耗竭、氧化应激和肿瘤应激。参见，例如，shanware n等人,glutamine:pleiotropic roles intumor growth and stress resistance.j mol med(berl)2011；89:229
–
236. doi:10.1007/s0010901107319。报告显示通过谷氨酰胺酶的作用从谷氨酰胺释放的氨通过称为谷氨酰胺分解的过程调控癌细胞中的自噬。参见，例如，engc等人,(2010)ammonia derived from glutaminolysis is a diffusible regulator ofautophagy.sci signal 3:ra31。在癌细胞中，谷氨酰胺分解可通过脂肪酸、核苷酸和氨基酸的合成作为细胞生长和增殖的燃料。参见，例如，benjamin d等人,global profiling strategies for mapping dysregulated metabolic pathways incancer.cell metab.2012；16:565-577.doi:10.1016/j.cmet.2012.09.013。谷氨酰胺酶的表达可能受转录因子c-myc的调控，其转而调控人前列腺癌细胞中的细胞增殖和细胞死亡。参见，例如，gao p等人,c-myc suppression of mir23a/benhances mitochondrial glutaminase expression and glutaminemetabolism.nature.2009；458:762
–
765.doi:10.1038/nature07823。在脑肿瘤(如胶质瘤)中，已经显示胶质瘤细胞可能会向细胞外空间释放过量的谷氨酸，导致肿瘤相关的癫痫或惊厥。参见，例如，simon m,von lehe m,glioma-relatedseizures:glutamate is the key.nat med.2011；17:1190-1191.doi:10.1038/nm.2510。还有人提出谷氨酸释放促进胶质母细胞瘤的细胞增殖、细胞侵袭和肿瘤坏死。参见，例如，schunemann d等人,glutamate promotes cell growth by egfrsignaling on u87mg human glioblastoma cell line.pathol oncol res.2010；16:285
‑ꢀ
293.doi:10.1007/s1225300992234。关于谷氨酸和谷氨酰胺代谢的进一步信息可以在文献中到。参见，例如，yelamanchi s.等人,a pathway map ofglutamate metabolism,j cell commun signal.2016年3月:10(1):69-76。 doi10.1007/s12079-015-0315-5，以及chen l和hengmin c,targeting glutamineinduces apoptosis:a cancer therapy approach,int.j.mol.sci.2015,16,22830
‑ꢀ
22855；doi:10.3390/ijms160922830。
[0011]
利鲁唑(6-(三氟甲氧基)苯并噻唑-2-胺)是一种已用于肌萎缩侧索硬化症(als)的药物。最近，已显示利鲁唑具有其他临床益处。例如，以每天 100mg的总剂量每天两次口服给予利鲁唑可缓解或神经精神症状和障碍，如情绪、焦虑症、难治性抑郁症、强迫性焦虑症等。参见，例如，从 https://clinicaltrials.gov/ct2(标识号nct00523718)检索到的riluzoleaugmentation in treatment-refractory obsessive-compulsive disorder,yaleuniversity(2016)。此外，有一些指征指示利鲁唑可能具有抗癌作用。参见，例如，从https://clinicaltrials.gov/ct2(标识号nct00866840)检索到的riluzole intreating patients with stage iii or stage iv melanoma that cannot be removedby surgery,rutgers university(2013)。
[0012]
人类癌症具有许多遗传和表观遗传改变，产生潜在地可被免疫系统识别的新抗原。参见，例如，sjoblom等人(2006)science 314:268-74)。由t和b淋巴细胞组成的适应性免疫系统具有强大的抗癌潜力，具有广泛的能力和精确的特异性以响应多种肿瘤抗原。此外，免疫系统证明了相当大的可塑性和记忆成分。成功地利用适应性免疫系统的这些属性使得免疫疗法在当前的癌症模态中是独特的。
[0013]
癌症免疫疗法包括通过过继性转移活化的效应细胞、针对相关抗原进行免疫或提供非特异性免疫刺激剂如细胞因子来增强抗肿瘤免疫应答的方法。癌症免疫疗法还包括提供用于癌症的新免疫方法的免疫检查点途径抑制剂，包括例如靶向程序性死亡-1(pd-1)受体和阻断抑制性pd-1/pd-1配体途径以及细胞毒性t淋巴细胞抗原-4(ctla-4)受体的抑制剂。
[0014]
pd-1是由活化的t细胞和b细胞表达的关键免疫检查点受体，并介导免疫抑制。pd-1是cd28受体家族(包括cd28、ctla-4、icos、pd-1和btla) 的成员。已经鉴定了用于pd-1的两种细胞表面糖蛋白配体-程序性死亡配体
‑ꢀ
1(pd-l1)和程序性死亡配体-2(pd-l2)，其在抗原呈递细胞以及许多人类癌症上表达并且已显示在与pd-1结合后下调t细胞活化和细胞因子分泌。在临床前模型中抑制pd-1/pd-l1相互作用介导有效的抗肿瘤活性(参见，例如，美国专利号8,008,449和7,943,743)，并且已在临床试验中研究了pd-1/pd-l1相互作用的抗体抑制剂用于癌症的用途。参见，例如，topalian s等人, targeting the pd-1/b7-h1(pd-l1)pathway to activate antitumor immunity.curropin immunol(2012)24:207-212；pardoll d,the blockade of immunecheckpoints in cancer immunotherapy.nature reviews cancer(2012)12:252-264。
[0015]
纳武单抗(由美国新泽西州普林斯顿的百时美施贵宝公司(bristol-myerssquibb company)以商品名“opdivo
tm”销售，也称为5c4、bms-936558、 mdx-1106或ono-4538)是完全人igg4(s228p)pd-1免疫检查点抑制剂抗体，其选择性地阻止与pd-1配体(pd-l1和pd-l2)的相互作用，从而阻断抗肿瘤t 细胞功能的下调。参见，例如，美国专利号8,008,449；wang等人(2014)；另外参见http://www.cancer.gov/drugdictionary？cdrid＝695789(最后访问：2017年4 月25日)。派姆单抗(由美国新泽西州白宫的默克公司(merck&co.,inc)以商品名“keytruda
tm”销售，也称为lambrolizumab和mk-3475)是针对人细胞表面受体pd-1的人源化单克隆igg4抗体。派姆单抗描述于，例如，美国专利号8,354,509和8,900,587中；另外参见 http://www.cancer.gov/drugdictionary？cdrid＝539833(最后访问：2017年4月25 日)。
[0016]
伊匹单抗(由美国新泽西州普林斯顿的bristol-myers squibb company，以商品名“yervoy
tm”销售)是完全人igg1单克隆抗体，其阻断ctla-4与其b7 配体的结合，从而刺激t细胞活化并改善晚期黑素瘤患者的总体存活期。伊匹单抗描述于，例如，美国专利号6,984,720中；另外参见 http://www.cancer.gov/drugdictionary？cdrid＝38447(最后访问：2017年4月25日)。
[0017]
用免疫学靶向抗癌剂的其他癌症方法的例子包括靶向多种受体的其他抗体，以及肽、蛋白质、小分子、佐剂、细胞因子、溶瘤病毒、疫苗、双特异性分子和细胞剂。参见，例如，ott p等人combinationimmunotherapy:a road map journal for immunotherapy of cancer(2017)5:16 doi:10.1186/s40425-017-0218-5，以及hoos a,development of immuno
‑ꢀ
oncology drugs-from ctla4 to pd1 to the next generations,nat rev drugdiscov.2016年4月；15(4):235-47.doi:10.1038/nrd.2015.35。
[0018]
尽管患者通过免疫疗法癌症已经获得了益处，但仍希望改进。例如，希望在以下领域改善患者的响应，如例如总体存活期、生活质量、总体反应率、反应持续时间、无进展存活期、患者报告结果、最小残留疾病或免疫应答等。
[0019]
发明概述
[0020]
本发明涉及具有谷氨酸调节剂和免疫剂的组合免疫疗法，用以疾病，特别是癌症。凭借本发明，现在可以为患者提供更有效的免疫肿瘤学。患者可在一个或多个领域经历改善的反应，该一个或多个领域包括例如总体存活期、生活质量、总体反应率、反应持续时间、无进展存活期、患者报告结果、最小残留疾病或免疫应答。
[0021]
在本发明的一方面，提供了一种有需要的患者的癌症的方法，其包括向患者给予有效量的谷氨酸调节剂和免疫性抗癌剂。
[0022]
在一方面，谷氨酸调节剂是促进调节、调控、减弱或加强以下项的药剂： (i)促离子型谷氨酸受体；(ii)促代谢型谷氨酸受体；或(iii)谷氨酸转运蛋白。在一方面，谷氨酸调节剂是抑制谷氨酸释放的药剂。在一方面，谷氨酸调节剂是调节、调控、减弱或加强谷氨酸或谷氨酰胺代谢的药剂。在一方面，促离子型谷氨酸受体选自nmda、ampa和钾盐镁矾(kainite)。在一方面，该促代谢型谷氨酸受体是以下一种或多种：选自mglur1和mglur5的组1受体；选自mglur2和mglur3的组ii受体；或选自mglur4、mglur6、mglur7和 mglur8的组iii受体。在一方面，谷氨酸转运蛋白在神经胶质或神经元中表达。
[0023]
在本发明的一方面，该谷氨酸调节剂选自利鲁唑、美金刚、n-乙酰半胱氨酸、金刚烷胺、托吡酯、普瑞巴林、拉莫三嗪、、s-、azd8108、 azd 6765(拉尼西明(lanicemine))、bhv-4157(trigriluzole)、右美沙芬、av-101、 cerc-301、gly-13及其药学上可接受的盐、前药或类似物。
[0024]
在本发明的一方面，免疫性抗癌剂选自抗体、肽、蛋白质、小分子、佐剂、细胞因子、溶瘤病毒、疫苗、双特异性分子和细胞剂在一方面，免疫性抗癌剂是检查点抑制剂。在一方面，检查点抑制剂是选自pd-1、pd-l1和ctla-4的检查点受体的抑制剂。在一方面，pd-1的抑制剂是选自纳武单抗、派姆单抗和吡地利单抗(pidilzumab)的抗pd-1抗体。在一方面，pd
‑ꢀ
l1的抑制剂是选自bms-936559、度伐单抗、阿特珠单抗、阿维单抗和mdx
‑ꢀ
1105的抗pd-ll抗体。在一方面，pd-l1的抑制剂是肽。在一方面，ctla-4的抑制剂是选自伊
匹单抗和替西木单抗的抗ctla-4抗体。
[0025]
在本发明的一方面，谷氨酸调节剂和该免疫性抗癌剂能够在第60天提供至少2.0的小鼠存活比(msr
60
)
[0026]
在本发明的一方面，提供了一种用于调节用免疫性抗癌剂的患者中的谷氨酸的方法，其包括在临近免疫性抗癌剂的时间使患者体内的谷氨酸受体或谷氨酸转运蛋白与谷氨酸调节剂接触。在一方面，谷氨酸调节剂是利鲁唑。在一方面，利鲁唑是静脉内、肌肉内、肠胃外、舌下、经鼻或口服给予的。在一方面，将利鲁唑以前药的形式给予。在一方面，该前药具有下式：
[0027][0028]
在一方面，谷氨酸受体或谷氨酸转运蛋白与谷氨酸调节剂的接触在用免疫性抗癌剂之前、同时或之后进行。在一方面，临近时间是在用免疫性抗癌剂的一(1)周内。
[0029]
在本发明的一方面，提供了一种使患有癌症的正用免疫性抗癌剂的患者敏化的方法，其包括在临近免疫性抗癌剂的时间向患者给予有效量的谷氨酸调节剂。在一方面，敏化促进增强的抗肿瘤功效。在一方面，通过增加的患者客观反应率或增加的患者反应持续时间来测量增强的抗肿瘤功效。
[0030]
在一方面，增强的抗肿瘤功效促进患者总体存活期的增加。在一方面，患者在初次给予免疫性抗癌剂后展现出至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约19个月、至少约20个月、至少约 21个月、至少约22个月、至少约23个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年、或至少约5年的总体存活期。在一方面，该总体存活期是用有效量的免疫性抗癌剂但不用谷氨酸调节剂的患者的总体存活期的至少约1.1 倍、至少约1.2倍、至少约1.3倍、至少约1.4倍、至少约1.5倍、至少约2.0倍、至少约3.0倍、或至少约3.0倍。
[0031]
在本发明的一方面，提供了一种用于改善患有癌症的正用免疫性抗癌剂的患者的反应的方法，其包括向有需要的患者给予有效量的免疫性抗癌剂和利鲁唑或其前药。在一方面，免疫性抗癌剂是检查点抑制剂。在一方面，检查点抑制剂是选自pd-1、pd-l1和ctla-4的检查点受体的抑制剂。在一方面，将患者另外用选自以下的抗体：抗lag3抗体、抗 cd137抗体、抗kir抗体、抗tgfp抗体、抗il-10抗体、抗b7-h4抗体、抗fas 配体抗体、抗cxcr4抗体、抗间皮素抗体、抗cd20抗体、抗cd27抗体、抗 gitr抗体、抗ox40抗体或其任何组合。在一方面，将患者另外用放射疗法、化疗、疫苗、细胞因子、酪氨酸激酶抑制剂、抗vegf抑制剂、ido抑制剂、 ido1抑制剂、tgf-β抑制剂或其任何组合。
[0032]
在本发明的一方面，癌症选自黑素瘤癌症，肾癌，前列腺癌，乳腺癌，结肠癌，肺癌，骨癌，胰腺癌，皮肤癌，头颈癌，皮肤或眼内恶性黑素瘤，子宫癌，卵巢癌，直肠癌，肛区癌，胃癌，睾丸癌，子宫癌，输卵管癌，子宫内膜癌，宫颈癌，阴道癌，外阴癌，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，食道癌，小肠癌，内分泌系统癌，甲状腺癌，甲状旁腺癌，肾上腺癌，软组织肉瘤，尿道
癌，阴茎癌，包括急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病的慢性或急性白血病，儿童实体瘤，淋巴细胞性淋巴瘤，膀胱癌，肾或输尿管癌，肾盂癌，cns肿瘤，原发性cns淋巴瘤，肿瘤血管生成，脊髓轴肿瘤，脑干胶质瘤，垂体腺瘤，卡波西肉瘤，表皮样癌，鳞状细胞癌，t细胞淋巴瘤，包括由石棉诱导的那些的环境诱导癌症，及其任何组合。
[0033]
在一方面，改善的反应是总体存活期、生活质量、总体反应率、反应持续时间、无进展存活期、患者报告结果、最小残留疾病或免疫应答中的一种或多种。
[0034]
在本发明的一方面，提供了一种用于患有癌症的患者的试剂盒，该试剂盒包含：
[0035]
(a)免疫性抗癌剂；和
[0036]
(b)用于给予本发明的方法中的免疫性抗癌剂与谷氨酸调节剂的组合的说明书。在一方面，免疫性抗癌剂选自纳武单抗、派姆单抗、吡地利单抗、度伐单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、伊匹单抗和替西木单抗。
[0037]
在本发明的一方面，提供了一种用于患有癌症的患者的试剂盒，该试剂盒包含：
[0038]
(a)谷氨酸调节剂；和
[0039]
(b)用于给予本发明的方法中的谷氨酸调节剂与免疫性抗癌剂的组合的说明书。在一方面，谷氨酸调节剂是利鲁唑(riluzole)或其前药。
[0040]
从附图和发明详述中，本发明的这些和其他方面以及特征将是清楚的。
[0041]
本发明还包括如下项：
[0042]
1.一种有需要的患者的癌症的方法，其包括向该患者给予有效量的谷氨酸调节剂和免疫性抗癌剂。
[0043]
2.项1的方法，其中该谷氨酸调节剂是促进调节、调控、减弱或加强以下项的药剂：(i)促离子型谷氨酸受体；(ii)促代谢型谷氨酸受体；或(iii)谷氨酸转运蛋白。
[0044]
3.项1的方法，其中该谷氨酸调节剂是抑制谷氨酸释放的药剂。
[0045]
4.项1的方法，其中该谷氨酸调节剂是调节、调控、减弱或加强谷氨酸或谷氨酰胺代谢的药剂。
[0046]
5.项2的方法，其中该促离子型谷氨酸受体选自n-甲基-d-天冬氨酸 (“nmda”)、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸(“ampa”)和钾盐镁矾。
[0047]
6.项2的方法，其中该促代谢型谷氨酸受体是以下中的一种或多种：选自 mglur1和mglur5的组1受体；选自mglur2和mglur3的组ii受体；或选自mglur4、mglur6、mglur7和mglur8的组iii受体。
[0048]
7.项2的方法，其中该谷氨酸转运蛋白在神经胶质或神经元中表达。
[0049]
8.项1的方法，其中该谷氨酸调节剂选自利鲁唑、美金刚、n-乙酰半胱氨酸、金刚烷胺、托吡酯、普瑞巴林、拉莫三嗪、、s-、azd8108、 azd 6765(拉尼西明)、bhv-4157(trigriluzole)、右美沙芬、av-101、cerc
‑ꢀ
301、gly-13及其药学上可接受的盐、前药或类似物。
[0050]
9.项8的方法，其中该谷氨酸调节剂具有下式：
[0051][0052]
10.项1的方法，其中该免疫性抗癌剂选自抗体、肽、蛋白质、小分子、佐剂、细胞因子、溶瘤病毒、疫苗、双特异性分子和细胞剂 11.项10的方法，其中该免疫性抗癌剂是检查点抑制剂。
[0053]
12.项11的方法，其中该检查点抑制剂是选自pd-1、pd-l1和ctla-4的检查点受体的抑制剂。
[0054]
13.项12的方法，其中该pd-1的抑制剂是选自纳武单抗、派姆单抗和吡地利单抗的抗pd-1抗体。
[0055]
14.项12的方法，其中该pd-ll的抑制剂是选自bms-936559、度伐单抗、阿特珠单抗、阿维单抗和mdx-1105的抗pd-l1抗体。
[0056]
15.项12的方法，其中该pd-l1的抑制剂是肽。
[0057]
16.项12的方法，其中该ctla-4的抑制剂是选自伊匹单抗和替西木单抗的抗ctla-4抗体。
[0058]
17.项1的方法，其中该谷氨酸调节剂和该免疫性抗癌剂能够在第60天提供至少2.0的小鼠存活比(msr
60
)。
[0059]
18.一种用于调节用免疫性抗癌剂的患者中的谷氨酸的方法，其包括在临近该免疫性抗癌剂的时间使患者体内的谷氨酸受体或谷氨酸转运蛋白与谷氨酸调节剂接触。
[0060]
19.项18的方法，其中该谷氨酸调节剂是利鲁唑。
[0061]
20.项19的方法，其中该利鲁唑是静脉内、肌肉内、肠胃外、舌下、经鼻或口服给予的。
[0062]
21.项20的方法，其中将该利鲁唑以前药的形式给予。
[0063]
22.项21的方法，其中该前药具有下式：
[0064][0065]
23.项18的方法，其中使该谷氨酸受体或该谷氨酸转运蛋白与该谷氨酸调节剂接触是在用该免疫性抗癌剂之前、同时或之后进行。
[0066]
24.项18的方法，其中该临近时间是在用该免疫性抗癌剂的一(1)周内。
[0067]
25.一种使患有癌症的用免疫性抗癌剂的患者敏化的方法，其包括在临近该免疫性抗癌剂的时间向该患者给予有效量的谷氨酸调节剂。
[0068]
26.项25的方法，其中该敏化促进增强的抗肿瘤功效。
[0069]
27.项26的方法，其中通过增加的患者客观反应率或增加的患者反应持续时间来测量增强的抗肿瘤功效。
[0070]
28.项27的方法，其中该增强的抗肿瘤功效促进患者总体存活期的增加。
[0071]
29.项28的方法，其中在初次给予该免疫性抗癌剂后该患者展现出至少约10
个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约19个月、至少约20个月、至少约21个月、至少约22个月、至少约23 个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年、或至少约5年的总体存活期。
[0072]
30.项28的方法，其中该总体存活期是用有效量的免疫性抗癌剂但不用谷氨酸调节剂的患者的总体存活期的至少约1.1倍、至少约1.2 倍、至少约1.3倍、至少约1.4倍、至少约1.5倍、至少约2.0倍、至少约3.0 倍、或至少约3.0倍。
[0073]
31.一种用于改善患有癌症的用免疫性抗癌剂的患者的反应的方法，其包括向有需要的患者给予有效量的免疫性抗癌剂和利鲁唑或其前药。
[0074]
32.项31的方法，其中该免疫性抗癌剂是检查点抑制剂。
[0075]
33.项32的方法，其中该检查点抑制剂是选自pd-1、pd-l1和ctla-4的检查点受体的抑制剂。
[0076]
34.项31的方法，其中将该患者另外用选自以下的抗体：抗lag3抗体、抗cd137抗体、抗kir抗体、抗tgfp抗体、抗il-10抗体、抗b7-h4抗体、抗fas配体抗体、抗cxcr4抗体、抗间皮素抗体、抗cd20抗体、抗cd27 抗体、抗gitr抗体、抗ox40抗体或其任何组合。
[0077]
35.项31的方法，其中将该患者另外用放射疗法、化疗、疫苗、细胞因子、酪氨酸激酶抑制剂、抗vegf抑制剂、ido抑制剂、ido1抑制剂、tgf
‑ꢀ
β抑制剂或其任何组合。
[0078]
36.项31的方法，其中该癌症选自黑素瘤癌症，肾癌，前列腺癌，乳腺癌，结肠癌，肺癌，骨癌，胰腺癌，皮肤癌，头颈癌，皮肤或眼内恶性黑素瘤，子宫癌，卵巢癌，直肠癌，肛区癌，胃癌，睾丸癌，子宫癌，输卵管癌，子宫内膜癌，宫颈癌，阴道癌，外阴癌，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，食道癌，小肠癌，内分泌系统癌，甲状腺癌，甲状旁腺癌，肾上腺癌，软组织肉瘤，尿道癌，阴茎癌，包括急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病的慢性或急性白血病，儿童实体瘤，淋巴细胞性淋巴瘤，膀胱癌，肾或输尿管癌，肾盂癌，中枢神经系统(cns)肿瘤，原发性cns淋巴瘤，肿瘤血管生成，脊髓轴肿瘤，脑干胶质瘤，垂体腺瘤，卡波西肉瘤，表皮样癌，鳞状细胞癌，t细胞淋巴瘤，包括由石棉诱导的那些的环境诱导癌症，及其任何组合。
[0079]
37.项31的方法，其中该改善的反应是以下项中的一种或多种：总体存活期、生活质量、总反应率、反应持续时间、无进展存活期、患者报告结果、最小残留疾病或免疫应答。
[0080]
38.一种用于通过向有需要的患者给予根据项1-37中任一项的免疫性抗癌剂与谷氨酸调节剂的组合来癌症的药物组合物，该药物组合物包含有效量的谷氨酸调节剂和药学上可接受的载体。
[0081]
39.根据项1-37中任一项的谷氨酸调节剂在制备用于癌症的药物组合物中的用途。
[0082]
40.一种用于患有癌症的患者的试剂盒，该试剂盒包含：
[0083]
(a)免疫性抗癌剂；和
[0084]
(b)用于给予项1-37中任一项的方法中的免疫性抗癌剂与谷氨酸调节剂的组合的说明书。
[0085]
41.一种用于患有癌症的患者的试剂盒，该试剂盒包含：
[0086]
(a)谷氨酸调节剂；和
[0087]
(b)用于给予项1-37中任一项的方法中的谷氨酸调节剂与免疫性抗癌剂的组
合的说明书。
[0088]
42.项41的试剂盒，其中该谷氨酸调节剂是利鲁唑或其前药。
[0089]
43.项42的试剂盒，其中该前药具有下式：
[0090][0091]
44.项40的试剂盒，其中该免疫性抗癌剂选自纳武单抗、派姆单抗、吡地利单抗、度伐单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、伊匹单抗和替西木单抗。
[0092]
附图简述
[0093]
图1示出了实施例1中描述的测试的结果，显示了测试利鲁唑前药(bhv
‑ꢀ
4157)、抗pd-1抗体(单独和与对照组合)的胶质母细胞瘤动物模型中的存活率。
[0094]
图2示出了实施例1中具体实验的设计。
[0095]
发明详述
[0096]
提供以下详细描述以帮助本领域技术人员实施本发明。在不脱离本公开的精神或范围的情况下，本领域普通技术人员可以对本文所述的实施方案进行修改和变化。除非另外定义，否则在此所使用的所有技术和科学术语具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。说明书中使用的术语仅用于描述特定实施方案，而非旨在限制。
[0097]
如本技术中所使用的，除非本文另有明确规定，否则以下术语中的每一个应具有下文所述的含义。另外的定义在整个申请中阐述。在本文中没有具体定义术语的情况下，该术语由本领域普通技术人员在上下文中将该术语应用于其在描述本发明中的用途而给出了本领域公认的含义。
[0098]
除非上下文另有明确指示，否则冠词“一个”和“一种”指的是该冠词的一个/种或多于一个/种(即至少一个/种)语法对象。举例来说，“一个元素”意指一个元素或多于一个元素。
[0099]
术语“约”是指在本领域普通技术人员确定的特定值或组成的可接受误差范围内的值或组成，其部分取决于如何测量或确定值或组成，即测量系统的局限性。例如，根据本领域实践，“约”可表示在1个或多于1个标准偏差内。可替代地，“约”可以表示高达10％或20％(即
±
10％或
±
20％)的范围。例如，约3mg可包括2.7mg和3.3mg之间(10％)或2.4mg和3.6mg之间(20％)的任何数量。此外，特别是关于生物系统或过程，该术语可以表示高达一个数量级或高达5倍的值。当在本技术和权利要求中提供特定值或组成时，除非另有说明，否则应当假定“约”的含义在该特定值或组成的可接受的误差范围内。
[0100]
术语“als”是指肌萎缩侧索硬化症。
[0101]
术语“给予”是指使用本领域技术人员已知的任何不同方法和递送系统将包含剂的组合物物理引入受试者。例如，免疫检查点抑制剂(例如抗 pd-1抗体或抗pd-l1抗体)的给予途径可包括静脉内、肌肉内、皮下、腹膜内、脊柱或其他肠胃外给予途径，例如通过注射或输注。如本文所用的短语“肠胃外给药”意指除肠内和局部给药以外的给药方式，通常通过注射，包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、淋巴管内、病灶内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外以及胸
骨内注射和输注，以及体内电穿孔。在一些实施方案中，免疫性抗癌剂(例如免疫检查点抑制剂)是通过非肠胃外途径给予，在一些实施方案中，是口服给予。谷氨酸调节剂(例如利鲁唑)的典型给药途径可包括颊、鼻内、眼、口、渗透、肠胃外、直肠、舌下、局部、透皮或阴道。给予还可以例如进行一次、多次和/或经一个或多个延长的时间段，并且可以是有效剂量或亚剂量。
[0102]
术语“抗抗原”抗体是指但不限于与抗原特异性结合的抗体。例如，抗 pd-1抗体与pd-1特异性结合，并且抗ctla-4抗体与ctla-4特异性结合。
[0103]
术语抗体的“抗原结合部分”(也称为“抗原结合片段”)是指但不限于抗体的一个或多个片段，其保留与整个抗体结合的抗原特异性结合的能力。
[0104]
术语“抗体”(ab)是指但不限于糖蛋白免疫球蛋白(其特异性地结合抗原并包含通过二硫键相互连接的至少两条重(h)链和两条轻(l)链)，或其抗原结合部分。每条h链包含重链可变区(本文缩写为vh)和重链恒定区。重链恒定区包含三个恒定域，即c
h1
、c
h2
和c
h3
。每条轻链包含轻链可变区(本文缩写为v
l
)和轻链恒定区。轻链恒定区包含一个恒定域c
l
。vh和v
l
区域可以进一步细分为具有高变性的区域，称为互补决定区(cdr)，散布有更保守的区域，称为框架区(fr)。每个vh和v
l
包含三个cdr和四个fr，按照以下顺序从氨基末端到羧基末端排列：fr1，cdr1，fr2，cdr2，fr3，cdr3，fr4。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，包括免疫系统的各种细胞(例如效应细胞)和经典补体系统的第一组分(c1q)。
[0105]
免疫球蛋白可衍生自任何公知的同种型，包括但不限于iga、分泌型iga、 igg和igm。igg亚类也是本领域技术人员熟知的，包括但不限于人igg1、igg2、 igg3和igg4。“同种型”是指但不限于由重链恒定区基因编码的抗体类别或亚类(例如，igm或igg1)。在某些实施方案中，可以使同种型的一个或多个氨基酸突变以改变效应功能。举例来说，术语“抗体”包括天然存在的和非天然存在的ab；单克隆和多克隆ab；嵌合和人源化ab；人或非人ab；全合成 ab；和单链抗体。非人抗体可以通过重组方法人源化以降低其在人体内的免疫原性。在没有明确说明的情况下，除非上下文另有指示，否则术语“抗体”还包括任何上述免疫球蛋白的抗原结合片段或抗原结合部分，并且包括单价和二价片段或部分以及单链抗体。
[0106]
术语“auc”(曲线下面积)是指受试者吸收或暴露的药物总量。通常， auc可以通过数学方法在受试者中药物浓度随时间(直到浓度可忽略不计)的曲线图中获得。术语“auc”(曲线下面积)也可以指指定时间间隔的部分 auc(如可能是舌下吸收的情况，其会在较早的时间间隔增加auc)。
[0107]
术语“癌症”是指广泛的一组疾病，其特征在于体内异常细胞的不受控制的生长。不受调控的细胞分裂和生长导致恶性肿瘤的形成，其侵入邻近组织并且还可以通过淋巴系统或血流转移到身体的远端部分。“癌症”包括原发性、转移性和复发性癌症以及癌前病症，即与癌症风险增加相关的细胞无序形态的状态。术语“癌症”包括但不限于以下增殖性疾病：急性淋巴细胞性白血病(all)，急性髓性白血病(aml)，肾上腺皮质癌，儿童癌症，艾滋病相关癌，卡波西肉瘤，艾滋病相关淋巴瘤，原发性中枢神经系统淋巴瘤，肛门癌，星形细胞瘤，非典型畸胎样/横纹肌样瘤，基底细胞癌，皮肤癌(非黑素瘤)，胆管癌，膀胱癌，骨癌，尤文肉瘤家族肿瘤，骨肉瘤和恶性纤维组织细胞瘤，脑干胶质瘤，非典型畸胎样/横纹肌样瘤，胚胎性肿瘤，生殖细胞肿瘤，颅咽管瘤，室管膜瘤，乳腺癌，支气管癌，伯基特淋巴瘤，非霍奇
金淋巴瘤，类癌瘤，胃肠癌，心脏肿瘤，原发性淋巴瘤，宫颈癌，胆管癌，脊索瘤，慢性淋巴细胞白血病(cll)，慢性髓细胞性白血病(cml)，慢性骨髓增生性肿瘤，结肠癌，结肠直肠癌，颅咽管瘤，皮肤t细胞淋巴瘤，蕈样真菌病和塞加里综合征，导管原位癌(dcis)，胚胎性肿瘤，子宫内膜癌，室管膜瘤，食管癌，鼻腔神经胶质瘤，颅外生殖细胞肿瘤，性腺外生殖细胞肿瘤，眼癌，眼内黑素瘤，视网膜母细胞瘤，输卵管癌症，骨纤维组织细胞瘤，恶性肿瘤和骨肉瘤，胆囊癌症，胃癌，胃肠道类癌肿瘤，胃肠道间质肿瘤(gist)，生殖细胞肿瘤，卵巢癌，睾丸癌，妊娠滋养细胞疾病，胶质瘤，毛细胞白血病，头颈癌，肝细胞癌(肝癌)，组织细胞增多症，朗格汉斯细胞，霍奇金淋巴瘤，下咽癌，胰岛细胞肿瘤，胰腺神经内分泌肿瘤，卡波西肉瘤，肾脏，肾细胞，朗格汉斯细胞组织细胞增多症，喉癌，白血病，急性成淋巴细胞性白血病 (all)，急性髓性白血病(aml)，慢性淋巴细胞性白血病(cll)，慢性髓性白血病(cml)，毛细胞癌、唇癌和口腔癌，肝癌(原发性)，肺癌(非小细胞肺癌，小细胞肺癌)，淋巴瘤(霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤)，巨球蛋白血症，瓦尔登斯特伦病，男性乳腺癌，黑素瘤，梅克尔细胞癌，间皮瘤，具隐匿性原发灶的转移性鳞状颈癌，涉及nut基因的中线道癌，嘴癌，多发性内分泌肿瘤综合征，多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤，蕈样真菌病，骨髓增生异常综合征，骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤，髓细胞性白血病，慢性粒细胞白血病(cml)，髓性白血病，急性髓性白血病(aml)骨髓瘤，多发性骨髓增生性肿瘤，鼻腔和副鼻窦癌，鼻咽癌，神经母细胞瘤，非霍奇金淋巴瘤，非小细胞肺癌，口癌，口腔癌，唇和口咽癌，骨肉瘤和恶性骨纤维组织细胞瘤，卵巢癌，低度恶性潜能肿瘤，胰腺癌，胰腺神经内分泌肿瘤(胰岛细胞肿瘤)，乳头瘤样增生，副神经节瘤，副鼻窦和鼻腔癌，甲状旁腺癌，阴茎癌，鼻咽癌，嗜铬细胞瘤，垂体肿瘤，浆细胞肿瘤/多发性骨髓瘤，胸膜肺母细胞瘤，妊娠期乳腺癌，原发性cns淋巴瘤，原发性腹膜癌，前列腺癌，直肠癌，肾细胞癌(肾癌)，肾盂和输尿管癌，移行细胞癌，视网膜母细胞瘤，横纹肌肉瘤，唾液腺癌，横纹肌肉瘤，子宫癌，小肠癌，软组织肉瘤，鳞状细胞癌，具隐匿性原发灶的鳞状颈癌，转移性胃癌，t细胞淋巴瘤，睾丸癌，咽喉癌，胸腺瘤和胸腺癌 (thymoma and thymic carcinoma)，甲状腺癌，肾盂和输尿管的移行细胞癌，原发灶不明癌，输尿管和肾盂癌，移行细胞癌，尿道癌，子宫癌，子宫内膜癌，子宫肉瘤，阴道癌，外阴癌，瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症以及威尔姆氏瘤。
[0108]
术语“嵌合抗体”是指但不限于其中可变区衍生自一个物种并且恒定区衍生自另一物种的抗体，如其中可变区衍生自小鼠抗体并且恒定区衍生自人抗体的抗体。
[0109]
术语“cmax”是指在给予第一剂量和给予第二剂量之间，受试者的血液、血清、指定隔室或测试区域中药物的最大浓度。如果指定，术语cmax还可以指剂量标准化比率。
[0110]
术语“细胞毒性t-淋巴细胞抗原-4”(ctla-4)是指属于cd28家族的免疫抑制性受体。ctla-4仅在体内t细胞上表达，并与两种配体即cd80和 cd86(也分别称为b7-1和b7-2)结合。术语“ctla-4”包括人ctla-4(hctla
‑ꢀ
4)，hctla-4的变体、同种型和物种同源物，以及与hctla-4具有至少一个共同表位的类似物。完整的hctla-4序列可以在genbank登录号aab59385 下到。
[0111]
术语“给药间隔”是指在向受试者给予多剂量的本文公开制剂之间经过的时间量。因此，给药间隔可以指示为范围。
[0112]
术语“给药频率”是指在给定时间内本文公开制剂的剂量给予频率。给药频率可以指示为每给定时间的剂量数，例如每周一次或两周一次。
[0113]
术语“有效量”是指足以实现预期结果的量。有效量将根据受试者和所的疾病状态、病痛的严重程度和给药方式而变化，并且可由本领域普通技术人员常规确定。
[0114]
术语“平剂量(flat dose)”是指向患者给予的不考虑患者体重或体表面积 (bsa)的剂量。因此，平剂量不以mg/kg剂量提供，而是以药剂(例如抗pd-1 抗体)的绝对量提供。例如，60kg的人和100kg的人将接受相同剂量的抗体 (例如，240mg的抗pd-1抗体)。
[0115]
关于本发明组合物的术语“固定剂量”是指单一组合物中的两种或更多种不同剂以特定(固定)比例存在于组合物中。在一些实施方案中，固定剂量基于剂的重量(例如，mg)。在某些实施方案中，固定剂量基于两种抗体的浓度(例如，mg/ml)。在一些实施方案中，该比例为至少约1:1、约1: 2、约1:3、约1:4、约1:5、约1:6、约1:7、约1:8、约1:9、约1:10、约 1:15、约1:20、约1:30、约1:40、约1:50、约1:60、约1:70、约1:80、约1:90、约1:100、约1:120、约1:140、约1:160、约1:180、约1:200、约200:1、约180:1、约160:1、约140:1、约120:1、约100:1、约90:1、约80:1、约70:1、约60:1、约50:1、约40:1、约30:1、约20:1、约15: 1、约10:1、约9:1、约8:1、约7:1、约6:1、约5:1、约4:1、约3:1、或约2:1mg第一抗体:mg第二抗体。例如，3:1比例的第一抗体和第二抗体可以表示小瓶可以含有约240mg的第一抗体和80mg的第二抗体或约3mg/ml的第一抗体和1mg/ml的第二抗体。
[0116]
术语“人抗体”(humab)是指但不限于具有可变区的其中构架区和cdr 区均衍生自人种系免疫球蛋白序列的抗体。此外，如果抗体含有恒定区，则恒定区也衍生自人种系免疫球蛋白序列。本发明的人抗体可包括不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。然而，如本文所用，术语“人抗体”不旨在包括其中衍生自另一种哺乳动物物种(如小鼠)的种系的cdr序列已经被移植到人框架序列上的抗体。术语“人”抗体和“完全人”抗体同义使用。
[0117]“人源化抗体”是指但不限于其中非人抗体的cdr结构域外的一些、大部分或所有氨基酸被衍生自人免疫球蛋白的相应氨基酸替代的抗体。在人源化形式的抗体的一个实施方案中，cdr结构域外的一些、大部分或所有氨基酸已被来自人免疫球蛋白的氨基酸替代，而一个或多个cdr区内的一些、大部分或所有氨基酸未改变。氨基酸的少量添加、缺失、插入、取代或修饰是被允许的，只要它们不消除抗体结合特定抗原的能力即可。“人源化”抗体保留与原始抗体类似的抗原特异性。
[0118]
术语“免疫性抗癌剂”、“免疫剂”和“免疫肿瘤学药剂”是指不直接攻击肿瘤而是通过受试者的适应性或先天免疫来动员免疫系统的药剂，并且这些药剂包括广泛范围的药剂，包括例如抗体、肽、蛋白质、小分子、佐剂、细胞因子、溶瘤病毒、疫苗、双特异性分子和细胞疗法。免疫性抗癌剂包括靶向免疫系统以产生抗癌效果的任何药剂。此类靶标和药剂包括但不限于：抗pd-1、抗pd-l1、抗ctla4或其他免疫疗法或检查点抑制剂靶标。
[0119]
术语“免疫疗法”是指通过包括诱导、增强、抑制或以其他方式修饰免疫应答的方法患有疾病或者处于感染疾病或遭受疾病复发风险下的受试者。
[0120]
术语“免疫相关的”反应模式是指在用免疫剂的癌症患者中经常观察到的临床反应模式，所述免疫剂通过诱导癌症特异性免疫应答或通过修饰天然免疫过程产生抗肿瘤作用。该反应模式的特征在于在肿瘤负荷初始增加或新病变出现之后的有益效果，其在传统化学剂的评估中将被分类为疾病进展并且将与药物失效同义。因此，
对免疫剂的适当评估可能需要长期监测这些药剂对靶标疾病的影响。
[0121]
术语“与......组合”和“与......结合”是指除了另一种模态之外还给予一种方式。因此，“与......组合”或“与......结合”是指在向受试者给予另一种模态之前、期间或之后给予一种模态。
[0122]“分离的抗体”是指但不限于基本上不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体(例如，与pd-1特异性结合的分离的抗体基本上不含与pd-1以外的抗原特异性结合的抗体)。然而，与pd-1特异性结合的分离的抗体可以与其他抗原(例如来自不同物种的pd-1分子)具有交叉反应性。此外，分离的抗体可以基本上不含其他细胞物质和/或化学物质。
[0123]
术语“单克隆抗体”(“mab”)是指但不限于具有单一分子组成的抗体分子的非天然存在的制剂，即其一级序列基本相同并且展现出单一结合特异性和对特定表位的亲和力的抗体分子。mab是分离的抗体的例子。mab可以通过杂交瘤、重组、转基因或本领域技术人员已知的其他技术产生。
[0124]
术语“小鼠存活比”，也称为“msr
x”，是指通过除以以下计算的值：根据实施例1中就此所述的程序在将肿瘤植入小鼠后的“x”天数的时间段的(i) 用免疫性抗癌剂加谷氨酸调节剂的小鼠的存活百分比，(ii)用单独的免疫性抗癌剂的小鼠的存活百分比。因此，msr
60
是指肿瘤植入后60天时的小鼠存活比。
[0125]
术语“药学上可接受的盐”是指本文所述的一种或多种化合物或前药的盐形式，其用于增加化合物在患者胃肠道的胃或胃肠液中的溶解度，以促进这些化合物的溶解和生物利用度。药学上可接受的盐包括衍生自药学上可接受的无机或有机碱和酸的盐，如果适用的话。合适的盐包括衍生自以下的那些盐：碱金属如钾和钠，碱土金属如钙，镁和铵盐，以及制药领域熟知的许多其他酸和碱。
[0126]
程序性死亡-1(pd-1)”是指属于cd28家族的免疫抑制性受体。pd-1主要在体内先前活化的t细胞上表达，并与两种配体即pd-l1和pd-l2结合。如本文所用的术语“pd-1”包括人pd-1(hpd-1)，hpd-1的变体、同种型和物种同源物，以及与hpd-1具有至少一个共同表位的类似物。完整的hpd-1序列可以在genbank登录号u64863下到。
[0127]
程序性死亡配体-1(pd-l1)是pd-1的两种细胞表面糖蛋白配体之一(另一种是pd-l2)，其在结合pd-1时下调t细胞活化和细胞因子分泌。如本文所用的术语“pd-l1”包括人pd-l1(hpd-l1)，hpd-l1的变体、同种型和物种同源物，以及与hpd-l1具有至少一个共同表位的类似物。完整的hpd-l1序列可以在genbank登录号q9nzq7下到。
[0128]
术语“前药”是指药物的前体，其可以以改变的或活性较低的形式给予。前药可以通过水解或其他代谢途径在生理环境中转化为活物形式。t. higuchi和v.stella,pro-drugs as novel delivery systems(1987)14 of the a.c.s. symposium series和bioreversible carriers in drug design,(1987)edward b. roche编,american pharmaceutical association and pergamon press中提供了前药的讨论。
[0129]
术语“舌下给药”是指通过将化学药剂或药物置于受试者的舌下而给予化学药剂或药物的途径。
[0130]
术语“受试者”和“患者”是指任何人或非人动物。术语“非人动物”包括但不限于脊椎动物，如非人灵长类动物、绵羊、狗和啮齿动物，如小鼠、大鼠和豚鼠。在一些实施方案中，受试者是人。术语“受试者”和“患者”在本文中可互换使用。
[0131]
术语“亚剂量”是指比在单独给予用于疾病(例如，癌症)时剂(例如，抗体或谷氨酸调节剂)的通常或典型剂量低的剂量的剂。在本发明的一些方面，有效量可包括亚剂量的免疫性抗癌剂或谷氨酸调节剂，或两者。
[0132]
术语“有效量”、“有效剂量”和“有效剂量”的药剂(在本文中有时也称为“药物”)是指当单独使用或与另一种药物组合使用时，由降低疾病症状的严重程度、增加疾病无症状期的频率和持续时间、或预防由于疾病病痛引起的损伤或伤残证明的，保护受试者免于疾病发作或促进疾病消退的任何量的药剂。可以使用本领域技术人员已知的各种方法评估药剂促进疾病消退的能力，例如在临床试验期间的人类受试者中，在预测人类中功效的动物模型系统中，或通过测定药剂在体外测定中的活性。在某些实施方案中，有效量完全预防癌症的发展或复发。“抑制”癌症的发展或复发意指减少癌症发展或复发的可能性，或者完全预防癌症的发展或复发。
[0133]
术语“tmax”是指给药后在受试者的血液、血清、指定隔室或测试区域中达到最大浓度(cmax)时的时间或时间段。
[0134]
术语“”是指受试者中的病症或疾病的任何，并且可以包括： (i)预防该疾病或病症发生于可能易患该疾病但尚未被诊断为患有该疾病的受试者中；(ii)抑制该疾病或病症，即阻止其发展；缓解该疾病或病症，即引起该病症消退；或(iii)改善或缓解由该疾病引起的病症，即疾病的症状。可以与其他标准疗法组合使用或单独使用。受试者的或“疗法”还包括对受试者进行的任何类型的干预或处理，或向受试者给予药剂，目的是逆转、减轻、改善、抑制、减缓或预防症状、并发症或病症或者与疾病相关的生化指标的发作、进展、发展、严重程度或复发。
[0135]
术语“基于体重的剂量”是指基于患者的体重计算的向患者给予的剂量。例如，当体重为60kg的患者需要3mg/kg的抗pd-1抗体与1mg/kg的抗ctla
‑ꢀ
4抗体组合时，可以一次从抗pd-1抗体和抗ctla-4的3:1比例固定剂量给药制剂中吸取适量的抗pd-1抗体(即180mg)和抗ctla-4抗体(即60mg)。
[0136]
根据本发明优选使用免疫检查点抑制剂。优选的免疫检查点抑制剂包括提供所希望功效和安全性的抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体和抗ctla-4抗体或其任何组合。在一些实施方案中，抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体或其抗原结合部分是嵌合、人源化或人单克隆抗体或其部分。在用于人受试者的某些实施方案中，抗体是人源化抗体。在用于人受试者的其他实施方案中，抗体是人抗体。可以使用igg1、igg2、igg3或igg4同种型的抗体。
[0137]
适于根据本发明使用的优选免疫检查点抑制剂包括以高特异性和亲和力结合pd-1，阻断pd-l1的结合并抑制pd-1信号传导通路的免疫抑制作用的抗pd-1抗体。在本文公开的任何方法中，抗pd-1或抗pd-l1抗体包括分别与pd-1或pd-l1受体结合并展现出与完整抗体在抑制配体结合和上调免疫系统上相似的功能特性的抗原结合部分。在一个实施方案中，抗pd-1抗体是纳武单抗。在一个实施方案中，抗pd-1抗体是派姆单抗。在其他实施方案中，抗pd-1抗体选自美国专利号8,008,449中所述的人抗体17d8、2d3、4h1、 4a11、7d3和5f4。在其他实施方案中，抗pd-1抗体是medi0608(以前称为 amp-514)、amp-224或bgb-a317或吡地利单抗(ct-011)。
[0138]
可根据本发明使用的抗pd-1抗体还包括与人pd-1特异性结合并与另一抗体例如纳武单抗交叉竞争结合人pd-1的分离的抗体。抗体交叉竞争结合抗原的能力指示这些抗体
结合抗原的相同表位区域并且在空间上阻碍其他交叉竞争抗体与该特定表位区域的结合。由于它们结合pd-1的相同表位区域，预期这些交叉竞争抗体具有与这种抗体(例如纳武单抗)非常相似的功能特性。在标准pd-1结合测定(如biacore分析、elisa测定或流式细胞术)中，可以基于它们与这种抗体(例如纳武单抗)交叉竞争的能力容易地鉴定交叉竞争抗体 (参见例如wo 2013/173223)。对于向人受试者给予，这些交叉竞争抗体可以是嵌合抗体或者人源化或人抗体。可通过本领域熟知的方法制备和分离此类嵌合、人源化或人mab。
[0139]
可用于本发明方法的抗pd-1抗体还包括上述抗体的抗原结合部分。抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段进行。包含在抗体的抗原结合部分内的结合片段的例子包括(i)fab片段，即由v
l
、vh、c
l
和c
h1
结构域组成的单价片段；(ii)f(ab
″
)2片段，即包含在铰链区由二硫键连接的两个fab片段的二价片段；(iii)由vh和c
h1
结构域组成的fd片段；以及(iv)由单臂抗体的v
l
和vh结构域组成的fv片段。
[0140]
可以根据本发明使用igg1、igg2、igg3或igg4同种型的抗体。在某些实施方案中，抗pd-1抗体或其抗原结合部分包含重链恒定区，其为人igg1或 igg4同种型。在某些其他实施方案中，抗pd-1抗体或其抗原结合部分的igg4 重链恒定区的序列含有s228p突变，该突变用通常在igg1同种型抗体中的相应位置发现的脯氨酸残基替代铰链区中的丝氨酸残基。存在于纳武单抗中的该突变阻止fab臂与内源igg4抗体的交换，同时保留对活化与野生型igg4抗体相关的fc受体的低亲和力。参见，例如，wang等人(2014)。在其他实施方案中，抗体包含轻链恒定区，其为人κ或λ恒定区。在其他实施方案中，抗pd
‑ꢀ
1抗体或其抗原结合部分是mab或其抗原结合部分。
[0141]
抗pd-1和抗pd-l1靶向相同的信号传导途径，并且已经在临床试验中显示在多种癌症(包括rcc)中展现出相似水平的功效。参见，例如，brahmer等人(2012)n engl j med 366:2455-65；topalian等人(2012a)n engl j med 366:2443-54；wo 2013/173223)。因此，在本文公开的任何方法中，抗 pd-l1抗体可以取代抗pd-1抗体。在某些实施方案中，抗pd-l1抗体是bms
‑ꢀ
936559(以前称为12a4或mdx-1105)(参见，例如，美国专利号7,943,743；wo 2013/173223)。在其他实施方案中，抗pd-l1抗体是mpdl3280a(也称为 rg7446)。参见，例如，herbst等人(2013)j clin oncol 31(suppl):3000andabstract；美国专利号8,217,149。在其他实施方案中，抗pd-l1抗体是 medi4736。参见，例如，khleif(2013)：proceedings from the european cancercongress 2013；9月27日-10月1日,2013；amsterdam,the netherlands.abstract802)。在一些实施方案中，用于本发明的免疫检查点抑制剂，例如抗pd-1拮抗剂，是pd-1fc融合蛋白。
[0142]
适于根据本发明使用的优选免疫检查点抑制剂还包括抗ctla-4抗体。抗ctla-4抗体与人ctla-4结合，从而破坏ctla-4与人b7受体的相互作用。由于ctla-4与b7的相互作用转导导致携带ctla-4受体的t细胞失活的信号，因此相互作用的破坏有效地诱导、增强或延长这种t细胞的活化，从而诱导、增强或延长免疫反应。
[0143]
在美国专利号6,984,720和7,605,238中公开了以高亲和力特异性结合 ctla-4的humab。其他ctla-4mab已在例如美国专利号5,977,318、 6,051,227、6,682,736和7,034,121中描述。美国专利号6,984,720和7,605,238中公开的ctla-4humab已经证明展现出以下一个或多个特征：(a)特异性结合人ctla-4，如通过biacore分析测定的，结合亲和力由至少约107m-1
、或约109m-1
、或约10
10
m-1
至10
11
m-1
或更高的平衡缔合常数(k
α
)反映；(b)动力学缔合
常数(ka)为至少约103、约104或约105m-1
s-1
；(c)动力学解离常数(kd) 为至少约103、约104或约105m-1
s-1
；以及(d)抑制ctla-4与b7-1(cd80)和 b7-2(cd86)的结合。优选用于本发明的抗ctla-4抗体包括与人ctla-4特异性结合并展现出至少一种、至少两种、或(在一个实施方案中)至少三种前述特征的mab。在一个实施方案中，抗ctla-4抗体是伊匹单抗。伊匹单抗是适用于本文公开的方法的抗ctla-4抗体。伊匹单抗是完全人igg1单克隆抗体，其阻断ctla-4与其b7配体的结合，从而刺激t细胞活化并优选改善癌症患者 (例如晚期黑素瘤)的总体存活期(os)。可用于本发明方法的另一种抗ctla-4 抗体是替西木单抗(也称为cp-675,206)。替西木单抗是人igg2单克隆抗 ctla-4抗体。替西木单抗描述于例如wo 2012/122444、美国公开号 2012/263677和wo 2007/113648 a2中。
[0144]
可用于本发明的公开方法的抗ctla-4抗体还包括与人ctla-4特异性结合并与伊匹单抗或替西木单抗交叉竞争结合人ctla-4或与伊匹单抗或替西木单抗相同的人ctla-4表位区域结合的分离的抗体。在某些实施方案中，与伊匹单抗或替西木单抗交叉竞争结合人ctla-4或与伊匹单抗或替西木单抗相同的人ctla-4表位区域结合的抗体是包含人igg1同种型重链的抗体。对于向人受试者给予，这些交叉竞争抗体是嵌合抗体或者人源化或人抗体。可用的抗ctla-4抗体还包括上述抗体的抗原结合部分，例如fab、f(ab
″
)2、 fd或fv片段。
[0145]
淋巴细胞活化基因-3(lag-3)抑制剂也适于根据本发明使用。lag-3包括人lag-3(hlag-3)，hlag-3的变体、同种型和物种同源物，以及与hlag-3 具有至少一个共同表位的类似物。术语“人lag-3”是指人序列lag-3，例如具有genbank登录号np_002277的人lag-3的完整氨基酸序列。术语“小鼠 lag-3”是指小鼠序列lag-3，例如具有genbank登录号np_032505的小鼠 lag-3的完整氨基酸序列。lag-3在本领域中也称为例如cd223。人lag-3 序列与genbank登录号np_002277的人lag-3的区别可在于具有例如保守突变或非保守区域中的突变，并且该lag-3与genbank登录号np_002277的人 lag-3具有基本相同的生物学功能。例如，人lag-3的生物学功能是在lag
‑ꢀ
3的细胞外结构域中具有如下表位，其被本公开的抗体特异性结合，或者人 lag-3的生物学功能是与mhc ii类分子结合。在例如wo 2015/042246和美国公开号2014/0093511和2011/0150892中公开了结合lag-3的抗体。可用于本发明的示例性lag-3抗体是25f7(描述于美国公开号2011/0150892中)。可用于本发明的另外的示例性lag-3抗体是bms-986016。在一个实施方案中，可用于本发明的抗lag-3抗体与25f7或bms-986016交叉竞争。在另一个实施方案中，可用于本发明的抗lag-3抗体结合与25f7或bms-986016相同的表位。在其他实施方案中，抗lag-3抗体包含25f7或bms-986016的六个cdr。
[0146]
靶向抗cd137的药剂可适于根据本发明使用。抗cd137抗体特异性结合并活化表达cd137的免疫细胞，刺激针对肿瘤细胞的免疫应答，特别是细胞毒性t细胞应答。结合cd137的抗体已在美国公开号2005/0095244和美国专利号7,288,638、6,887,673、7,214,493、6,303,121、6,569,997、6,905,685、6,355,476、 6,362,325、6,974,863和6,210,669中公开。在一些实施方案中，抗cd137抗体是乌瑞鲁单抗(bms-663513)，描述于美国专利号7,288,638(20h4.9-igg4 [10c7或bms-663513])中。在一些实施方案中，抗cd137抗体是bms
‑ꢀ
663031(20h4.9-igg1)，描述于美国专利号7,288,638中。在一些实施方案中，抗cd137抗体是4e9或bms-554271，描述于美国专利号6,887,673中。在一些实施方案中，抗cd137抗体是
美国专利号7,214,493；6303121；6,569,997； 6,905,685；或6,355,476中公开的抗体。在一些实施方案中，抗cd137抗体是 1d8或bms-469492；3h3或bms-469497；或3e1，描述于美国专利号6,362,325 中。在一些实施方案中，抗cd137抗体是在授权的美国专利号6,974,863中公开的抗体(如53a2)。在一些实施方案中，抗cd137抗体是在授权的美国专利号6,210,669中公开的抗体(如1d8、3b8或3e1)。在一些实施方案中，抗体是辉瑞公司(pfizer)的pf-05082566(pf-2566)。在其他实施方案中，可用于本发明的抗cd137抗体与本文公开的抗cd137抗体交叉竞争。在一些实施方案中，抗cd137抗体与本文公开的抗cd137抗体结合相同的表位。
[0147]
靶向kir的药剂可适于根据本发明使用。术语“杀伤细胞ig样受体”、“杀伤细胞抑制性受体”或“kir”是指由作为kir基因家族的成员的基因编码或由从这种基因制备的cdna编码的蛋白质或多肽。关于kir基因家族的详细综述，包括kir基因和kir基因产物的命名以及示例性kir的genbank登录号，是m.carrington和p.norman的“the kir gene cluster”，其可在称为bookshelf 的ncbi网站上获得(可在ncbi.nlm.nih.gov/books上访问)。术语kir包括人 kir(hkir)，hkir的变体、同种型和物种同源物，以及与hkir具有至少一个共同表位的类似物。人类kir基因和cdna的序列以及它们的蛋白质产物可在公共数据库(包括genbank)中获得。人kir的非限制性示例性genbank条目具有以下登录号：kir2dl1：genbank登录号u24076，nm_014218，aar16197 或l41267；kir2dl2：genbank登录号u24075或l76669；kir2dl3：genbank 登录号u24074或l41268；kir2dl4：genbank登录号x97229；kir2ds 1： genbank登录号x89892；kir2ds2：genbank登录号l76667；kir2ds3： genbank登录号nm o 12312或l76670(剪接变体)；kir3dl1：genbank登录号 l41269；和kir2ds4：genbank登录号aar26325。kir可以包含1至3个细胞外结构域，并且可以具有长(即，多于40个氨基酸)或短(即，少于40个氨基酸) 的胞质尾区。kir在国际公开号wo 2014/055648中进一步描述。抗kir抗体的例子已在wo 2014/055648、wo 2005/003168、wo 2005/009465、wo2006/072625、wo 2006/072626、wo 2007/042573、wo 2008/084106、wo2010/065939、wo 2012/071411和wo 2012/160448中公开。可用于本发明的一种抗kir抗体是wo 2008/084106中公开的利丽单抗(也称为bms-986015， iph2102，或1-7f9的s241p变体)。可用于本发明的另一种抗kir抗体是1
‑ꢀ
7f9(也称为iph2101)，描述于wo 2006/003179中。
[0148]
靶向gitr的药剂可适于根据本发明使用。术语“gitr”、“肿瘤坏死因子受体超家族成员18”、“活化诱导型tnfr家族受体”和“糖皮质激素诱导的t fr相关蛋白”均指作为肿瘤坏死因子受体超家族的成员的蛋白质。gitr 由人类的tnfrsf18基因编码。它是241个氨基酸的i型跨膜蛋白，其特征在于细胞外结构域中的三个半胱氨酸假重复，并且特异性地保护t细胞受体诱导的细胞凋亡，尽管它不保护细胞免于其他凋亡信号，包括fas触发、地塞米松、或uv照射。参见，例如，nocentini,g等人(1997)proc.natl.acad.sci, usa94:6216-622)。术语gitr包括人gitr(hgitr)，hgitr的变体、同种型和物种同源物，以及与hgitr具有至少一个共同表位的类似物。已经鉴定了三个hgitr同种型，除了其c末端部分外，它们都享有相同的细胞外结构域。变体1(登录号np_004186)由241个氨基酸组成，并且代表最长的转录物。与变体2相比，它含有导致帧移位的额外编码段。与同种型2相比，所得蛋白质(同种型1)含有不同且较短的c末端。变体2(登录号np 683699)编码最长的蛋白质 (同种型2)，由255个氨基酸组成，并且是可溶的。与变体2相比，变体3(登录号np 683700)含有导致帧移位
的额外编码段。与同种型2相比，所得蛋白质(同种型3)含有不同且较短的c末端，并且由234个氨基酸组成。gitr活化增加效应t细胞的增殖和功能，以及消除由活化的t调节细胞诱导的抑制。此外， gitr刺激通过增加其他免疫细胞如nk细胞、抗原呈递细胞和b细胞的活性来促进抗肿瘤免疫。抗gitr抗体的例子已在wo 2015/031667、wo2015/184,099、wo 2015/026,684、wo 2006/105021、美国专利号7,812,135和 8,388,967以及美国公开号2009/0136494、2014/0220002、2013/0183321和 2014/0348841中公开。在一个实施方案中，可用于本发明的抗gitr抗体是 trx518(描述于例如schaer等人curr opin immunol.(2012)4月；24(2):217-224 和wo 2006/105021中)。在另一个实施方案中，可用于本发明的抗gitr抗体是mk4166或mk1248以及wo 2011/028683和u.s.8,709,424中描述的抗体，并且包含例如含有seq id no:104的vh链和含有seq id no:105的vl链，其中这些seq id no来自wo 2011/028683或u.s.8,709,424)。在某些实施方案中，抗gitr抗体是wo 2015/031667中公开的抗gitr抗体，例如包含分别含有wo 2015/031667的seq id no:31、71和63的vh cdr 1-3以及含有wo2015/031667的seq id no:5、14和30的vl cdr 1-3的抗体。在某些实施方案中，抗gitr抗体是wo 2015/184099中公开的抗gitr抗体，例如抗体hum23 \#\或hum231#2，或其cdr，或其衍生物(例如，pabl967、pabl975或pabl979)。在某些实施方案中，抗gitr抗体是在jp 2008278814、wo 09/009116、wo2013/039954、us 20140072566、us 20140072565、us 20140065152或wo2015/026684中公开的抗gitr抗体，或者是inbrx-110(inhibrx)、lkz
‑ꢀ
145(诺华公司(novartis))、或medi-1873(米迪缪尼公司(medlmmune))。在某些实施方案中，抗gitr抗体是pct/us 2015/033991中描述的抗gitr抗体(例如，包含28f3、18e10或19d3的可变区的抗体)。
[0149]
尽管并非旨在提供可能适合于根据本发明使用的所有免疫肿瘤学药剂的详尽清单，但以下列出了许多可商购或正在开发的药剂。可适于根据本发明使用的pd-1抗体的例子包括例如派姆单抗、纳武单抗、amp-224、 medi0680、amp-514和regn2810。可适于根据本发明使用的pd-l1抗体的例子包括例如阿特珠单抗、mdx-1105、aurvalumab、阿维单抗。可适于根据本发明使用的ctla-4抗体的例子包括例如伊匹单抗和替西木单抗。可适于根据本发明使用的kir抗体的例子包括例如利丽单抗和nnc0141-0000-0100。可适于根据本发明使用的lag3抗体的例子包括例如bms-986016、imp321和 mk-4280。可适于根据本发明使用的gitr抗体的例子包括例如trx518、mk
‑ꢀ
4166和mk-1248。可适于根据本发明使用的ox40抗体的例子包括例如 medi6383、medi6469和moxr0916。可适于根据本发明使用的ido/ido1剂的例子包括例如indoximod、incb024360、f001287和ngl919。可适于根据本发明使用的tgf-β剂的例子包括例如sotaracept、fresolimumab、trabedersen、 lucanix、ly2157299和ace-536。可适于根据本发明使用的cd137抗体的例子包括例如乌瑞鲁单抗和utomilumab。可适于根据本发明使用的cd289/tlt9剂的例子是mgn1703。可适于根据本发明使用的muc-1/cd227剂的例子包括例如ont-10和asn-004。可适用于根据本发明的ccf2药剂的例子是pf
‑ꢀ
04136309。可适于根据本发明使用的cd27抗体的例子包括例如varlilumab和 amg172。可适合根据本发明使用的cd40抗体的例子是达西珠单抗。可适合根据本发明使用的slamf7/cs1抗体的例子是埃罗珠单抗。可适合根据本发明使用的cd20剂的例子是di-leu16-il2。可适合根据本发明使用的cd70剂的例子是argx-110。可适于根据本发明使用的il-10剂的例子包括例如 am0010和mk-1966。可适于根据本发明使用的psa剂的例子是前列腺素。可适于根
据本发明使用的gp100抗体的例子是mdx-1379。可适合根据本发明使用的stat3剂的例子是azd9150。可适于根据本发明使用的il-12剂的例子包括例如veledimex、inxn-2001、msb0010360n、免疫脉冲、gen-1和ino
‑ꢀ
9012。可适于根据本发明使用的il-2剂的例子包括例如msb0010445和 rg7813/ro6895882。可适合根据本发明使用的il-33剂的例子是警报素il-33。可适合根据本发明使用的m-csf剂的例子是pd-0360324。可适用于根据本发明的htert剂的例子是ino-1400。可适合根据本发明使用的smac模拟剂的例子是birinapant。可适合根据本发明使用的immtac剂的例子是imcgp100。可适用于根据本发明的cd-40剂的例子是ro7009789。可适合根据本发明使用的cd39剂的例子是iph52。可适合根据本发明使用的ceacam1剂的例子是mk-6018。
[0150]
靶向vegf的药剂可适于根据本发明使用。血管内皮生长因子(“vegf”) 是内皮细胞特异性丝裂原和血管生成的诱导物。vegf在血管生成和肿瘤生长与发育中具有突出的作用。在某些实施方案中，抗vegf拮抗剂是抗vegf 抗体、抗原结合分子或其片段。在某些实施方案中，抗vegf抗体是贝伐单抗(描述于美国专利号7,169,901中)，或本领域已知的任何其他vegf抗体，包括雷珠单抗(美国专利号7,297,334)、vgx-100(美国专利号7,423,125)、r84(美国专利号8,034,905)、阿柏西普(美国专利号5,952,199)、imc-18f1(美国专利号7,972,596)、imc-1c11(pct/us 2000/02180)和雷莫芦单抗(美国专利号 7,498,414)。
[0151]
靶向alk的药剂可适于根据本发明使用。alk抑制剂作用于具有间变性淋巴瘤激酶(alk)变异(如eml4-alk易位)的肿瘤。可根据本发明使用的 alk抑制剂包括克唑替尼(辉瑞公司；xalkori
tm
，pf-02341066)，其结构描述于who drug information,第25卷,第1期,第54页(201 1)；瑞替尼(诺华公司；zykadia
tm
，ldk378)，其结构描述于who drug information,第28卷, 第1期,第79页(2014)；和艾乐替尼(罗氏公司(roche)/中外公司(chugai)； alecensa
tm
，ro542802，ch542802)，其结构描述于who drug information, 第27卷,第3期,第70页(2013)。alk抑制剂的其他例子包括，例如，pf
‑ꢀ
06463922(辉瑞公司)，nvp-tae684(诺华公司)，ap261 13(阿瑞雅德公司 (ariad))，tsr-01 1(tesaro)，x-396(xcovery)，cep-37440(瑟法隆公司 (cephalon)/梯瓦公司(teva))和rxdx-101(igynta；nms-e628，nerviano)。参见，例如，wang等人,med.chemmun.2014,5:1266。克唑替尼是间变性淋巴瘤激酶(alk)及其致癌变体(即alk融合事件和选定的致癌alk突变)的抑制剂，以及肝细胞生长因子受体(hgfr、c-met)、c-ros癌基因1(ros1)及其致癌变体、recepteur d'origine nantais(ron)受体酪氨酸激酶(rtk)、ltk、 trk(trka、trkb、trkc)和/或胰岛素受体。xalkori
tm
(克唑替尼)在美国已被批准用于转移性非小细胞肺癌(nsclc)患者，其肿瘤为间变性淋巴瘤激酶(alk)阳性，如经fda批准的测试检测的，并且在欧洲、日本和其他司法管辖区已被批准用于alk阳性nsclc。克唑替尼及其药学上可接受的盐描述于wo 2006/021884、wo 2006/021881和wo 2007/066185以及美国专利号7,858,643、8,217,057和8,785,632中。在wo 2007/06617和美国专利号 7,825,137中描述了克唑替尼在由alk或c-met/hgfr介导的异常细胞生长(如癌症)中的用途。克唑替尼在ros介导的癌症中的用途描述于wo2013/017989中。
[0152]
其他抗体可适于根据本发明使用。在一些实施方案中，其为抗tgfβ抗体，如wo 2009/073533中所公开的。在一些实施方案中，抗体是抗il-10抗体，如 wo 2009/073533中所公开的。在一些其他实施方案中，抗体是抗b7-h4抗体，如wo 2009/073533中所公开的。在
某些实施方案中，抗体是抗fas配体抗体，如wo 2009/073533中所公开的。在一些实施方案中，抗体是抗cxcr4抗体，如美国公开号2014/0322208中所公开的(例如，ulocuplumab(bms-936564))。在一些实施方案中，抗体是抗间皮素抗体，如美国专利号8,399,623中所公开的。在一些实施方案中，抗体是抗her2抗体，例如赫赛汀(美国专利号 5,821,337)、曲妥珠单抗或ado-曲妥珠单抗(ado-trastuzumabemtansine)(kadcyla，例如wo 2001/000244)。在实施方案中，抗体是抗cd27 抗体。在实施方案中，抗cd-27抗体是varlilumab(也称为“cdx-1127”和“1f5”)，其是人igg1抗体，为人cd27的激动剂，如例如美国专利号9,169,325中所公开的。在一些实施方案中，抗体是抗cd73抗体。在某些实施方案中，抗cd73 抗体是cd73.4.igg2c219s.iggl。
[0153]
除了上述抗体之外，适于根据本发明使用的其他免疫性抗癌剂包括从以下模态起作用的那些，这些模态包括肽、蛋白质、小分子、佐剂、细胞因子、溶瘤病毒、疫苗、双特异性分子和细胞剂。
[0154]
根据本发明，可以使用另外的肿瘤学疗法和药剂，包括例如手术、放射、用其他药剂、抗体和化疗。
[0155]
在一些实施方案中，免疫剂与本领域已知的任何化疗组合给予。在某些实施方案中，化疗是基于铂的化疗。基于铂的化疗是铂的配位络合物。在一些实施方案中，基于铂的化疗是铂-双联化疗。在一个实施方案中，化疗以特定指征的批准剂量给予。在一些实施方案中，基于铂的化疗是顺铂、卡铂、奥沙利铂、赛特铂、吡铂、奈达铂、三铂、铂脂质体(lipoplatin)或其组合。在某些实施方案中，基于铂的化疗是本领域已知的任何其他基于铂的化疗。在一些实施方案中，化疗是核苷酸类似物吉西他滨。在一个实施方案中，化疗是叶酸抗代谢物。在一个实施方案中，叶酸抗代谢物是培美曲塞。在某些实施方案中，化疗是紫杉烷。在其他实施方案中，紫杉烷是紫杉醇。在其他实施方案中，化疗是核苷类似物。在一个实施方案中，核苷类似物是吉西他滨。在一些实施方案中，化疗是本领域已知的任何其他化疗。
[0156]
在某些实施方案中，免疫剂与酪氨酸激酶抑制剂组合给予。在某些实施方案中，酪氨酸激酶抑制剂是吉非替尼、厄洛替尼、其组合或本领域已知的任何其他酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施方案中，酪氨酸激酶抑制剂作用于表皮生长因子受体(egfr)。在某些实施方案中，免疫剂与布鲁顿酪氨酸激酶(btk)抑制剂组合给予。可用于癌症的btk抑制剂包括美国专利号8,940,725(yamamoto等人)和美国专利号7,514,444(honigberg等人)、u.s. 2015/0118222(levy等人)和wo 2017/059224中所传授的那些。
[0157]
用于不同类型癌症的标准照护疗法是本领域技术人员所熟知的。例如，作为美国21个主要癌症中心联盟的国家综合癌症网络(nccn)发布了肿瘤学 nccn临床实践指南(nccn guidelines
tm
)，其提供了有关针对多种癌症的标准照护疗法的详细最新信息(参见nccn guidelines，2014)。
[0158]
对于肿瘤的，举例来说，相对于未的受试者或者(在某些实施方案中)相对于用标准照护疗法的患者，有效量的免疫剂可将细胞生长或肿瘤生长抑制至少约10％、至少约20％、至少约40％、至少约60％或至少约80％。在本发明的其他实施方案中，可以观察到肿瘤消退并持续至少约20天、至少约40天或至少约60天的时间。不论这些有效性的最终测量，免疫药物的评估还必须考虑“免疫相关的”反应模式。
[0159]
本发明提供了使用一种或多种免疫性抗癌剂(例如抗pd-1抗体)作为单一疗法或与其他抗癌剂和谷氨酸调节剂组合癌症的方法。在一个实施方案中，癌症是实体瘤。在另一个实施方案中，癌症是原发性癌症。在其他实施方案中，癌症是转移性或复发性癌症。在一些实施方案中，受试者是人类患者。在某些实施方案中，受试者是初次化疗的患者(例如，之前未接受任何化疗的患者)。在其他实施方案中，受试者已接受另一种癌症疗法(例如，化疗)，但对此另一种癌症疗法来说是有抗性的或难治性的。
[0160]
调整剂量方案以提供最佳的所希望反应，例如最大反应和/或最小副作用。在某些实施方案中，本发明的方法可以适用平剂量或基于体重的剂量。在进一步的实施方案中，免疫剂以平剂量给予。在进一步的实施方案中，免疫剂以基于体重的剂量给予。对于给予抗pd-1抗体，作为单一疗法或与另一种抗癌剂组合，剂量范围可以为约0.01至约20mg/kg、约0.1至约10 mg/kg、约0.1至约5mg/kg、约1至约5mg/kg、约2至约5mg/kg、约7.5至约12.5 mg/kg、或约0.1至约30mg/kg受试者体重或者约80mg至至少800mg、约80mg 至约700mg、约80mg至约600mg、约80mg至约500mg、约80mg至约400 mg、约80mg至约300mg、约100mg至约300mg、或约200mg至约300mg。例如，剂量可以为约0.1、约0.3、约1、约2、约3、约5或约10mg/kg体重，或约0.3、约1、约2、约3、或约5mg/kg体重；或约80mg、约100mg、约160mg、约200mg、约240mg、约300mg、约320mg、约400mg、约500mg、约600 mg、约700mg、或约800mg。给药方案典型地被设计为基于抗体的典型药代动力学特性实现导致持续受体占用(ro)的暴露。示例性方案需要每周给予约一次、约每2周一次、约每3周一次、约每4周一次、约一个月一次、约3
‑ꢀ
6个月或更长时间一次。在某些实施方案中，约每2周一次向受试者给予抗pd
‑ꢀ
1抗体如纳武单抗。在其他实施方案中，抗体约每3周给予一次。剂量和时间安排可在过程中改变。例如，抗pd-1单一疗法的给药方案可包括给予ab： (i)在约6周周期中，约每2周一次；(ii)约每4周一次，持续约6剂，然后约每三个月一次；(iii)约每3周一次；(iv)约3-约10mg/kg一次，随后每约2-3周约1mg/kg。考虑到igg4抗体典型地具有2-3周的半衰期，本发明的抗pd-1抗体通过静脉内给予的剂量方案包含至少约0.3至至少约10mg/kg体重、至少约1 至至少约5mg/kg体重、或至少约1至至少约3mg/kg体重或至少约80至至少约 800mg，每约14-21天，最多约6周或约12周的周期给予抗体，直至完全反应或证实进展性疾病。在某些实施方案中，抗pd-1单一疗法以每2周3mg/kg给予，直至进展性疾病周，直至进展性或不可接受的毒性。在一些实施方案中，抗体或本文公开的任何组合持续至少约1个月、至少约3个月、至少约6个月、至少约9个月、至少约1年、至少约18个月、至少约24个月、至少约 3年、至少约5年、或至少约10年。免疫性抗癌剂的剂量的其他例子可以是约1-100mg/kg；例如，1mg/kg、2mg/kg、5mg/kg、7.5mg/kg、10mg/kg、 20mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg、100mg/kg或任何中间值。
[0161]
当与其他癌症药剂组合使用时，与单一疗法剂量相比，可以降低免疫剂的剂量。例如，纳武单抗的低于典型的3mg/kg但不低于0.001mg/kg的剂量是亚剂量。本文方法中使用的抗pd-1抗体的亚剂量高于0.001 mg/kg且低于3mg/kg。在一些实施方案中，亚剂量为约0.001mg/kg-约1 mg/kg、约0.01mg/kg-约1mg/kg、约0.1mg/kg-约1mg/kg、或约0.001mg/kg
‑ꢀ
约0.1mg/kg体重。在一些实施方案中，亚剂量为至少约0.001mg/kg、至少约0.005mg/kg、至少约0.01mg/kg、至少约0.05mg/kg、至少约0.1mg/kg、至少约0.5mg/kg、或至少约1.0mg/kg体重。在一些实施方案中，亚平剂量少于每2周约240mg，例如每
两周约160mg或约80mg。来自15名接受0.3 mg/kg至10mg/kg纳武单抗给药的受试者的受体占用率数据指示pd-1占用率在该剂量范围内似乎是剂量依赖性的。在所有剂量中，占用率均值为85％(范围，70％至97％)，平稳期占用率均值为72％(范围，59％至81％)(brahmer等人 (2010)j clin oncol 28:3167-75)。在一些实施方案中，0.3mg/kg剂量可以允许充分暴露以导致最大的生物活性
[0162]
在某些实施方案中，免疫剂的剂量是药物组合物中的固定剂量。在其他实施方案中，本发明的方法可以适用平剂量(向患者给予的剂量，无论患者的体重如何)。例如，平剂量的纳武单抗可以是约240mg。例如，平剂量的派姆单抗可以是约200mg。在一些实施方案中，抗pd-1抗体或其抗原结合部分以约240mg的剂量给予。在一些实施方案中，抗pd-1抗体或其抗原结合部分以约360mg的剂量给予。在实施方案中，抗pd-1抗体或其抗原结合部分以约480mg的剂量给予。在一个实施方案中，每3周一次给予360mg抗pd-1抗体或抗原结合片段。在另一个实施方案中，每4周一次给予480mg抗pd-1抗体或抗原结合片段。
[0163]
伊匹单抗(yervoy
tm
)被批准用于黑素瘤，每3周一次静脉内以3 mg/kg给予，持续4剂。在某些实施方案中，抗ctla-4抗体的剂量是平剂量，其被给予患者，无论患者的体重如何。在具体实施方案中，抗ctla-4抗体的平剂量为约80mg。
[0164]
因此，在一些实施方案中，约3mg/kg是与抗pd-1抗体组合使用的伊匹单抗的最高剂量，但在某些实施方案中，当与抗pd-1抗体(例如纳武单抗)组合时，抗ctla-4抗体如伊匹单抗可以在约每两周或三周约0.3至约10mg/kg、约0.5至约10mg/kg、约0.5至约5mg/kg、或约1至约5mg/kg体重的范围内给药。在其他实施方案中，伊匹单抗以与抗pd-1抗体不同的剂量方案给予。在一些实施方案中，伊匹单抗约每周、约每两周、约每三周、约每四周、约每五周、约每六周、约每七周、约每八周、约每九周、约每十周、约每十一周、约每十二周或约每十五周给予一次。
[0165]
伊匹单抗的低于典型的每3周3mg/kg但不低于0.001mg/kg的剂量是亚剂量。本文方法中使用的抗ctla-4抗体的亚剂量高于0.001mg/kg且低于3mg/kg。在一些实施方案中，亚剂量为约0.001mg/kg-约1mg/kg、约0.01mg/kg-约1mg/kg、约0.1mg/kg-约1mg/kg、或约0.001mg/kg-约0.1 mg/kg体重。在一些实施方案中，亚剂量为至少约0.001mg/kg、至少约 0.005mg/kg、至少约0.01mg/kg、至少约0.05mg/kg、至少约0.1mg/kg、至少约0.5mg/kg、或至少约1.0mg/kg体重。在某些实施方案中，抗pd-1抗体或抗 pd-l1抗体和抗ctla-4抗体的组合在诱导期中向受试者约每2或3周静脉内给予一次，持续1、2、3或4次给予。在某些实施方案中，抗pd-1抗体和抗pd
‑ꢀ
l1抗体的组合在诱导期中约每2周或约每3周静脉内给予一次，持续约4次给予。诱导期之后是维持期，在此期间仅约每两周或三周以约0.1、约0.3、约1、约2、约3、约5或约10mg/kg或约40mg、约80mg、约100mg、约160mg、约 200mg、约240mg、约320mg或约400mg的剂量向受试者给予抗pd-1抗体或抗pd-l1抗体，只要证明是有效的或直到发生无法控制的毒性或疾病进展。在某些实施方案中，在维持期期间约每2周以约3mg/kg体重或约240mg 的剂量给予纳武单抗。
[0166]
在某些实施方案中，抗pd-1抗体或抗pd-l1抗体的剂量是具有第二抗癌剂的药物组合物中的固定剂量。在某些实施方案中，将抗pd-1抗体或抗pd
‑ꢀ
l1抗体和抗ctla-4抗体配制为单一组合物，其中抗pd-1抗体或抗pd-l1抗体和抗ctla-4抗体的剂量以1:50、1:40、1:30、1:20、1:10、1:5、1: 3、1:1、3:1、5:1、10:1、20:1、30:1、40:1或50:1的比例组合。
[0167]
对于免疫剂与其他抗癌剂的组合，这些药剂典型地以其批准的剂量给予。只要观察到临床益处或直至发生不可接受的毒性或疾病进展，就继续。然而，在某些实施方案中，给予的这些抗癌剂的剂量显著低于批准的剂量，即，亚剂量的该药剂与免疫剂组合给予。
[0168]
在某些实施方案中，将免疫性抗癌剂与特定类型癌症的标准照护疗法组合给予。在进一步的实施方案中，免疫性抗癌剂与化疗组合给予，包括5-fu、依托泊苷和基于铂的药物，例如卡铂或顺铂。在一些实施方案中，免疫性抗癌剂在放射疗法之前、同时或之后给予。在一些实施方案中，免疫性抗癌剂在手术切除之前、同时或之后给予。
[0169]
剂量和频率根据受试者中免疫性抗癌剂的半衰期而变化。通常，人抗体显示出最长的半衰期，其次是人源化抗体、嵌合抗体和非人抗体。给药的剂量和频率可以根据是预防性还是性而变化。在预防性应用中，典型地以相对不频繁的间隔长时间给予相对低的剂量。一些患者在余生持续接受。在性应用中，有时需要间隔相对短的相对高的剂量，直到疾病的进展减少或终止，或直到患者显示疾病症状的部分或完全改善。此后，可以向患者给予预防性方案。
[0170]
可以改变本发明药物组合物中一种或多种活性成分的实际剂量水平，以便获得有效于实现针对特定患者、组合物和给药方式的所希望反应的量的活性成分，而不会对患者造成过度毒性。所选的剂量水平将取决于多种药代动力学因素，包括所采用的本发明特定组合物的活性，给药途径，给药时间，所采用的特定化合物的排泄速率，持续时间，与所采用的特定组合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料，所患者的年龄、性别、体重、病况、一般健康状况和既往病历，以及医学领域中熟知的类似因素。本发明的包含免疫剂的组合物可以使用本领域熟知的多种方法中的一种或多种通过一种或多种给药途径给予。如本领域技术人员所理解的，给药途径和 /或方式将根据所希望的结果而变化。
[0171]
本发明的免疫剂可以由组合物构成，例如含有抗体和药学上可接受的载体的药物组合物。如本文所用，“药学上可接受的载体”包括生理上相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。在一个实施方案中，含有抗体的组合物的载体适用于静脉内、肌肉内、皮下、肠胃外、脊柱或表皮给予(例如，通过注射或输注)，而含有肽、蛋白质、小分子、佐剂、细胞因子、溶瘤病毒、疫苗、双特异性分子和细胞剂的组合物的载体可适用于非肠胃外给予，例如口服给予。本发明的药物组合物可包括一种或多种药学上可接受的盐、抗氧化剂、水性和非水性载体、和/或佐剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。
[0172]
适于根据本发明使用的谷氨酸调节剂包括以下任何药剂：(a)促进调节、调控、减弱或加强：(i)促离子型谷氨酸受体；(ii)促代谢型谷氨酸受体；或 (iii)谷氨酸转运蛋白；(b)抑制谷氨酸释放；或(c)调节、调控、减弱或加强谷氨酸或谷氨酰胺的代谢。促离子型谷氨酸受体包括nmda、ampa和钾盐镁矾。促代谢型谷氨酸受体包括来自以下的那些：组1受体，包括mglur1 和mglur5；组ii，包括mglur2和mglur3；和组iii，包括mglur4、mglur6、 mglur7和mglur8。谷氨酸转运蛋白可以在神经胶质或神经元中表达。优选地，谷氨酸调节剂：(i)正常化患者的谷氨酸水平；(ii)减弱或正常化患者的谷氨酸释放；或(iii)正常化、增强或加强患者中谷氨酸的摄取。谷氨酸调节剂可通过增加兴奋性氨基酸转运蛋白的表达引起谷氨酰胺/谷氨酸水平的降低或增加谷氨酸的循环，导致在减少增殖和效应功能上的减少。
[0173]
优选的谷氨酸调节剂选自利鲁唑、美金刚、n-乙酰半胱氨酸、金刚烷胺、托吡酯、普瑞巴林、拉莫三嗪、、s-、azd8108、azd 6765(拉尼西明)、bhv-4157(trigriluzole)、右美沙芬、av-101、cerc-301、gly-13及其药学上可接受的盐、前药或类似物。利鲁唑目前在市场上可以买到，因为(利鲁唑)可以从新泽西州布里奇沃特的赛诺菲-安万特公司 (sanofi-aventis)获得，并具有下文所示的结构。
[0174][0175]
除非另有说明，术语“利鲁唑”还指所有前药、对映体或衍生物及其药学上可接受的盐。术语“利鲁唑前药”是指作为来自利鲁唑的其中具有修饰的衍生物的化合物。利鲁唑前药也可以指由身体代谢成利鲁唑活性形式的化合物。
[0176]
某些优选的利鲁唑前药具有以下结构：
[0177][0178]
包括对映体、非对映异构体、水合物、溶剂化物、其药学上可接受的盐和络合物，其中：
[0179]r23
选自由以下组成的组中：h、ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch2cch、 ch(ch3)2、ch2ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch2och2ph、 ch2ch2och2ph、ch(oh)ch3、ch2ph、ch2(环己基)、ch2(4-oh-ph)、 (ch2)4nh2、(ch2)3nhc(nh2)nh、ch2(3-吲哚)、ch2(5-咪唑)、ch2co2h、 ch2ch2co2h、ch2conh2和ch2ch2conh2。本领域技术人员将认识到，类似或变体前药可以由其他谷氨酸调节剂制成。这些药剂可用作本发明组合的一部分。
[0180]
一种尤其优选的谷氨酸调节剂trigriluzole具有下式：
[0181][0182]
在例如美国专利申请序列号14/385,551、美国专利申请序列号14/410,647、 pct申请序列号pct/us 2016/019773和pct申请序列号pct/us 2016/019787 中描述了利鲁唑的前药。提供稳定性和优异性质的利鲁唑的舌下制剂描述于 pct申请序列号pct/us 2015/061106和pct申请序列号pct/us 2015/061114 中。
[0183]
谷氨酸调节剂可以作为本文详述的同位素标记形式的化合物存在。同位素标记的化合物具有由本文给出的式表示的结构，除了一个或多个原子被具有选定原子质量或质量数的原子替代。可以掺入本公开内容的化合物中的同位素的例子包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如但不限于2h(氘、d)、3h(氚)、nc、
13
c、
14
c、
15
n、
18
f、
31
p、
32
p、
35
s、ci和i。提供
了本公开文本的各种同位素标记的化合物，例如其中掺入放射性同位素如3h、
13
c和
14
c 的那些。这种同位素标记的化合物可用于代谢研究、反应动力学研究、检测或成像技术，如正电子发射断层扫描(pet)或单光子发射计算机断层扫描 (spect)，包括药物或底物组织分布测定，或用于受试者(例如人类)的放射性。还提供了本文所述的同位素标记的化合物，视情况而定，是任何药学上可接受的盐或水合物。
[0184]
在一些变化形式中，本文公开的化合物可以如下变化，使得与碳原子附接的1至“n”个氢被氘替代，其中“n”是分子中氢的数目。这些化合物可以展现出增加的代谢抗性，并且因此当给予受试者时可用于增加化合物的半衰期。参见，例如，foster,"deuterium isotope effects in studies of drugmetabolism",trends pharmacol.sci.5(12):524-527(1984)。这些化合物通过本领域熟知的手段合成，例如通过采用其中一个或多个氢被氘取代的原料。
[0185]
本公开内容的氘标记或取代的性化合物可具有改善的药物代谢和药代动力学(dmpk)性质，涉及吸收、分布、代谢和排泄(adme)。用较重的同位素如氘取代因为代谢稳定性更高而可以提供某些优势，例如体内半衰期延长、剂量需求减少和/或指数改善。
18
f标记的化合物可用于pet或 spect研究。本公开内容的同位素标记的化合物通常可以通过进行本领域技术人员已知的方法，通过用容易获得的同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂来制备。应理解，在本文中氘被认为是本文提供的化合物中的取代基。
[0186]
这种较重同位素(特别是氘)的浓度可以通过同位素富集因子来定义。在本公开内容的化合物中，未特别指定为特定同位素的任何原子意指代表该原子的任何稳定同位素。除非另有说明，否则当位置特别指定为“h”或“氢”时，该位置应理解为处于其天然丰度同位素组成的氢。
[0187]
本发明的谷氨酸调节剂可以通过口服、舌下、鼻内、颊、皮下或任何其他合适的递送方式给予。谷氨酸调节剂可以是前药(其在体内释放药剂)、持续释放媒介物、延迟释放媒介物的形式或任何其他合适的递送形式。谷氨酸调节剂和免疫剂可以同时或依次递送。如果顺序递送药剂，则可以首先给予任一药剂，并且时间的分离可以包括在开始另一药剂的剂量之前完成一种药剂的给予，或者可以将它们及时混合。典型地，谷氨酸调节剂是在临近免疫性抗癌剂给药的时间给予，例如在免疫性抗癌剂之前或之后1 周、1天、1小时、1分钟内给予或与免疫性抗癌剂同时给予。
[0188]
与待给予的免疫剂一起使用的谷氨酸调节剂的剂量可取决于待的受试者，包括其年龄、性别、体重和一般健康状况。在这方面，要给予的药剂的精确量将取决于从业者的判断。在确定在或减少与所述症状和障碍相关的病症中给予的谷氨酸调节剂和免疫剂的有效量时，医师可以评估临床因素，包括症状严重程度或障碍的进展。在某些情况下，快速吸收谷氨酸调节剂或免疫剂可能是理想的。的有效量将根据受试者和所的疾病状态、病痛的严重程度和给药方式而变化，并且可由本领域普通技术人员常规确定。
[0189]
作为用于癌症或症状的制剂的一部分的谷氨酸调节剂可以按等于或低于约400mg/天、等于或低于约300mg/天，等于或低于约150mg/天、等于或低于约100mg/天、等于或低于约70mg/天、等于或低于约60mg/天、等于或低于约50mg/天、等于或低于约42.5mg/天、等于或低于约37.5mg/天、等于或低于约35mg/天、等于或低于约20mg/天、等于或低于约
17.5mg/天、等于或低于约15mg/天、等于或低于约10mg/天、等于或低于约5mg/天、或等于或低于约1mg/天给药。
[0190]
本发明的包含谷氨酸调节剂的药物组合物典型地还包含其他药学上可接受的载体和/或赋形剂，例如粘合剂、润滑剂、稀释剂、包衣、崩解剂、屏障层组分、助流剂、着剂、溶解度增强剂、胶凝剂、填充剂、蛋白质、辅因子、乳化剂、增溶剂、悬浮剂及其混合物。本领域技术人员将了解根据本发明的制剂中可包含哪些其他药学上可接受的载体和/或赋形剂。赋形剂的选择将取决于组合物的特性和制剂中其他药理活性化合物的性质。适当的赋形剂是本领域技术人员已知的(参见handbook of pharmaceutical excipients,fifthedition,2005 edited by rowe等人,mcgraw hill)并且已经用于产生具有意想不到的性质的新型舌下制剂。
[0191]
可用于制备本发明药物组合物的药学上可接受的载体的例子可包括但不限于填充剂，如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；纤维素制剂，如玉米淀粉，小麦淀粉，大米淀粉，马铃薯淀粉，明胶，黄蓍胶，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，聚乙烯吡咯烷酮(pvp)，滑石，硫酸钙，植物油，合成油，多元醇，海藻酸，磷酸盐缓冲溶液，乳化剂，等渗盐水，无热原水及其组合。如果希望，也可以组合崩解剂，并且示例性崩解剂可以是但不限于交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐(如海藻酸钠)。组合物可以通过任何药学方法制备，但所有方法包括使一种或多种如上所述的化学药剂与构成一种或多种必需成分的载体缔合的步骤。通常，本发明的药物组合物可以用本领域已知的常规方法制备，例如，通过常规的混合、溶解、制粒、制糖衣、磨细、乳化、包封、包埋、冻干过程等。谷氨酸调节剂如利鲁唑及其药学上可接受的盐可以使用本领域熟知的药学上可接受的载体配制成适于舌下、鼻内或口腔给予的剂量。这些载体使谷氨酸调节剂能够配制成剂型，例如片剂、粉末、丸剂、胶囊、液体、凝胶、薄膜、糖浆、浆液、悬浮液等。
[0192]
一些谷氨酸调节剂可以舌下给予。pct申请号pct/us 2015/061106和 pct申请号pct/us 2015/061114描述了利鲁唑(一种优选的谷氨酸调节剂)的舌下制剂。该舌下制剂可以以有效量给予有需要的受试者。受试者可以是动物或人。当谷氨酸调节剂被制备成舌下制剂时，舌下给予的化学药剂或药物可以通过舌下的粘膜扩散到毛细血管中，并且然后进入受试者的静脉循环。因此，舌下给药可优于口服给药，因为其允许直接或更快地进入静脉循环，没有胃肠道降解的风险、肝脏中药物代谢的改变等。
[0193]
可用于本发明的舌下制剂包含有效量的利鲁唑或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异头物、对映体、水合物或前药。该制剂为利鲁唑提供足够的溶解度，以便以相对大的剂量掺入舌下制剂中并且舌下递送。该制剂优选是利鲁唑的改良口腔崩解制剂。将赋形剂(包括甘露糖醇和明胶)共混，用水溶解并脱气，之后与分别研磨的活物成分(或“api”)利鲁唑混合。api的粒度(d50)小于约2微米。通过快速冷冻将混合物冻干，并且然后冷冻干燥。该制剂具有良好的口服适口性。可用于本发明的舌下制剂中的谷氨酸调节剂的达到较低剂量的有效量可以小于口服给予的量。此外，谷氨酸调节剂的舌下制剂的有效剂量可以是口服给予药剂的约1％至95％。就可以制备免疫剂的舌下制剂而言，它也可以具有改善的性质。
[0194]
在本发明的一方面，将谷氨酸调节剂提供在处于口服溶解或崩解片剂 (odt)形式的舌下制剂中。如本文所用的odt可以通过将谷氨酸调节剂和/或免疫剂与水溶性稀释
剂混合并在片剂中压制来制备。可以用合适的赋形剂制备包含活性产物的悬浮液，并且可以将悬浮液分配到泡罩包装中并冷冻干燥。可用于odt的示例性冷冻干燥制备平台是(康泰伦特公司(catalent)，美国新泽西州萨默塞特)制剂。特别地，将赋形剂(包括水)共混，并将谷氨酸调节剂分别研磨至应有大小并与赋形剂混合。然后通过快速冷冻和冷冻干燥对悬浮液进行冻干。可以使用(非限制性)制备odt的其他方法，并且以下中已经公开了其一般方法的详细描述，例如，美国专利号5,631,023； 5,837,287；6,149,938；6,212,791；6,284,270；6,316,029；6,465,010；6,471,992； 6,471,992；6,509,040；6,814,978；6,908,626；6,908,626；6,982,25l；7,282,217； 7,425,341；7,939,105；7,993,674；8,048,449；8,127,516；8,158,152；8,221,480； 8,256,233和8,313,768，其中每一个都通过引用以其整体并入本文。一些谷氨酸调节剂可以舌下给予。pct申请号pct/us 2015/061106和pct申请号 pct/us 2015/061114描述了利鲁唑(一种优选的谷氨酸调节剂)的舌下制剂。该舌下制剂可以以有效量给予有需要的受试者。受试者可以是动物或人。
[0195]
如通过标准测试参数测量的，舌下配制的谷氨酸调节剂的临床或效果可以具有改善的药剂药代动力学特征。当舌下给予谷氨酸调节剂时，与相同剂量的相同化合物的口服给予形式相比，可以改善药物的tmax、cmax和 auc。例如，谷氨酸调节剂的舌下制剂可具有比口服给予的谷氨酸调节剂更大的cmax，以提供有益效果。谷氨酸调节剂的舌下制剂可具有比口服给予的谷氨酸调节剂更早或更少的tmax，以提供有益效果，并且在一些情况下，具有更快的效果。可替代地，谷氨酸调节剂的舌下制剂可以比口服给予的谷氨酸调节剂具有更高的每毫克药剂auc。此外，由于谷氨酸调节剂可以使免疫剂更有效，可能需要更少量的免疫剂来实现相同的结果，同时减少固有的副作用。
[0196]
在一方面，本发明提供癌症的方法，其包括向有需要的受试者舌下给予有效量的谷氨酸调节剂或其药学上可接受的盐和抗癌免疫剂或其药学上可接受的盐或前药。这两种药物的组合可以作为组合产品以单一剂量给予，使用相同或不同的形式同时给予，或使用相同或不同递送形式顺序给予。例如，如果可以将它们制成片剂或者舌下形式的一部分，则可以一起给予它们。类似地，如果免疫剂只能通过注射给予(推注或静脉注射)，并且谷氨酸调节剂可以以相同的形式给予，这也可以用于同时或顺序给药。然而，如果免疫剂只能通过注射递送(例如，如果它是抗体)，并且谷氨酸调节剂可以作为片剂或舌下递送，则两种药剂的递送可以通过不同的形式进行。关于免疫剂和谷氨酸调节剂的具体给予方式的进一步细节可由本领域普通技术人员确定。
[0197]
识别需要这种的受试者可以是受试者或卫生保健专业人员的判断，并且可以是主观的(例如，意见)或客观的(例如，可通过测试或诊断方法测量)。所鉴定的受试者可以是有需要的动物或人，特别是人。这种适合给予患有该疾病的受试者，特别是人。
[0198]
组合产品的效果，特别是当它适用于症状时，可以明显在给予它后约几分钟至约一小时内发生。特别地，效果可以在给药后约1分钟内、约2分钟内、约3分钟内、约4分钟内、约5分钟内、约6分钟内、约7分钟内、约8分钟内、约9分钟内、约10分钟内、约11分钟内、约12分钟内、约13 分钟内、约14分钟内、约15分钟内、约16分钟内、约17分钟内、约18分钟内、约内20分钟、约60分钟内、或约90分钟内开始。然而，在给药后数周或数月内可能不会长期治愈或改善疾病。
[0199]
对症状的影响可以维持给药后约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6
小时、约7小时、约8小时、9小时、约10小时、约12小时、约14 小时、约16小时、约18小时、约20小时、约22小时、约24小时、约2天或约3 天或更多。有希望的是，一旦实现对疾病状态的长期影响，该疾病和该症状将被永久消除。
[0200]
谷氨酸调节剂的典型剂量频率包括每天一次、一天两次、一天三次、一天四次、每隔一天一次、每周一次、一周两次、一周三次、一周四次、每两周一次、每月一次或两次等。
[0201]
在某些实施方案中，本发明的免疫疗法(例如，给予抗pd-1抗体或抗 pd-l1抗体和任选的另一种抗癌剂)与谷氨酸调节剂的组合有效地增加了受试者的存活持续时间。在一些实施方案中，与标准照护疗法相比，本发明的组合疗法增加了受试者的存活持续时间。在某些实施方案中，本发明的疗法增加了受试者的总体存活期。在一些实施方案中，受试者在给药后展现出至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约19个月、至少约20个月、至少约21个月、至少约22个月、至少约23个月、至少约 2年、至少约3年、至少约4年、或至少约5年的总体存活期。在一些实施方案中，与仅用标准照护疗法的另一个受试者相比，受试者的存活持续时间或总体存活期增加至少约5％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约40％、至少约50％或至少约75％。在其他实施方案中，与仅用标准照护疗法的另一个受试者相比，受试者的存活持续时间或总体存活期增加至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约6个月、至少约1年、至少约18个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年或至少约5年。
[0202]
在某些实施方案中，本发明的组合疗法有效地增加了受试者的无进展存活期的持续时间。例如，与仅用标准照护疗法的另一个受试者相比，受试者的无进展存活期增加至少约2周、至少约1个月、至少约2个月、至少约3 个月、至少约4个月、至少约6个月、或至少约1年。在某些实施方案中，与标准照护疗法后的反应率相比，在给予免疫剂(例如，抗pd-1抗体或抗pd
‑ꢀ
l1抗体疗法)与谷氨酸调节剂的组合后，受试者展现出至少约30％、35％、36％、 37％、39％、40％、45％或50％的总体反应率。
[0203]
在某些实施方案中，本发明的组合疗法提供改善的反应，其可以是例如总体存活期、生活质量、总体反应率、反应持续时间、无进展存活期、患者报告结果、微小的残留疾病或免疫反应中的一种或多种。
[0204]
优选的谷氨酸调节剂是利鲁唑，并且优选的免疫剂是检查点抑制剂，如抗pd-1抗体。似乎谷氨酸调节剂可使癌细胞对抗癌剂如免疫剂更易感。此外，谷氨酸调节剂可使患者敏化以使免疫剂的更有效。
[0205]
包含免疫剂(例如，抗pd-1抗体或抗pd-l1抗体)和/或谷氨酸调节剂 (例如利鲁唑)和任选地用于用途的另一种抗癌剂的试剂盒也在本发明的范围内。试剂盒典型地包括标签，其指示试剂盒内容物的预期用途和使用说明。术语标签包括在试剂盒上或与试剂盒一起提供的任何书写或记录材料，或者试剂盒以其他方式附带的材料。在用于人类患者的某些实施方案中，试剂盒包含本文公开的抗人pd-1抗体或抗人pd-l1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗。在其他实施方案中，试剂盒包含本文公开的抗人ctla-4抗体，例如伊匹单抗或替西木单抗。在其他实施方案中，试剂盒包含谷氨酸调节剂，例如利鲁唑或trigrilozole。
[0206]
已经显示多种实体恶性肿瘤过度表达磷酸盐依赖性谷氨酰胺酶(gls)，其将谷氨
酰胺转化为谷氨酸，进一步强调了谷氨酰胺在癌症代谢中的作用。然而，谷氨酸是关键的氮“废物”库，并且在多种细胞代谢途径中是关键的。因此，免疫细胞的谷氨酰胺/谷氨酸水平降低可降低增殖和效应功能，从而限制抗肿瘤免疫介导的反应。虽然这种效果对于产生gls的肿瘤细胞是明显的，但是在许多其他肿瘤细胞上发现谷氨酸受体，并且认为这种联合疗法对这些细胞也是有效的。
实施例
[0207]
以下实施例说明了本发明，但非旨在限制本发明的范围。在一些例子中，使用的缩写是本领域技术人员已知的，或者可以从实施例中引用的文献中容易地获得，例如欧洲药品管理局公布的产品特征概述(summaryofproductcharacteristics)。
[0208]
实施例1：
[0209]
在该实施例中，将谷氨酸调节剂bhv-4157与免疫剂抗pd-1组合的组合的效果与基本上如zeng,j.等人,intjradiatoncolbiolphys.,2013june1；86(2):343-349(其部分在下文中重现)中描述的胶质瘤模型中的单独任一项进行比较。
[0210]
细胞
[0211]
使gl261-luc细胞在杜尔贝科氏改良伊格培养基(dmem)+10％胎牛血清+1％青霉素中在37℃下在维持在5％co和5％o2(吉博科公司(gibco))的潮湿培养箱中生长。
[0212]
肿瘤模型
[0213]
4至6周龄或6至8周龄的雌性c57bl/6j小鼠(harlan)用于原位胶质瘤实验，如sonabendam,velicus,ulasoviv等人asafetyandefficacystudyoflocaldeliveryofinterleukin12transgenebyppcpolymerinamodelofexperimentalglioma.anticancerdrugs.2008；19:133
–
142所述。为了建立同基因胶质瘤，经1分钟将1μl体积的130,000个gl261-luc细胞立体定向地注射到左侧纹状体中下列坐标：1mm前部，前囟外侧1mm，以及距皮质表面3mm深。在植入后第7、21和35天通过荧光素酶成像监测肿瘤负荷，并且基于肿瘤辐射将小鼠随机分配到组中，使得每组中的平均肿瘤辐射大致相当。这些动物在出现神经功能缺陷的预定迹象(无法走动、体重减轻》20％体重、嗜睡、缩成一团的姿势)时会被安乐死。肿瘤摄取率为100％。在存活实验中每组有6到10只小鼠。所有实验至少重复三次。
[0214]
抗pd-1抗体
[0215]
使用产生抗小鼠pd-1单克隆抗体的仓鼠杂交瘤g4来产生抗体，如hiranof,kanekok,tamurah等人blockadeofb7-h1andpd-1bymonoclonalantibodiespotentiatescancertherapeuticimmunity.cancerres.2005；65:1089
–
1096所述。
[0216]
具体方案
[0217]
将4至6周龄的雌性c57bl/6j小鼠按每只130,000个gl261细胞颅内植入于左侧纹状体中。根据约翰霍普金斯大学动物设施(johnshopkinsuniversityanimalfacility)的机构动物护理和使用委员会议定书(institutionalanimalcareandusecommitteeprotocol)饲养和维持小鼠。在第7、21和35天通过生物发光成像(珀金埃尔默公司(perkinelmer))对小鼠成像以评估肿瘤负荷并随机分配至组，每组10只小鼠，如下：
[0218]
1.对照
[0219]
2.抗pd-1
[0220]
3.trigriluzole 15mg/kg
[0221]
4.trigriluzole 30mg/kg
[0222]
5.trigriluzole 45mg/kg
[0223]
6.抗pd-1+trigriluzole 15mg/kg
[0224]
7.抗pd-1+trigriluzole 30mg/kg
[0225]
8.抗pd-1+trigriluzole 45mg/kg
[0226]
方案如图2所示。
[0227]
第0天代表颅内植入的日期。对照组1未接受。在第10、12、14天，对照组2通过腹膜内注射按200μg/动物的剂量单独接受αpd-1。对照组3、4和 5在第10天开始每天通过腹膜内注射以15、30和45mg/kg(分别)的剂量单独接受bhv-4157。对照组6、7和8在第10天开始每天通过腹膜内注射以15、30和 45mg/kg(分别)的剂量接受bhv-4157，并且在第10、12、14天通过腹膜内注射以200μg/动物的剂量接受αpd-1。
[0228]
当小鼠通过ivis成像显示没有肿瘤负荷时终止。根据包括中枢神经系统紊乱、缩成一团的姿势、嗜睡、体重减轻和无法走动的人道终点对动物实施安乐死。
[0229]
该实验的目的是观察联合疗法是否提供超出单独的任一疗法的益处。结果在图1中示出。如从图1中明显可见，组合疗法明显好于任何单独的疗法，并且效果不仅是加和的，而是显现为协同的。因此，似乎谷氨酸调节剂对谷氨酸/谷氨酰胺代谢的作用削弱了肿瘤细胞并使抗pd-1抗体更有效。相当令人惊讶的是，根据本发明，对于用谷氨酸调节剂与免疫性抗癌剂的组合的小鼠，在植入后约30、40和60天小鼠的存活百分比是与单独的免疫性抗癌剂的存活百分比相比的约2倍或更高。下表1显示了实施例1的数据。
[0230]
表1
[0231]
肿瘤移植后小鼠的存活百分比
[0232][0233]
从表1中可以看出，到第26天，第1组(对照组)的小鼠存活率为0％，第2组 (pd-1)的小鼠存活率为50％，第6、7和8组的小鼠存活率为至少70％至80％。因此，在第26天，小鼠存活比(msr
26
)为约1.4至1.6(即70/50和80/50)。在第28 天，第1组(对照组)的小鼠存活率为0％，第2组(pd-1)的小鼠存活率为30％，第6、7和8组的小鼠存活率为至少60％至80％。因此，在第28天，小鼠存活比 (msr
28
)为约2.0至2.6(即60/30和80/30)。在第60天，第1组(对照组)的小鼠存活率为0％，第2组(pd-1)的小鼠存活率为30％，第6、7和8组的小鼠存活率为60％至70％。因此，在第60天，小鼠存活比(msr
60
)为约2.0至2.3(即60/30和70/30)。优选地，根据本发明，当在肿瘤植入后26天测量(msr
26
)时，小鼠存活比为至少1.4，更优选为至少1.6。优选地，根据本发明，当在肿瘤植入后28天测量 (msr
28
)时，小鼠存活比为至少2.0，更优选为至少2.6。优选地，根据本发明，当在肿瘤植入后60天测量(msr
60
)时，小鼠存活比为至少2.0，更优选为至少 2.3。优选地，根据本发明，在未的小鼠达到0％存活率时或之后
直到肿瘤植入后60天的时间测量的小鼠存活比为至少1.4、至少1.6、至少2.0、至少 2.3或至少2.6。
[0234]
典型地，根据本发明的组合疗法，即免疫性抗癌剂和谷氨酸调节剂，将提供的小鼠存活比为至少2.0，更典型地至少2.3(在第60天测量，msr
60
)。
[0235]
实施例2
[0236]
以下说明了本发明的谷氨酸调节剂可如何与keytruda
tm
(派姆单抗)组合使用的例子，该药物可从美国新泽西州白宫的默克公司获得。有关其他信息，请参阅注射用keytruda(派姆单抗)、静脉用keytruda(派姆单抗)注射剂、静脉用(uspi-mk3475-iv-1703r007)的处方信息的重点(“ketruda包装说明书”)。
[0237]
根据ketruda包装说明书，keytruda是一种程序性死亡受体-1(pd
‑ꢀ
1)阻断抗体，适用于：-患有不可切除的或转移性黑素瘤的患者。-转移性nsclc患者，其肿瘤具有高pd-l1表达[(肿瘤比例得分(tps)≥50％)]，如由 fda批准的测试确定，没有egfr或alk基因组肿瘤畸变，也没有先前的转移性nsclc全身化疗。-患有转移性nsclc的患者，其肿瘤表达pd
‑ꢀ
l1(tps≥1％)，如由fda批准的测试确定，在含铂化疗期间或之后有疾病进展。具有egfr或alk基因组肿瘤畸变的患者在接受keytruda之前在fda 批准的针对这些畸变的疗法期间应该有疾病进展。-患有复发性或转移性 hnscc的患者，其在含铂化疗期间或之后有疾病进展。该指征基于肿瘤反应率和反应持久性在加速批准下获得批准。对该指征的持续批准可能取决于确认试验中的临床益处的验证和描述。-患有难治性chl的成人和儿童患者，或在3路先前疗法或更多路先前疗法后复发的患者。该指征基于肿瘤反应率和反应持久性在加速批准下获得批准。对该指征的持续批准可能取决于确认试验中的临床益处的验证和描述。
[0238]
在由欧洲药品管理局出版的summary of product characteristics forketruda中，公开了以下临床研究。本研究不是由申请人进行的，而是出于说明目的而提供的。
[0239]
黑素瘤
[0240]
keynote-006：在初次用伊匹单抗的黑素瘤患者中的受控试验。
[0241]
在keynote-006中研究了派姆单抗的安全性和有效性，这是一项多中心的受控的iii期研究，关于初次用伊匹单抗的患者的晚期黑素瘤的。将患者随机化(1:1:1)以每2周(n＝279)或3周(n＝277)接受派姆单抗10mg/kg或每3周(n＝278)接受伊匹单抗3mg/kg。患有braf v600e突变型黑素瘤的患者无需接受过先前的braf抑制剂疗法。用派姆单抗患者直至疾病进展或不可接受的毒性。允许具有疾病进展初始证据的临床稳定患者继续直至疾病进展得到证实。在12周进行肿瘤状态的评估，然后每6周至第48周进行，随后之后每12周进行一次。在834名患者中，60％为男性，44％为≥65岁(年龄中值为62岁[范围18-89])，并且98％为白种人。65％的患者有m1c期，9％有脑转移史，66％没有先前疗法，并且34％有一次先前疗法。31％的ecog体力状态为1，69％的ecog体力状态为0，并且32％的ldh升高。在302名(36％)患者中报告了braf突变。在患有braf突变型肿瘤的患者中，139例(46％)先前用braf抑制剂。主要功效结果度量是无进展存活期(pfs；如通过 integrated radiology and oncology assessment[iro]review评估的，使用 response evaluation criteria in solid tumours[recist]，版本1.1)和总体存活期(os)。次要功
效结果度量是总体反应率(orr)和反应持续时间。表2总结了初次用伊匹单抗的患者中的关键功效度量。
[0242]
表2：在keynote-006*中，初次用伊匹单抗的晚期黑素瘤患者对每2周或每3周派姆单抗10mg/kg的反应*
[0243][0244]
*基于分层cox比例危险模型的危险比(派姆单抗与伊匹单抗比较)
[0245]
基于分层对数秩检验
[0246]
基于具有确认的完全或部分反应的最佳总体反应的患者
[0247]
na＝不可获得
[0248]
根据本发明，参与如上所述的研究的患者可以用谷氨酸调节剂，例如利鲁唑或其前药bhv-4157(2-氨基-n-{[甲基({[6-(三氟甲氧基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氨基甲酰基}甲基)氨基甲酰基]甲基}乙酰胺)，按联合疗法。具体的方案可由本领域技术人员确定。然而，为了说明的目的，在设计方案时可以考虑以下内容。下文使用的缩写是本领域技术人员公知的。
[0249]
使用bhv-4157和派姆单抗作为例证，使用谷氨酸调节剂与pd-1阻断抗体的组合的考虑因素
[0250]
方案概要
[0251]
[0252]
[0253][0254]
-受试者可以每日口服给予bhv-4157，用派姆单抗以预定间隔进行iv，如例如第1、3、5、7、9和11周。主要终点是bhv-4157的最大耐受剂量(mtd)和推荐的2期剂量(rp2d)。次要终点包括：
[0255]
■
客观反应率(orr)
[0256]
■
不良事件类型、严重程度和频率
[0257]
■
存活时间(os)，1年和2年具有重大意义的存活率
[0258]
■
响应患者的反应持续时间
[0259]
■
到进展性疾病的时间(pfs)
[0260]
■
到失败的时间
[0261]
■
到下一次或死亡的时间(ttntd)
[0262]
■
免于新的转移
[0263]
■
相关科学：肿瘤微环境和外周血的变化有以下几种：
[0264]
■
til和pd-l1表达
[0265]
■
免疫细胞表型和基因表达
[0266]
■
血管生成标志物
[0267]
■
代谢效应分子
[0268]
■
外泌体形成
[0269]
在完成上述研究后，可以进行另外的研究以确定功效、剂量改进、副作用等，以鉴定对于经历免疫肿瘤学与谷氨酸调节剂组合的患者来说有用的。
[0270]
实施例3
[0271]
以下说明了本发明的谷氨酸调节剂可如何与(纳武单抗)组合使用的例子，该药物可从美国新泽西州普林斯顿的百时美施贵宝公司获得。有关其他信息，请参阅opdivo(纳武单抗)注射剂、静脉用(1506us1700258
‑ꢀ
01-01)的处方信息的重点(“opdivo包装说明书”)。
[0272]
根据opdivo包装说明书，opdivo是一种程序性死亡受体-1(pd-1)阻断抗体，用于患有以下的患者：
·
braf v600野生型不可切除的或转移性黑素瘤，作为单一药剂。
·
braf v600突变阳性不可切除的或转移性黑素瘤，作为单一药剂。该指征基于无进展存活期在加速批准下获得批准。对该指征的持续批准可能取决于确认试验中的临床益处的验证和描述。
·
无法切除的或转移性黑素瘤，与伊匹单抗组合。该指征基于无进展存活期在加速批准下获得批准。对该指征的持续批准可能取决于确认试验中的临床益处的验证和描述。
·
转移性非小细胞肺癌和基于铂的化疗期间或之后有进展。具有egfr或 alk基因组肿瘤畸变的患者在接受opdivo之前在fda批准的针对这些畸变的疗法期间应该有疾病进展。
·
先前接受抗血管生成的晚期肾细胞癌。
·
自体造血干细胞移植(hsct)和移植后本妥昔单抗(brentuximab vedotin)之后复发或进展的经典霍奇金淋巴瘤。该指征基于总体反应率在加速批准下获得批准。对该指征的持续批准可能取决于确认试验中的临床益处的验证和描述。
·
头颈部复发性或转移性鳞状细胞癌，在基于铂的期间或之后有疾病进展。
·
局部
晚期或转移性尿路上皮癌，其：
·
在含铂化疗期间或之后有疾病进展
·
在新辅助或含铂化疗辅助的12个月内有疾病进展。该指征基于肿瘤反应率和反应持续时间在加速批准下获得批准。对该指征的持续批准可能取决于确认试验中的临床益处的验证和描述。
[0273]
在由欧洲药品管理局出版的summary of product characteristics foropdivo中，公开了以下临床研究。本研究不是由申请人进行的，而是出于说明目的而提供的。
[0274]
黑素瘤-随机3期研究与达卡巴嗪(ca209066)
[0275]
在3期随机双盲研究(ca209066)中评估了纳武单抗3mg/kg晚期(不可切除的或转移性)黑素瘤的安全性和功效。该研究包括成年患者(18岁以上)，其患有确诊的初次的iii期或iv期braf野生型黑素瘤，并且ecog体力状态得分为0或1。具有活动性自身免疫疾病、眼黑素瘤或活动性脑或柔脑膜转移的患者被排除在研究之外。将总共418名患者随机化以接受每2周经60分钟静脉给予的3mg/kg纳武单抗(n＝210)，或每3周接受1000mg/m2达卡巴嗪 (n＝208)。随机化按肿瘤pd-l1状态和m期(m0/m1a/m1b与m1c)分层。只要观察到临床益处就继续或直到不再耐受。如研究者所确定的，对于具有临床益处并且没有研究药物的实质性副作用的患者，允许疾病进展后的。根据实体瘤反应评估标准(recist)1.1版，在随机化后9周进行肿瘤评估，并且第一年每6周继续一次，并且然后之后每12周一次。主要功效结果度量是总体存活期(os)。关键的二级功效结果度量是研究者评估的pfs和客观反应率(orr)。在两组之间平衡基线特征。年龄中值为65岁(范围：18-87)， 59％是男性，并且99.5％是白种人。大多数患者的ecog体力得分为0(64％)或 1(34％)。在研究开始时，61％的患者患有m1c期疾病。74％的患者患有皮肤黑素瘤，并且11％患有粘膜黑素瘤；35％的患者患有pd-l1阳性黑素瘤(》5％肿瘤细胞膜表达)。16％的患者接受了先前的辅助；最常见的辅助是干扰素(9％)。4％的患者有脑转移史，并且37％的患者在研究开始时的基线ldh 水平大于uln。功效结果在表3中示出。
[0276]
表3：功效结果(ca209066)
[0277][0278]“+”表示截尾观察
[0279]
根据本发明，参与如上所述的研究的患者可以用谷氨酸调节剂，例如利鲁唑或其前药bhv-4157(2-氨基-n-{[甲基({[6-(三氟甲氧基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氨基甲酰基}甲基)氨基甲酰基]甲基}乙酰胺)。使用谷氨酸调节剂的方案可以例如如实施例2中所述进行鉴定。
[0280]
实施例4
[0281]
以下说明了本发明的谷氨酸调节剂可如何与(伊匹单抗)组合使用的例子，该药物可从美国新泽西州普林斯顿的百时美施贵宝公司获得。有关其他信息，请参阅yervoy(伊匹单抗)注射剂、静脉用(1506us1700258
‑ꢀ
01-01)的处方信息的重点(“yervoy包装说明书”)。
[0282]
根据yervoy包装说明书，yervoy是一种人类细胞毒性t淋巴细胞抗原4(ctla-4)阻断抗体，适用于：
·
不可切除的或转移性黑素瘤。
·
辅助患有皮肤黑素瘤的患者，具有经历完全切除(包括完全淋巴结切除术)的超过1mm的区域淋巴结的病理性介入。
[0283]
在由欧洲药品管理局出版的summary of product characteristics foryervoy中，公开了以下临床研究。本研究不是由申请人进行的，而是出于说明目的而提供的。
[0284]
mdx010-20
[0285]
一项3期双盲研究登记了患有晚期(不可切除的或转移性)黑素瘤的先前接受过含有以下一种或多种的方案的患者：il-2、达卡巴嗪、替莫唑胺、福莫司汀或卡铂。将患者以3:1:1的比例随机化以接受伊匹单抗3mg/kg+ 研究性gp100肽疫苗(gp100)、伊匹单抗3mg/kg单一疗法或单独gp100。所有患者均为hla-a2*0201型；这种hla类型支持gp100的免疫提呈。无论其基线 braf突变状态如何，患者都被登记。患者每3周接受伊匹单抗，如果耐受的话，持续4剂(诱导)。如果患者具有足够的体力状态，那么在诱导期完成前继续对肿瘤负荷明显增加的患者进行诱导。在完成诱导后大约第 12周评估肿瘤对伊匹单抗的反应。向在初始临床反应(pr或cr)后或在自第一次肿瘤评估起》3个月的sd(根据修改的who标准)后发展了pd的那些患者提供用伊匹单抗进行的额外(再)。主要终点是伊匹单抗+gp100组与gp100组的os。关键次要终点是伊匹单抗+gp100组与伊匹单抗单一疗法组和伊匹单抗单一疗法组与gp100组的os。共有676个患者被随机分配：137 个分到伊匹单抗单一疗法组，403个分到伊匹单抗+gp100组，并且136个分到单独gp100组。大多数人在诱导期间接受了所有4个剂量。32个患者接受了再：伊匹单抗单一疗法组8个，伊匹单抗+gp100组23个，并且gp100组 1个。随访持续时间范围长达55个月。在各组间良好均衡基线特征。年龄中值为57岁。大多数(71％-73％)患者患有m1c期疾病，并且37％-40％的患者在基线时乳酸脱氢酶(ldh)升高。共有77个患者有先前过的脑转移病史。含有伊匹单抗的方案在os中证明了优于gp100对照组的统计学显著优势。伊匹单抗单一疗法与gp100的os相比的危险比(hr)为0.66(95％ci：0.51，0.87；p＝ 0.0026)。通过亚组分析，观察到的os益处在大多数患者亚组中是一致的(m [转移]-阶段，先前白细胞介素-2，基线ldh，年龄，性别以及先前的类型和数量)。然而，对于50岁以上的女性，支持伊匹单抗的os益处的数据是有限的。因此，伊匹单抗对超过50岁的女性的功效尚不确定。由于亚组分析仅包括少数患者，因此无法从这些数据中得出明确的结论。表4列出了1年和2年时os的中值和预计比率。
[0286]
表4：mdx010-20的总体存活期
[0287][0288]
a gp 100肽疫苗是实验对照
[0289]
在伊匹单抗3mg/kg单一疗法组中，sd患者和pd患者的中值os分别为22 个月和8个月。在进行该分析时，cr或pr患者未达到中值。对于需要再的患者，伊匹单抗单一疗法组的borr为38％(3/8患者)，而gp100组为0％。疾病控制率(dcr)(定义为cr+pr+sd)分别为75％(6/8患者)和0％。由于这些分析中患者数量有限，因此无法得出关于伊匹单抗再治功效果的明确结论。伊匹单抗后临床活动的发展或维持与使用或不使用全身性皮质类固醇相似。
[0290]
根据本发明，参与如上所述的研究的患者可以用谷氨酸调节剂，例如利鲁唑或其前药bhv-4157(2-氨基-n-{[甲基({[6-(三氟甲氧基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氨基甲酰
基}甲基)氨基甲酰基]甲基}乙酰胺)。使用谷氨酸调节剂的方案可以例如如实施例2中所述进行鉴定。
[0291]
实施例5
[0292]
以下说明了本发明的谷氨酸调节剂可如何与(派姆单抗)组合使用的例子，该药物可从美国新泽西州白宫的默克公司获得。有关其他信息，请参阅注射用(派姆单抗)、静脉用(派姆单抗) 注射剂、静脉用(uspi-mk3475-iv-1703r007)的处方信息的重点(“ketruda包装说明书”)。
[0293]
在由欧洲药品管理局出版的summary of product characteristics forketruda中，公开了以下临床研究。本研究不是由申请人进行的，而是出于说明目的而提供的。
[0294]
nsclc-keynote-010：先前用化疗过的nsclc患者的受控试验
[0295]
在keynote-010中研究了派姆单抗的安全性和有效性，这是一项多中心的开放标签的受控研究，关于先前用含铂化疗的患者的晚期nsclc的。基于pdl1 ihc 22c3 pharmdxtm试剂盒，患者具有pd-l1表达，tps ≥1％。具有egfr活化突变或alk易位的患者在接受派姆单抗之前在批准的针对这些突变的疗法期间也有疾病进展。将患者随机化(1:1:1)以每3周接受剂量为2(n＝344)或10mg/kg(n＝346)的派姆单抗，或每3周接受剂量为75 mg/m2(n＝343)的多西他赛，直至疾病进展或不可接受的毒性。该试验排除了患有自身免疫性疾病的患者；需要免疫抑制的疾病；或者在前26周内接受过超过30gy的胸部放射的患者。每9周进行一次肿瘤状态评估。该体的基线特征包括：年龄中值63岁(42％65岁以上)；男性61％；72％白种人和21％亚洲人，并且34％和66％的ecog体力状态分别为0和1。疾病特征是鳞状(21％) 和非鳞状(70％)；m1(91％)；稳定的脑转移(15％)，并且突变的发生率是 egfr(8％)或alk(1％)。先前包括铂-双联方案(100％)；患者接受一个(69％)或两个或更多(29％)线。主要功效结果度量是使用recist 1.1通过盲法独立中心审查(bicr)评估的os和pfs。次要功效结果度量是orr和反应持续时间。表5总结了整个人(tps≥1％)和tps≥50％的患者的关键功效度量。
[0296]
表5：在keynote-010中先前的nsclc患者对每3周派姆单抗2或10 mg/kg的反应
[0297][0298]
*基于分层cox比例危险模型的危险比(派姆单抗与多西他赛比较)
[0299]
基于分层对数秩检验
[0300]
基于针对多重性调整的预先指定的α水平的统计显著性
[0301]
使用recist 1.1进行盲法独立中心审查(bicr)来评估
[0302]
所有反应都是部分反应
[0303]
#基于具有确认的完全或部分反应的最佳总体反应的患者
[0304]
包括30、31和2个患者，其中派姆单抗2mg/kg、派姆单抗10mg/kg和多西他赛组分别持续6个月或更长时间的反应
[0305]
包括22、24和1个患者，其中派姆单抗2mg/kg、派姆单抗10mg/kg和多西他赛组分别持续6个月或更长时间的反应
[0306]
2mg/kg和10mg/kg派姆单抗组的功效结果相似。基于组间比较，无论肿瘤标本的年龄(新的与归档的)，os的功效结果是一致的。在亚组分析中，对于接受了至少基于铂的化疗和酪氨酸激酶抑制剂的从不吸烟的患者或患有具有egfr活化突变的肿瘤的患者，观察到派姆单抗与多西他赛相比存活益处降低；然而，由于患者数量较少，无法从这些数据中得出明确的结论。尚未确定派姆单抗在患有不表达pd-l1的肿瘤的患者中的功效和安全性。
[0307]
根据本发明，参与如上所述的研究的患者可以用谷氨酸调节剂，例如利鲁唑或其前药bhv-4157(2-氨基-n-{[甲基({[6-(三氟甲氧基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氨基甲酰基}甲基)氨基甲酰基]甲基}乙酰胺)。使用谷氨酸调节剂的方案可以例如如实施例2中所述进行鉴定。
[0308]
在整个申请中，以作者姓名和日期或者专利号或专利公开号引用各出版物。这些出版物的公开内容通过引用以其整体并入本技术，以便更全面地描述本领域技术人员已知的截至本文所述和要求保护的本发明的日期为止的本领域技术状态。然而，本文引用的参考文献不应被解释为承认此参考文献是本发明的现有技术。
[0309]
本领域的技术人员仅使用常规实验就将认识到或能够确定本文所述的具体程序的许多等同方案。这些等同方案被认为是在本发明的范围内，并且由所附权利要求覆盖。例如，根据本发明旨在，使用谷氨酸调节剂和免疫剂的组合疗法可用于除本文说明书和实施例中公开的具体癌症之外的癌症。此外，可以使用除本文描述和实施例中公开的那些之外的谷氨酸调节剂和免疫剂。此外，旨在条款列表内的具体条款或较大条款组内的条款子集组可以与其他具体条款、条款子集组或较大条款组组合，无论本文是否存在识别此类组合的具体公开内容。

技术特征：

1.谷氨酸调节剂与免疫性抗癌剂的组合在制备用于癌症的药物中的用途，其中该谷氨酸调节剂具有下式：或其对映体、非对映异构体、水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：r
23
选自由以下组成的组中：h、ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch2cch、ch(ch3)2、ch2ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch2och2ph、ch2ch2och2ph、ch(oh)ch3、ch2ph、ch2(环己基)、ch2(4-oh-ph)、(ch2)4nh2、(ch2)3nhc(nh2)nh、ch2(3-吲哚)、ch2(5-咪唑)、ch2co2h、ch2ch2co2h、ch2conh2和ch2ch2conh2，并且其中该免疫性抗癌剂包括第一检查点抑制剂和第二检查点抑制剂，该第一检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体和抗-pd-l1抗体，该第二检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体、抗-pd-l1抗体和抗-ctla-4抗体。2.谷氨酸调节剂在制备用于调节用免疫性抗癌剂的患者中的谷氨酸的药物中的用途，其中在临近该免疫性抗癌剂的时间使患者体内的谷氨酸受体或谷氨酸转运蛋白与谷氨酸调节剂接触，其中该谷氨酸调节剂具有下式：或其对映体、非对映异构体、水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：r
23
选自由以下组成的组中：h、ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch2cch、ch(ch3)2、ch2ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch2och2ph、ch2ch2och2ph、ch(oh)ch3、ch2ph、ch2(环己基)、ch2(4-oh-ph)、(ch2)4nh2、(ch2)3nhc(nh2)nh、ch2(3-吲哚)、ch2(5-咪唑)、ch2co2h、ch2ch2co2h、ch2conh2和ch2ch2conh2，并且其中该免疫性抗癌剂包括第一检查点抑制剂和第二检查点抑制剂，该第一检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体和抗-pd-l1抗体，该第二检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体、抗-pd-l1抗体和抗-ctla-4抗体。3.谷氨酸调节剂在制备用于改善患有癌症的用免疫性抗癌剂的患者的反应的药物中的用途，其中向该患者给药该谷氨酸调节剂与有效量的该免疫性抗癌剂的组合，其中该谷氨酸调节剂具有下式：
或其对映体、非对映异构体、水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：r
23
选自由以下组成的组中：h、ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch2cch、ch(ch3)2、ch2ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch2och2ph、ch2ch2och2ph、ch(oh)ch3、ch2ph、ch2(环己基)、ch2(4-oh-ph)、(ch2)4nh2、(ch2)3nhc(nh2)nh、ch2(3-吲哚)、ch2(5-咪唑)、ch2co2h、ch2ch2co2h、ch2conh2和ch2ch2conh2，并且其中该免疫性抗癌剂包括第一检查点抑制剂和第二检查点抑制剂，所述第一检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体和抗-pd-l1抗体，所述第二检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体、抗-pd-l1抗体和抗-ctla-4抗体。4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其中该谷氨酸调节剂和该免疫性抗癌剂同时或按时间顺序给药。5.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其中该第一检查点抑制剂和该第二检查点抑制剂各自是抗-pd-1抗体。6.根据权利要求5所述的用途，其中该第一检查点抑制剂是纳武单抗，且该第二检查点抑制剂是派姆单抗。7.一种用于通过向有需要的患者给药免疫性抗癌剂与谷氨酸调节剂的组合来癌症的药物组合物，该药物组合物包含有效量的谷氨酸调节剂和药学上可接受的载体，其中该谷氨酸调节剂具有下式：或其对映体、非对映异构体、水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：r
23
选自由以下组成的组中：h、ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch2cch、ch(ch3)2、ch2ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch2och2ph、ch2ch2och2ph、ch(oh)ch3、ch2ph、ch2(环己基)、ch2(4-oh-ph)、(ch2)4nh2、(ch2)3nhc(nh2)nh、ch2(3-吲哚)、ch2(5-咪唑)、ch2co2h、ch2ch2co2h、ch2conh2和ch2ch2conh2，并且其中该免疫性抗癌剂包括第一检查点抑制剂和第二检查点抑制剂，该第一检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体和抗-pd-l1抗体，该第二检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体、抗-pd-l1抗体和抗-ctla-4抗体。8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中该谷氨酸调节剂和该免疫性抗癌剂同时或按时间顺序给药。9.一种用于患有癌症的患者的试剂盒，该试剂盒包含：
(a)谷氨酸调节剂；(b)免疫性抗癌剂；和(c)用于给药免疫性抗癌剂与该谷氨酸调节剂的组合的说明书，其中该谷氨酸调节剂具有下式：或其对映体、非对映异构体、水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：r
23
选自由以下组成的组中：h、ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch2cch、ch(ch3)2、ch2ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch2och2ph、ch2ch2och2ph、ch(oh)ch3、ch2ph、ch2(环己基)、ch2(4-oh-ph)、(ch2)4nh2、(ch2)3nhc(nh2)nh、ch2(3-吲哚)、ch2(5-咪唑)、ch2co2h、ch2ch2co2h、ch2conh2和ch2ch2conh2，并且其中该免疫性抗癌剂包括第一检查点抑制剂和第二检查点抑制剂，该第一检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体和抗-pd-l1抗体，该第二检查点抑制剂选自抗-pd-1抗体、抗-pd-l1抗体和抗-ctla-4抗体。10.根据权利要求9所述的试剂盒，其中该谷氨酸调节剂和该免疫性抗癌剂同时或按时间顺序给药。

技术总结

本发明涉及谷氨酸调节剂与免疫疗法用以癌症的用途。公开了使用免疫剂如例如PD-1、PD-L1或CTLA-4检查点抑制剂和谷氨酸调节剂如利鲁唑或trigriluzole的组合来癌症的方法。还公开了包含免疫剂和谷氨酸调节剂的药物组合物和试剂盒。节剂的药物组合物和试剂盒。

技术研发人员：

科里克

受保护的技术使用者：

拜尔哈文制药股份有限公司

技术研发日：

2017.05.19

技术公布日：

2022/11/18