清学发展的滞后显然制约该感染流行病学研究发展。
3)单纯的分子生物学检测结果不能全面反映IE M 感染的流行病学状态。
水溶性抗氧化剂4)IE M 感染的临床诊断并非必须依赖分子生物学方法。即便采用适宜的市售H BsAg E LIS A (包括化学发光实验等)也可对IE M 感染进行初步的诊断。在建立G 6E LIS A 的同时，我们还建立了A11E LIS A (基本不具备IE M 感染检测能力)与G 145R H BsAg E LIS A ，并已着手进行抗G 145R H Bs 临床检测的探索(资料未显示)。只有建立起一套相对完备的IE M 感
染血清学检测方法系统，才有把握将我国IE M 感染
的临床诊断与流行病学研究推向一个更新的高度。
作者简介：刘静华(1982-)，女，在读硕士生，研究方向：免疫学技术；李方和，男，主要从事免疫学技术研究。参考文献:
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熔断器盒(收稿日期:2008-01-14)
3通讯作者
文章编号:1007-4287(2008)10-1203-03
甲胺基苯丙酮激活物抗血栓作用的实验研究
侯旭晖，杜建时3，杨松柏，张静菊
(吉林大学中日联谊医院，吉林长春130033)
摘要：目的 建立大鼠腹主动脉血栓模型，并研究给予组织型纤溶酶原激活物(tPA )前后造模大鼠血栓形成相关指标的变化情况。方法 通过结合损伤血管内膜和降低血流速度方法建立大鼠腹主动脉血栓模型，检测造模大鼠血栓出现率及血栓长度。同时，鼠尾静脉注射tPA ，检测造模大鼠血栓形成相关指标的变化情况。结果 实验组造模大鼠血栓出现率及血栓长度较对照组明显升高(P <0.01或P <0.05)。给予tPA 后,tPA 组血栓出现率及血栓长度较对照组明显降低(P <0.05)，血浆纤维蛋白原含量较对照组明显降低(P <0.01)，出、凝血时间较对照组明显升高(P < 0101)。结论 结合损伤血管内膜和降低血流速度，相比传统单纯损伤血管内膜的方法，其制备血栓模型的成功率更
高。给予tPA 后，血浆纤溶活性增高，从而阻抑血栓形成，并降低血浆纤维蛋白原含量，为进一步研究血栓性疾病的防治机理提供了实验基础。
关键词:tPA ；血栓形成；纤维蛋白原中图分类号:R54311+3
文献标识码:A
Construction of the models of abdominal aorta thrombosis in rats and study on the antithrombotic mech anism of tPA HOU Xu 2hui ,DU Jian 2shi ,Y ANG song 2bai ,et al.(China 2Japan Union Hospital o f Jilin Univer sity ,Changchun 130033,China )
Abstract :Objective T o C onstruct the m odels of abdominal aorta thrombosis in rats and to study the antithrombotic mechanism
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3021—中国实验诊断学 2008年10月 第12卷 第10期
of tPA.Methods T o construct the m odels of abdominal aorta thrombosis in rats ,and to detect the occurrence rates of thrombosis ,the thrombus length ,plasma levels of fibrinogen ,the bleeding time and coagulation time after administration of tPA.R esults The occur 2rence rates of thrombosis and the thrombus length of experimental group were increased significantly (P <0.01or P <0.05).A fter administration of tPA ,the occurrence rates ,the thrombus length and the plasma levels of fibrinogen were decreased significantly in the experimental group ,while the bleeding time and coagulation time were increased significantly (P <0.01).Conclusion The experi 2mental group showed higher success rate in construction of the m odels of thrombosis com pared with the control group.The study laid experimental foundation for further research of the therapy of thrombotic diseases.
K ey w ords :tPA ;thrombosis ;fibrinogen
(Chin J Lab Diagn ,2008,12:1203)
血液在血管内的正常流动依赖于纤溶系统与凝血系统活性的动态平衡。血浆纤溶系统由纤维蛋白溶解酶原、纤溶酶、纤溶酶原激活物与纤溶抑制物组成。纤溶系统活性降低将导致过多的纤维蛋白沉积，进而能诱发血栓形成。tPA 由各种组织和血管内皮细胞合成，是体内纤溶系统的重要组成部分，体内纤溶酶原主要由tPA 激活,tPA 在纤溶系统中起着至关重要的作用。本实验通过结合机械性损伤血管内膜和降低血流速度的方法建立大鼠腹主动脉血栓模型[1]，观察并检测造模大鼠血栓出现率及血栓长度，并检测给予tPA 后造模大鼠血栓形成相关指标的变化情况，为进一步研究血栓性疾病的防治机理提供了实验基础。1 材料与方法1.1 实验材料
超净工作台：苏州净化设备厂Y Z -857；全自动血凝/纤溶仪：美国贝克曼库尔特AC L -7000。实验
动物S D 大鼠(体重250-300g )：购自吉林大学白求恩医学院实验动物中心。1.2 建立大鼠腹主动脉血栓模型
选取40只S D 大鼠，体重250-300g ，随机分成两组，每组20只，雌雄各半。分别腹腔注射钠(40mg/kg )麻醉大鼠，解剖并分离腹主动脉和右髂总动脉。将一根直径约0.8mm 前端粗糙的聚乙烯导管，从右髂总动脉旋转插入至腹主动脉(肾动脉分叉以下)以损伤血管内膜，拔除导管后结扎右髂总动脉。
实验组(损伤血管内膜+降低血流速度组)：游离肾动脉以下段腹主动脉，沿腹主动脉平行放置一根直径
为0.2mm 的钢丝，用prolene 线绕腹主动脉和钢丝一起结扎，随后缓慢抽出钢丝，造成腹主动脉管腔部分狭窄(狭窄度为88.5%±1.5%)；对照组(传统机械损伤内膜组)：无特殊处置[2,3]。常规缝
合切口。2hr 后颈动脉放血处死动物，重新解剖并
分离腹主动脉，观察和计算各组血栓出现率(血栓出现率=腹主动脉出现血栓动物数/动物总数×
100%)，并用分规和千分尺测量血栓长度。1.3 tPA 抗血栓作用的实验研究
油田水处理
取40只S D 大鼠，体重250-300g ，参照上述方法建立腹主动脉血栓模型后，随机分成二组，每组20只，雌雄各半：实验组(tPA 组)：鼠尾静脉注射tPA (0.5mg/kg )；对照组(生理盐水组)：鼠尾静脉注射生理盐水。2hr 后颈动脉放血处死动物，同时收集血样。
按照上述方法解剖分离腹主动脉，计算并测量各组血栓出现率和血栓长度。将收集的血样分成两份:①用毛细玻管法测定出、凝血时间;②4℃,3000r/min 分离血浆，采用全自动血凝/纤溶分析仪测定血浆纤维蛋白原含量(结果以g/L 表示)。2 结果
2.1 大鼠腹主动脉血栓模型的建立
实验组及对照组造模大鼠检测腹主动脉血栓出
现率与血栓长度结果参见表1所示。实验组共获得18例腹主动脉完整资料，对照组共获得19例腹主
动脉完整资料。至实验终点2hr 时，实验组共有14例出现腹主动脉血栓，血栓出现率为77.78%；对照组共有11例出现腹主动脉血栓，血栓出现率为57190%。用分规和千分尺分别测量两组血栓长度,
实验组:7.83±2.42mm ，对照组:5.74±2.04mm 。统计分析结果表明，两组大鼠腹主动脉血栓出现率相比具有显著性差异(χ2检验,P <0.01)；两组血栓长度相比具有显著性差异(t 检验,P <0105)。
表1 大鼠腹主动脉血栓出现率与血栓长度(x —
±s )
组别观察数血栓例数血栓长度(mm )血栓出现率(%)
实验组18147.83±2.4277.78对照组1911 5.74±2.04
57.90
2.2 tPA 抗血栓作用的实验研究
实验组(tPA 组)及对照组造模大鼠腹主动脉血栓出现率、血栓长度、出血时间、凝血时间及血浆纤
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4021—Chin J Lab Diagn ,October ,2008,V ol 12,N o.10
维蛋白原含量测定结果见表2所示。
统计分析结果表明，实验组与对照组两组间相比较：血栓出现率(χ2检验)及血栓长度(t检验)均具有显著性差异(P均<0.05)，出血时间、凝血时间及血浆纤维蛋白原含量(t检验)均具有显著性差异(P均<0.01)。
表2 造模大鼠腹主动脉血栓出现率、血栓长度、出凝血时间及血浆纤维蛋白原含量测定(x—±s)
组别观察数血栓例数血栓长度(mm)血栓出现率(%)出血时间(min)凝血时间(min)纤维蛋白原(g/L) tPA组1811 5.17±1.9761.128.85±3.11 6.64±2.42 1.03±0.29
中空板封边机
对照组19157.91±2.1778.95 4.35±1.80 2.32±1.07 1.84±0.53
3 讨论
遵循Virchow提出的经典的血栓形成原理，即血管壁的改变、血液性质的变化及血流状态的改变，制备
动物血栓模型[4]的方法基本上可归纳为以下三种:①向血管腔内注射药物，同时降低血流速度以促进血液凝固形成血栓;②向血管腔内填充血凝块以阻塞管腔，形成血栓;③损伤血管内膜造成血小板析出、聚集和凝固从而形成血栓。其中，损伤血管内膜的方法主要包括物理性损伤血管内膜及药物化学性损伤血管内膜[5-7]等。传统单纯损伤血管内膜的方法制备血栓模型，其成功率相对较低，这对于探求血栓形成机制等相关实验性研究极为不利。本实验方法遵循Virchow血栓形成原理，参照徐晖等血栓模型建立方法，通过结合机械性损伤血管内膜和降低血流速度的方法制备大鼠腹主动脉血栓形成模型，实验结果表明，实验组较对照组血栓出现率及血栓长度明显升高。实验结果进一步证实了结合损伤血管内膜和降低血流速度的方法相比传统单纯损伤血管内膜的方法，其制备血栓模型的成功率更高，这为进一步研究血栓形成后机体生理、生化的动态变化，尤其是血栓形成后血管壁局部的病理生理变化提供了实验研究平台。
血液在血管内的正常流动依赖于纤溶系统与凝血系统活性的动态平衡。纤溶系统活性降低将导致过多的纤维蛋白沉积，进而能诱发血栓形成。体内纤溶酶原主要由tPA激活，后者在纤溶系统中起着决定性作用。tPA血浆水平的降低一方面可使纤溶能力减弱，促使血栓形成；另一方面则可导致纤维蛋白在体内沉积，促进动脉硬化及血栓的形成和发展。大量临床实验研究表明，血浆tPA水平降低是血栓性疾病、动脉粥样硬化以及心脑血管疾病的主要危险因素，提高tPA水平是临床防治血栓性疾病的重要手段之一[8,9]。本实验结果表明，实验组造模大鼠给予tPA后，其血栓出现率、血栓长度、血浆纤维蛋白原
含量明显降低，而出血时间及凝血时间则明显延长，统计分析结果表明均具有显著性差异(P< 0.01或P<0.05)。
本实验通过结合机械性损伤血管内膜和降低血流速度的方法制备大鼠腹主动脉血栓形成模型，同时检测分析了给予tPA后造模大鼠血栓形成相关指标的变化情况，为进一步研究血栓性疾病的防治机理提供了实验基础和研究平台。
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(收稿日期:2008-03-02)
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中国实验诊断学 2008年10月 第12卷 第10期
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