HIV初筛实验室样品采集和处理程序

HIV初筛实验室样品采集和处理程序
1 范围
本文件规定了用于人免疫缺陷病毒(HIV)检测的全血、血清、血浆、细胞样品的采集和处理方法,适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 样品种类及相应的用途
●全血、血清、血浆样品可用于HIV抗体检测。
●抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。
●血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。
●全血、血浆样品可用于HIV核酸的定性检测。
●全血可用于HIV-1分离培养。
3 操作步骤
3.1 采样前准备
根据检测项目的具体要求,确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法,按照临床采血技术规范的要求操作,遵守生物安全要求。
黄光制程
要检查所需物品是否已备齐,是否在有效期内,有无破损,是否足量,特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致,并注明样品采集时间。选择合适的室内(外)采血空间,受检者坐(卧)于合适的位置,准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。
●采血前,先对装有样品的离心管或滤纸进行标记,标记的内容至少应包括:
患者姓名、送检科室、床号
3.2 样本采集和处理
●抗凝全血:消毒局部皮肤,用加有抗凝剂(EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠)的真空
采血管抽取适量静脉血,或用一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管中,轻轻颠倒混匀6~8次,备用。
●末梢全血:消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指。1岁以下儿童
采用足跟部)。用采血针刺破皮肤,用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液,备用。
●血浆:将采集的抗凝全血1500~3000r/min离心15min,上层即为血浆,吸出置于合适的容
器中,备用。
●血清:根据需要,用一次性注射器(或真空采血管)抽取5~10ml静脉血,室温下自然放
生物打印机
●置1~2h,待血液凝固、血块收缩后再用1500~3000r/min离心15min,吸出血清,置于合
适的容器中,备用。
●根据检测要求选用适当的抗凝剂,如CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐或钾盐、
枸橼酸钠、肝素钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠。
●采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器里,妥善处理,防止发生职业暴露。
●样品采集后处理、保存、运输的时限和条件,因不同的检测项目而异,应参见不同检测项
环氧树脂涂层目要求。
●采样之后,应及时在登记本上作记录,记录的内容至少包括:
患者姓名、性别、年龄、送检科室、床号、送检项目、标本类别、采集时间、采集者
3.3 样品的保存
●用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品,短期(1周)内进行检测的可存放于2~8℃,一
周以上应存放于-20℃以下。
●用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进行检测的可存放于4℃,3个月以内应存放于
-20℃以下。3个月以上应置于-70℃以下。
●艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证实验室,筛查阴性样品,可根据
具体需要决定保存时间,一般实验室保存期为7天。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。
3.4 样品的运送
●应符合生物安全要求;要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。
●应采用三层容器对样品进行包装,随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检
单应标明受检者姓名、样品种类等信息,并应放置在第二层和第三层容器之间。
第一层容器:直接装样品,应防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲
气泵接头吸水材料,以免碰碎。
第二层容器:容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。
第三层容器:容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签,注明数量、收样和发件人及,同时要注明“小心轻放、防止日晒、小心水浸、防止
重压”等字样,还应易于消毒。
线路模拟器
●用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的
样品应在室温下(18~25℃)或4℃(特殊要求时)运送。用于病毒载量检测的样品应在-20℃以下运输。DBS样品应在室温下(18~25℃)运送。每一件包装的体积以不超过50mL为宜。
●运送样品必须有记录。
3.5 样品的接收
●样品接收必须在具有处理感染性材料能力的实验室内,由经过培训的、穿戴好工作服、戴
好乳胶手套的工作人员接收。
●核对样品与送检单,检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出,
对样品管和盛器消毒,同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。
●检查样品的状况,记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染
过重或者认为样品不能被接受,应将样品安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。
●接收样品时应在样本送检登记本上填写相应的信息,至少应包括:
送检人、接收时间、接收人。
3.6 样本检测后的处理
●检测后的标本暂存于标本冰箱7天,以备核查;对于可疑阳性标本,用一次性离心管(子
弹头)装血清标本,留存血清量600—800 ul,将标本冷冻保存于免疫室冰箱内,保存标本应标示清楚:受检者姓名、标本类型、采集时间;并在“HIV可疑标本送检筛查结果记录本”
上作相应的记录。交通管理信息系统
●血液标本存放7天后处理时,先用5000 mg/L次氯酸钠溶液浸泡2小时以上,然后用双层
专用黄医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾,送专门存放医用垃圾处,交接给南宁市医疗垃圾处理中心统一焚化处理,并做好登记。
4 支持性文件
《全国艾滋病检测技术规范(2009年修订版)》
5、相关记录
科室样本送检登记本
HIV可疑标本送检筛查结果记录本
废弃物处理登记本

本文发布于:2024-09-21 02:31:44,感谢您对本站的认可!

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