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3d蓝光播放器中华人民共和国国家标准
家庭自制黄豆芽机GB/T XXXXX—XXXX
常见动物源性成分快速测定膜芯片法Rapid detection of animal-derived Materials—Membrane-based array Method
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（征求意见稿）
图1 XXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。
本标准的附录A为规范性附录、附录B和附录C为资料性附录。
本标准主要起草单位：中国标准化研究院、四川华汉三创生物科技公司、山东省食品药品检验研究院、安徽省食品药品检验研究院、安徽出入境检疫检验局、滨州市食品药品检验检测中心、成都市食品药品检验研究院、江西省食品药品检验研究院、上海市兽药饲料检测所等。 本标准主要起草人：
常见动物源性成分快速测定膜芯片法
1 范围
本标准规定了猪、黄牛、羊、鸡、鸭、兔、驴、貂、狐、鼠、牦牛等常见动物源性成分膜芯片检测方法的原理、试样制备与保存、试剂与仪器设备、实验方法和流程、生物安全措施、结果判读、确证实验、结果表述。
本标准适用于肉制品及饲料中11种常见动物源性成分的快速和定性检测。
无线病房呼叫系统2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1 饲料采样
GB/T 19495.1 转基因产品检测通用要求和定义
GB/T 19495.2 转基因产品检测实验室技术要
GB/T 19495.7 转基因产品检测抽样和制样方法
GB 19489 实验室生物安全通用要求
GB/T 20195 动物饲料试样的制备
GB/T 25165 明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法实时荧光PCR法
GB/T 27403 实验室质量控制规范食品分子生物学检测
SN/T 3730 （所有部分）食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法
3 术语和缩略语
下列术语和缩略语适用于本标准。
DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid）
dNTP：脱氧核苷酸三磷酸（deoxyribonucleoside triphosphate ）
dATP：脱氧腺苷三磷酸（deoxyadenosine triphosphate ）
dCTP：脱氧胞苷三磷酸（deoxycytidine triphosphate ）
dGTP：脱氧鸟苷三磷酸（deoxyguanosine triphosphate ）
dTTP：脱氧胸苷三磷酸（deoxythymidine triphosphate ）
dUTP：脱氧尿苷三磷酸（deoxyuridine triphosphate）
bp：碱基对（base pair）
18SrRNA：线粒体18SrRNA基因（18S ribosomal RNA）
COXⅠ：线粒体细胞素氧化酶亚基Ⅰ基因（Cytochrome c oxidase subunit I）
Cytb：线粒体细胞素b基因（Cytochrome b）
ATPase6：ATP合成酶亚基6（ATP synthase 6）
D-loop：线粒体D-LOOP区域
PC：阳性对照（Positive control）
NC：阴性对照（Negative control）
Taq: ThermusAquaticus DNA聚合酶(ThermusAquaticus DNA polymerase)
UDG酶：尿嘧啶-N-糖基化酶(Uracil N-glycocasylase)
Biotin：生物素修饰基团
旋转机械故障诊断
AminolinkerC6：6个碳原子作为连接臂的氨基标记（C6 Amino linker）
焊锡线4 原理
待检样品经抽样记录后，提取DNA模板。针对食品及饲料中常见动物源性成分进行特异性基因片 段设计引物，对提取DNA模板进行多重不对称PCR扩增。PCR引物上修饰有生物素，若样本中含有
目标片段而得到PCR扩增，PCR扩增产物与固定有目标基因特异性探针的膜芯片进行杂交，经化学显
后可在杂交点上形成肉眼可见的杂交信号。依据膜芯片上的杂交点显情况，判断样本中是否含有待
检动物源性成分，检测结果可以用肉眼直接判断，或用芯片扫描仪对杂交芯片进行扫描并判定结果。
5 试样制备与保存
5.1抽样方法
按GB/T14699.1规定的方法进行样品采集。
5.2样品制备
5.2.1食品样品制备
从原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分用绞碎机绞碎，充分混匀，用四分法缩分出不少于500g作为试样。装入清洁容器中，加封后，标明标记。
5.2.2饲料样品制备
按GB/T20195的规定制备试样。选取有代表性饲料样品至少500g，经粉碎机粉碎后，过孔径为0.2mm的标准筛。混匀后，装入清洁容器内保存，防止交叉污染。
5.3样品保存
5.3.1食品样品保存
锌铝镁
将样品于-20℃冷冻保存。
5.3.2饲料样品保存
将样品于4℃避光保存。
6 试剂
6.1 试剂组分
试剂组分和存放条件参见附录A。除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的三级水。
6.2 引物
PCR反应使用的引物序列应符合表1的规定。
表1 PCR反应使用的引物序列
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