#研究原著#文章编号:100022790(2005)022*******
和，高国栋 (第四军医大学唐都医院神经外科，陕西西安710038)
收稿日期:2004203210; 修回日期:2004206216
作者简介：和(19732)，男(汉族)，河南省洛阳市人.硕士生(导师高国栋)1Tel 1(029)83377735 Em ail 1nsurgerx @f m mu 1edu 1cn
Inosi ne is neuroprective aga i nst MPTP 2i nduced Park i nson p s d isease i n C 57BL m ice
Y A O Q ing 2H e ,G A O Guo 2Dong
Depart m ent of Neurosurgery ,Tangdu H ospita ,l F o urth M ilita ry M ed i ca lUn i versity ,X i p an 710038,China
=Ab stra ct >A I M:To s t udy the ne urop ro te c ti ve e ff e c ts o f i n 2os i n e on 12m e thyl 242phe nyl 21,2,3,62te tra hydrop yr i di ne (MP TP )2i nduce d P a rk i nson p s d i se a se (P D)i n C 57BL
空调控制系统m i c e.M ETHOD S :The PD m ode l s w e re for m e d w it h i n tra pe r i to 2ne a l i n j e c ti ons o fMP TP.I nos i ne wa s a dm i n i s te re d i n tra pe r 2itone a ll y to m i ce 30m i n p ri o r to MP TP.The e ff e c t s o f i no 2s i ne a nd MP TP on the be ha v i o ra l e xh i b iti on ,the nu m be r o f dopam i ne (DA)ne urons i n the s ubs ta n ti a ni g ra and t he de ns ity o f t yros i n e hydroxyl a se 2m i m uno re a c ti ve (TH 2ir )ne rve fi be rs i n t he s tr i a tum,a nd t he l e ve lo f DA i n the s tri a 2tu m we re s tudi e d by be ha v i ora l t e s ,t m i m unoh i s tochem i ca l a na l ys i s a nd fl u o rospe c tropho t om e try .RE SULT S :The sco re s o f l ocom o ti on ,R o t a rod a nd sw m i t e s t de c re a se d by a bou t 45%a nd 43%a nd 22%,re spe c ti ve l y .The num be r o f DA ne urons i n the subs tan ti a ni g ra de c li ne d b y a bout 58%,the de ns it y o f TH 2ir ne rve fi be rs a l so de c re a se d ,a nd t he l e ve l o f DA i n t he s tri a tum de c li ned by abou t 88%.I nos i ne,g i ve n p ri or t o MP TP,a tt e nua t e d t he e ff e c ts o fMP TP.The sco re s o f l ocom o ti on ,R o t a rod and sw m i te s t de c li ned on l y by a bout 5%a nd 11%a nd 12%,re spe c ti ve l y ,t he num be r o f DA ne u rons i n the s ubs ta n ti a ni g ra de c l i ne d by on l y a bout 43%a nd t he l e ve l o f DA i n t he s tri a tum de c li ne d on l y by a 2bou t 71%.CONC LUS ION :Ino s i ne i s ne urop re c ti ve a ga i n s t MP TP 2i nd uce d l e s i o ns i n C 57B L m i ce.=K ey word s >i nos i ne;12Me t hy l 242phe ny 21,2,3,62te tra hyd ro 2
pyr i d i ne;P a rki nson d i se a se;ne a ra p ro t e c ti ve a 2ge n ts ;m i ce =摘 要>目的：观察肌苷对MPTP 致帕金森病(PD)小鼠模型的神经保护作用.方法：用MPTP 建立C57BL 小鼠PD 模型，在MPTP 前给予肌苷，通过行为学检测(自主活动计数、R otarod 检测、游泳实验)、免疫组织化学和荧光分光光度法，观察肌苷对PD 小鼠模型的行为学表现、黑质多巴胺(DA)神经元和纹状体酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(T H 2ir)神经纤维 以及纹状体D A 水平的影响.结果：给予M PTP 后，小鼠行为
学计数降低，自主活动计数、Rotaro d 检测、游泳实验分别降低约45%、43%和22%，黑质DA 神经元数目减少约58%，纹状体TH 2ir 神经纤维密度减低，纹状体DA 水平明显降低约88%，提前给予肌苷后降低程度减轻，自主活动计数、Rotarod 检测、游泳实验降低程度分别约为5%、11%和12%，黑质DA 神经元数目减少约43%，纹状体D A 水平降低约71%，两组相比有显著性差异(P <0101).结论：肌苷对M PTP 所致的C57BL 小鼠的神经损伤具有保护作用.=关键词>肌苷;12甲基242苯基21,2,3,62四氢吡啶；帕金森病;
神经保护药；小鼠
=中图号>R65111 =文献标识码>A
0 引言
帕金森病(Park i n son p s disease ,PD )是一种临床常见的神经系统退变性疾病，是中老年人常见的致残疾患之一.目前所知，其主要是由于黑质多巴胺(Dopa 2m i n e ,D A )能神经元坏死、凋亡，细胞数目减少，使黑质-纹状体通路DA 释放减少，出现多巴胺2乙酰胆碱失衡，患者出现静止性震颤、肌张力增高、运动减少等一系列症状，严重影响患者的生活质量.研究显示PD 的发病与遗传和环境等多种因素相关,12甲基242苯基21、2、3、62四氢吡啶(12m et h yl 242phenyl 21,2,3,62tetrahydropyri d i n e ,MPTP)可以导致人类及灵长类、小鼠等多种动物产生PD 样症状，为PD 研究提供了新的途径.肌苷(inosi n e ,I N O )是腺嘌呤核苷和核苷酸代谢的中间产物之一，临床上长期作为能量营养剂用于多种疾病如肝脏和心血管疾病的辅助.近期研究发现，肌苷在神经系统的损伤与修复中也具有重要的营养和保护作用.本研究利用常用的MPTP 致C57BL 小鼠PD 模型，探讨肌苷在PD 中的神经保护作用. 1 材料和方法
111 动物和分组 8wk 龄雄性C57BL 小鼠(第四军医大学实验动物中心提供)，体质量25~27g ，安静环境饲养，自由取食饮水，人工昼夜节律(12~12h).将动物随机分为3组：生理盐水组(Sa li n e 组);MPTP 组；肌苷+MPTP 组(I N O +MPTP 组)，每组10只.第1~3日I NO+MPTP 组给予肌苷60mg /kg i p 1次/d ,Saline 组、MPTP 组给予等量生理盐水ip 1次/d ，第4~10日I N O +MPTP 组给予肌苷60mg /kg i p ,30m in 后MPTP 30mg /kg ip 1次/d ,MPTP 组给予等量生理
盐水ip30m i n后MPTP30mg/kg i p1次/d,Sali n e组给予等量生理盐水ip1次/d.
112试剂和仪器MPTP,I N O和DA标准品为Sig2 ma公司产品，小鼠抗酪氨酸羟化酶(T H)单克隆抗体，生物素化兔抗小鼠二抗,ABC试剂盒为Calbio2 che m公司产品，其余试剂为国产分析纯.用0101 mol/L盐酸将D A配制成100mg/L，保存于0~2e，使用前用0101mol/L盐酸稀释配制成标准应用液2 mg/L.酸化正丁醇:100mL正丁醇中加入01085mL 浓盐酸;1/15mol/L磷酸盐缓冲液(p H712): KH2PO40135g和N a2H PO4#12H2O1145g溶于9715mL去离子水中，用10mol/L N a O H或H3PO4调至p H712，最后定容到100mL;011mol/L碘试剂: K I1g溶于重蒸馏水后加入I20125g，再加重蒸馏水至20mL，贮于棕瓶中，避光保存；碱性亚硫酸钠: 0125g亚硫酸钠(N a2S O3)溶于5mol/L Na OH9mL 中，再加水1mL混匀，临用前配制;011mol/L EDT A 溶液(pH710):EDT A22N a.2H2O01371g溶于915 mL乙酸钠(1mol/L)中，用10mol/L N a O H调p H 710，最后用乙酸钠(1mol/L)溶液加到10mL，贮存于冰箱备用.UGO BASI L E7750型Rotarod仪，岛津RF25000荧光分光光度仪.
113行为学检测在停药后第3日，进行下述行为学检测.
11311自主活动计数参照Ka wa iH[1]的测试方法，自制30c m@30c m@15c m的有机玻璃盒，底部刻出6c m@6c m的格子，在安静、光线较暗的环境中检测.小鼠适应环境10m i n后，计数5m in内小鼠移动的格子数，连续测5次取平均值.
11312Rotarod检测Rotarod实验需要动物在滚轴上保持平衡并连续运动，是广泛采用的检测运动协调性的实验.滚轴直径6c m，转速20r/m i n，连续测20次取平均值.
11313游泳实验参照Donnan G A[2]的测试方法，将受试小鼠放入一个20c m@30c m@20c m规格的有机玻璃水箱中，水深10c m，水温为22~25e.评分标准如下：在1m i n内能连续不断游泳者记310分；大部分时间游泳仅偶尔漂浮者记215分；漂浮时间占整个受试时间50%以上者记210分；偶尔游泳者记115分；偶尔用后肢游动并漂浮在水箱一边者记110分.检测5次取平均值.
114黑质及纹状体免疫组织化学检测行为学检测后，每组取5只小鼠行黑质及纹状体免疫组织化学检测.5g/L钠1mL腹腔麻醉后，开胸经主动脉先以9g/L生理盐水15mL冲洗血液，再用含40 g/L多聚甲醛的011mol/L的磷酸缓冲液(PBS,p H 712)100mL先快后慢灌注固定1h1灌毕立即取脑，在含300g/L蔗糖的PBS内过夜(4e)至组织沉底.参考小鼠脑图谱，在恒冷箱(-22e)行中脑黑质和纹状体冠状切片，片厚30L m，收集于0101mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,p H712)内.免疫组织化学染步骤如下:3mL/L过氧化氢甲醇溶液(300mL过氧化氢1mL+甲醇80mL+PBS19mL)30m in,3g/L T ri2 ton X2100的PBS30m i n，浸入小鼠抗T H单克隆抗体(1B3000)孵育48h(4e)，浸入生物素化兔抗小鼠二抗(1B500)孵育2h(室温)，浸入ABC复合物(1B500)孵育2h(室温)，蒸馏水快速冲洗后硫酸镍胺加强D AB蓝反应法显20~30m in，当阳性产物呈深蓝而背底清晰时蒸馏水冲洗3次终止显.以上步骤每步后均需0101mol/L PBS清洗3次，每次10m i n.其中一抗用含10mL/L小牛血清和3g/L 的T riton X2100的PBS稀释，二抗和ABC复合物用PBS稀释.贴片，脱水，透明，中性树胶封片.每只小鼠黑质取头端、中部、尾端切片3张，取大脑脚中点上方区域，在200@高倍镜下计数T H免疫反应阳性(T H2 ir)神经元个数，取平均数.
115纹状体DA水平检测在行为学检测后，每组取5只行纹状体D A水平荧光分光光度法检测.将小鼠迅速断头、取脑，放入预冷的生理盐水中，去除脑膜和血液，滤纸吸干水分，在冰皿上剥离纹状体，称质量后置于含有少量冰冷的酸化正丁醇的匀浆器中，在冰水浴中制成匀浆，转移至具塞刻度离心管内，并用酸化正丁醇补充至3mL，按以下步骤测D A浓度：匀浆液振荡1m i n，离心(2500r/m in)5m i n，上清液115 mL+1/15mol/L磷酸盐缓冲液(pH712)115mL，振荡1m i n，离心5m i n，水相015mL+EDT A溶液014 mL混合，加碘试剂012mL混合、静置，准确反应2 m i n，加碱性亚硫酸钠015mL混合、静置，准确反应2 m i n，加6mol/L乙酸016mL，沸水浴20m i n，冷却后检测荧光强度(波长：激发光320nm，发射光370 nm).每批实验均需空白管和标准管.空白管：取0101mol/L盐酸012mL，用酸化正丁醇补充至3mL，其余操作同样品管.标准管：取标准应用液012mL，用酸化正丁醇补充至3mL，其余操作同样品管.
统计学处理：实验结果采用x?s表示,SPSS1010统计软件行单因素方差分析和S NK2q组间两两比较,P<0105为有统计学意义.
2结果
211小鼠给予M PTP后的一般表现小鼠在给予MPTP后3~5m in，出现震颤、运动减少、弓背、后肢张开、步态不稳、竖尾、竖毛等改变，个别出现癫痫样发作，约30~60m i n后上述症状逐渐减轻,24h后
基本恢复正常，但随着给药次数的增加，急性反应表现反倒减轻，但24h后其运动减少、肢体僵硬、步态不稳、反应迟缓的表现越来越明显.
212行为学检测结果见Tab1,MPTP组出现小鼠行为学计数降低，自主活动计数、Rotarod检测、游泳
实验分别降低约45%、43%和22%，提前给予肌苷的I N O +MPTP 组降低程度减轻，自主活动计数、Rotarod 检测、游泳实验降低程度分别约为5%、11%和12%，与MPTP 组相比，自主活动计数和Rotarod 检测(P <0101)以及游泳实验(P <0105)具有显著性差异.
表1 MPTP 和肌苷对小鼠行为学的影响
Tab 1 Effect ofMPTP and i nosi ne on behavi ora l exhi b iti on of PD m i ce (n =10,x ?s )
G roup Loco m otion Rotarod Swi m Saline
135112?1511017189?21322118?0120M PTP 74104?15135b 10112?1165b 1169?0123b I
N O+M P TP 128162?11162
d
15192?1182
d防盗井盖
1192?0122
c
b
P <0101vs s ali ne ,c
P <0105,d
P <0101vs MPTP .Loco m otion :Th e numb er of areas that t he m i ce a mbu lated i n 5m i n;Rot arod:The ti m e t hat t he m i ce con ti nu ed on rod (S);S w i m :Th e score of s w i m m i ng m ove m ent
.
b
P <0101vs s ali ne ;
d
P <0101vs MPTP .
F i g 1 Nu mber of T H 2ir neuro ns i n the substanti a nigra of m i ce
treated by sa li ne or MPTP or I NO +MPTP group(n =5,x ?s )图1 Sa line ,MPTP 和I NO +M PTP 组小鼠的黑质T H 2ir 神经
元数目
Sali n e :A ,B ;M P TP :C ,D ;I NO+MPTP :E ,F ;T H 2ir n euron s i n the s ub st anti a n i gra :A ,C ,E;TH 2i r nerve fi b ers i n t h e stri at um :B ,D ,F. ABC , @100
F ig 2 T H 2i r neuro ns in the s ubstanti a n i gra and T H 2ir ne rve fi bers i n the striatu m of the m i ce treated by sa li ne orM PTP or I NO+M PTP 图2 Sali ne 组、M PTP 组和I NO+M PTP 组小鼠的黑质TH 2ir 神经元及纹状体T H 2ir 神经纤维
213 黑质及纹状体免疫组织化学检测 结果见F i g
1,2.MPTP 组与Sa li n e 组相比，黑质T H 2ir 神经元数目明显减少约58%，残留神经元皱缩，突起减少或消失，纹状体T H 2ir 神经纤维密度减低，提前给予肌苷后黑质T H 2ir 神经元数目减少约43%，与MPTP 组相比有显著性差异(P <0101).
214 纹状体DA 水平检测 结果见Fig 3.MPTP 组与Sa li n e 组相比，纹状体D A 水平明显降低约88%，而I N O +MPTP 组提前给予肌苷后降低程度约为71%，与MPTP 组相比有显著性差异(P <01
01).
b
P <0101vs sali ne ;
d
P <0101vs MPTP .
F ig 3 Leve l of DA i n the striatu m of m ice treated by sali ne or M PTP or I NO+MPTP(n =5,x ?s)
图3 Sali ne ,MPTP 和I NO+MPTP 组小鼠的纹状体DA 水平
3 讨论
MPTP 的神经毒性作用发现于20世纪80年代，它能导致人类及多种动物出现PD 样症状.MPTP 进入细胞内以后，被位于线粒体外膜的单胺氧化酶B 催
化生成甲基-苯基吡啶离子(MPP +
)，释放到细胞外间隙，被临近的DA 能神经元轴突末梢通过突触前膜D A 转运体摄取，并逆向运输至神经元胞体，被线粒体主动摄取而浓集，特异性抑制氧化呼吸链复合体I 和电子传递，减少ATP 生成，造成D A 能神经元ATP 耗竭，并且通过促进反应氧族和过量一氧化氮的生成而发挥毒性作用，对
D A 能神经元造成选择性的损伤而出现坏死和凋亡.MPTP 的神经毒性作用已在多种动物中得到证实，包括灵长类、小鼠、大鼠、猫、猪和金鱼等.在接受MPTP 的小鼠和灵长类脑内黑质D A 能神经元大量死亡，纹状体T H 阳性纤维大量丧失，纹状体D A 及其代谢产物D OPAC 、HVA 水平均明显降低，也有黑质纹状体小胶质细胞和星形细胞的增生和蓝斑、下丘脑等区的损伤，与PD 患者的改变基本相同.MPTP 对C57BL 小鼠作用明确，是目前最常用的PD 动物模型之一.
肌苷是临床常用的能量营养剂，在体内肌苷的生成有两条途径：腺嘌呤核苷酸在腺苷酸酶的催化下生成腺苷，腺苷在腺苷脱氨酶作用下生成肌苷；或者腺嘌呤核苷酸在嘌呤脱氨酶催化下生成次黄嘌呤核苷酸，再经核苷酸酶去磷酸并加一分子水后生成肌苷.肌苷的分解则通过核苷磷酸化酶生成次黄嘌呤和1-磷酸核糖，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶催化下经黄嘌呤生成代谢终产物尿酸.1-磷酸核糖在磷酸核糖变位酶的作用下转变为5-磷酸核糖，其在磷酸核糖焦磷酸合成酶催化下生成磷酸核糖焦磷酸(PRPP),PRPP 参加嘌呤核苷酸的从头合成途径；次黄嘌呤则与PRPP 生成次黄嘌呤核苷酸，参加嘌呤核苷酸的补救合成途径.生成52磷酸核糖后，还可以通过磷酸戊糖通路在无氧糖酵解时产生ATP(3分子肌苷可产生8个分子的ATP)，由此肌苷可以参加ATP 的生成和其他腺嘌呤核苷酸的代谢过程.
研究发现，肌苷不仅仅增加ATP 生成，参加能量代谢，而且在神经系统的损伤和修复中也具有重要的营养和调节作用.L itskyML 等使用鱼藤酮抑制呼吸链，对培养的鼠胚脊髓细胞进行损伤，当给予肌苷后发现明显提高神经元的存活率和正常形态细胞比例，并表现
出浓度依赖性[3]
.肌苷对硫酸锌诱导的体外培养PC12细胞的损伤也可以增加细胞存活率，维持细胞正常形
态，具有直接的保护作用[4]
.除了对神经元的直接保护作用之外，肌苷还可以促进神经突起的生长，恢复神经突触的功能.Beno w itz LI 等人发现肌苷可促进体外培养的金鱼和幼鼠视网膜神经节细胞轴突的生长，伴有促进轴突再生相关基因如生长相关蛋白G AP 243,E5872
Ag ,Neurolin ，细胞黏附分子L1和T A 21的表达[5,6]
.在体内实验中，将成年大鼠锥体交叉平面以上的一侧皮质脊髓束切断，于对侧大脑皮质感觉运动区用微泵将肌苷持续注入，结果发现未损伤侧皮质锥体细胞的轴突侧支大量出芽，并生长到损伤侧已溃变的颈髓白质中，形成新的突触和神经通路，免疫组织化学证明损伤区有大量的G AP 243蛋白表达[7]
.同样，在阻断一侧大脑中动脉的大鼠半侧脑皮层缺血模型，通过微泵将肌苷持续注入枕大池或者侧脑室，结果发现与Sa li n e 组相比，虽然梗死区域大小无差别，但未损伤侧皮质红核束和皮质脊髓束均有明显的再生轴突侧支生长进入损伤侧，伴有高水平的G AP 243蛋白表达，同时观察到大
鼠瘫痪侧上肢运动功能有明显恢复[8]
.最近研究表明，在成年大鼠视神经横断以及移植自体外周神经，给予ip 肌苷，则轴突切断的视网膜神经节细胞存活数增加，以及在移植的外周神经内出现明显增加的视网膜神经
节细胞再生轴突[9,10]
.
本研究结果显示，肌苷对MPTP 致帕金森病小鼠模型也具有神经保护作用.肌苷的作用可能通过以下
机制:¹增加ATP 的生成，减轻MPTP 抑制线粒体呼吸链后造成的能量耗竭，提高黑质DA 神经元存活率;º肌苷可能通过抑制核蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)从而减少受损细胞内ATP 的消耗，防止能量耗竭，同时PARP 的活性被肌苷抑制后还可阻止一氧化氮合酶的作用过程，减少一氧化氮合成，结果使过亚硝酸盐生成减少，保护细胞的膜性结构，减
轻MPTP 的神经毒性[4]
;»肌苷可以升高神经元内Bc l 22水平，而Bc l 22可抑制MPTP 诱导的神经元凋
亡，阻止细胞的坏死过程[4]
.¼肌苷降解形成尿酸，而尿酸可以保护神经元防止缺氧损伤，清除过亚硝酸
盐和氧自由基[11,12]
;½肌苷可以通过细胞膜易化扩散进入神经元内，促进神经细胞突起的生长，恢复损伤的突触功能，可能的机制包括激活胞内的蛋白激酶N ；催化生成c A MP ,c A MP 作为第二信使参与神经突起的生长；抑制多种抑制性因子，如激动G i 蛋白的髓鞘相关糖蛋白等，从而促进细胞突起的生长，保留残
存神经元的突触功能[4,5]
.本研究中提前给予肌苷后,MPTP 对C57BL 小鼠黑质DA 能神经元的损伤减轻，纹状体的T H 2ir 神经纤维得以保存，纹状体DA 浓度降低程度减轻，是行为学检测反映的PD 症状较轻的病理基础.通过本研究证实了肌苷对MPTP 致帕金森病小鼠模型的神经保护作用，为肌苷应用于帕金森病的预防提供了实验依据，为进一步深入研究神经组织保护机制和帕金森病奠定了基础.=参考文献>
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收稿日期:2004206218; 修回日期:2004210215
作者简介：郭效东(19702)，男(汉族)，河南省平舆县人.主治医师，硕士生(导师高国栋).T e.l (029)83377736 Em ai.l GXD749@sohu
#经验交流# 文章编号:100022790(2005)022*******
支气管败血鲍特氏菌致肾脓肿1例
郭效东，高国栋，赵振伟，秦怀洲，李立宏，李维新，曲友直，邓剑平 (第四军医大学唐都医院神经外科，陕西
西安710038)
=关键词>支气管败血杆菌；脑外伤；肾脓肿=中图号>R 692 =文献标识码>B
1 病例报告 患者，男,49岁，因头部撞地后意识障碍进行性加重6h 入唐都医院神经外科，临床症状：呕吐频繁，躁动不安，深昏迷，呼吸困难，右侧瞳孔散大，对光反射消失，双侧巴氏征(+)，双肺布满湿性罗音.CT 示右额颞部硬膜外血肿、中线左移215c m.急诊开颅清除血肿及气管切开.术后意识障碍渐好转，但第10日开始持续高热，呼吸道分泌物多，痰培养见支气管败血杆菌生长.多次尿检均未见明局部镀锡
显异常.血常规:W BC 1916@109/L ，中性0199，淋巴0101，核左移.反复动脉血培养均为阴性.按肺部感染给予抗炎及雾化吸入等，肺部
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感染得到控制，但仍发热.术后28d 发现患者左腹部一压痛包块,B 超提示左肾体积增大，内有液性暗区.肾穿刺放出灰白粘稠无臭味脓液约2500mL ，细菌培养为支气管败血杆菌.引流5d 后体温便恢复正常，后行左肾切开造瘘术并置造瘘管引流,2mo 后痊愈.
2 讨论 支气管败血鲍特氏菌俗称支气管败血杆菌，为革兰氏阴性球杆菌，主要是动物的致病菌，能从动物的呼吸道中分离出来.经常与患病的兔、豚鼠、猫、狗接触的人，可引起呼吸道感染，但致泌尿系感染的病例尚未见报道.本患者肾脓肿病源菌是支气管败血杆菌，其寄生于支气管，因此推断病源菌是通过血源性感染这条途径到达肾脏，形成脓肿.其原因可能是吸痰时损伤了气管黏膜，细菌经破口进入血液，流经肾脏形成肾脓肿.通过救治该患者，我们有几点体会:¹昏迷患者的主要并发症有肺部感染、泌尿系感染、褥疮等，当出现持续高热，白细胞升高，核左移等中毒症状时，不能只满足于上述几条诊断，要全面体检，综合分析，明确发热原因，以免误诊、漏诊;º气管切开的患者要保持呼吸道畅通，加强气管切开护理及熟练掌握吸痰技巧.调整负压吸引压力在0102~0104kP a 以下，动作要轻柔，避免损伤气管黏膜而导致肺部致病菌血源性转移至其他器官;»尿检正常时不能完全排除肾积脓的可能.当有肾结石或输尿管结石致肾积水时，易并发肾积脓或肾盏积脓，由于发生了梗阻，脓细胞不能随尿液流入膀胱，故尿检是阴性的.
编辑 王小仲
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