操作规程
Olympus IX5
厦门大学医学院中心实验室
黄静茹
2016年10月
视觉智能识别系统
说明：
①透射光主开关；②汞灯高压电源开关；③透射光光强控制钮；④滤片架；
⑤光路选择杆；⑥X轴和Y轴调节钮；⑦物镜转盘；⑧粗/微调焦旋钮； ⑨双目观察筒；⑩屈光度调节环；⑪聚光镜高度调节钮；⑫聚光镜对中旋钮；⑬视场光阑调节杆；⑭孔径光阑调节杆；⑮聚光镜转盘；⑯荧光光闸（SHUTTER）；⑰荧光激发块转盘；⑱荧光减光阀 一、开机
1、打开透射光源（白光）主开关①；
2、打开荧光光源（汞灯高压电源）②；
3、打开电脑，进入cellSens Standard工作站；
备注：标本为HE染、免疫组化时，不需要打开荧光光源；标本为荧光染料染时，一般也不需要打开白光光源。
二、明场观察（Bright Field BF）
1、正确放置标本，BF主要用于HE染、免疫组化标本；
手套加工2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；
3、转动聚光镜转盘⑮到“BF”位置，直到听到咔嗒声；
4、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；
5、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节白光光强控制钮③至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察，根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩；
三、相衬观察（Phase contrast PH)
1、正确放置标本，PH主要用于没有任何染的、较透明的标本；
2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；
3、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜；
4、转动聚光镜转盘⑮，使相衬光学元件与所用物镜相匹配（见表1）；
5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；
6、调节光强控制钮③直至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察，根
据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩。
表1：物镜、相差元件匹配表
四、荧光观察
1、如果需要，可先用明场观察对标本定位，再转入荧光观察；
2、如果不再需要BF观察，可关闭白光电源②；或将白光光强调节钮③逆时针旋
至最低，将孔径光阑向右拨至最小；
3、转动荧光激发块转盘⑰，根据所用的荧光染料选择匹配的荧光激发块；
表2：荧光激发块
双面自粘防水卷材
破真空阀4、打开荧光光闸⑯（SHUTTER），使其置于“O”位置；
5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；加热搅拌
6、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察，根据荧
光强度选择合适的ND滤镜（荧光减光阀）⑱进入光路。（第一个ND100：100% 的荧光强度进入光路；第二个ND6：6%的荧光强度进入光路，第三个ND25: 25% 的荧光强度进入光路）。
五、CCD成像
1、cellSens Standard工作站中，，点击右侧摄像控制中的实时观察；
2、将光路选择杆⑤拉出（，CCD成像光路），调节粗/细调焦旋钮进⑧行聚焦；
3、曝光：可先选择自动曝光，参照自动曝光时间，再通过手动调节曝光时间使
图像更清晰；
4、背景校准：进行明场和相差成像时执行白平衡，荧光成像时执行黑平
衡，在样品空白背景处画一个小区域，软件自动以该处为背景对整幅图像进行调整，使所选区域显示为白或黑；
5、各成像参数设定完毕后，点击拍照，仪器自动成像；
6、右键文档工具栏窗口或在文件处进行保存（TIF或JPG格式）。
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