主要试剂
高尔基染需要的主要试剂（西格玛试剂公司）
1、4%多聚甲醛（多聚甲醛粉末）
2、25%氨水(一箱?)
4、Golgi Cox液（重铬酸钾、、铬酸钾）(一箱?一瓶?)
5、30%蔗糖（蔗糖）（-覃师兄有国产的）
6、CXA 溶液（氯仿，二甲苯，(一箱?一瓶?)100%乙醇）办公椅扶手
7、0.5%铬钒明胶配方：明胶、麝香草酚（3粒/次 ）（-覃师兄有国产的）
8、中性树脂(熊师有)
需要领取的实验器材：
？？
25%氨水(北京天根生物技术有限公司)
磷酸二氢钠(成都金山化学有限公司)
磷酸氢二钠(天津巴斯夫化学有限公司)
中性树脂胶(北京天根生物技术有限公司)
柯达显影液(北京天根生物技术有限公司)
柯达定影液(北京天根生物技术有限公司)
酒精(郑州韦博化工有限公司)
氯仿(郑州韦博化工有限公司)
蔗糖，25%氨水，显影液，定影液，酒精，CXA，中性树脂
4%多聚甲醛的配制：取10xPBS100ml，向其中加入900ml去离子水稀释成浓度为1xPBS1000ml，称取40g多聚甲醛粉末，用1000ml 1xPBS溶解，因为多聚甲醛难溶解，所以实验过程中，将1000ml1xPBS分别用三个厚玻璃瓶分装成300ml，300ml和400ml三份，分别向其中加入12g，12g和16g多聚甲醛粉末。在40摄氏度烘箱中隔夜放置，使多聚甲醛完全溶解。 14%氨水500ml配制：取25%氨水336ml，加入264ml去离子水混合均匀。
95%乙醇500ml配制：取475ml 100%乙醇，向其中加入25ml去离子水。
90%乙醇500ml配制：取450ml 100%乙醇，向其中加入50ml去离子水。
80%乙醇500ml配制：取400ml 100%乙醇，向其中加入100ml去离子水。
75%乙醇500ml配制：取375ml 100%乙醇，向其中加入125ml去离子水。
50%乙醇500ml配制：取250ml 100%乙醇，向其中加入250ml去离子水。
30%蔗糖100ml溶液配制：称取30g蔗糖，加入70ml去离子水，充分搅拌直至完全溶解。
用100ml烧瓶，补充去离子水定容至100ml溶液。(是否需要准确定容??)
Golgi Cox液：由A液(5%重铬酸钾),B液（5%）和C液(5%铬酸钾)组成。
配制Golgi Cox液1000ml的步骤：
干式放电线圈A液：在200ml去离子水中加入10g重铬酸钾搅拌均匀成为浓度为5%重铬酸钾；
B液：在200ml去离子水中加入10g搅拌均匀成为终浓度为5%；
C液：在160ml去离子水中加入8g铬酸钾成为终浓度为5%铬酸钾。
1.在容量为500ml的烧杯中将A液和B液混合，边混合边搅拌。
2.在容量为1000ml的烧杯中将溶液C和400ml去离子水混合在一起。
3.缓慢的将混合好的A液和B液倒入C液中。并定容至1000毫升 ,
将配制好的Golgi Cox液在黑暗处放置5天才能使用。
CXA 溶液配制：将氯仿，二甲苯，100%乙醇按照1：1：1的比例混合即成为本实验中的CXA溶液。
载玻片的处理：.将载玻片置于水中，加清洁尔液然后煮沸30min，将煮过的玻片反复用流水冲洗10遍以上，然后浸泡在浓硫酸中24小时，24小时后用流水冲洗玻片10遍以上，用烘箱烘干玻片，将玻片浸泡于去离子水中一天，最后用烘箱烘干玻片。破真空阀>安全门卡
0.5%铬钒明胶配方：1.取明胶5.0g，放置于1000ml规格的烧杯中。2.加入去离子水500ml，加热到60℃左右，搅拌，使明胶溶解。3.加足去离子水至1000ml，加入铬钒0.5g，融化后溶液呈现蓝。4.加热至70℃，使溶质全部溶解。5.加入少量麝香草酚（3粒）。6.用滤纸将所得液体过滤至烧杯。7.将载玻片置于烧杯中1min中，捞出载玻片，在烘箱中烘干。
染过程
1. 将实验动物用10%的水合氯醛麻醉
2. 将已麻醉的动物固定在解剖台上,固定四肢,用左手持镊子夹其腹部皮肤,右手持剪刀自腹 部剪一小口,由此沿腹中线和胸骨剑突中线向上将皮肤剪至下颌,分离皮下组织,将皮肤翻向外侧,再沿腹中线和胸骨中线向上剪开胸骨,沿膈肌向两侧分开,并用止血钳将胸骨和胸部的皮肤前进,将止血钳翻向外侧,充分暴漏心脏.小心用镊子将心包打开.
3. 将灌注针插入左心室,同时剪开右心耳,打开调节阀,灌注生理盐水,待血液流净时改为灌注固定液多聚甲醛，直至全身组织器官变硬为止。
4. 将小鼠头剪下，分离皮肤和颅骨，小心将脑取出，暂粘滞阻尼系数置于生理盐水中。
5.将脑块浸入高尔基染液中，置于黑暗处浸泡14天，并每三天更换一下瓶中液体。
6. 第15天将脑块浸入30％蔗糖，至少浸泡三天。蔗糖用0.1M PB配制。
7.用震动切片机将脑块切成120uM厚度，将切片贴在载玻片上。载玻片事先经过严格处理：1.将载玻片用煮沸开水加洗洁精浸泡，刷洗2.用自来水冲洗10遍，烘干3.泡酸24h 4.自来水冲洗，烘干 5.dH2O浸泡俩次，各12h。
8.按照 清扫工具蒸馏水1min→30%氨水30min→蒸馏水1min→显影液2min→定影剂40-60min→蒸馏
水1min→50％酒精5min→70％酒精5min→80%酒精5min-90%酒精5min-95％酒精5min→100％酒精5min→100％酒精5min→100％酒精5min→CXA5min→CXA10min→中性树脂封片 的顺序做好染，显微镜下观察，计数树突分支及树突棘数目。
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