·全科基础论著·斯氏并殖吸虫囊蚴生物学及宿主适应性研究 杨树国，钟萍，张光玉
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【摘要】目的调查十堰地区不同月份溪蟹斯氏并殖吸虫囊蚴自然感染率，探讨理化因素对囊蚴孵出的影响，明确囊蚴生物学特性，观察囊蚴对实验动物适应性。方法定时定点捕获野外溪蟹，解剖不同月份捕获的溪蟹并计数比较其 体内囊蚴感染情况，实验观察囊蚴对温度的耐受性，生理盐水、蒸馏水及胆汁孵育囊蚴，判断不同理化条件对肺吸虫后尾
蚴孵出的影响。口饲囊蚴，感染后1 4月解剖小白鼠、大鼠、家兔及豚鼠，观察其在实验动物宿主体内的发育。结果
全年阳性溪蟹集中分布于4 11月份，囊蚴密度6月份最高而4月份最低，溪蟹体内囊蚴对45ħ及以上温度较敏感，后
尾蚴在胆汁内的孵出率高于生理盐水、蒸馏水。囊蚴在大白鼠体内可发育为成虫，而小白鼠、兔、豚鼠对斯氏并殖吸虫的
耐受性较差。结论斯氏并殖吸虫感染中间宿主具有季节差异性，大白鼠可作为斯氏并殖吸虫的实验终末宿主。
【关键词】斯氏并殖吸虫；囊蚴；生物学；宿主
【中图分类号】R383．29【文献标识码】A【文章编号】1674-4152（2013）01-0006-02
Biological Characteristics of Paragonimus Skrjabini Metacercaria and Adaptation to Host River Crabs YANG Shu-guo，ZHONG Ping，ZHANG Guang-yu．Department of Parasitology，Hubei Medical and Pharmaceutical College，Shiyan442000，Hubei，China
【Abstract】Objective To investigate the infection rate of Paragonimus skrjabini encysted metacercaria in river crabs captured
in Shiyan city in different months，explore the effects of physical and chemical factors on the hatch of metacercaria，discuss the bi-ology characteristic of Paragonimus skrjabini metacercaria，and observe the adaptation of Paragonimus skrjabini to their hosts．Methods The second intermediate hosts were anatomized and the cysts were counted in different months．The collected cysts were deal with physical and chemical factors so that the optimal conditions of incubation could be determi
ned．The experimental animals were fed with cysts to observe the development of Paragonimus skrjabini in1to4months later．Results The positive ri-
val crabs could be obtained from April to November．The infection rate of cyst in crab caught in June and April were the top and lowest one respectively．The cysts were sensitive to45ħand above temperature water．Hatchability of larvae in gall was higher than NSG and distilled water．The cysts could develop to adult in rat body，but mouse，rabbit and guinea pig showed the different survivability to cyst．Conclusion There is significant difference in the second intermediate host infected by Paragonimus skrjabi-
ni in different months．The rats could be experimental definitive host of Paragonimus skrjabini．
【Key words】Paragonimus skrjabini；Encysted metacercaria；Biological；Host
斯氏并殖吸虫是一种食源性人兽共患寄生虫，为我国独有虫种［1］，囊蚴感染人体后，童虫在人体内移行造成多脏器的损害。鄂西北作为斯氏并殖吸虫的流行区已得到证实，且对囊蚴的形态已有详细的描述。本实验探讨环境因素对溪蟹感染囊蚴的影响，及不同条件下后尾蚴孵出情况，斯氏并殖吸虫囊蚴对实验动物寄生适应性等生物学特性进行了观察，现将结果报道如下。
1材料与方法
1.1溪蟹捕获及囊蚴镜检计数选择十堰城区中间宿主孳生地作为长期调查地点，全年每月定点、定时观察溪蟹孳生环境、溪蟹密度。将各月捕获溪蟹带回实验室捣碎后，在解剖镜下检查蟹体囊蚴并计数，收集囊蚴备用。
1.2温度、生理盐水、蒸馏水及胆汁等对囊蚴和后尾蚴孵出的影响以45ħ、50ħ、55ħ、60ħ、65ħ为测试温度，在处理后2min、5min及10min不同时间点显微镜下观察处理前后囊蚴形态。在室温25ħ下将囊蚴置于生理盐水和蒸馏水中孵育5min，比较后尾蚴孵出率。在37ħ下将囊蚴置于100%和75%胆汁
作者单位：442000湖北省十堰市，湖北医药学院寄生虫学教研室
通讯作者：张光玉，：zgyymc@163．com 中孵育5 10min，比较后尾蚴孵出率。
1.3实验动物对斯氏狸殖吸虫囊蚴的适应性囊蚴口饲感染实验动物：小白鼠4只，10个/只；豚鼠7只，20个/只；家兔1只，30个/只；大白鼠10只，20个/只。感染后1 4月解剖存活实验动物，检查虫体在实验动物体内寄生部位和发育情况。
2结果
2.1溪蟹感染囊蚴的检查连续一年逐月捕获，显示1 3月溪蟹密度最低，平均为3只/月，5 10月密度最高，平均密度25只/月。选取4月、6月、9月及11月捕获的溪蟹做囊蚴感染的检查，结果显示：6月份
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为最高，而4月份为最低。见表1。
表1不同月份捕获阳性溪蟹数及检获囊蚴数
月份阳性溪蟹（只）囊蚴数（个）平均数（个/只）
4月20502．50
6月1326020．00
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9月3051417．13
11月2330013．04
2.2不同温度下囊蚴形态与后尾蚴孵出的实验观察将溪蟹放入45ħ、50ħ水中2min可杀死部分囊蚴，囊蚴形态无变化，内部结构清晰。55ħ水中10 min虽可杀死囊蚴，囊蚴结构不清晰，但有脱囊现象。放入60ħ、65ħ水中5min，囊蚴死亡率达100%，囊
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等电位端子箱·中华全科医学2013年1月第11卷第1期Chinese Journal of General Practice，January2013，Vol.11，No.1
蚴外形发生改变，较脆弱接触后易破碎，内部结构不清晰，经48h培养不能发育为后尾蚴。囊蚴在室温25ħ的生理盐水、蒸馏水中，后尾蚴的孵出率分别为12%、7%，蒸馏水中后尾蚴的孵出率明显低于生理盐水组。随后把分离的囊蚴放入胆汁中，置37ħ5min 后尾蚴孵出率为100%，75%胆汁中10min后尾蚴孵出率为96%，孵出的后尾蚴运动活泼。
2.3斯氏并殖吸虫对实验动物寄生的适应性小白鼠、兔、豚鼠感染囊蚴后寄生适应性较差，小白鼠感染后数天全部死亡。兔于感染后第30天、36天及85天在肠壁、腹腔及胸腔查到童虫。3只豚鼠感染后陆续死亡。第66天、75天、77天和91天存活豚鼠在肺组织或胸腔查到童虫。大白鼠在91d、111d解剖，肺脏、胸腔、肝脏结节内查到童虫。122d大白鼠在肺脏或胸腔积液中均查到成虫或虫卵。
3讨论
不同地区斯氏并殖吸虫第二中间宿主溪蟹阳性率存在一定差异，据报道，三峡库区为28．48%［2］，广州北部山区为36．73%［3］，神农架林区为31．38%［4］，福建博特溪蟹33．30%，华溪蟹为80．60%［5］，但阳性溪蟹体内囊蚴密度与季节的关系鲜有报道，本调查显示野外捕获阳性溪蟹与温度高低有直接关系，5 10月气温较高时，溪蟹活动频繁，溪水中微小生物较多，为
溪蟹生长、繁殖提供了充足的营养物质基础，使得溪蟹的密度增大，以6 9月溪蟹体内囊蚴密度为高，这可能与野生保虫动物在气温转暖后到溪边活动增多，排出的虫卵落入溪水，造成中间宿主多次感染，使溪蟹体内囊蚴密度与其他季节相比显著增高的因素有关。
溪蟹体内囊蚴对不同温度的抵抗力观察，45ħ及以上水温均可杀死囊蚴，溪蟹体内的囊蚴在一定时间内，随着温度升高和时间延长，囊蚴的形态结构发生变化，囊蚴的死亡率不断增大。在室温下生理盐水中后尾蚴的孵出率高于蒸馏水，而胆汁中的囊蚴经一定时间孵育，后尾蚴的孵出率明显高于生理盐水及蒸馏水，且孵出的后尾蚴运动活泼，运动幅度也较大，但2h后观察运动逐渐减弱，在浓度较高的胆汁中后尾蚴短期内的孵出率可大幅度的提高，与胆盐对肺吸虫囊蚴脱囊作用显著的研究结果相一致［6］。
糖化锅囊蚴可经多种途径感染实验动物，可经口、皮肤深埋及腹腔注射方式感染，王承全等［2］研究显示：以经口感染为最佳。本研究以口饲方式感染实验动物，结果发现小白鼠、兔、豚鼠感染囊蚴后，寄生适应性较差，死亡率较高。大白鼠可作为斯氏并殖吸虫的实验宿主，已报道感染后60d，大鼠体内的虫体主要为成虫［7］，虫体在家猫体内成熟时间也为60d［8］，但经腹腔注射感染，30d即可发育为成虫［9］，本次实验，感染后90d已有虫囊形成，与朱名胜等［10］实验结果相似，可初步推断，斯氏并殖吸虫经口感染实验宿主，性成熟时间最短约为60d，本时间段应作为保虫宿主驱虫的关键时期。从调查结果看，野生环境溪蟹肺吸虫感染率仍非常高，加强卫生宣教，应是肺吸虫病防治工
作重要内容，掌握斯氏并殖吸虫囊蚴的生物学特性，可为开展科学研究提供理论依据。
参考文献
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（收稿日期：2012-03-31）多聚甲醛配制
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中华全科医学2013年1月第11卷第1期Chinese Journal of General Practice，January2013，Vol.11，No.1
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