ICS07.060
CCS A 45 37山东省地方标准
DB37/T 4323—2021
海水增养殖区环境微塑料监测技术规范Technical specification for microplastics monitoring in mariculture zone 2021-03-11发布2021-04-11实施
DB37/T 4323—2021 海水增养殖区环境微塑料监测技术规范
1 范围
本文件规定了海水增养殖区环境中微塑料的监测内容与方法、样品分析、数据处理等方面的内容。 本文件适用于海水增养殖区水体、沉积物中的微塑料监测。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 17378.2 海洋监测规范第2部分：数据处理与分析质量控制
GB 17378.3 海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输
GB 17378.5 海洋监测规范第5部分：沉积物分析
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
海水增养殖区mariculture zone
具备开展增殖或养殖活动条件的海域。
3.2
微塑料microplastics
长度或等容粒径≤5mm的塑料颗粒。
3.3
微塑料丰度abundance of microplastics
单位体积水体或者单位质量沉积物中微塑料的个数。
4 监测内容与方法
4.1 监测前准备
灯光控制器
监测工作开展前应了解监测增养殖区的养殖设施类型、养殖对象及养殖特点，购置或配置外业调查用品及实验室分析仪器、试剂等，并确定监测方案。
4.2 监测内容
水体、沉积物中微塑料的形状、成分、粒径、丰度及颜等。
4.3 站位布设
4.3.1 监测站位布设原则
采样断面（点）的设置以海水增养殖区为主，同时关注周边的旅游区、河口区、排污区等。
4.3.2 监测站位布设方法
面积≤50km2的海水增养殖区至少设置3个断面，面积＞50km2的海水增养殖区至少设置4个断面，断面垂直于岸线布设，每个断面布设3个水体和沉积物微塑料监测点。在受养殖活动影响较小的海域设置1个监测对照点。若监测附近海域存在旅游区、河口区、排污区等，需在此区域增设1个监测断面。
4.4 样品采集与处理铣床飞刀
4.4.1 水体微塑料监测
4.4.1.1 监测器具
开展表层水体微塑料拖网监测，可使用具有矩形网框，网衣孔径为330μm的微塑料拖网进行。如需获取小粒径微塑料样品时，可使用击开式不锈钢采水器进行。 4.4.1.2 监测方法
水性涂料分散剂
进行表层水体拖网监测时应在网口增设流量计。将网具固定悬挂于调查船的左（或右）舷，调整拖缆长度以保证网口位于不受船尾螺旋桨搅动或船体排水口影响的区域，调整网具浮漂与配重以保证网口浮出水面的比例固定，姿态稳定，根据网框高度标识记录水下部分网口高度。拖网时调查船船速≤3节，拖网持续时间为10min～15min。拖网结束后，将网具以＜0.5m/s的速度缓慢收放至调查船内。
使用采水器进行时，需采集不受船尾螺旋桨搅动或船体排水口影响区域的水体样品，总采水体积≥25L。
平行样品采集数量应不少于总监测站位的10%。参照附录A做好记录。
4.4.1.3 样品保存
拖网采样结束后，将网中收集的样品冲洗进不锈钢筛（150目）中，再将筛中样品转移至玻璃样品瓶内。样品转移辅助工具须为非塑料制物品。
使用不锈钢采水器时，可将采集的水体样品整体转移至玻璃样品瓶内带回实验室处理，也可现场使用便携式真空抽滤泵进行抽滤，将滤膜放入玻璃培养皿带回实验室。抽滤前应设置空白样，以检测现场空气中的微塑料污染状况。
4.4.2 沉积物微塑料监测
4.4.2.1 监测器具与监测方法
沉积物微塑料监测使用采泥器进行，调查方法按照GB 17378.5的规定进行，采集表面至5cm的沉积物样品，重量不少于500g。
平行样品采集数量应不少于总监测站位的10%。参照附录A做好记录。
4.4.2.2 样品保存
使用非塑料制采样勺将样品转移至玻璃样品瓶或铝箔袋内带回实验室。
4.4.3 样品管理
调查人员需对样品的接收、贮存、标识、运输及流转等过程进行质量控制，按照GB 17378.3的规定进行。调查过程中尽量穿着棉质衣服，佩戴棉质手套等，减少人为污染。
5 样品分析
5.1 水体微塑料样品处理
将水体样品转移至1L烧杯中，加入25mL H2O2（30%）溶液，使用玻璃棒或摇床充分混合后使用电热
板或水浴锅加热至75℃，静置24h，利用真空抽滤泵进行抽滤。将滤膜放入玻璃培养皿，避光自然风干。
5.2 沉积物微塑料样品处理
称取50g沉积物样品，置于干燥箱60℃烘干至恒重，通过计算重量差的方法测定沉积物样品含水率。
高速车针称取200g沉积物样品放入1L玻璃烧杯中，缓慢加入饱和氯化钠溶液，使用玻璃棒或摇床使其充分混合，静置沉降5分钟后继续加入饱和氯化钠溶液进行浮选。将浮选上清溶液转移至另一玻璃烧杯中。可重复上述浮选步骤以提高微塑料的回收率。随后，在上清液中加入25mL H2O2（30%）溶液，使用玻璃棒或摇床充分混合后使用电热板或水浴锅加热至75℃，静置24h，利用真空抽滤泵进行抽滤。将滤膜放入玻璃培养皿，避光自然风干。
浮选试剂也可采用饱和碘化钠溶液或饱和碘化钾溶液。
5.3 微塑料样品镜检
使用体视显微镜对玻璃纤维滤膜上的微塑料样品进行识别、拍照和计数。滤膜在显微镜下以从左到右的Z字形进行镜检。利用显微镜CCD镜头进行拍照，并使用相关图像软件对微塑料的粒径进行测量，按其最长边计算长度。
5.4 微塑料样品成分鉴定
使用显微傅里叶变换红外光谱仪对镜检挑出的疑似微塑料颗粒进行化学成分鉴定。所获图谱与标准谱有70%以上的匹配度可认定为相应的物质。最后根据鉴定结果统计微塑料丰度。
5.5 质量控制
实验器具使用前应用超纯水冲洗3遍以上，烘干后备用；实验所用玻璃纤维滤膜孔径应≤5μm；实验所用溶剂均使用玻璃纤维滤膜过滤备用；抽滤完成后使用超纯水洗净烧杯内壁和抽滤装置；实验用敞口器皿需使用铝箔覆盖，药品或试剂使用完毕后应及时封口；操作人员穿戴纯棉实验服；实验进行时关闭门窗并避免随意走动；每次实验应设置3个空白对照。
6 数据处理
6.1 微塑料丰度计算
6.1.1 水体微塑料丰度计算
使用水平拖网调查时，按公式（1）计算水体微塑料丰度：
(1)
D=N
W×H×L
式中：
D——微塑料丰度，单位为个/立方米（items/m3）；
N ——样品中微塑料数量，单位为个（items）；
W——采样网具的网口宽度，单位为米（m）；
H——采样网具的水下部分网口高度，单位为米（m）；
L——调查船拖网时行驶的距离，单位为米（m）。
如拖网网口增设有流量计，按公式（2）计算水体微塑料丰度：
(2)
D=N
W×H×(f i−f0)×k
式中：
D——微塑料丰度，单位为个/立方米（items/m3）；
N——样品中微塑料数量，单位为个（items）；
W——采样网具的网口宽度，单位为米（m）；
H——采样网具的水下部分网口高度，单位为米（m）；
f i——网口流量计的结束值；
f0 ——网口流量计的初始值；
k——网口流量计的滤水系数。
使用采水器调查时，按公式（3）计算水体微塑料丰度：
(3)ad8009
D=N
V
式中：
D——微塑料丰度，单位为个/立方米（items/m3）；
N——样品中微塑料数量，单位为个（items）；
V——采集水样的体积，单位为立方米（m3）。
6.1.2 沉积物微塑料丰度计算
进行沉积物微塑料调查时，按公式（4）计算沉积物微塑料丰度（干重）：
(4)
D=N
Q×(1−w0)
式中：
D——微塑料丰度，单位为个/千克（items/kg）；
N——样品中微塑料数量，单位为个（items）；
Q——沉积物样品的重量（湿重），单位千克（kg）；
61850 mmsw o——沉积物样品的含水率，单位%。
6.2 质量控制
按照GB 17378.2规定进行。
6.3 数据汇总分析和监测报告
监测分析结束后，对监测数据进行汇总分析，编写监测报告。报告格式和内容参照附录B。
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