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QuEChERS结合气相谱-三重四极杆串联质谱法快速测定地参中63种农药残留...

2021 Vol.40 No.3

•170* Serial No.349

China Brewing

Analysis and Examination

QuEChERS 结合气相谱-三重四极杆串联质谱法快速测定地参中

63种农药残留

黄小兰，周祥德何旭峰杨勤周浓2*

*，易良键郑容6收稿日期:2020-09-20

修回日期:2020-11-24

基金项目：重庆市自然科学基金项目资助(cstc2019jcyj-msxmX0770)；重庆市恒物通农业开发有限公司委托项目

作者简介：黄小兰(1986-)，女，工程师，硕士，事药食同源植物资源的开发和利用工作。

*通讯作者：周浓(1978-)，男，教授，硕士，主要从事药用植物栽培与量控制工作。

(1.重庆市万州食品药品检验所-重庆404100/2.重庆三峡学院生物与食品工程学院三峡库区道地药材绿种植与深加工

重庆市工程实验室-重庆404100; 3.重庆三峡医药高等专科学校中医学院。重庆404100)

摘要：采用QuEChERS 前处理技术结合气相谱-三重四极杆串联质谱法(GC-MS/MS )对不同产地的10批地参中的63种农药残留进行测定。样品用1%醋酸-乙H 溶液和QuEChERS 萃取盐包提取，经1.2 4硫酸镁、400 mg 2丙基乙二胺(PSA )及200 mg 石墨化炭黑(GCB ) 净化，在选择反应监测模式(SRM )下检测，基质匹配内标法定量。结果显示,63种农药在5〜500ngmL 质量浓度范围内线性关系良好，相关系数(R 2)均〉0.996 4；在0.05 mg/kg 、0.25 mg/kg 和0.75 mg/kg 3个添加水平下，各农药化合物加标回收率为71.5%〜120.4%，方

法的相对标准偏差(RSD )为0.12%〜9.70%；仪器精密度试验结果RSD 为1.93%〜5.06%；检出限(LOD)为0.5〜3.6 !g/kg ，定量限(LOQ)为 1.7〜12.0 !gkg 。不同产地地参均不同程度检出5种农药残留，包括氯菊酯、丙环呼

关键词：地 QuEChERs ；气相谱-三四极杆串联质谱药

中图分类号：0657.7 文章编号-0254-5071 (2021)03-0170-07 doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2021.03.032

引文格式：，周祥德，，• QuEChERS 结合气相谱-三四极杆串联质谱法快速测定地参中63种药［J ］ •中国酿造,

2021,40(3):170-176.

Determination of 63 kinds of pesticide residues in Lycopus lucidus by QuEChERS-GC-MS/MS

HUANG Xiaolan 巴 ZHOU Xiangde 1, HE Xufeng 1, YANG Qin 3, ZHOU Nong 2*, YI Liangjian 1, ZHENG Rong 1

(l.Chongqing Wan^hou Food and Drug Inspection Institute, Chongqing 404100, China; 2. Chongqing Engineering Laboratory for

Green Cultivation and Deep Processing of the Three Gorges Reservoir Area S Medicinal Herbs, College of F ood and

Biological Engineering, Chongqing Three Gorges University, Chongqing 404100, China;

3.Chongqing Three Gorges Medical College, College Traditional Chinese Medicine, Chongqing 404100, China)

Abstract ： 63 kinds of pesticide residues in 10 batches of Lycopus lucidus from different habitats were determined by QuEChERS pretreatment combined

with GC-MS/MS. The samples were extracted with 1% acetic acid-acetonitrile solution and QuEChERS, purified by 1.2 g MgSO4, 400 mg N-propyleth- ylenediamine (PSA) and 200 mg graphitized carbon black (GCB), detected under selected reaction monitoring (SRM) mode, and quantitated with the matrix-

matched internal standard method. The results showed that 63 pesticides had good linearity in the range from 5-500 ng/ml, and the correlation coefficients u R 2)

were greater than 0.996 4. The standard recovery rates of each pesticide compound were mainly between 71.5% and 120.4% at the three spiked concentration levels (0.05 mg/kg, 0.25 mg/kg, 0.75 mg/kg), and the relative standard deviation (RSD) of t he method was between 0.12% and 9.70%. The RSD of instrument

precision was between 1.93% and 5.06%, the limit of detection (LOD) was 0.5-3.6 !g/kg, and the limit of quantification (LOQ) was 1.7-12.0 !g/kg. 5 kinds

of p esticide residues in L. lucidus from different habitats were detected, including permethrin, propiconazole, isazofos, benalaxyl, and trifloxystrobin.

Key words ： Lycopus lucidus ; QuEChERs; gas chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry; pesticide residues

地参为唇形科地笋属植物硬毛地笋(.Lycopus lucidus var. hirtus Regel )的干燥根茎，其性平味甘，有化瘀止血、益气利水之功效［1］，是我国名贵的中草药，曾收载于2009版《湖南省中药材标准》眄晚秋以后采挖出饱满脆嫩的根茎可作蔬菜食用，其营养丰富、味道鲜美，享有“蔬菜珍品”之

美誉，是一种传统的药食兼用佳品® 于地的中其营养和药用

问，而对其安全指标的研究鲜见报道。

近来，性有物的

注，中药材、食品中农药残留超标问题日益凸显冏。农药残

标，

中药材的声誉，

约了中药的发展。由于环境、水土的污染［9］，化学农药

的用用，植物中

药性叫

种植中

种化的，

药

地

药安全性

控制显得十分必要。

2021年第40卷第3期

总第349期

-171-

中国酿造

分析与检测

大部分农药化合物具有能气化、热稳定性好和沸点较低等特点，适用于气相谱法［11'121进行测定，但气相谱仪

检测器单一无法满足同时测定不同种类的农药化合物，且定性效果较差。气相谱-质谱法具有定性准确、灵敏度高和

通量高等优点［13-16］，目前广泛应用于食品、农产品和中药材等植物源性样品中农药残留的检测。近几年兴起的农药残

留检测前处理方法QuEChERs 一种应用农产品检测方的

样品前处理技术，具有

、等特点［15-16>_

用QuEChERS 前处理合气相谱-三重四极杆串联质谱法(gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry , GC-MS/MS)同时快速测定地参(Lycopus lu-

cidus)中63种农药残留量。通

不同产地农药残留

用农药品种, 期

的定 , 的种植理产1材料与方法1.1材料与试剂

63种农药标准品溶液(1 000 !g/mL)、环氧七氯B

(100 !g/mL)：中国计量研究院；乙酸乙酯、乙膳(农残级):

有 QuEChERs (6 g 无水硫酸镁、1.5 g 乙酸钠)3QuEChERs 净化管(1 200 mg 硫酸镁、400 mg N -丙基乙二胺(primary secondary a mine , PSA)

及200 mg (graphitized carbon black , GCB))：美国

Agilent

用。于,

重三

物食品

授鉴定为唇形

科地笋属植物硬毛地笋(.Lycopus lucidus var. hirtus RegeD 的干燥根茎。样品预处理方法照湖南省中药材准［2］，将

洗净泥沙，晾干水分，置于恒温干燥箱45 !烘干至恒质量，将其粉碎35目筛，备用。

1.2仪器与设备

完美分割TSQ 8000 EVO 型三重四极杆气质联用仪(配TraceFinder 定性定量软件赛默飞世尔有 Milli-Q

Advantage A10型超纯水机：美国Millipore 公司；Sigma4-16S

型高速离心机：德Sigma

ML204型万分之一分析天

梅特勒- 多仪器(上海)有限公司。

1.3方法

1.3.1气相谱-质谱条件

谱柱为赛默飞石英毛细管Z TG-5MS (30 m x 0.25 mm x

0.25 “m ；升温程序：初始温度40 °C ，保持1.5 min ；以25 !/min 升温至90 °C ，保持1.5 min ；然后以25 C /min 升温至180 °C ,

保持1.5 min ；再以5 C /min 升温至280 °C ，不保持；最后以 10 C /min 升温至300 !，保持5 min 。载气：高纯氨气(He)

(纯度! 99.999W ；流速1.2 mL/min ；进样口温度270 C ，脉冲不分流进样；进样量1 “L ；离子源：电子电离(electron

ionization ,ED 源；离子源温度300 °C ；传输线温度300 C ；扫描方式：选择反应监测模式(selected reaction monitoring ,

SRM)；各农药合物的质谱详见表1。

表1各农药化合物及内标的保留时间、监测离子对和碰撞能量

Table 1 Retention time, monitoring ion pairs and collision energy of each pesticide compouncl

序号农药化合物

保留时间/min 定量离子对碰撞能量/eV 定性离子对碰撞能量/eV

序号农药合物保留时间/min 定量离子碰撞能量/eV 定性离子碰撞能量/eV 异丙威10.46136.1〉121.1(8)121.1〉77(18)19莠灭浄

15.31227.1〉58.1(12)227.1 170(10

2氧乐果11.12

156〉110(8)110〉79(10)

灵15.39160.1〉130(18)131.9>117(12)

3灭线磷

11.43200〉158(6)

157.9>96.9(16)21草15.40241.1 58.1(12

226.1〉184.1(8)

氯苯胺灵11.60213〉127(14)171〉127(8)

杀螟硫磷15.78277 109(16125〉79(8)5治螟磷11.99

322〉202(10)202〉145.9(10)23甲基喀睫磷15.79

305.1 180.1(8

290.1〉125 (20)

甲拌磷12.15260〉75 (8)

75〉47 (8)24

甲拌磷亚枫

16.07153 97( 1096.9>65(10)7莠去津

12.83215.1〉58.1(12)200〉122.1(8)2516.07173.1 99(1292.8〉63 (8)

8五氯硝基苯13.28

294.8〉236.9(14)213.8S141.9 (28)26

甲拌磷枫16.27199 143(10125—97 (5)9烘苯酰草胺

13.31175〉147(15)173〉145(15)27倍硫磷16.35278 109(18245.3 125(12

地虫硫磷13.33246〉109(14)

137〉109(6)

28毒死脾16.40313.9 257.9(12零点在线

196.7〉107 (36)11二嗪磷

13.50

179.1>121.5(26)137.1〉54.1(20)29对硫磷16.44291 109(12

109 81( 10

氯—磷13.85161〉119(8)118.9〉76(18)30

三氯杀嫡醇

16.50250.9 139(12111 74.9(1213抗™威14.28

238.1〉166.1(10)166.1〉55(18)

31三—酮16.52

208 111(20208 180.8(8

磷胺

14.71264.1〉127(12)

127〉94.9(16)32

水胺硫磷16.65136 69(30121.1 65(1415草14.88146〉117.7(8)131.8〉117(14)33甲基异柳磷

17.21241.1

121.1(20

199 65(3416

甲基毒死脾14.96

285.9>93 (20)125〉47(12)

环氧七氯B 17.40

354.8 264.9(15

352.8 316.8(5

17甲基对硫磷

14.97263>109(12)124.9〉47(12)35戊菌—17.47248 157(22158.9 89(28

甲基立枯磷15.11

266.8〉252(12)

265〉219.9(20)

唾硫磷

17.79

157.1 102(22146 118.1(10

2021Vol.40No.3

•172・Serial No.349China Brewing Analysis and Examination

续表

序号农药化合物保留时1可/

/in

定量离子对

碰撞能量/eV

定性离子对

碰撞能量/eV

序号农药化合物

留/

/in

定量离子

碰撞能量/eV

定性离子

碰撞能量/eV

37腐霉利17.99283>96.1(8)95.9>53(16)517菌酯22.13145095(14)116.1>63(24) 38杀扑磷18.23145>58(14)145>85(6)52戊％醇22.54250125(20)125>89(16) 39丁草胺18.69188.1>160.1(10)160131.7(12)53异菌：23.49315.7>247(10)314>245(10) 40己％醇19.07231>175(10)213.9>123.5(28)54漠嫡酯23.79340.8>185(14)184.975.5(30) 41氟酰胺19.13281>173(10)173>95(28)55联苯菊酯23.93181>165.9(10)165.1163.6(24) 42丙*磷19.28336.9X266.9(12)296.7>268.9(10)56甲？菊酯24.14181>126.8(28)97.155.1(6) 43丙草胺19.39238.1>146.1(10)202.1>145.5(14)5724.22204>176.1(10)140.962.9(26) 44狄氏剂19.42262.8>190.9(30)262.8>227.8(16)58伏杀硫磷25.03182>74.8(30)121.1>65(10) 45青菌％19.69179>90(28)179>125(14)59高效氯氟？菊酯25.85207.9>180.9(8)180.9>152(22) 46乙硫磷20.94230.9>128.9(22)153>97(10)60氯苯CD醇25.98219>107(10)13974.9(26) 47三％磷21.39172.1>77.1(25)161>105.7(12)61菊27.18183.1>153(12)163>91.1(12) 48苯霜灵21.73148.1>77(30)91165(12)62哒；灵27.38147.1>117.1(20)147.1>119.1(8) 49敌瘟磷21.79310_109

(26)172.9>65.1(30)63青苯％28.25198.1>129.1(8)!2977.8(8) 50丙环％21.90172.9>74(38)172.9>109(24)64漠？菊酯31.86252.8192.9(16)!8!!52.(22)

1.3.2样品溶液制备

参照G'23200.113—201）《植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定》旳进行样品前处理，即称取混

合均匀的地参粉末2-（精确至0.0001-），置于50/L塑料离心管中，加水5/L润湿30/in，加入15.0/L1%醋酸-乙月青溶液，涡旋10min，冷冻30/in，加入QuEChERs萃取盐包和2颗陶瓷均质子，盖上盖子，剧烈振荡1/in后4000r/min 离心5min。准确吸取8.0/L上清液加入QuEChERs净化管中，涡旋混匀1/in,4000r//in离心5/in，准确吸取3.0/L 上清液于10/L氮吹管中,40!水浴氮吹至近干。加入20^L 内标溶液，加入1.0/L乙酸乙酯复溶，过0.22!/微孔滤膜，测。

1.3.3标准曲线的配制

称取样品（质），照“132”项下处理步骤除不添加溶液外同质溶液。

精密量取内标物质环氧七氯'（质量浓度为100!g//L）1.0/L，置于20/L容量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，质量 5.0!g//L的溶液。

精量取农药准品溶液100!L置于10/L容量瓶中，乙酸乙定容至质量10!g//L混合准液。后乙酸乙进行质量5ng//L10ng//L50ng//L100ng//L250ng//L 500ng//L的系列混合标准液。质溶液氮吹干，分别加入1.0/L混合标准液复溶，加入20!L际溶液，混匀，质混合准液，上前，0.22!/。照“1.3.1”的测定，定量，农药化合物物质量，农药化合物物K Y），准，

。1.3.4精密度及回收率试验

取 1.3.3项下同混合准液照 1.3.1的行测定6，农药化合物的

准偏差（relative standard deviation,RSD）得仪器精密度结果。称取空白基质地参粉末2g（精确至0.0001g），按0.05/g/kg、0.25/g/kg、0.75/g/kg低中3水平添加混合标准溶液，

水行3进行测定，代入准

。

1.3.5检出限和定量限

参照[18]的，取0.05/g/kg加标水平的样品进行，测定，，3的

K li/it of detection,LOD）,10时的

为定量限（li/it of quantitation,LOQ）。

2结果与分析

2.1农药指标的选择

63种农药的离子1。

图中化合物序号同表1。

图163种农药混合标准溶液GC分析总离子流谱图Fig.1Total ions chromatogram of63kinds of pesticide mixed standard solutions ahalyzed by

2021年第40卷第3期

总第349期

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中国酿造

分析与检测

农药残留超标的现象主要是人为因素引起的，种植户缺乏相关知识或者存在逐利心理，导致农药的滥用。本文

参考了GB 2763—2019《食品安全国家标准食品中农药最

大残留限量》问和《中国药典》㈣里的农药检测指标，结合此类植物的常见病虫害，选择了其中63种农药进行测定，包

括有机磷、有、虫和类，盖禁

用、限用和常用农药，、种类齐全。

2.2基质效应的消除

基质效应是质谱分方中常见的因素，分为增

强和抑制2种作用

,21-

。预试验发现，地参基质对大部分农药

有效，

的方有

和基质

匹配标准

。由于本试验采用QuEChERs 前处理方法，

，

基质方，

基质标准

了基质效应。

2.3各农药化合物的线性关系、检出限及定量限

农药物的留、方、相关系数(R )、

检出限和定量限见表2。结果显示各化合物在5-500 ng/mL

的质量浓度范围内相关系数(R)为0.996 4〜0.999 9，表明所

用方

，分要求，检出限为0.5〜3.6!gkg ,

定量限为1.7〜12.0!g/kg 。

表2 63种农药化合物的回归方程、相关系数、检出限、定量限和仪器精密度

Table 2 Regressio n equati o n, determi n atio n coefficie n t, limit of detect i on , limit of qua n titatio n and in s trument precisio n of 63 kinds of pesticides

序号农药

物方