经验交流空
史艳艳
(天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心300402)
摘要：酶联免疫吸附技术是一种应用于饲料和食品安全检测的快速检测技术，可对农兽药残留、违禁药物使用、有害微生物、生物毒素和转基因食品安全等进行定量和定性检测，由于酶联免疫吸附技术既可以检测样本中的抗原，也可以检测抗
体，因此，选择性高，检测结果的特异性和灵敏度也较高，其在饲料和食品安全检测应用前景广阔。本文从技术原理、试验类型和技术优缺点对酶联免疫吸附技术进行系统概述，介绍酶联免疫吸附技术在饲料和食品安全检测中的应用，以期更好地普及和推广酶联免疫吸附技术应用。
关键词：ELISA；饲料安全；食品安全；应用
酶联免疫吸附技术(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)是基于抗原抗体反应的一种新型、快速的免疫测定技术。由于ELISA检测技术的灵敏度高、特异性强、选择性好、 实用性强，且不需要大型仪器设备，对工作人员的专业技能要
求不高，被广泛应用于分析化学、生物药学、临床医学和食品
安全等领域的检测。ELISA检测技术不仅可以对饲料和食品中
的药物残留、有害微生物和生物毒素等物质进行定性和定量分析，还能应用于转基因食品的安全检查，为饲料及食品安全提
供参考依据。
1酶联免疫吸附技术概述
1.1技术原理
ELISA是基于抗原-抗体的特异性结合反应建立起来的一
种快速检测技术，即首先通过固相状态的载体吸附已知的抗原
或抗体，待测样本中对应的抗体或抗原与之结合形成特异性的
抗原抗体复合物，通过洗涤的方法区分固相载体上的抗原抗体
复合物和其他物质，再加入酶标记的抗原或抗体，也会岀现抗
原和抗体特异性结合反应结合在固相载体上，加入酶反应的底
物后，底物由酶催化为带颜的产物(颜变化为定性检测)，
通过吸光度值计算待测样本的抗原(或抗体)量。由于产物的量
与标本中受检物质的量直接相关，ELISA还可以进行定量分析。
1.2试验类型
ELISA检测技术根据待检物质类型和检测条件主要分为间
接法、竞争法和夹心法。间接法主要应用于抗体检测，即将已
知抗原和固相载体结合，加入待检样本，其特异性抗体和固相
抗原结合形成固相抗原抗体复合物，洗涤后固相载体上只留下
特异性抗体，再加入酶标抗抗体与其结合，间接对抗体标记上酶，加入酶的底物进行显即可。抗原程度的高低直接影响间
接法的特异性。竞争法主要用于小分子抗原的检测，即待检样
本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合，若待检
样本中的抗体含量多，其结合在固相上的酶标抗体会减少，因此，阴性反应颜比阳性反应颜更深更明显。夹心法主要用
于大分子抗原检测，即通过固相抗体去检测待检样本中的抗原，该方法更适合测定二价或二价以上的分子，可以形成两位
点夹心。
作者简介：史艳艳(1982.12-)，女，天津市宝坻区人，大学本科，兽医师，1.3试验优缺点
(1)优点：ELISA检测技术既可以检测抗原，也可以检测
抗体，其反应特异性高、灵敏度强、试验操作简单、耗时短，
不需要大型仪器设备，结果可读性高，分析简单且成本低，是
当下较为理想的饲料和食品安全检测技术之一。
(2)缺点：ELISA检测技术对试剂的选择性高，对相对分
子量小的化合物检测难度大，且结构相似的化合物还会岀现不
同程度的交叉反应，因此，未来需要从单克隆抗体研发入手，
加速不同检测ELISA试剂盒的开发，更好地普及和推广ELISA
检测技术。
2酶联免疫吸附技术在饲料及食品安全检测中的应用
2.1农药残留的检测
农药残留是威胁饲料和食品安全的重要因素之一，还会降
低我国副产品的岀口率，目前农业残留种类主要包括有机磷、
有机氯和拟除虫菊酯类等，有机磷农药杀虫范围广，应用范围大，对人畜的危害性较高，高效液相谱法、气相谱法和薄
层层析法检测有机磷农药残留，样品处理操作负责，而ELISA
检测技术。邢玮玮和陈燕敏(2018)通过ELISA技术测定食品
有筋网
中有机磷农药残留，同时对比气相谱法和高效液相谱法，
结果发现ELISA测定结果的可靠性更高，且操作更为方便|1］。
监控摄像机支架
2.2违禁药物的检测
盐酸克伦特罗(CL)是一种肾上腺类神经兴奋剂，CL非
兽药也非饲料添加剂，常用于支气管哮喘的；莱克多巴胺(RAC)是一种人工合成的克仑巴安茁肾上腺受体激动剂，常
用于充血性心力衰竭症。但CL和RAC人畜食用后会产生
副作用，我国境内分别于2002年9月和2011年12月在饲料
和饮用水中食用。但仍有部分养殖户私用“瘦肉精”来抑制脂
肪的合成，提高动物产品瘦肉率。贺健强等(2019)用ELISA
试剂盒和液相谱串联质谱法(LC-MSMS)同时测定动物饲料
中的CL和RAC，结果发现，饲料样品残留量在0.1ug/kg水平以
上时，ELISA检测方法是一种快速筛查方法，且定性和定量结果
可以作为初步，快速筛查依据，而LC-MSMS可用于精准定量|2。
2.3有害微生物的检测
饲料中的有害微生物不仅会降低饲料品质，畜禽食用后还
主要从事兽药、饲料和畜产品残留检测工作。
2021.4国禽业95
与经验交流
互联网在甘州区养殖业中的应用及建议
常嵘张乐年
(甘肃省甘州区农业农村局动物卫生监督所734000)
摘要：随着我国科学技术的不断提高，网络信息技术得到迅速发展，并且在不同行业得到推广。目前，网络信息技术是现
代技术的领头羊，在社会不同层和不同行业得到广泛应用。发展现代化畜牧业离不开网络技术的支撑，在激烈的市场竞争 中，畜牧产业必须从饲养管理到加工销售等环节都需要更科学的管理，畜牧业信息化的普及自然成为提升畜牧业生产效率 的必然手段，本文结合畜牧业实际情况提出一些建议供大家参考遥
关键词：互联网；养殖业；现状及建议
格宾笼挡墙1畜牧业信息化意义
随着信息技术高速发展，物联技术产业异军突起，成为一
种新型技术产业， 推动了我国畜牧行业的改革， 提高了畜牧业
养殖水平。畜牧业互联网信息技术推动了整个畜牧业的信息发 展，使动物及动物产品追溯系统进一步完善，加强了畜牧产品 的监管力度。保证动物性食品安全，保障人民生命财产，维护
社会稳定。
目前，信息化在我国畜牧业并不突岀，同西方发达国家相
比还有一段距离，如畜牧业信息资源不足；畜牧业信息技术成
果应用程度不高；畜牧业网络建设不规范，规模小且散，各部
作者简介：常嵘(1989.3-)，女，甘肃省张掖市人，硕士，兽医师，主要从事动物卫生监督，兽药饲料监察等工作。
会扰乱肠胃微生物菌，对畜禽是一种危害性较大的内源性污 染，可直接威胁畜禽生命健康。沙门氏菌和大肠杆菌都是饲料 中常见的有害微生物，饲喂时必须除去病原微生物污染的饲 料，提高饲料安全性遥韩志辉和张红见(2011)通过Dot- ELISA 对西宁市某饲料厂饲料沙门氏菌进行检测发现，Dot- ELISA 法与常规分离鉴定技术的符合率为82.23%，和常规分离鉴
定技术相比，ELISA 检测技术不仅缩短检测时间，其较强的特异
性和敏感性可以支撑ELISA 技术应用于饲料中沙门氏菌检测|3遥 2.4生物毒素的检测
真菌是造成饲料毒素产生的关键，饲料中常见的生物毒素
有黄曲霉毒素、玉米赤烯酮和霉菌毒素等。姚静静等(2019) 首先制备了高灵敏度的AFB1单克隆抗体，并通过ELISA 检测 方法对粮食和饲料中的黄曲霉毒素B 1进行检测，其AFB1单克 隆抗体的效价高达5.12X105，检测范围为0.014~1.920ng/ml，且 与其他霉菌毒素无交叉反应，成功建立了灵敏度高和特异性强
的AFB1间接竞争ELISA 检测方法|4］遥张元杰(2018)通过
ELISA 检测技术测定临沂市5个县区150份煎饼类食品中黄曲 霉毒素含量，结果发现，140份样本都检岀了黄曲霉毒素，其中
102份为黄曲霉毒素B 1，含26份黄曲霉毒素B 1超标样本|5］遥 2.5转基因食品的检测
转基因食品是当下发展最快的新型食品， 可以通过基因工
程人为改变生物形状、 营养价值、 产品品质和数量等， 但转基 因食品的安全性、伦理学和环境污染情况也一直困扰广大消费 者的选择， 越来越多的国家采取强制性转基因食品标识让消费
立式升降机者享有知情权。转基因食品检测的常用方法有聚合酶链式反 应、ELISA 检测技术、侧流技术和生物芯片技术，其中ELISA 检测方法特异性强、 成本低、 稳定好， 因此被广泛应用于转基
因食品安全检测当中。李小宇等(2016)通过双抗夹心ELISA隔离桩
检测技术对转Bar 基因抗除草剂大豆(膦丝菌素乙酰转移酶)
进行检测，确定了最低检测限为0.04ng/ml, ELISA 检测技术的 重复性变异系数小于3%，且根、茎、花、叶、种子不同部位
都可检测到该蛋白的表达|6］遥
3 结语
随着人们对动物源性食品安全问题的关注， 操作简便、 高 灵敏度和特异性的ELISA 检测技术被广泛应用于饲料和食品安
全检测中，为我国畜牧业健康和食品安全提供重要保障，但要
钻机转盘想真正解决饲料和食品安全问题，还需要从源头入手，加强对 饲料生产、 加工和农兽药销售行业的管理， 规范养殖户的饲养
方法和药物使用，减少药物残留，为畜禽提供一个健康稳定的 环境，才能为广大人民众提供安心安全的动物源性食品。
参考文献:
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⑹ 李小宇，张春雨，郭东全，等.双抗夹心ELISA 检测转Bar 基因抗除草剂
大豆［J ］.食品科学,2016,37(4)：222-225.
9碣国禽业
2021.4
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