(GB 5413.37-2010第二法)
一、原理:
亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当试样通过亲和柱时,抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合,形成抗体—抗原复合体。用水洗柱除去柱内杂质,然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素M1,收集洗脱液。用带有荧光检测器的高效液相谱仪测定洗脱液中黄曲霉毒素M1含量。 二、所需仪器
1、高效液相谱仪
(配荧光检测器—具有365 nm激发波长、435 nm发射波长,在适当的谱条件下能够测定0.02 ng的黄曲霉毒素M1(相当于5倍噪音))
锡渣分离机 2、离心机(转容50ml角转子,转速10000r/min)
3、氮吹仪
4、固相萃取装置(带真空系统)
5、水浴锅(温控30℃±2℃,50℃±2℃;温范25℃~60℃)
6、天平:感量为0.01 g
7、PH计:精度0.01
8、旋转蒸发仪(奶油样品制备)
9、紫外分光光度计(标液浓度的校正,波长范围为200nm~400nm)
三、试剂及耗材
1、黄曲霉毒素M1免疫亲和柱
2、黄曲霉毒素M1标准品
3、反相谱柱 C18 4.6*250 加有反相谱材料的保护柱
5、移液管:1ml, 2ml, 50ml
6、烧 杯:50ml, 250ml
7、分液漏斗:250ml(干酪和奶油样品制备)
8、容量瓶:100ml
9、一次性注射器:10ml, 50ml
10、针式过滤器(水系)0.22um,Φ13
11、乙腈(CH3CN):谱醇
12、甲醇:分析醇
13、:分析醇
14、石油醚:分析醇
15、带刻度的磨口锥形玻璃试管:5 mL、10 mL、20 mL
16、离心管:50ml
四、操作方法依据GB 5413.37-2010第二法
五、供应产品明细
品名 | 规格 | 报价 | 品牌 | 备注 |
高效液相谱仪 | | | | |
荧光检测器 | 包装箱制作 | | | 人造海参 |
黄曲霉毒素M1免疫亲和柱 | 25支/盒 | 5130.00 | 德国R-Biopharm | 可供选择 |
25支/盒 | 3900.00 | agela |
离心机 | | | | |
天平 | | | | |
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方案二、酶联免疫吸附法
(可定性、定量检测牛乳及其他乳制品等样本中的黄曲霉毒素M1)
一、原理
标准溶液和样品试液加入各自板孔,游离的黄曲霉毒素M1与微孔中包被的黄曲霉毒素M1抗体结合,没有结合的物质在洗涤中被清除。再加入黄曲霉毒素M1酶标记物,将没有结合的抗体位点全部覆盖,结合的酶标记物通过显液显示出来。最后加入终止液,用酶标仪在450nm测定吸光度值,吸光度值与样品中的黄曲霉毒素M1含量成反比。 二、所需仪器和耗材
1、微孔板酶标仪450nm/630nm
2、冷冻离心机(转容10ml角转子和50ml角转子,转速不低与3500转/ min)磁性相框
3、天平:感量为0.01 g
4、mavs微量移液器:单道20l~200l、200l~1000l、多道250l
5、振荡器
6、刻度移液管:25ml
7、洗耳球
8、三角瓶:100ml
9、聚苯乙烯离心管:10ml/50ml
10、去离子水
三、操作方法详情见黄曲霉毒素M1酶联免疫试剂盒说明书
四、供应产品明细
品名 | 规格 | 报价 | 品牌 | 备注 |
微孔板酶标仪 | | 35000.00 | 德国R-Biopharm | |
黄曲霉毒素M1酶联免疫试剂盒 | 96孔 | 4950.00 | 德国R-Biopharm | 可供选择 |
96孔 | 3000.00 | 博纳艾杰尔 |
48孔 | 1800.00 | 博纳艾杰尔 |
微量移液器 | 20l~200l | 1650.00 | 美国 Thermo | |
微量移液器吸头 | 20l~200l 1000支/包 | 40.00 | 国产 | Thermo配套价格:150.00,可选择 |
微量移液器吸头盒 | 20l~200太阳能光伏密封胶l | 15.00 | 国产 | |
微量移液器 | 200l~1000l | 600.00 | 美国 Thermo | |
微量移液器吸头 | 200l~1000l 500支/包 | 40.00 | 国产 | Thermo配套价格:150.00,可选择 |
微量移液器吸头盒 | 200l~1000l | 15.00 | 国产 | |
微量移液器 | 多道250l | 2600.00 | 美国 Thermo | 8道 |
微量移液器吸头 | 多道250l 1000支/包 | 40.00 | 国产 | |
微量移液器吸头盒 | 多道250l | 15.00 | 国产 | |
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方案三、双流向酶联免疫法
(GB 5413.37-2010第四法)
一、原理
利用酶联免疫竞争原理,样品中残留的黄曲霉毒素M1与定量特异性酶标抗体反应,多余的游离酶
标抗体则与酶标板内的包被抗原结合,通过流动洗涤,加入酶显底物显后,与标准点比较定性。
二、所需仪器和耗材
1、黄曲霉毒素M1双流向酶联免疫试剂盒,2 ℃~7 ℃保存
2、酶联免疫检测加热器,40℃±5℃
四、操作方法依据GB 5413.37-2010第四法
五、供应产品明细
品名 | 规格 | 报价 | 品牌 | 备注 |
黄曲霉毒素M1双流向酶联免疫试剂盒 | 20条/盒 | 2600.00 | 美国 SNAP | |
酶联免疫检测加热器 | 个 | 5000.00 | 美国 SNAP | |
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