doi ：4. 3969/j. Rsc. 406 - 493 0 202 0 03. 04
*基金项目：陕西省重点研发计划［2015SF-258］；陕西省中医药研究院科研课题［2013 - 07］ ;2018年中医药公共卫生服务补助资 金资助项目［财社〔203〕43号］。 第一作者：陈娟，女，博士研究生，助理研究员，研究方向为药物制剂的质量标准与活性成分，()chenjuan 』007jie@ 47. com 。 △通信作者：张红，女，博士研究生，研究员，研究方向为中药药效物质基础与质量控制，()zhabghoog9393@ 43 。
陈 娟，陈瑞明，孟 雪，杨智峰，王娣，鲁文静，蒙麦侠，张红人
(陕西省中医药研究院，陕西西安7(0061)
摘要：目的 建立同时测定党参中紫丁香苷、党参块苷和苍术内酯川含量的高效液相谱法。方法 谱柱为Kromasil Ci3柱(250 mm X 40 mm, 5 pm )，流动相为 乙腈(A) - 0. 1%磷酸水溶液(B)，梯度洗脱(0-20 min 时 4%A,22〜30 min 时 4% A 〜30%A, 30〜50 min 时30%A -YO/A )，流速为0. 8 mL/mic，柱温为32 C ，检测波长为220 cm，进样量为4 pL 。结果 紫丁香苷、党参块苷和苍术内酯川
在各自的质量浓度范围内线性关系良好(厂M 0.998 9, n=6)，平均回收率分别为4098% ,40 87% ,9905% , RSD 分别为0. 70% ,
0. 54%,O 20%(n=6)o 结论 该方法分离效果和重复性均良好，回收率高，可用于党参药材的质量控制。
关键词：党参；高效液相谱法；紫丁香苷；党参块苷；苍术内酯川；含量测定
中图分类号：R932;R284 1;R286・0 文献标志码：A 文章编号：1006 -4931(2021)05 -0069-04
Simultaneaus Determination of Three Iodeacs Componeats in Codonopsic Pilosula by HPLC
CHEN Juan, CHEN RuUmg , MENG Xa, YANG Zhtfeng, WANG Di, LU Wenjing. MENG Maixin, ZHANG Hong
(Shaanxi Academy of Traainonal Chines p Memcine , XC aa, SSaaaxi , China 712061)
Abstract : Objective Ta estab/sh a high - performance /quid chromamgraphy(HPLC) method far the simuOaneons determiqatioo of syringing, todetyoOn, atracmenoCUv 皿 in Co P opop s p pilosula. Methods The chromamgraphP column was Kromasil C o coCmc (250 mm X
4. 2 mm , 3 pm), the moCilo phase was acemoiRile (A) - 0. 1 % phosphoric acid apueons soluXoo(B) with grapienl eCXon((1 - 20 min ,
4%A ；20 -30 min 10%A - 30%A ；30 - 50 min,30% A - 70% A, , the iow rate was 0. 8 mL/min,thv column temperature was 30 C ,
the demcXon wavelength was 220 cm , a np the injecUon volume was 4 pL. Respite The syringing , to Oem o On , atracmCnoOdo 皿 showed
good /near reCtmoships within their own range G M 0098 9, n=6), the averapo recoveries were 40 98% , 40 87% anp 99.65%
with RSDo of 0. 90% , 0. 84% and 0 20% ( n = 6). Conclusion The method has a good separation eUect , repeatabUUy anp high recov
ery ,which can be used far the quality control of Codonopsp pilosula.
Key word ：: Codoaopsis pilosula ; HPLC ; syringin ; ChemoCn ; atracmCnoOdo 皿;content determinatioo
党参为桔梗科植物党参CoPonopsppilosulo (Franch. 5
Nannf.、素花党参 CoPonopsp pilosulo Nannf . var. modesta
(Nannf. ) L. T. Sken 或川党参 CoPonopsp iangsUen Oliv .
的干燥根，具有补中益气、健脾益肺功效4］。现代药理学
研究表明，党参可调节血糖及胃肠功能，提高造血机能, 抗溃疡，抗炎，抗疲劳，抗肿瘤，延缓衰老，增强机体免疫
的含量［J ］.中国药师,4017,16 ((0)：1510 -312.
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(收稿日期:2020 -02- 20；修回日期：2020 - 07 - 3)
69
功能［2-7；o其主要化学成分为甾醇类、多糖类、苷类、萜类、生物碱类等J-2；o2013年版《中国药典（一部）》仅收载了党参的显微和薄层鉴定方法，未收载指标性成分含量测定项。党参炔苷为党参的指标性成分，对乙醇所致胃黏膜损伤有很好保护作用，与党参补中益气功效相符，是党参保护胃黏膜的活性成分⑻。杨静等⑼比较了不同产地党参中苍术内酯川和党参炔苷的成分，发现苍术内酯川可代表潞党参的道地性，具有抗炎、调节胃肠道、促进营养物质吸收的作用［14；，与党参的药理作用有相关性，可作为指标性成分。胡春阳等20以党参炔苷和紫丁香苷为指标性成分评价和鉴定纹党与白条党，发现紫丁香苷具有抗疲劳、抗脑缺血、增强适应性等功效22；，也可作为指标性成分。为了进一步提升党参临床用药的有效性和安全性，本研究中拟采用高效液相谱（HPLC）法同时测定党参中紫丁香苷、党参炔苷和苍术内酯川3种成分的含量，为其质量评价提供参考。现报道如下。
1仪器与试药
1・1仪器
AgiUnt966型高效液相谱仪（美国安捷伦公司）；KH-320D型数控超声波清洗机（昆山禾创超声仪器有限公司，功率为320W，频率为40kHz）；BT253型 电子天平（精度为十万分之一），BS210S型电子天平（精度为万分之一），均购自赛多利斯科学仪器<；北京〉有限公司。
1・2试药
紫丁香苷对照品（批号为CHB180330，纯度三98%），党参炔苷对照品（批号为CHB18092，纯度三98%、，苍术内酯川对照品（批号为CHB180224，纯度三98%、，均购自成都克洛玛生物科技有限公司；乙腈为谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。党参药材（批号分别为202200301,202000302,202000303）采收自陕西省宜君县，经陕西省中医药研究院杨智峰研究员鉴定均为党参Codonopsis pilosula Franch.的干燥根。
2方法与结果
21谱条件
谱柱：Komasil C d柱（254mm x4.6mm,3m—）；流动相：乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B），梯度洗脱（0〜20min时9%A,20〜30min时9%A—30%A, 30〜50min时32%A—72%A）；检测波长：220nm；柱温12C；流速：0.8mL/min；进样量：9m L。紫丁香苷、党参炔苷、苍术内酯川的分离度均不低于25，理论板数按紫丁香苷峰计均不低于3000o
2・2溶液制备
混合对照品溶液：精密称取各对照品适量，加甲醇制成含紫丁香苷0.670mp/mL、党参炔苷0.231mp/mL、苍术内酯川0.98mp/mL的对照品贮备溶液。精密吸取上述对照品贮备溶液各1mL，置9mL容量瓶中，加入75%甲醇溶解，定容，摇匀，即得。
供试品溶液：取党参样品粉末（过44目筛）10p，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇25mL，密塞，称定质量，超声处理45min，放冷，再称定质量，用75%甲醇补足减失的质量，摇匀，用0.43m—微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2・3方法学考察
专属性试验：分别吸取2.2项下混合对照品溶液和供试品溶液各9m L按2.1项下谱条件进样测定。结果供试品溶液谱中，在与混合对照品溶液谱紫丁香苷、党参炔苷、苍术内酯川相应位置上有相应谱峰，且与其他杂质峰分离良好。谱图见图i o
0紫丁香苷 2.党参炔苷 3.苍术内酯川
A.混合对照品溶液
B.供试品溶液
图1高效液相谱图
1.1y ringin
2.1o Uetyelid/atractylenolide皿
A.Mixed reference solution
B.Test solution
Fig.1HPLC chromatovrams
线性关系考察：分别精密吸取对照品贮备溶液00,00,0.8,02,26,20mL，置9mL容量瓶中，加75%甲醇稀释至刻度，摇匀，按2.7项下谱条件进样9m L，以溶液质量浓度（X,MP）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归。结果见表i o
表1各成分线性关系考察结果（a=6）
Tab.1The liueve relationshiu of evch componens（a=6）
成分线性回归方程s线性范围（MP、
紫丁香苷Y二i393.5X+1927.50.99890.920〜03400党参炔苷Y二1986.3X-4.06730.99990.04620〜00620苍术内酯川Y二42410X+150930.99900.02166-00166
精密度试验：精密吸取2.2项下同一混合对照品溶液9m L，按2.7项下谱条件重复进样6次。结果紫
丁香苷、党参炔苷、苍术内酯川峰面积的RSD分别为0.40%,0.54%,0.28%（o=6），表明仪器精密度良好。
重复性试验：取同一批（批号为202000301）样品6你精密称定，依法制备供试品溶液，按2.7项下谱条件
70
进样分析。结果紫丁香苷、党参炔苷、苍术内酯皿含量的RSD分别为0.02%,0.1%,0.5%(n=6)，表明方法重复性良好。
稳定性试验：取同一供试品溶液，室温放置，分别于0,2,4,6,8,1,1h时按2.1项谱条件下进样1p L。结果紫丁香苷、党参烘苷、苍术内酯皿峰面积的RSD分别为0.42%,0.45%,264%(n=7)，表明供试品溶液在ih内稳定。
加样回收试验：取各已知成分的党参样品(批号为202000301)0.5g，精密称定，共6份，依法制备供试品溶液，分别精密加入各对照品适量，按2.1项下谱条件进样测定，并计算紫丁香苷、党参炔苷、苍术内酯皿的加样回收率。结果见表2o
表2各成分加样回收试验结果(”=6)
Tab.3Results of recovery tests of each component(a=6)
组分取样量
(s，
样品含量
(me，
加入量
(me，
测得量
(me，
屋面檩条回收率
(%)(%)
RSD
(%)
毒死蜱颗粒剂紫丁香苷 5.20005121 1.95669.25601557
5.7922 1.0043 1.95662,261712,86
5.20025126 1.9566 2.66641557
15530,70
5.20005121 1.9566 2.66321501
5.20045135 1.9566 2.66261535
5.20125148 1.9566 2.653610,74
党参炔苷 5.2000 5.2233 5.20800.41612,21
5.7922 5.2201 5.20800.41513.99
5.2002 5.22330.20800.41612,02
15830.34
5.2000 5.22330.20800.41610,53
5.2004 5.22340.20800.4151554
5.2012 5.22310.20800.4181547
苍术内酯M 5.2000 5.530860.232500.25289423
5.7922 5.530330.232500.253010,34
5.2002 5.530870.232500.25319
6.94
96:66 1.20
5.2000 5.530860.232500.25269453
5.2004 5.530860.232500.253410.03
5.2012 5.030630.232500.25361506
2.4样品含量测定
取不同批次(批号分别为222200301,202000302, 202000303)党参样品各20g，精密称定，依法制备供试品溶液，按2.1项下谱条件进样测定，记录峰面积，并计算含量。结果见表3o
表3样品含量测定结果(mg/g,a=3)
Tab.3Results of content determination of samples(mg/g,a=3)批号紫丁香苷党参炔苷苍术内酯皿202000301 2.28160.44530206050 2220003022228660.44700.06163 202000303 2.28670240660.061783讨论
3.1检测波长选择
采用紫外检测器在200-400nm波长范围内对党参3种指标性成分进行扫描，结果紫丁香苷在220, 205nm波长处有最大吸收，党参烘苷在222,232,267, 233nm波长处有最大吸收，苍术内酯皿在220nm波长处有最大吸收。胡涛[1：在不同生长年限与采收期川党参中主要成分含量的比较研究中发现，紫丁香苷、党参苷I和党参烘苷的最大吸收峰为267nm；杨静等⑼研究不同产地党参苍术内酯皿和党参炔苷含量时发现，苍术内酯皿在220nm波长处有最大吸收，均与本研究结果一致。本研究中，紫丁香苷和党参烘苷在267nm波长处也有最大吸收峰，但苍术内酯皿在267nm波长处的吸收峰远小于220nm波长处，故选择220nm为检测波长。
3.3流动相选择
考察了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.I%磷酸水溶液、乙腈-0.1%磷酸水溶液等流动相系统，以党参3个指
标性成分的分离度、峰形、基线的平稳情况进行综合考察，结果以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱时谱峰的基线平稳、峰形好和分离度均好，能满足检测要求。
3.3提取溶剂和提取方法选择
考察了超声提取和回流提取2种方法，提取效果差异不明显，故选择便于操作的超声提取法。考察了甲醇和乙醇及不同体积分数的甲醇和乙醇的提取效果，结果75%甲醇提取效果最佳。考察了30,45,60min时的提取效果，结果超声提取45min的效果最佳。
3.3方法评价
本研究中建立的同时测定党参中3种指标性成分的HPLC法，分离效果和重复性均良好，回收率高，能全面评价党参药材的质量，可为党参的质量控制提供参考。
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(1.北京市临床药学研究所，北京30035 ； 2.首都医科大学附属北京中医医院，北京40043
摘要：目的提升清热止痢合剂的质量标准。方法采用薄层谱(TLC )法对清热止痢合剂中的白头翁、儿茶、关黄柏、黄连、黄苓进行定 性鉴别；采用高效液相谱(HPLC)法测定没食子酸、葛根素、芍药苷、黄苓苷的含量。结果白头翁、儿茶、关黄柏、黄连、黄苓TLC 特征斑点
清晰，分离度好，专属性强；没食子酸、葛根素、芍药苷、黄苓苷的质量浓度分别在4. 537 1〜40 04 7 pg/mL,3. 450 0〜30 050 0 pg/mL ,
10. 947 1〜98. 44 7 pg/mL, 13.500 0 - 46. 560 0 pg/mL 范围内与峰面积线性关系良好(c M / 999 4)，平均加样回收率分别为
4003% ,40. 71% ,9808% ,4005% , RSD 分别为 0. 86% ,0 60% ,0. 84% ,0 4% ( n 二6)。结论 该方法准确可靠，重复性好，可用 于清热止痢合剂的质量控制。
插片散热器关键词：清热止痢合剂；薄层谱法；高效液相谱法；质量标准；含量
中图分类号：R932;R284 1;R286・0 文献标志码：A 文章编号：1006 -4931(2021)05 -0072-04
Improvemeat of Quality StandarO of Qingrr ZhiU Mixterr
DONG ChenUC, JIANG DC , LI Toxin 1, XIAO W c O
(2 InsPtlLm
of 0,171x 1 Pharmaca pp Bring MlLnnippl< Healti Bureau , Beijinu , China 120035 ; 2. Beijinu Hospital op Traainoaal Chinesp Mennixe ,
Capital Mm UniversPa , Beijinu ，China 140014)
Abstract ： Objective Ta improve the quality stanpard of Qingre Zhili Mixture. Methodt Thin - layer chromamgraphy(TLC) method was
used far qualitative identiUcation of Qingre Zhili Mixture. High - performance /quid chromatography(HPLC) method was used far the
coptenl determinatioo of gal/c acid , puerarin , paeoniyorin anp baicabn in this preparation. Respite The TLC spots d R o PC x PgsaPXae,
Acacia catechu Corten Phellodendri , Rhnoma CoptiXn anp Radix Scutellapae were clear , the separation was good , and the specRicUy was
strong. Gallic acid , puerarin , paeoniyorin and baicabn showed good /near reCtmoships in the ranges of 4057 1 - 40 04 7 pg/mL ,
7.450 0 - 70 250 0 pg/mL , 4007 1 -98.44 7 pg/mL anp 4.500 0 - 46. 960 0 pa/mL (c M 0099 4),respecUveC. The
averapo recoveries were 40. 47% ,4001% ,98.23% anp 100. 65% with RSDo d 006%, O 00% , 0. 84% anp 0 4% (n=6).
超声波探测
Conclusion This method R accurate , reCable and reproOpciblv , which can be used far the quality control d Qingre Zhili Mixture.
Ke y words ： Qingre Zhili Mixture ;TLC ; HPLC ;quality stanpard ;coptenl
清热止痢合剂为首都医科大学附属北京中医医院
的院内制剂，由白头翁、地榆、儿茶、关黄柏、黄连、黄苓、 葛根、白芍等多味中药组方，具有清热解毒、凉血止痢功
效，临床用于湿热毒邪积滞肠腑证，症见腹痛、腹泻、肛 门灼热、身热、口苦口黏。本研究中采用薄层谱(TLC )
法对制剂中的白头翁、儿茶、关黄柏、黄连、黄苓进行定
性鉴别4-7；，采用高效液相谱(HPLC )法测定没食子 酸、葛根素、芍药苷、黄苓苷的含量，为其质量控制提供 参考^o 现报道如下。
1仪器与试药
11 仪器
L -2000型高效液相谱仪，包括L-2055 DAD 型
检测器、L-2200 Cooling Unit 型自动进样器、L-2O0 型四元泵(株式会社日立制作所牘; CPA225D 型电子天
平(赛多利斯科学仪器有限公司，精度十万分之一)；
0HB -皿型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限
公司)；KQ2200DV 型数控超声波清洗器(昆山市超声仪 器有限公司，功率为200 W，频率为44 kHz ) ,JY020型紫外
第一作者：董臣林，男，硕士研究生，研究实习员，研究方向为药物制剂，()140463650@qq. com 。
△通信作者：肖薇，女，大学本科，主任药师，研究方向为中药制剂制备与传承，()ych/652@43. com 。
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