---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 酵母组蛋白提取方法的优化与探索rrggg
摘要：组蛋白（histones）为真核生物体细胞染质中的碱性蛋白质和基本结构蛋白，含较多精氨酸和赖氨酸等碱性氨基酸，二者加起来约为所有氨基酸残基的1/4。因其氨基酸成分和分子量不同，主要分成5类：H1、H2A、H2B、H3、H4。它们富含带正电荷的碱性氨基酸，能够同DNA中带负电荷的磷酸基团相互作用[1]。而本实验涉及到的酵母组蛋白是一种有别于其他动物组织的组蛋白，它属于真核生物，在提取其组蛋白时，需要破裂其组织细胞壁。提取之后，再利用一种高效又普遍的方法进行蛋白的测定—&mdash；过程包括考马斯亮蓝染、蛋白质印迹法（western blot）转膜后杂抗体(一抗和二抗)；通过IMAGE影像曝光法，最后得出蛋白条带的曝光图[2]。5674 关键词：酵母组蛋白的提取；破裂细胞壁；蛋白质印迹法；杂抗体；曝光；木纹铝扣板
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oahOptimization and Exploration Of the Extraction Method on Yeast Histone
Abstract: Histone is the basic protein and basic structure in eukaryotic somatic chromatin, containing more basic amino acids such as arginine and lysine, which add up to approximately one forth of the tot
al amino acid residues. Due to its different amino acid composition and molecular weight, it can be pided into five categories: H1, H2A, H2B, H3 and H4. They are rich in basic amino acid with a positive charge, so they can have the interaction with the phosphate groups which are negatively charged in DNA. This experiment is related to the yeast histone which is different from those of other animal tissues. It belongs to the eukaryotic. It is necessary to rupture the cell wall of the organization when extracting its histone. After this kind of process, then detect the histone with a general and efficient method, including Coomassie blue staining, Western blot, film transferred, using antibodies(the primary and secondary antibody) and image exposure. At last, we can have the protein bands exposure map.
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虽然蛋白质的可变性和多样性等特殊性质导致了蛋白质研究技术远远比核酸技术要复杂和困难得多，但是蛋白质本身的存在形式和活动规律，如翻译后修饰、蛋白质间相互作用以及蛋白质构象等问题，仍依赖于直接对蛋白质的研究来解决。正是这些特性参与和影响着整个生命过程的存在形式和活动规律。[5]
同基因组学一样，蛋白质组学不是一个封闭的，概念化的，稳定的知识体系，而是一个领域。它旨在阐明生物体全部蛋白质的表达模式及功能模式，其内容包括蛋白质的鉴定疾病、药物对生命过程的影响；对基因表达的蛋白质水平进行定量的测定以及解释基因表达调控的机制、细胞内定位、动态描述基因调节，相互作用研究等，最终来揭示蛋白质功能，是基因组ＤＮＡ序列与基因功能之间的桥梁[6]。 作为一门科学，蛋白质组研究并非从零开始，它是已有20多年历史的蛋白质(多肽)谱和基因产物图谱技
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术的一种延伸。多肽图谱依靠双向电泳和进一步的图象分析；而基因产物图谱依靠多种分离后的分析，如质谱技术、氨基酸组分分析等[7]。
蛋白质组的研究不仅能为生命活动规律提供物质基础，也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论依据和解决途径。通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析，我们可以到某些&ldquo；疾病特异性的蛋白质分子”，它们可成为新药物设计的分子靶点，或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。确实，那些世界范围内销路最好的药物本身是蛋白质或其作用靶点为某种蛋白质分子。因此，蛋白质组学研究不仅是探索生命奥秘的必须工作，也能为人类健康事业带来巨大的利益。蛋白质组学的
研究是生命科学进入后基因时代的特征[8]。
生命科学是实验科学，因此生命科学的发展极大地依赖于实验技术的发展。以DNA序列分析技术为核心的基因组研究技术推动了基因组研究的日新月异，而以基因芯片技术为代表的基因表达研究技术为科学家了解基因表达规律立下汗马功劳。在蛋白质组研究中，二维电泳和质谱技术的黄金组合又为科学家掌握
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蛋白质表达规律再铸辉煌。蛋白质组学就是指研究蛋白质组的技术及这些研究得到的结果。
多媒体控制器研究发现，组蛋白甲基转移酶的作用对象不仅仅限于组蛋白，某些非组蛋白也可以被组蛋白甲基转移酶甲基化，这将为探明细胞内部基因转录、信号转导、甚至个体的发育和分化机制提供更广阔的空间。
近年来，数十种酵母基因组测序的完成，标志着酵母基因组研究的后基因时代的来临，而随着大量的DNA序列信息的获得，蛋白质研究成为一种重要的研究酵母生物学机制的高通量方法。当前已经可以用凝胶电泳与质谱欧联的方法一次性研究大量的单板的表达。通过提取酵母中的组蛋白，随后进行的
蛋白质印迹法即Western blot，观察蛋白质条带，最后利用质谱检测其组蛋白的表达是目前化学蛋白质组学中较为普遍也最为有效的方法之一。近来的蛋白微序列技术的发展，进一步促进了蛋白相互作用的研究。
鸡笼的做法5 / 28
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