膜过滤法验证方案 Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】 微生物限度检查方法(薄膜过滤法)
验证方案
微生物限度检查方法(薄膜过滤法) 验证方案
编码：表
一、验证方案的起草与批准
同步相量测量装置
1.验证方案起草
起草人：起草时期：年月日
2.验证小组成员：
药品压片机
3.验证方案审核
4.验证方案批准
批准人：批准日期：
二、验证方案
1.验证目的和原理
验证目的
为确认所采用的方法适合于该药品的细菌、霉菌、酵母菌数的测定，特制定本方案。验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需要变更时，应报验证委员会批准。
原理
通过比较试验4组中试验菌的恢复生长结果来评价整个检验方法的准确性、有效性和重现性。 2.验证方法步骤
氧化挂具
验证前的准备：进行微生物限度检查方法（薄膜过滤法）验证前，所有的平皿和稀释剂
超音频电源都应该严格
按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。试验菌应包括G—、G+、酵母菌和霉菌类微生物以基本覆盖样品中可能存在的微生物。
验证试验的操作计划：用3个不同批号产品微生物限度检测方法进行平行试验，通过计算回收率来判断限度检查方法是否对产品有影响。
试验结果可接受标准：用标准菌株评价方法“”的微生物限度检查对检品中微生物的抑制性，试验结果应显示3次独立的平行试验中，稀释剂对照组的菌回收率应不小于70%，试验组回收率也不低于70%。
3.试验实施
试验前的准备
3.1.1主要仪器设备：恒温培养箱、生化培养箱、电子天平、高压蒸汽灭菌器、净化工作台。
3.1.2操作环境：操作间应该安装空气除菌过滤层装置。环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。操作间或净化工作台的洁净空气应该保持对环境形成正压，不低于。
3.1.3试验样品：
批号：批号：批号：
3.1.4培养基：
3.1.5稀释液：无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液
以上经115℃高压蒸汽灭菌30min。
3.1.6验证用微生物名称及其编号
实验菌株的来源：
编号由菌名首字母—传代代数—制备日期组成。
3.1.7器具：无菌薄膜过滤器：（孔径直径50mm）、无菌移液管（5ml）
4.验证方法
菌液的制备
将大肠埃希菌、金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌接种至10ml的无菌营养肉汤中在30～35℃下培养18～24小时，将白念珠菌接种至改良马丁液体培养基中，在23～28℃下培养24～48小时。将黑曲霉接种至改良马丁液体培养基中，在23～28℃下培养5～7天。将上述培养物用%的无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌落数为50～100cfu的菌悬液。
实验方法
供试液的制备：取样品10g（ml）加入无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇使分散均匀□，用匀浆仪混匀□，置45℃水浴使胶囊壳溶化混匀□，制成1：10均匀的供试液。
A样品试验组
取1:10供试液（相当1g或1ml供试品）10ml，加至100ml稀释液中混匀，过滤并用稀释液冲洗滤膜3次，每次100ml，在最后一次冲洗液中加入50~100cfu菌液，滤完后，将接有细菌的滤膜取出，菌面向上（接触细菌和样品的面）贴于已凝固的培养基上。大肠埃希菌、金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌贴于营养琼脂培养基平皿上；白念珠菌、黑曲霉贴于玫瑰红钠琼脂培养基平皿上。
B菌液组磁卡门禁机>桁架结构
取上述制备菌液各1ml加至100ml稀释液中混匀，过滤并用稀释液冲洗滤膜3次，每次100ml，滤完后，将接有细菌的滤膜取出，菌面向上（接触细菌和样品的面）贴于已凝固的培养基上。大肠埃希菌、金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌贴于营养琼脂培养基平皿上；白念珠菌、黑曲霉贴于玫瑰红钠琼脂培养基平皿上。
C供试品对照组
取上述1：10供试液10ml，加至100ml稀释液中混匀，过滤并用稀释液冲洗滤膜3次，每次100ml，滤完后，将滤膜取出，接触样品的面向上贴于已凝固的培养基上。大肠埃希菌、金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌贴于营养琼脂培养基平皿上；白念珠菌、黑曲霉贴于玫瑰红钠琼脂培养基平皿上。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议