称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。 需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
“PBS”缓冲液
数模转换电路PH | 7.6 | 7.4 | 7.2 | 7.0 |
H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 | 1000 8.5 2.2 0.1 | 1000 8.5 2.2 0.2 | 1000 8.5 2.2 0.3 | 1000 ml 8.5 g 2.2 g 0.4 g |
| | | | |
2、磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）
多点干油泵试剂： NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。 （1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或人工挖孔桩机械 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92.0 8.0
5.9 90.0 10.0
6.0 87.7 12.3
6.1 85.0 15.0
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51.0 49.0
6.9 45.0 55.0
7.0 39.0 61.0
7.1 33.0 67.0
7.2 28.0 72.0
7.3 23.0 67.0
7.4 19.0 81.0
7.5 16.0 84.0
7.6 13.0 87.0
7.7 10.5 89.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7.0 93.0
8.0 5.3 94.7
3、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制
方法一
1、 首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)
试剂：NaH2PO4·2H2O
Na2HPO4·12H2O
配制方法：先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液)，两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
A液：称取NaH2PO4·2H2O 31.2g，加双蒸水充分溶解定容至1000ml；
B液：称取Na2HPO4·12H2O 71.632g，加双蒸水充分溶解定容至1000ml；
2、 0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)的配制：
A液为碱性，B液为酸性；取A液和B液在pH计的监测下按一定比例进行混和，可得到所需的不同pH的0.2mol/L的PB。pH7.4所需A液和B液为19.0ml和81.0ml
0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）(PB)
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92.0 8.0
5.9 90.0 10.0
6.0 87.7 12.3
6.1 85.0 15.0
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51.0 49.0
6.9 45.0 55.0
7.0 39.0 61.0
7.1 33.0 67.0合欢椅怎么使用
7.2 28.0 72.0
7.3 23.0 67.0
7.4 19.0 81.0
7.5 16.0 84.0
7.6 13.0 87.0
7.7 10.5 89.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7.0 93.0
8.0 5.3 94.7
3、 0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)：
试剂：0.2mol/L PB 500ml
NaCl 8.5～9.0g(约0.15mol/L)
双蒸水 加至1000ml量脚器
配制方法：取0.2mol/L PB 500ml，加入300ml双蒸水及NaCl 8.5～9.0g，充分搅拌溶解后加入双蒸水定容至1000ml。一般情况下，0.2mol/L PB的pH值稍微高些，稀释成0.1mol/L PBS时，常可达到要求的pH；若需调整pH，通常是调PB的pH。
4、 参考： 朱立平，陈学清主编，免疫学常用实验方法，北京:人民军医出版社，2000.3
方法二
1． PBS(0.1M，pH 7.4)贮存液配方（10倍浓缩）
NaCl 80g
Na2HPO4.12H2O 32.3g
NaH2PO4.2H2O 4.5g
加蒸馏水至 1000ml
或者
NaCl 80g
Na2HPO4.2H2O 11.5g
KH2PO4 2g
KCl 2g
加蒸馏水至 1000ml
贮存液室温下保存一个月
2． PBS工作液(0.01M，pH 7.4)
取贮存液10倍稀释后24小时内使用
方法三注塑机联网
溶液A：0.2mol/LNaH2PO4（27.8g NaH2PO4；或者36.14g 2水合NaH2PO4 溶于1000ml水中）
溶液B：0.2mol/LNa2HPO4（53.65g 7水合Na2HPO4或者71.7g 12水合Na2HPO4溶于1000ml水中）
溶液A与B按下表比例混合后，用水稀释至终体积为200ml
体积A（ml）－－－体积B（ml）－－－pH
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